水環(huán)境中磺胺嘧啶脅迫下異育銀鯽的組織病理學(xué)研究

鄭婷婷 涂宗財(cái), 唐平平 張 露 沙小梅 王 輝

(1. 江西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 功能有機(jī)小分子教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 南昌 330022;2. 南昌大學(xué)食品與科學(xué)技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 南昌 330047)

磺胺類藥物是一類具有對氨基苯磺胺結(jié)構(gòu)的藥物的總稱, 因其價(jià)值低廉同時(shí)具有廣譜殺菌功能而被大量應(yīng)用于人類和動(dòng)物疾病的治療[1]。1932年,磺胺類藥物首次用于臨床試驗(yàn), 而近幾年在中國的產(chǎn)量已經(jīng)達(dá)到每年2—5×107kg[2]。研究表明, 在中國海河流域、遼河盆地及其鄰近的遼東灣的地表水和廢水中磺胺類藥物頻繁被檢測出, 檢測濃度為8.4 ng/L—211 μg/L[3,4]。有文獻(xiàn)報(bào)道, 美國USGS調(diào)查了抗生素濫用較嚴(yán)重地區(qū)的污水、飲用水以及地表水中抗生素的含量, 其中磺胺類藥物的檢出率最高[5]。人類長期受磺胺類藥物污染, 會出現(xiàn)排尿和造血紊亂等一系列健康問題[6]。另外, 由于磺胺類藥物在人體中的代謝時(shí)間較長, 容易導(dǎo)致耐藥性的產(chǎn)生, 并且具有潛在的致癌性, 對人類健康產(chǎn)生了嚴(yán)重的安全隱患[7,8]。

目前, 國內(nèi)外有關(guān)磺胺類抗生素的研究多停留在藥代動(dòng)力學(xué)以及痕量檢測方面, 其在生態(tài)毒理學(xué)方面的研究也越來越受到重視。有研究報(bào)道, 磺胺嘧啶的攝入對斑馬魚的孵化、心率及自主運(yùn)動(dòng)均具有不良影響[9,10]。謝美萍等[11]發(fā)現(xiàn)低濃度下的磺胺類藥物會對斑馬魚的代謝功能產(chǎn)生影響。然而,對水環(huán)境中的磺胺類抗菌藥物進(jìn)入水生生物體后對其各組織的病理變化卻少有研究。異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)是我國淡水魚養(yǎng)殖的主要種類之一, 因其生長快, 周期短, 營養(yǎng)價(jià)值高, 味道鮮美等優(yōu)點(diǎn)被人們所喜愛, 產(chǎn)量較大。水環(huán)境中磺胺嘧啶對異育銀鯽的組織病理學(xué)研究未見報(bào)道,因此, 本實(shí)驗(yàn)以磺胺類抗菌藥物中比較具有代表性的磺胺嘧啶為實(shí)驗(yàn)藥物, 將異育銀鯽分別在含不同濃度磺胺嘧啶的水環(huán)境中飼養(yǎng)28d, 觀察其肝臟、腎臟、鰓、腸、肌肉等組織的病理變化, 旨在探討水環(huán)境中磺胺嘧啶作用下對異育銀鯽的組織病理變化規(guī)律, 為異育銀鯽的健康養(yǎng)殖和磺胺嘧啶的科學(xué)合理用藥提供參考資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

儀器與試劑儀器: JJ-12J脫水機(jī), 武漢俊杰電子有限公司; JB-P5 包埋機(jī), 武漢俊杰電子有限公司; RM2016 病理切片機(jī), 上海徠卡儀器有限公司;JB-L5 凍臺, 武漢俊杰電子有限公司; KD-P組織攤片機(jī), 浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司; DHG-9140A烤箱, 上?；厶﹥x器制造有限公司; 10212432C載玻片及蓋玻片, 江蘇世泰實(shí)驗(yàn)器材有限公司;Nikon Eclipse CI正置光學(xué)顯微鏡, 日本尼康; Nikon DS-U3 成像系統(tǒng), 日本尼康;

試劑: 無水乙醇、二甲苯、鹽酸、氨水、中性樹膠購于國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司; 蘇木素-伊紅染液購于武漢谷歌生物科技; 甲醛購于天津市大茂化學(xué)試劑廠。

