抗菌肽抑菌機(jī)理及其研究方法

張 宇，姜 寧，張愛(ài)忠

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，黑龍江 大慶 163319）

抗生素產(chǎn)生耐藥性的問(wèn)題日益嚴(yán)重，許多抗生素已經(jīng)被禁用，抗菌肽作為抗生素的替代品之一，在農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)、食品生產(chǎn)和醫(yī)藥衛(wèi)生等領(lǐng)域被廣泛關(guān)注。天然的抗菌肽是由生物體內(nèi)基因編碼并通過(guò)核糖體合成的小分子肽，具有廣譜抗菌性且不易使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性，其來(lái)源十分廣泛，可以分為昆蟲抗菌肽、植物抗菌肽、哺乳動(dòng)物抗菌肽、兩棲動(dòng)物抗菌肽、魚類、軟體動(dòng)物、甲殼類動(dòng)物抗菌肽、微生物源抗菌肽，其中微生物源抗菌肽容易獲得，但是被開(kāi)發(fā)利用的并不多[1]?？咕牡慕Y(jié)構(gòu)主要有α-螺旋、β-折疊和環(huán)狀結(jié)構(gòu)，不同結(jié)構(gòu)的抗菌肽性質(zhì)特點(diǎn)有所不同[2]。

目前被發(fā)現(xiàn)且分離鑒定出結(jié)構(gòu)的抗菌肽已有一千多種，但研究抗菌肽的基本結(jié)構(gòu)只是應(yīng)用的前提，若要將抗菌肽應(yīng)用到實(shí)際生產(chǎn)，使其真正成為有效的抗生素替代品并充分發(fā)揮抑菌效果，發(fā)揮應(yīng)有的作用價(jià)值，就必須明確抗菌肽的抑菌機(jī)理。同種抗菌肽對(duì)于不同的細(xì)菌作用部位和機(jī)制可能不同，而不同的抗菌肽對(duì)于相同細(xì)菌的作用也不同。大量的研究表明，抗菌肽的抑菌機(jī)制與其來(lái)源和結(jié)構(gòu)并沒(méi)有絕對(duì)的關(guān)系,但是卻有相對(duì)的相關(guān)性[3]。為此，本文對(duì)抗菌肽的抑菌機(jī)理及其相應(yīng)的研究方法進(jìn)行了綜述，以期為抗菌肽的深入研究提供參考。

1 抗菌肽的抑菌機(jī)理

1.1抗菌肽作用于細(xì)菌細(xì)胞壁細(xì)胞壁能維持細(xì)菌的形狀，是保護(hù)菌體的最外層屏障，細(xì)胞壁一旦被破壞就會(huì)引起細(xì)菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化和細(xì)胞死亡?？咕淖饔糜诩?xì)菌時(shí)最先接觸細(xì)胞壁，通過(guò)破壞細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)發(fā)揮抑菌作用[4]。帶正電荷的抗菌肽可以與細(xì)胞壁中的脂多糖和磷壁酸相結(jié)合。Singh等[5]發(fā)現(xiàn)，S1系列抗菌肽與脂多糖的結(jié)合程度取決于其所帶電荷的數(shù)量及疏水性的強(qiáng)弱，衍生肽GKY25的兩親性與其同脂多糖和磷壁酸的結(jié)合呈顯著的線性關(guān)系[6]。有研究表明,帶正電荷的抗菌肽會(huì)取代細(xì)胞壁表面帶負(fù)電的Mg2+和Ca2+并導(dǎo)致細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，抗菌肽能穿過(guò)細(xì)胞壁作用于細(xì)菌細(xì)胞膜。很多研究表明，抗菌肽對(duì)細(xì)菌細(xì)胞壁的破壞不僅取決于其所帶電荷多少和疏水性強(qiáng)弱，作用于細(xì)菌的濃度也會(huì)影響抗菌肽對(duì)細(xì)胞壁的破壞程度。

