豬繁殖與呼吸綜合征疫苗免疫策略分析

周 磊 ，張心慧

（中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 100193）

豬繁殖與呼吸綜合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是嚴(yán)重危害全球養(yǎng)豬生產(chǎn)的重要疾病，可引起感染母豬的繁殖障礙和各日齡豬只的呼吸道疾病。該病可致母豬流產(chǎn)、配種失敗、仔豬出生率下降以及窩健仔數(shù)減少，斷奶前后死亡率增加、日增重下降，商品豬出欄時(shí)間推遲、種豬銷售停滯，以及后期動(dòng)保、監(jiān)測、生物安全設(shè)施改建費(fèi)用的提升，造成豬場的巨大經(jīng)濟(jì)損失。其病原為豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus ，PRRSV），具有免疫抑制、持續(xù)性感染、毒株易變異的特征。毒株變異往往導(dǎo)致新的PRRS流行和原有疫苗免疫保護(hù)效果不理想。

在傳染病傳播的三要素（傳染源-易感動(dòng)物-傳播途徑）中，疫苗免疫在理想狀態(tài)下可將易感動(dòng)物轉(zhuǎn)化為非易感動(dòng)物，從而切斷或減緩病原的傳播。和大多數(shù)豬病的防控相似，疫苗免疫仍然是當(dāng)前PRRS防控的重要手段，但由于異源毒株保護(hù)性低這一免疫保護(hù)機(jī)制的制約，加之現(xiàn)有疫苗的自身缺陷以及疫苗使用方法的不合理，導(dǎo)致PRRS疫苗免疫后效果并不理想，仍有諸多問題存在爭議。文內(nèi)將對PRRS疫苗免疫過程中常見的一些疑問和誤區(qū)做逐一探討。

1　PRRS疫苗的種類和特點(diǎn)

根據(jù)疫苗中是否含有能夠在體內(nèi)增殖復(fù)制的活病毒，可將PRRS疫苗分為滅活苗（killed vaccine）和致弱（減毒）活疫苗（modified live vaccine，MLV）。

其中滅活苗是將病毒培養(yǎng)物滅活后，添加佐劑，利用病毒組成成分作為免疫原，刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫（產(chǎn)生抗體）。其最大的特點(diǎn)是安全性好、不散毒、不會(huì)產(chǎn)生毒力返強(qiáng)、易運(yùn)輸存儲(chǔ)，但由于病毒進(jìn)入體內(nèi)并不增殖，所需免疫劑量大、免疫產(chǎn)生所需時(shí)間較長、持續(xù)期較短。國內(nèi)外專家普遍認(rèn)為當(dāng)用于未感染的動(dòng)物時(shí)，傳統(tǒng)滅活苗免疫并不表現(xiàn)出有效的保護(hù)性。但愛荷華州立大學(xué)Alejandro Ramirez教授在《PRRSV指南》（Servet出版）中提出，使用滅活苗接種已感染或致弱活疫苗免疫過的豬只，可提供一定的保護(hù)作用，在臨床生產(chǎn)中也有少數(shù)這樣操作的，但效果如何仍存在較大爭議。

另一種則是使用較為廣泛的致弱（減毒）活疫苗（MLV），由PRRSV在非靶細(xì)胞（MARC-145等）中連續(xù)傳代致弱而成，MLV免疫豬只后可以在機(jī)體內(nèi)繼續(xù)復(fù)制增殖，因此和滅活苗相比，僅需要較少的病毒，便可以在體內(nèi)增殖后產(chǎn)生足夠強(qiáng)的免疫刺激，可同時(shí)誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫。MLV在合理使用且對豬場流行毒株具有交叉保護(hù)性的情況下，能夠有效地減輕因病毒感染所致的臨床癥狀和臟器病理變化，加快病毒血癥的清除，改善生長育肥豬的生產(chǎn)性能，減緩由于感染所致的日增重降低。MLV對異源毒株的交叉保護(hù)程度具有很大差異，目前并不清楚MLV與流行毒株需要有多高的同源性才能夠提供有效地保護(hù)，也不清楚決定保護(hù)與否的病毒基因或位點(diǎn)是什么。有國外報(bào)道稱，美洲型毒株免疫后能夠?qū)W洲型毒株產(chǎn)生保護(hù)，但反之歐洲型毒株免疫卻不能保護(hù)美洲型毒株，更加說明PRRSV異源保護(hù)機(jī)制的復(fù)雜性。由于當(dāng)下疫苗對新近流行的類NADC30毒株不能提供有效的保護(hù)，這可能使得該毒株迅速擴(kuò)散，在國內(nèi)廣泛流行。同時(shí)，由于PRRSV是RNA病毒，其復(fù)制保真性差，毒株具有易變異性，使其MLV也存在毒力返強(qiáng)和與其他毒株重組產(chǎn)生毒力增強(qiáng)株的風(fēng)險(xiǎn)。