試驗(yàn)生物異育銀鯽由南昌市某養(yǎng)殖場提供, 平均體重(25±2) g。采用實(shí)驗(yàn)室模擬半靜態(tài)法對其進(jìn)行馴養(yǎng), 試驗(yàn)用水為經(jīng)曝氣去氯處理24h的自來水, 為保持試驗(yàn)藥液的濃度不低于起始濃度的80%, 試驗(yàn)期間每隔24h更換藥液1次, 水溫保持在(20±1)℃, pH為 7.02—7.25左右。馴養(yǎng)期間, 每天正常喂食, 每次投放飼料的量不超過魚體重的1%。魚體在正式實(shí)驗(yàn)開始前對其進(jìn)行為期1周的馴養(yǎng)。

1.2 方法

試驗(yàn)設(shè)計(jì)因?qū)嶒?yàn)中藥品的影響質(zhì)量濃度一般為μg/L至mg/L水平, 同時(shí)結(jié)合水體中磺胺類藥物的檢出濃度, 所以設(shè)置了高、中、低3個(gè)質(zhì)量濃度梯度和1個(gè)空白對照: 0、1 μg/L、100 μg/L、10 mg/L。

樣品處理魚體的染毒方式采用靜態(tài)水質(zhì)接觸染毒。于暴露后的第7、第14、第21、第28天,分別從對照組和實(shí)驗(yàn)組隨機(jī)取出3條魚, 解剖取出腎臟、腸、鰓、肝胰臟、肌肉固定于10%的中性福爾馬林中24h后, 用石蠟包埋, 連續(xù)切片(4 μm)。將烘干的切片依次放入二甲苯、酒精中進(jìn)行脫蠟處理, 取出切片用蒸餾水沖洗, 然后進(jìn)入染色階段。病理切片采用蘇木精-伊紅(HE)染色, 中性樹膠封片后用顯微鏡觀察并拍照。

2 結(jié)果

2.1 肝臟組織病理變化

不同濃度的磺胺類藥物處理對異育銀鯽肝臟組織的影響如圖1所示。空白組的肝臟組織切片如圖1L所示, 其結(jié)構(gòu)完整、清晰, 包括完整的中央靜脈、肝小葉、肝血竇等結(jié)構(gòu)。肝細(xì)胞呈多角狀, 體積雖有大小不同, 但形狀均無差異, 圍繞著中央靜脈整齊緊密排列。細(xì)胞界限清楚, 細(xì)胞質(zhì)染色較細(xì)胞核淺且均勻, 圓形細(xì)胞核大而規(guī)則, 基本位于細(xì)胞中央。肝上皮細(xì)胞、肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞、紅細(xì)胞等各類細(xì)胞健康無損傷?；前粪奏け┞?d后, 低濃度(1 μg/L)組和中濃度(100 μg/L)組肝臟組織除了出現(xiàn)中央靜脈和肝血竇輕度充血外, 基本沒有出現(xiàn)其他損傷和異常。高濃度(10 mg/L)組肝細(xì)胞腫脹、部分肝細(xì)胞出現(xiàn)空泡化, 少數(shù)細(xì)胞核偏離細(xì)胞中央靠近細(xì)胞一側(cè), 另外部分區(qū)域肝細(xì)胞索模糊。磺胺嘧啶暴露14d后, 肝臟組織損傷較暴露7d更為嚴(yán)重,低濃度和中濃度處理組肝細(xì)胞腫脹, 空泡化, 細(xì)胞間隙增大, 中央靜脈、肝血竇和肝小葉間出現(xiàn)淤血。高濃度處理組的肝組織則大量炎性細(xì)胞浸潤,肝細(xì)胞空泡化, 溶解, 崩潰, 造成部分局灶性壞死?；前粪奏ぬ幚?1d后, 各濃度組肝臟組織出現(xiàn)嚴(yán)重?fù)p傷, 表現(xiàn)為中央靜脈和肝血竇淤血嚴(yán)重, 大量炎性細(xì)胞浸潤, 嚴(yán)重的較大面積的肝細(xì)胞壞死。28d后, 各濃度處理組肝臟組織損傷較為相似, 除肝血竇和中央靜脈淤血外, 細(xì)胞腫大嚴(yán)重, 細(xì)胞間隙擴(kuò)大, 嚴(yán)重空泡化, 細(xì)胞核固縮甚至消失, 細(xì)胞壞死。