1.2抗菌肽作用于細(xì)菌細(xì)胞膜抗菌肽穿過(guò)第一道屏障細(xì)胞壁后接觸到細(xì)菌細(xì)胞膜，氨基酸殘基與磷脂雙分子在靜電作用下發(fā)生結(jié)合?？咕耐ㄟ^(guò)將疏水端插入細(xì)胞膜的輸水區(qū)域來(lái)改變膜的結(jié)構(gòu)或使膜蛋白發(fā)生凝聚失去活性，進(jìn)入磷脂雙分子層后親水端發(fā)生結(jié)合并形成離子通道，細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)外泄導(dǎo)致菌體的死亡，但只有當(dāng)膜電勢(shì)高于110 nv時(shí)，離子通道才能開(kāi)啟或關(guān)閉[7]。絕大部分抗菌肽的抑菌模式是通過(guò)對(duì)細(xì)胞膜的破壞作用實(shí)現(xiàn)的，但抗菌肽與膜的相互作用會(huì)受到肽鏈長(zhǎng)度、二級(jí)結(jié)構(gòu)、電荷分布情況以及疏水性的影響[8]。抗菌肽對(duì)細(xì)胞膜的具體作用機(jī)制主要有以下四種假說(shuō)[9-10]。

1.3抗菌肽入胞后的作用機(jī)制有些抗菌肽的殺菌方式并不是或不完全是作用于細(xì)菌的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，它們能穿透細(xì)胞壁膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，通過(guò)阻斷細(xì)菌核酸（DNA、RNA）的合成、影響蛋白質(zhì)和細(xì)胞壁的形成、抑制胞內(nèi)酶活性發(fā)揮殺菌作用。但有些抗菌肽甚至可以通過(guò)抑制細(xì)胞呼吸等方式來(lái)達(dá)到抑菌作用，如某些富含脯氨酸的抗菌肽同細(xì)菌的熱休克蛋白結(jié)合發(fā)揮抗菌活性[15]。

1.3.1 抗菌肽對(duì)細(xì)菌DNA的作用 大量的試驗(yàn)結(jié)果表明，某些種類的抗菌肽可抑制核酸物質(zhì)的合成。來(lái)自于兩棲動(dòng)物皮膚的抗菌肽Dermaseptin、來(lái)自于牛中性粒細(xì)胞的抗菌肽Bac5/Bac7和人汗腺中的抗菌肽Dermcidin均能抑制細(xì)菌RNA的合成，而人附睪中的HE2和人嗜中性粒細(xì)胞中的HNP-1和HNP-2既能抑制RNA又能抑制DNA合成。蘇冠芳等[16]研究發(fā)現(xiàn)，buforinⅡ衍生物可以在不破壞菌膜的情況下進(jìn)入金黃葡萄球菌內(nèi)與DNA合成基因特異性結(jié)合，通過(guò)阻止DNA的合成達(dá)到抑菌效果。Hao等[17]研究發(fā)現(xiàn)buforinⅡ衍生物能插入DNA雙螺旋的凹槽內(nèi)通過(guò)干擾堿基對(duì)聚集來(lái)影響DNA的復(fù)制。陳旋等[18]研究發(fā)現(xiàn)，抗菌肽P7能嵌入大腸桿菌DNA堿基形成DNA-肽復(fù)合物，與rnhA序列發(fā)生特異性結(jié)合進(jìn)而影響大腸桿菌的DNA復(fù)制和RNA合成。陳飛龍等[19]研究發(fā)現(xiàn)，由副干酪乳桿菌FX-6產(chǎn)生的抗菌肽F1以嵌插的方式與金黃色葡萄球菌的DNA結(jié)合，影響細(xì)胞分裂周期和遺傳信息的正常表達(dá)。

表1 抗菌肽四種作用機(jī)制假說(shuō)Table 1 Four hypothesis mechanisms of antimicrobial peptides

1.3.2 抗菌肽對(duì)細(xì)胞壁合成的作用 抗菌肽除在胞外能破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，還可以在胞內(nèi)通過(guò)抑制細(xì)胞壁的合成和阻止細(xì)胞的分裂等方式殺滅細(xì)菌。很多種類的抗菌肽都可以通過(guò)抑制細(xì)胞壁的合成來(lái)阻止細(xì)胞分裂，如來(lái)自于麻蠅的Sarcotoxins、變異鏈球菌抗菌肽Mutacin1140和放線菌抗菌肽Planosporicin等[16]。細(xì)胞壁的主要成分之一是肽聚糖，研究表明放線菌抗菌肽Planosporicin能阻斷肽聚糖合成導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞壁合成受阻。