2　PRRS疫苗使用中的疑問與誤區(qū)

當(dāng)前PRRS疫苗使用過程中存在諸多疑問和誤區(qū)。其一，過分依賴疫苗，而不重視生物安全控制。對人員、車輛以及環(huán)境控制松懈，公豬精液購入以及引種中隔離和監(jiān)測過程中缺少對PRRSV引入的防范；其二，豬場缺乏對豬群PRRSV感染的監(jiān)測與評估，在不清楚豬場所處PRRSV感染狀態(tài)的情況下盲目使用活疫苗；其三，頻繁更換疫苗毒株，同時(shí)使用兩種以上毒株的活疫苗。既包括在同一批豬中使用不同毒株來源的疫苗，也包括在同一豬場因成本節(jié)約或是管理運(yùn)營方面的原因，在不同生產(chǎn)階段使用不同毒株來源疫苗。PRRSV具有易重組特性，兩株不同來源的病毒同時(shí)感染同一個(gè)動(dòng)物中的相同細(xì)胞時(shí)可能發(fā)生重組，經(jīng)過宿主的篩選，重組子代病毒往往具有復(fù)制能力更強(qiáng)，更能逃脫免疫選擇壓力的特性。我們的前期實(shí)驗(yàn)表明，兩株低致病性的毒株在體內(nèi)發(fā)生重組后，子代病毒致病性能夠增強(qiáng)；其四，免疫過于頻繁，兩次免疫之間時(shí)間間隔不足。部分豬場為了盡快完成免疫程序，在初次免疫后1～2周便開始二免加強(qiáng)，在此類情況下，在機(jī)體還處于針對PRRSV免疫較為活躍的狀態(tài)下注射MLV疫苗，其中的活病毒會(huì)很快被機(jī)體清除，并不能起到有效地加強(qiáng)免疫的效果。免疫學(xué)基礎(chǔ)理論認(rèn)為，首次免疫已經(jīng)處于下降階段，形成記憶性免疫細(xì)胞之后，再次遇到相同的免疫原，機(jī)體會(huì)更快地產(chǎn)生更高水平的免疫應(yīng)答，所以二次加強(qiáng)免疫時(shí)應(yīng)該留給機(jī)體一定的反應(yīng)時(shí)間；其五，免疫劑量混亂，隨意改變免疫劑量，使用0.3、0.5或者2頭份進(jìn)行免疫。疫苗在研發(fā)上市之前必須通過系列實(shí)驗(yàn)確定最小免疫劑量，也就表明商品中規(guī)定的1頭份中所含活病毒的數(shù)量是經(jīng)過實(shí)驗(yàn)研究確認(rèn)的，不得隨意改變，注射劑量的翻倍并不能帶來保護(hù)效率的翻倍；其六，免疫程序過于隨意，或一成不變。免疫程序的確定并不依據(jù)本場PRRSV的流行狀況、豬群發(fā)病情況以及豬群健康狀況確定定制化的免疫程序，而是隨意安排或照搬其他豬場的現(xiàn)有程序。亦或是程序一旦制定下來，就多年不變，即使本場PRRSV感染狀態(tài)已發(fā)生改變，仍不修改免疫程序，這往往造成疫苗過度注射的浪費(fèi)或是免疫時(shí)間的不及時(shí)。