2.2 腎臟組織病理變化

不同濃度的磺胺類藥物處理對異育銀鯽腎臟組織的影響如圖2所示?？瞻捉M腎臟組織(圖2K)實(shí)質(zhì)均勻, 結(jié)構(gòu)完整, 具有清晰可見的腎小球和腎小管。腎小管由排列整齊且緊密的上皮細(xì)胞組成, 中間為管腔, 腎小球中央為一團(tuán)毛細(xì)血管, 最外層為腎小囊, 兩者之間為囊腔, 各類細(xì)胞基本無損傷。磺胺嘧啶處理7d后, 低、中、高濃度處理組均發(fā)生了較為相似的損傷, 腎小管上皮細(xì)胞腫大, 與正常組相比腎小管上皮細(xì)胞排列較為疏松, 腎小球和腎間質(zhì)輕微出血。另外, 中、高濃度組腎臟組織腎小管腔隙變大。14d處理后, 低濃度組腎小管細(xì)胞排列稀疏, 上皮細(xì)胞空泡化嚴(yán)重, 腎小球淤血, 部分腎小球細(xì)胞壞死, 溶解, 腎間質(zhì)血細(xì)胞出現(xiàn)淤血,細(xì)胞出現(xiàn)滴狀玻璃樣變性。中濃度和高濃度組, 腎小管上皮細(xì)胞腫大, 空泡化, 壞死, 腎小管腔變小,甚至消失。部分腎小球細(xì)胞壞死, 腎小球崩解, 結(jié)構(gòu)破壞, 腎間質(zhì)組織出現(xiàn)壞死區(qū)。21d處理后, 低濃度組腎臟組織充血明顯。中濃度和高濃度組的腎間組織細(xì)胞空泡, 溶解, 壞死嚴(yán)重, 出現(xiàn)較大面積空白。高濃度組的腎小管上皮細(xì)胞空泡樣變性嚴(yán)重,腎小球淤血, 腎間組織空泡, 壞死, 淤血嚴(yán)重。28d處理后, 低濃度組與之前損傷無顯著差異。中濃度和高濃度組的腎臟組織損傷更為嚴(yán)重, 腎小管上皮細(xì)胞核固縮, 嚴(yán)重的腎小管組織失去原有結(jié)構(gòu),出現(xiàn)壞死, 腎間組織細(xì)胞空泡, 出現(xiàn)大片壞死。

圖1 肝臟的組織病理Fig. 1 Histopathology of liver (×200)

圖2 腎臟的組織病理×200Fig. 2 Histopathology of kidney×200

2.3 鰓組織病理變化

不同濃度的磺胺類藥物處理對異育銀鯽鰓絲結(jié)構(gòu)的影響如圖3所示?？瞻捉M的鰓絲表面平緩舒展, 鰓小片分布均勻、梳妝排列整齊, 結(jié)構(gòu)完整, 長短均勻, 各類細(xì)胞基本無損傷、脫離(圖3G)。不同濃度的磺胺嘧啶對鰓組織結(jié)構(gòu)具有不同程度的損傷, 表現(xiàn)出一定的時(shí)間和劑量效應(yīng)?；前粪奏け┞?d后, 各濃度組均出現(xiàn)較為輕度的損傷, 具體表現(xiàn)為鰓小片上皮細(xì)胞出現(xiàn)腫脹、鰓小片基部上皮細(xì)胞不同程度增生。中濃度組鰓小片上皮細(xì)胞脫落,導(dǎo)致鰓小片變短。高濃度組鰓小片無規(guī)則扭曲。14d后, 低濃度組鰓小片間上皮細(xì)胞增生持續(xù)加重,部分充滿鰓小片的間隙。中濃度組, 鰓小片間細(xì)胞增生嚴(yán)重, 使鰓絲成板狀, 鰓小片變短, 但依然存在。高濃度組鰓組織損傷嚴(yán)重, 鰓小片結(jié)構(gòu)消失,鰓絲部分細(xì)胞壞死。21d后, 低濃度組鰓小片充血嚴(yán)重。中濃度組鰓小片結(jié)構(gòu)消失。28d后各濃度組鰓組織病理變化與21d的無明顯差別 。