1.3.3 抗菌肽對(duì)酶的作用 部分抗菌肽可以通過(guò)抑制細(xì)胞內(nèi)酶的活性影響菌體代謝。陳飛龍等[19]發(fā)現(xiàn)，經(jīng)抗菌肽F1處理后的金黃色葡萄球菌代謝受到影響，抗菌肽F1降低了細(xì)胞內(nèi)非特異性酯酶及β-半乳糖苷酶的活性。某些種類的兩棲動(dòng)物抗菌肽如aurein 2.2、carein 1.8等，可通過(guò)抑制大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)ATP生成酶的活性影響其能量代謝，使細(xì)菌生長(zhǎng)速率下降[20]。劉立偉等[21]發(fā)現(xiàn)，抗菌肽能誘發(fā)胞內(nèi)蛋白酶和鈣離子外流，刺激細(xì)胞色素C釋放，通過(guò)酶促反應(yīng)使細(xì)胞凋亡。

2 抗菌肽抑菌機(jī)制的研究方法

對(duì)于抗菌肽不同的抑菌機(jī)制可采用不同的研究方法。通常采用電鏡技術(shù)（透射電鏡、掃描電鏡）和顯微鏡技術(shù)（原子力顯微鏡、熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡等）結(jié)合熒光染色技術(shù)等來(lái)觀察抗菌肽對(duì)細(xì)菌膜的作用；采用SDS電泳、DNA凝膠阻滯、熒光光譜分析、流式細(xì)胞技術(shù)、蛋白質(zhì)印記法等方法研究抗菌肽入胞后的作用機(jī)制；近年來(lái)，通過(guò)人工建立生物膜模型和動(dòng)力學(xué)模擬，結(jié)合電化學(xué)方法、核磁共振技術(shù)、熒光淬滅法、圓二色譜法及其他物理學(xué)光譜分析法，能更清晰便捷地了解抗菌肽的抗菌機(jī)制。

2.1抗菌肽對(duì)細(xì)菌細(xì)胞膜作用機(jī)制的研究方法大量的研究表明，細(xì)菌外膜是抗菌肽作用的主要部位，通過(guò)觀察細(xì)菌的外部形態(tài)以及胞膜結(jié)構(gòu)的完整性可以確定某種抗菌肽的作用靶點(diǎn)是否在細(xì)菌的細(xì)胞膜上。電鏡可以觀察到抗菌肽的微觀結(jié)構(gòu)變化：細(xì)菌壁或膜表面的變化，其中透射電鏡可以觀察到更加細(xì)微的變化，如細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)外膜發(fā)生分離、膜表面出現(xiàn)孔洞、細(xì)胞內(nèi)容物外流等。利用原子力顯微鏡并借助相關(guān)的軟件，無(wú)需對(duì)細(xì)菌進(jìn)行特殊處理即可計(jì)算出膜表面產(chǎn)生的孔洞直徑大小。電化學(xué)掃描隧道顯微鏡的分辨率較高，可以觀察到分子內(nèi)單個(gè)原子的排列情況。這兩種顯微鏡雖然能夠觀察到極其細(xì)微的結(jié)構(gòu)，但在研究中應(yīng)用較多的是透射電鏡和掃描電鏡。謝海偉等[22]研究合成的鱟素抗菌肽對(duì)大腸桿菌等其他細(xì)菌的作用，通過(guò)電鏡掃描觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)菌細(xì)胞的微觀結(jié)構(gòu)發(fā)生較大的變化，細(xì)胞表面出現(xiàn)坍塌和破裂。魏曉曉等[23]在掃描電鏡下觀察到被改造的牛血紅蛋白源抗菌肽JH-3可以使金黃色葡萄球菌的發(fā)生皺縮、使大腸桿菌的細(xì)胞膜表面出現(xiàn)孔洞、使白色念珠菌的表面凹凸不平并出現(xiàn)明顯裂痕。劉艷環(huán)等[24]通過(guò)透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，抗菌肽MSL可以使金黃葡萄球菌和綠膿桿菌的細(xì)胞膜破損甚至導(dǎo)致細(xì)胞瓦解，胞內(nèi)染色質(zhì)發(fā)生聚集現(xiàn)象。李瑞芳等[25]在篩選嗜鉻粒蛋白衍生肽時(shí)，通過(guò)掃描電鏡觀察CGA-N12可以使熱帶念珠菌菌體皺縮出現(xiàn)裂縫；通過(guò)透射電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)其可以使細(xì)胞壁與膜之間空隙變窄、顏色變深，細(xì)胞器受到破壞。馮興軍等[26]通過(guò)透射電鏡掃描發(fā)現(xiàn)鴨抗菌肽Cath（1-20）和Cath（5-20）能破壞細(xì)菌細(xì)胞膜，證明鴨抗菌肽的作用靶點(diǎn)就是細(xì)胞膜。Krisztina Nagy等[27]通過(guò)原子力顯微鏡觀察富含半胱氨酸的抗菌肽NCR247和NCR335均能使大腸桿菌表面粗糙度增加，引起胞膜損傷，進(jìn)而得出結(jié)論：抗菌肽NCR作用于細(xì)菌的第一個(gè)靶標(biāo)可能是細(xì)菌細(xì)胞膜。