3　PRRS MLV疫苗使用的基本原則

1）豬群PRRSV感染狀態(tài)的評估和監(jiān)測是疫苗免疫程序制定的前提

根據(jù)豬群排毒和抗體轉(zhuǎn)陽情況，可將豬群的PRRSV感染狀態(tài)分為4類（暴發(fā)，陽性不穩(wěn)定，陽性穩(wěn)定和陰性）。PRRSV感染狀態(tài)的不同直接決定是否需要使用疫苗，以及疫苗使用的時(shí)間和頻次。PRRS陰性豬場不使用疫苗（包括滅活苗），目前豬繁殖與呼吸綜合征疫苗免疫與野毒感染所產(chǎn)生的抗體無法區(qū)分，疫苗免疫即可導(dǎo)致豬群轉(zhuǎn)陽、帶毒，喪失陰性群種豬銷售的附加價(jià)值；陽性穩(wěn)定場，不使用MLV進(jìn)行全群免疫，但對后備豬進(jìn)行隔離馴化，監(jiān)測合格后方可混群；陽性不穩(wěn)定豬場，應(yīng)適當(dāng)使用MLV活疫苗，根據(jù)PRRSV發(fā)病情況，提前3～4周給生長豬群進(jìn)行單次免疫；對于疫情發(fā)生的豬場，應(yīng)使用活疫苗，并制定合理的免疫程序。疫情發(fā)生初期，可對所有繁殖母豬和后備豬進(jìn)行一次普免，使豬群PRRS狀態(tài)均一化，減少易感動(dòng)物，縮短暴發(fā)時(shí)間。之后母豬群配種前進(jìn)行一次免疫。生長豬群，依據(jù)感染和發(fā)病階段（經(jīng)臨床和實(shí)驗(yàn)室確診），提前3～4周進(jìn)行免疫，可免疫1～2次。

2）豬場僅使用一種毒株來源的活疫苗

為減少毒株間的重組風(fēng)險(xiǎn)，一個(gè)豬場只使用一種毒株來源的致弱活疫苗，不可頻繁更換疫苗毒株或不同生產(chǎn)階段使用不同毒株來源的疫苗。引種優(yōu)先選擇從陰性豬場引入，即使本場為PRRSV陽性場，也可將陰性豬引入后，在隔離期間用本場所用疫苗株進(jìn)行馴化。

3）PRRS MLV進(jìn)行后備豬馴化安全性更高

后備豬馴化是PRRS防控中非常重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。通過混群前的提前暴露，產(chǎn)生機(jī)體免疫，能有效減少引入易感動(dòng)物的風(fēng)險(xiǎn)。PRRS馴化有多種方法，如將經(jīng)產(chǎn)母豬與后備豬混群自然感染、陽性血清接種和疫苗免疫接種等，其中疫苗免疫馴化較前兩種方法，安全性更高，免疫動(dòng)物均一性也更好。

4）有合理的PRRS MLV疫苗退出機(jī)制

當(dāng)豬群進(jìn)入陽性穩(wěn)定狀態(tài)后，可停止普免活疫苗，即經(jīng)產(chǎn)母豬群抗體陽性率80%以上且生產(chǎn)成績穩(wěn)定，可不用免疫，僅對后備母豬進(jìn)行馴化。如果以凈化PRRS，建立陰性群為目標(biāo)，豬群進(jìn)入PRRS陽性穩(wěn)定狀態(tài)后停用PRRS MLV活疫苗是必要步驟。

4　結(jié)語

PRRS在豬場的傳播和流行是一個(gè)復(fù)雜過程，對其防控應(yīng)摒棄以往一味強(qiáng)調(diào)疫苗免疫的單一模式，必須診斷先行，綜合防控。從生物安全控制，豬群健康監(jiān)測，免疫管理和繼發(fā)感染控制多個(gè)維度加以全方位應(yīng)對。同時(shí)PRRS新一代疫苗的開發(fā)也應(yīng)該考慮更高的安全性，降低毒力返強(qiáng)風(fēng)險(xiǎn)，減少重組概率；能夠?qū)Χ喾N異源毒株提供有效的保護(hù)；帶有分子標(biāo)記，動(dòng)物使用后能夠區(qū)分疫苗免疫還是野毒感染。