圖3 鰓的組織病理×400Fig. 3 Histopathology of gills×400

2.4 腸道組織病理變化

不同濃度的磺胺類藥物處理對異育銀鯽腸道絨毛結(jié)構(gòu)的影響如圖4所示?？瞻捉M的異育銀鯽的腸道絨毛完整, 排列整齊緊密, 各類細(xì)胞無明顯損傷(圖4G)?；前粪奏ぬ幚?d后, 低濃度處理組的肌層血細(xì)胞增多, 黏膜下層增厚, 黏膜上皮細(xì)胞變性,細(xì)胞排列疏松, 微絨毛變短, 部分區(qū)域微絨毛結(jié)構(gòu)破壞, 脫落。中濃度組的腸道組織比低濃度組損傷更為嚴(yán)重, 除黏膜下層增厚外, 出現(xiàn)較多壞死區(qū)域;固有層細(xì)胞腫大, 且出現(xiàn)較多空泡化細(xì)胞; 部分黏膜皺襞破損, 甚至裂開; 黏膜層層上皮細(xì)胞變性壞死, 甚至溶解, 潰爛, 導(dǎo)致微絨毛損壞, 腸腔內(nèi)出現(xiàn)較多脫落的微絨毛。高濃度組損傷和中濃度組相類似, 均比較嚴(yán)重。處理14d后, 各濃度組腸道組織病變具有較大的緩解, 腸道結(jié)構(gòu)較為完整, 只有少部分微絨毛脫落, 然而隨著磺胺嘧啶暴露時(shí)間的累加, 腸道組織又出現(xiàn)較大的損傷。處理21d后, 中高濃度組的杯狀細(xì)胞增多, 腸道上皮細(xì)胞空泡, 壞死導(dǎo)致部分微絨毛脫落, 黏膜皺襞相互融合, 連接。固有層細(xì)胞變性, 壞死, 導(dǎo)致固有膜結(jié)構(gòu)消失。處理28d后, 低濃度組的腸道依舊損傷較小, 肌層部分區(qū)域出現(xiàn)空泡化壞死細(xì)胞和黏膜層杯狀細(xì)胞增多,而中高濃度組損傷和21d相差不大, 表現(xiàn)為持續(xù)損傷。

2.5 肌肉組織病理變化

不同濃度的磺胺類藥物處理對異育銀鯽肌肉組織結(jié)構(gòu)的影響如圖5所示?？瞻捉M肌肉組織的肌纖維呈多角形, 含有多個(gè)細(xì)胞核, 排列緊致有序(圖5M)?；前粪奏ぬ幚?d后, 低濃度組有輕度損傷, 表現(xiàn)為肌纖維間隙變寬, 肌纖維輕微彎曲并有縫隙。中濃度組的肌肉組織損傷增大, 肌纖維輕微變性,腫大, 部分相鄰肌纖維出現(xiàn)聚集, 呈團(tuán)塊狀, 肌纖維疏松, 彎曲, 甚至斷裂。高濃度組的肌纖維斷裂, 甚至溶解, 壞死, 出現(xiàn)一些空白的孔洞, 橫紋模糊。14d處理后, 低濃度組的肌纖維彎曲斷裂, 表面孔洞較多。中濃度組和高濃度組損傷類似, 肌纖維彎曲、斷裂嚴(yán)重。經(jīng)高濃度21d和28d處理的異育銀鯽的肌纖維溶解, 崩潰, 并出現(xiàn)碎片化。

圖5 肌肉的組織病理×100Fig. 5 Histopathology in muscle ×100

3 討論

磺胺嘧啶為廣譜抗菌類藥物, 目前國內(nèi)外用于水產(chǎn)動(dòng)物疾病防治的磺胺藥物有十多種, 而磺胺嘧啶為其中比較具有代表性的一種, 用量較大, 易殘留于水環(huán)境, 造成污染, 同時(shí)可能會引起水生生物組織結(jié)構(gòu)的病變。本實(shí)驗(yàn)異育銀鯽在磺胺嘧啶暴露后, 肝臟、腎臟、鰓、腸道、肌肉均發(fā)生了不同程度的損傷, 其中肝臟、鰓、腎臟損傷尤為嚴(yán)重,且磺胺嘧啶處理時(shí)間的延長, 劑量的增加會導(dǎo)致組織損傷加重。