通過(guò)電鏡和原子力顯微鏡只能觀察到未經(jīng)處理的細(xì)菌細(xì)胞膜表觀形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，但是其具體的實(shí)質(zhì)性變化需要通過(guò)熒光染色，借助熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡以及流式細(xì)胞儀等技術(shù)檢測(cè)。張倩[28]用PI染色含色氨酸的陽(yáng)離子抗菌肽，在激光共聚焦顯微鏡下觀察到被熒光標(biāo)記的抗菌肽出現(xiàn)在細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。蘇冠芳等[16]通過(guò)熒光光譜分析發(fā)現(xiàn)抗菌肽buforinⅡ衍生物與金黃葡萄球菌的DNA結(jié)合方式為嵌入式，通過(guò)流式細(xì)胞儀探究抗菌肽對(duì)細(xì)菌細(xì)胞周期的影響發(fā)現(xiàn)buforinⅡ能特異性地阻滯DNA合成階段。Bi等[29]用熒光標(biāo)記的抗菌肽作用于大腸桿菌后在激光共聚焦顯微鏡下觀察到被感染的細(xì)菌出現(xiàn)熒光，通過(guò)流式細(xì)胞儀對(duì)不同光信號(hào)采集整合并以散點(diǎn)圖展示出試驗(yàn)結(jié)果。Liu等[30]通過(guò)熒光染色和流式細(xì)胞技術(shù)也發(fā)現(xiàn)，在一段時(shí)間的作用后DiBAC4染料能進(jìn)入到90%以上的細(xì)菌中。

2.2抗菌肽進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞后作用機(jī)制的研究方法有些抗菌肽既能作用于細(xì)菌細(xì)胞膜又能入胞發(fā)揮作用，而有些抗菌肽能在不破壞細(xì)胞膜的情況下在細(xì)胞內(nèi)找到作用靶點(diǎn)，發(fā)揮殺菌作用。SDS電泳、DNA凝膠阻滯、熒光光譜分析、蛋白質(zhì)印記法等常用來(lái)研究抗菌肽入胞之后的作用機(jī)制。陳飛龍等[19]通過(guò)鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷法、凝膠阻滯電泳、SDS電泳、考馬斯亮藍(lán)檢測(cè)、熒光染色及流式細(xì)胞術(shù)等方法探究抗菌肽F1對(duì)金黃葡萄球菌的抑菌作用發(fā)現(xiàn)，抗菌肽F1以嵌插的方式與細(xì)菌的DNA結(jié)合，進(jìn)而影響DNA的復(fù)制和蛋白質(zhì)的表達(dá)，細(xì)胞內(nèi)的β-半乳糖苷酶和非特異性酯酶的活性降低，細(xì)菌生長(zhǎng)代謝受阻。陳旋等[18]研究抗菌肽P7對(duì)大腸桿菌的非膜作用方式時(shí)，通過(guò)P7與染色劑結(jié)合大腸桿菌DNA的熒光光譜來(lái)分析P7與DNA的結(jié)合方式；通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)分析抗菌肽與大腸桿菌DNA結(jié)合對(duì)細(xì)胞周期的影響；通過(guò)核酸染色及熒光分析探究P7對(duì)大腸桿核酸合成的影響。