肝臟是魚類維持生命活動(dòng)和代謝的實(shí)質(zhì)性組織器官, 具有解毒和防御功能, 外來污染物質(zhì)可在肝臟組織進(jìn)行代謝和生物轉(zhuǎn)化, 過量的毒性物質(zhì)會對肝臟造成不同程度的損傷[12]。肝臟組織中含有大量的酶, 肝臟受到病理損傷時(shí)易改變酶的活性?；前奉愃幬锎蠖嘁自诟闻K發(fā)生乙?；? 造成過高濃度時(shí)可能會影響肝臟組織酶的活性, 進(jìn)而引發(fā)組織病理變化。本實(shí)驗(yàn)表明, 磺胺嘧啶對異育銀鯽肝臟組織具有損傷作用, 表現(xiàn)為肝組織淤血, 炎性細(xì)胞浸潤, 空泡化, 嚴(yán)重的出現(xiàn)肝細(xì)胞核固縮, 溶解, 大面積壞死等。大量的研究也表明水環(huán)境中的一些污染毒性物質(zhì)易引發(fā)魚類肝臟組織造成本實(shí)驗(yàn)所出現(xiàn)的損傷。Zodrow等[13]研究發(fā)現(xiàn), 斑馬魚在受到二噁英類化合物TCDD毒性作用后, 肝臟組織出現(xiàn)肝細(xì)胞腫大, 壞死, 細(xì)胞數(shù)量減少等現(xiàn)象。王荻等[14]研究表明諾氟沙星可造成肝細(xì)胞腫脹、核固縮甚至肝細(xì)胞消溶等損傷。張濤等[15]研究發(fā)現(xiàn), 水中高濃度的氨氮、亞硝酸鹽會引發(fā)黃穎魚肝臟組織局灶性壞死。韓冰等[16]研究阿維菌素對松浦鏡鯉的組織病理變化, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)阿維菌素可造成肝臟組織肝血竇淤血, 細(xì)胞質(zhì)變淡, 細(xì)胞核溶解消失。

腎臟是魚體重要的排泄和免疫器官, 具有調(diào)節(jié)內(nèi)環(huán)境使其保持穩(wěn)定的功能。腎臟組織發(fā)生病變后, 易造成內(nèi)環(huán)境酸堿、體液、內(nèi)分泌等功能異常,進(jìn)而損害魚體健康生長[17]?；前奉愃幬锛捌浯x產(chǎn)物難溶于水, 經(jīng)腎臟排泄時(shí)易析出晶體, 造成腎小管堵塞, 引起腎臟發(fā)生病變[18]。異育銀鯽在磺胺嘧啶環(huán)境中暴露后, 腎臟組織出現(xiàn)持續(xù)的病理損傷,表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞空泡化, 腎小球細(xì)胞壞死,腎間質(zhì)淤血, 出現(xiàn)壞死區(qū)等。研究表明[19], 羅非魚感染海豚鏈球菌病后腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生水腫, 壞死, 與本文損傷較為一致。腎小管上皮細(xì)胞腫脹,壞死, 易腎組織的滲透作用削弱, 進(jìn)而引起排泄異常, 嚴(yán)重導(dǎo)致腎功能衰竭。另外, 還有研究表明[20],腎臟組織遭受病理損傷后, 血漿中滲透壓平衡打破,導(dǎo)致滲透壓降低, 引起腎臟組織淤血, 與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符合。

鰓是魚類的呼吸器官, 具有氣體交換, 調(diào)節(jié)體內(nèi)滲透壓、酸堿、離子平衡, 排泄一些含氮廢棄物等多種重要功能。魚鰓在呼吸過程中與外界水環(huán)境直接接觸, 也極敏感, 易受水環(huán)境中化學(xué)、物理、生物等污染物影響, 造成組織病理損傷。水環(huán)境中污染物對魚鰓的損傷作用主要包括兩種, 一種是防御反應(yīng)產(chǎn)生的損傷, 包括上皮細(xì)胞腫大, 鰓小片隆起等, 另一種是藥物直接損傷, 如上皮細(xì)胞壞死脫落, 鰓結(jié)構(gòu)破壞等[21,22]。在本實(shí)驗(yàn)中, 根據(jù)異育銀鯽經(jīng)磺胺嘧啶脅迫后產(chǎn)生的病理變化, 推測可能前期主要為防御反應(yīng)損傷, 后期為直接損傷。大量研究表明, 水環(huán)境中的污染物對魚鰓具有毒性作用, 極易造成病理損傷。Biagini等[23]研究表明水中污染物會對羅非魚鰓組織造成鰓小片頂端膨大, 基部融合等與本文相似的病理變化。王曉光[24]研究了4種不同濃度的溴氰菊酯暴露對斑馬魚鰓組織的病理變化, 經(jīng)溴氰菊酯暴露后鰓小片上皮細(xì)胞腫脹,增生, 頂端膨大, 嚴(yán)重者基部發(fā)生融合。而鰓小片上皮細(xì)胞增生嚴(yán)重會影響魚正常呼吸和分泌等, 甚至引起魚體缺氧, 嚴(yán)重影響魚健康生長[25]。重金屬污染也易使魚鰓發(fā)生組織病變, 聶志娟等[26]發(fā)現(xiàn)暴露在3 mg/mL的Cu2+環(huán)境中刀鱭幼魚的鰓損傷較為嚴(yán)重, 毛細(xì)血管充血, 鰓小片發(fā)生脫落。鰓組織損傷后易感染一些致病菌, 引發(fā)新的疾病, 因此養(yǎng)殖魚類在使用抗生素類藥物時(shí), 應(yīng)避免因用藥造成鰓組織損傷。

腸道是魚類消化吸收營養(yǎng)物質(zhì)的場所, 腸道組織健康對魚類生長至關(guān)重要。腸道組織發(fā)生病變后, 易造成魚體營養(yǎng)不良, 生長滯緩, 對魚類養(yǎng)殖危害巨大。異育銀鯽在磺胺嘧啶的水體中暴露, 腸道組織產(chǎn)生相關(guān)病理變化, 表現(xiàn)為腸道微絨毛脫落,黏膜下層增厚, 黏膜皺襞出現(xiàn)破損等。腸道黏膜皺襞的高低疏密, 微絨毛的發(fā)達(dá)程度, 杯狀細(xì)胞數(shù)量多少都對魚體消化吸收能力具有影響作用[27]。因此, 磺胺嘧啶暴露后微絨毛脫落, 黏膜皺襞破損均會影響魚體的消化吸收。然而, 磺胺嘧啶暴露14d后, 其腸道組織損傷反而減少, 這可能是因?yàn)轸~體自身在應(yīng)對外界毒性物污染后, 會啟動(dòng)應(yīng)激反應(yīng),產(chǎn)生一定的適應(yīng)性。但是, 隨著磺胺嘧啶暴露時(shí)間的持續(xù)加長, 依然會對腸道組織產(chǎn)生不同程度的損傷。Puerto等[28]研究報(bào)道水環(huán)境中微囊藻毒素會導(dǎo)致羅非魚腸道組織發(fā)生上皮細(xì)胞脫落, 絨毛和微絨毛結(jié)構(gòu)破壞等病理變化。

魚肌肉是人類動(dòng)物蛋白質(zhì)的重要來源, 肌肉組織發(fā)生病變損傷會使肌肉品質(zhì)下降。另外, 肌肉組織主要負(fù)責(zé)魚體各種的運(yùn)動(dòng)功能, 肌肉組織病變異常的會引起魚的運(yùn)動(dòng)能力下降。在本實(shí)驗(yàn)中, 隨著異育銀鯽在磺胺嘧啶水體中暴露時(shí)間的延長, 濃度的增大, 肌肉組織損傷不斷加重, 表現(xiàn)為肌纖維排列疏松, 紊亂, 甚至斷裂等。陳濤等[29]研究氰戊菊酯對鲇魚肌肉組織的病理損傷影響, 發(fā)現(xiàn)氰戊菊酯會導(dǎo)致鲇魚肌肉組織表面疏松, 肌纖維不規(guī)則, 肌纖維間隙變大等, 這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)論相一致。陳秀榮的研究[30]也發(fā)現(xiàn)氰戊菊酯會引發(fā)草魚肌纖維排列紊亂, 疏松, 不規(guī)則等病變。

綜上, 水環(huán)境中磺胺嘧啶會對異育銀鯽產(chǎn)生不同程度的組織病理損傷, 其中肝臟、鰓、腎臟組織損傷程度大, 而且隨著磺胺嘧啶暴露時(shí)間的延長、濃度的加大, 各組織的病理損傷更為嚴(yán)重。

[1]Thuy H T T, Loan T T C. Antibiotic contaminants in coastal wetlands from Vietnamese shrimp farming [J].Environmental Science and Pollution Research, 2011,18(6): 835—841

[2]Tong L, Li P, Wang Y,et al. Analysis of veterinary antibiotic residues in swine wastewater and environmental water samples using optimized SPE-LC/MS/MS [J].Chemosphere, 2009, 74(8): 1090—1097

[3]Jia A, Hu J, Wu X,et al. Occurrence and source apportionment of sulfonamides and their metabolites in Liaodong Bay and the adjacent Liao River Basin, North China [J].Environmental Toxicology and Chemistry,2011, 30(6): 1252—1260

[4]Luo Y, Xu L, Rysz M,et al. Occurrence and transport of tetracycline, sulfonamide, quinolone, and macrolide antibiotics in the Haihe River Basin, China [J].Environmental Science & Technology, 2011, 45(5): 1827—1833