2.3人工生物膜的建立及動(dòng)力學(xué)模擬抗菌肽與細(xì)菌細(xì)胞直接接觸作用并借助其他試驗(yàn)技術(shù)是生物學(xué)的驗(yàn)證和研究，而采用人工模擬合成細(xì)胞膜及分子動(dòng)力學(xué)模擬等方法，能進(jìn)一步清晰地闡明抗菌肽與磷脂雙分子層的作用方式。

人工建立的生物膜模型有很多，可以采用某一種磷脂或幾種磷脂混合構(gòu)成脂質(zhì)體，也可采用囊泡模型或者固體支撐膜模型來(lái)模擬。一般用磷脂酰膽堿（DMPC）模擬動(dòng)植物細(xì)胞膜；用磷脂酰甘油（DMPG）模擬細(xì)菌細(xì)胞膜。在建立的模型上通過(guò)電化學(xué)方法、核磁共振法、圓二色譜法、熒光淬滅法、X-射線結(jié)晶學(xué)技術(shù)、熒光法、拉曼光譜及傅立葉轉(zhuǎn)換紅外線（FTIR）等研究方法可以測(cè)定出抗菌肽與磷脂雙分子的作用方式。在實(shí)際的研究中，一般采用上述的某一種方法或幾種方法相結(jié)合。冉瑜[31]通過(guò)電化學(xué)的方法將人工脂質(zhì)體固定修飾到電極形成雙層膜，通過(guò)電流大小得知膜的完整性，同時(shí)采用色氨酸淬滅試驗(yàn)對(duì)熒光淬滅，研究脂質(zhì)體與抗菌肽的作用。圓二色譜法和核磁共振法通常用來(lái)檢測(cè)抗菌肽與細(xì)胞膜作用時(shí)的二級(jí)結(jié)構(gòu)變化。圓二色譜（CD）應(yīng)用廣、簡(jiǎn)單、快捷，可以測(cè)定抗菌肽在不同溶劑中二級(jí)結(jié)構(gòu)的變化情況；核磁共振法在進(jìn)行同位素標(biāo)記時(shí)不破壞樣品的結(jié)構(gòu)，樣品也不需要結(jié)晶處理，更接近于內(nèi)環(huán)境，同時(shí)，通過(guò)固態(tài)和液態(tài)核磁共振相結(jié)合能進(jìn)一步清楚了解抗菌肽與細(xì)胞膜的作用方式。孫宜君[32]通過(guò)圓二色譜研究螺旋藻抗菌肽的抑菌機(jī)理時(shí)發(fā)現(xiàn)，在水中抗菌肽以無(wú)規(guī)則卷曲形式存在，而在疏水條件下則主要以β-折疊形式存在。葉南慧等[33]利用圓二色譜法和核磁共振法測(cè)定不同溶液中沼水蛙抗菌肽的二級(jí)結(jié)構(gòu)并研究其抑菌機(jī)理，結(jié)果表明，沼水蛙抗菌肽的二級(jí)結(jié)構(gòu)會(huì)因溶劑不同而發(fā)生變化。而X-射線結(jié)晶學(xué)、拉曼光譜及傅立葉轉(zhuǎn)換紅外光譜是通過(guò)物理學(xué)方法，經(jīng)射線的散射作用獲得光譜，進(jìn)一步分析抗菌肽及生物膜的分子結(jié)構(gòu)變化，目前的應(yīng)用不及其他方法廣泛。Lauren等[34]用和頻振動(dòng)光譜（SFG）研究抗菌肽不同人工模擬的脂質(zhì)膜作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌膜脂質(zhì)提取物模擬的生物膜要優(yōu)于純POPG模擬的復(fù)合膜。