[5]Kolpin D W, Furlong E T, Meyer M T,et al. Pharmaceuticals, hormones, and other organic wastewater contaminants in US streams, 1999-2000: A national reconnaissance [J].Environmental Science & Technology, 2002,36(6): 1202—1211

[6]Zhang J. Studies on the toxicity and metabolism of sulfadimethoxine-sodium inIctalurus punctatus[D].Thesis for Master of Science. Huazhong Agricultural University. Wuhan. 2010 [張娟. 磺胺二甲氧嘧啶鈉在斑點(diǎn)叉尾鲙體內(nèi)毒性及代謝的研究. 碩士學(xué)位論文, 華中農(nóng)業(yè)大學(xué).武漢. 2010]

[7]Gao P, Mao D, Luo Y,et al. Occurrence of sulfonamide and tetracycline-resistant bacteria and resistance genes in aquaculture environment [J].Water Research, 2012,46(7): 2355—2364

[8]Willmott A, McCombie A, Rossleigh M. 99m-magiii diuretic renographic findings in sulfadiazine induced crystalluria [J].Internal Medicine Journal, 2011, 41: 25—26

[9]Lin T, Chen Q Y, Chen W. Toxic effect of sulfadiazine on the growth of zebrafish embryos in the water body [J].Journal of Safety and Environment, 2014, 14(3):324—327 [林濤, 陳燕秋, 陳衛(wèi). 水體中磺胺嘧啶對斑馬魚的生態(tài)毒性效應(yīng). 安全與環(huán)境學(xué)報(bào), 2014, 14(3):324—327]

[10]Lin T, Chen Y Q, Chen W. Impact of toxicological properties of sulfonamides on the growth of zebrafish embryos in the water [J].Environmental Toxicology and Pharmacology, 2013, 36(3): 1068—1076

[11]Xie M P, Yan Y. Toxic effects on zebrafish exposed to three sulfonamides in aquatic ecosystem [J].Environmental Science and Technology, 2015, 28(2): 30—34 [謝美萍, 顏勇. 水體中 3 種磺胺類藥物對斑馬魚的生態(tài)毒性效應(yīng). 環(huán)境科技, 2015, 28(2): 30—34]

[12]Roy S, Bhattacharya S. Arsenic-induced histopathology and synthesis of stress proteins in liver and kidney ofChanna punctatus[J].Ecotoxicology and Environmental Safety, 2006, 65(2): 218—229

[13]Zodrow J M, Stegeman J J, Tanguay R L. Histological analysis of acute toxicity of 2, 3, 7, 8-tetrachlorodibenzop-dioxin (TCDD) in zebrafish [J].Aquatic Toxicology,2004, 66(1): 25—38

[14]Wang D, Li S W, Feng J,et al. Norfloxacin accumulation rule and toxicity to Siberian sturgeon (Acipenser baeriiBrandt) [J].Journal of Fishery Sciences of China, 2015,22(6): 1209—1218 [王荻, 李紹戊, 馮娟, 等. 諾氟沙星在西伯利亞鱘體內(nèi)蓄積規(guī)律及其對組織的病理損傷. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2015, 22(6): 1209—1218]

[15]Zhang T, Song W H, Fu L J,et al. Effects of conventional water quality factors on histopathology of yellow catfish (Pelteobagrus fulvidraco) with ascites [J].Chinese Journal of Fisheries, 2015, 28(3): 32—36 [張濤, 宋文華,富麗靜, 等. 常見水質(zhì)指標(biāo)對患腹水病黃顙魚組織病理的影響. 水產(chǎn)學(xué)雜志, 2015, 28(3): 32—36]

[16]Han B, Wang D, Lu T Y. Acute toxicity and tissue injury studies of ivermectin for Songpu mirror carp (Cyprinus specularissongpu) [J].Journal of Fishery Sciences of China, 2015, 22(4): 687—697 [韓冰, 王荻, 盧彤巖. 伊維菌素對松浦鏡鯉的急性毒性與組織損傷. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2015, 22(4): 687—697]

[17]Wood E M, Yasutake W T. Histopathology of kidney disease in fish [J].The American Journal of Pathology,1956, 32(4): 845—856

[18]Lehr D. Clinical toxicity of sulfonamides [J].Annals of the New York Academy of Sciences, 1957, 69(1):417—447