分子動(dòng)力學(xué)（MD）模擬是多原子系統(tǒng)在外力場(chǎng)的作用下單個(gè)原子發(fā)生運(yùn)動(dòng)，根據(jù)運(yùn)動(dòng)軌跡和力學(xué)統(tǒng)計(jì)方法獲得體系的力學(xué)量和性質(zhì)。繼1977年Karplus等對(duì)牛蛋白酶抑制劑進(jìn)行分子動(dòng)力學(xué)模擬之后，分子動(dòng)力學(xué)方法被廣泛應(yīng)用，隨后又被與計(jì)算機(jī)模擬相結(jié)合，使得分子動(dòng)力學(xué)模擬成為生物大分子研究中重要途徑之一。利用此模擬方法是從原子水平對(duì)抗菌肽與細(xì)胞膜作用方式的分析，通過(guò)微觀角度的觀察來(lái)驗(yàn)證宏觀的試驗(yàn)猜想，進(jìn)一步明確抗菌肽的作用機(jī)理。毛文超[35]利用分子動(dòng)力學(xué)模擬研究抗菌肽LL-37對(duì)人工模擬的細(xì)菌及哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞細(xì)胞膜的作用，通過(guò)不同的力場(chǎng)作用，計(jì)算并分析出肽和膜的穩(wěn)定性及形態(tài)結(jié)構(gòu)變化等，得到與實(shí)際試驗(yàn)一樣的結(jié)論。類似的探究和驗(yàn)證抗菌肽作用于細(xì)胞膜的試驗(yàn)有很多，蟲孔模型和毯式模型都經(jīng)過(guò)此模擬方法得到驗(yàn)證[36]。

研究表明，分子動(dòng)力學(xué)（MD）模擬只能研究抗菌肽作用于細(xì)胞膜形成的孔隙情況，而不能研究整個(gè)過(guò)程的作用情況。所以在MD的基礎(chǔ)上衍變出了耗散粒子動(dòng)力學(xué)（DPD）。DPD可以模擬長(zhǎng)度為毫米和時(shí)間為毫秒的尺度系統(tǒng)，將耗散粒子動(dòng)力學(xué)與靜電相互作用相結(jié)合，使研究者在較大的時(shí)間和尺度上探究抗菌肽在磷脂雙分子層上易位的全過(guò)程。將靜電相互作用結(jié)合耗散的粒子動(dòng)力學(xué)模擬探究抗菌肽穿過(guò)磷脂雙分子層的方式會(huì)發(fā)現(xiàn)，只有達(dá)到肽濃度臨界值時(shí)抗菌肽才會(huì)穿過(guò)膜，作用方式為先垂直插入再平行吸附。

3 小結(jié)

抗菌肽來(lái)源廣、種類多，在動(dòng)植物及微生物體內(nèi)含量很低，但殺菌作用明顯，可通過(guò)對(duì)細(xì)菌細(xì)胞壁、細(xì)胞膜和胞內(nèi)物質(zhì)的作用發(fā)揮作用。但由于抗菌肽種類繁多，結(jié)構(gòu)不同，即使是同類抗菌肽對(duì)于不同亞群的細(xì)菌抑菌機(jī)理也有可能不同。近階段一些研究表明，細(xì)菌也會(huì)對(duì)抗菌肽產(chǎn)生一定程度的耐受性，主要有以下幾種途徑：通過(guò)改變自身細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和結(jié)合位點(diǎn)影響抗菌肽的結(jié)合；通過(guò)分泌和釋放蛋白降解酶降解抗菌肽；通過(guò)改變細(xì)胞膜表面的電荷分布，如增加正電荷量減少與抗菌肽的靜電吸引作用；通過(guò)某種運(yùn)輸機(jī)制降低抗菌肽在細(xì)胞膜表面的濃度；通過(guò)基因突變產(chǎn)生對(duì)抗菌肽的耐受性；通過(guò)被抗菌肽激活的調(diào)節(jié)通路和特異性原件抵御抗菌肽。為了避免和解決細(xì)菌對(duì)抗菌肽的耐藥性問(wèn)題，深入研究不同抗菌肽的抑菌機(jī)制是十分重要的，同時(shí)這也將成為未來(lái)抗菌肽研究領(lǐng)域的一大熱點(diǎn)問(wèn)題。

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