[19]Zhu J L, Qi Z L, Li D Y,et al. Pathological changes in tilapia (Oreochromis niloticus) naturally infected byStreptococcus iniae[J].Journal of Fisheries of China,2014, 38(5): 722—730 [祝璟琳, 柒壯林, 李大宇, 等. 羅非魚海豚鏈球菌病的病理學(xué)觀察. 水產(chǎn)學(xué)報(bào), 2014,38(5): 722—730]

[20]Wang X Z, Lu H D. The acute toxicity and histopathology of Abamectin in Allogynogenetic crucian carp [J].Journal of Dalian Fisheries University, 2010, 25(1):66—70 [王錫珍, 陸宏達(dá). 關(guān)于阿維菌素對異育銀鯽的急性毒性和組織病理研究. 大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào), 2010,25(1): 66—70]

[21]Cengiz E I, Unlu E. Sublethal effects of commercial deltamethrin on the structure of the gill, liver and gut tissues of mosquitofish,Gambusia affinis: a microscopic study[J].Environmental Toxicology and Pharmacology, 2006,21(3): 246—253

[22]Pandey S, Parvez S, Ansari R A,et al. Effects of exposure to multiple trace metals on biochemical, histological and ultrastructural features of gills of a freshwater fish,Channa punctataBloch [J].Chemico-biological interactions, 2008, 174(3): 183—192

[23]Biagini F R, de Oliveira David J A, Fontanetti C S. The use of histological, histochemical and ultramorphological techniques to detect gill alterations inOreochromis niloti-cusreared in treated polluted waters [J].Micron, 2009,40(8): 839—844

[24]Wang X G. Effect of Deltamethrin on gills and livers inDanio rerio[D]. Thesis for Master of Science. Shandong Normal University. Jinan. 2015 [王曉光. 溴氰菊酯對斑馬魚鰓, 肝臟的影響. 碩士學(xué)位論文, 山東師范大學(xué), 濟(jì)南. 2015]

[25]Yang S W, Xu F F, Zhao M D. Distribution and bioaccumulation of tetrabromobisphenol A inCarassius auratustissues and its pathological effect [J].China Environmental Science, 2013, 33(4): 741—747 [楊蘇文, 徐范范, 趙明東. 四溴雙酚A在鯽魚不同器官中的分布, 富集及病理研究. 中國環(huán)境科學(xué), 2013, 33(4): 741—747]

[26]Nie Z J, Xu G C, Zhang S L,et al. Acute effects of copper on survival of fingerlings, antioxidant enzyme activities in liver and structure of gill and liver ofCoilia nasus[J].Journal of Fishery Sciences of China, 2014, 21(1):161—168 [聶志娟, 徐鋼春, 張守領(lǐng), 等. 銅對刀鱭幼魚的急性毒性及對肝抗氧化酶活性與組織結(jié)構(gòu)的影響.中國水產(chǎn)科學(xué), 2014, 21(1): 161—168]

[27]Chen K Q, Ye Y T, Cai C F,et al. Effects of dietary oxidized fish oil on the intestinal structure and permeability of grass carp (Ctenopharyngodon idellus) [J].Acta Hydrobiologica Sinica, 2016, 40(4): 804—813 [陳科全, 葉元土,蔡春芳, 等. 飼料氧化魚油引起草魚腸道結(jié)構(gòu)損傷、通透性增加. 水生生物學(xué)報(bào), 2016, 40(4): 804—813]

[28]Puerto M, Prieto A I, Jos A,et al. Dietary N-Acetylcysteine (NAC) prevents histopathological changes in tilapias (Oreochromis niloticus) exposed to a microcystinproducing cyanobacterial water bloom [J].Aquaculture,2010, 306(1): 35—48

[29]Chen T. The study of the effect of fenvalerate on GST metabolic enzymes activity and physiological damage on freshwater catfish (Silurus asotus) [D]. Thesis for Master of Science. China Agricultural University. Beijing. 2007[陳濤. 氰戊菊酯對鲇魚GST代謝酶系的影響及其生理損傷作用的研究. 碩士學(xué)位論文. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué), 北京.2007]

[30]Chen X R. The study of the effect of fenvalerate on the CYP3A activity and histological toxicology on grass carp[D]. Thesis for Master of Science. Huazhong Agricultural University, Wuhan. 2010 [陳秀榮. 氰戊菊酯對草魚CYP3A活性的影響及組織毒理學(xué)研究. 碩士學(xué)位論文.華中農(nóng)業(yè)大學(xué), 武漢. 2010]