響應(yīng)面法優(yōu)化微波輔助米渣蛋白糖基化改性工藝

,, ,*,

(1.安徽師范大學(xué) 環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院,安徽蕪湖 241002;2.浙江省生物工程重中之重學(xué)科,浙江萬里學(xué)院,浙江寧波315100;3.食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江南大學(xué),江蘇無錫 214122)

米渣是以大米為原料生產(chǎn)抗生素、有機(jī)酸和淀粉糖等工業(yè)產(chǎn)品的副產(chǎn)品。在大米糖漿的生產(chǎn)過程中,每加工100 t大米,約產(chǎn)生14.5 t米渣。據(jù)統(tǒng)計(jì),目前我國每年可產(chǎn)生5×105t以上的米渣副產(chǎn)品[1-2]。米渣主要成分為蛋白質(zhì)、少量淀粉和脂肪等物質(zhì),其中蛋白質(zhì)在米渣中所占比例因生產(chǎn)工藝的差異而不同,約占米渣質(zhì)量50%～70%[3]。在大米糖漿的生產(chǎn)過程中,會經(jīng)歷很高的溫度和壓力,這些加工措施會造成大米蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和氨基酸含量及比例的劇烈變化,這不僅降低了蛋白質(zhì)的溶解度,而且影響了米渣蛋白的功能性質(zhì),限制了米渣蛋白在食品工業(yè)中的應(yīng)用[4-5]。

近年來,微波作為一種新型食品加工技術(shù),已在食品熱加工領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,如利用微波場產(chǎn)生的熱效應(yīng)誘導(dǎo)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的變化,達(dá)到殺菌的目的[6];除此之外,微波加熱還應(yīng)用于蛋白質(zhì)的改性,如Liu等[7]為了提高蛋白纖維的韌性,采用微波對小麥蛋白進(jìn)行加熱處理,發(fā)現(xiàn)微波加熱小麥蛋白結(jié)構(gòu)更為平滑,毛孔較少,并且明顯增加了小麥蛋白的吸水性。

美拉德反應(yīng)是食品體系熱加工過程中經(jīng)常發(fā)生的一種反應(yīng),即蛋白質(zhì)鏈上的氨基酸與還原糖發(fā)生接枝反應(yīng),通過該反應(yīng)改善食品體系的穩(wěn)定性和食品的功能性質(zhì)。基于此,研究人員利用該反應(yīng)對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾,以改善其溶解性、乳化性等性能。王治平等[8]采用濕熱法在米渣蛋白結(jié)構(gòu)上接枝葡萄糖,對美拉德反應(yīng)的產(chǎn)物進(jìn)行評價(jià)發(fā)現(xiàn),接枝后的米渣蛋白疏水性降低,并且接枝修飾后的米渣蛋白α-螺旋結(jié)構(gòu)減少,β-螺旋結(jié)構(gòu)增加,并且米渣蛋白結(jié)構(gòu)較為分散。杜研學(xué)等[9]采用干熱美拉德接枝反應(yīng)對米渣谷蛋白進(jìn)行糖基化改性,發(fā)現(xiàn)接枝卡拉膠后的米渣谷蛋白溶解性、乳化性和乳化穩(wěn)定性顯著提高,并且改善了米渣谷蛋白在不同pH范圍內(nèi)的功能性質(zhì)。華靜嫻[10]利用微波加熱研究米蛋白-葡聚糖美拉德反應(yīng),并對接枝工藝進(jìn)行優(yōu)化,接枝度最大達(dá)48.1%,這高于普通加熱接枝反應(yīng)的接枝率;此外還發(fā)現(xiàn)微波加熱能加速蛋白質(zhì)的降解,促使體系產(chǎn)生更多的氨基酸,從而為美拉德反應(yīng)提供更多的底物[11]。但是,米渣經(jīng)過高溫高壓處理后,其結(jié)構(gòu)均已發(fā)生變化,微波場作用下,米渣蛋白是否可以接枝上糖類物質(zhì),進(jìn)而改變其溶解性等性質(zhì)尚未可知。

因此,本研究以米渣蛋白為研究對象,利用微波輔助接枝海藻酸鈉,通過考察接枝產(chǎn)物的接枝度和褐變度,對微波輔助米渣蛋白糖基化改性工藝進(jìn)行優(yōu)化,旨在獲得高效、安全的蛋白質(zhì)改性方法,為米渣蛋白的工業(yè)化應(yīng)用提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1材料與儀器

米渣 江西麻姑實(shí)業(yè)有限公司;脂肪酶(酶活10000 U/g) 江蘇銳陽生物科技有限公司;糖化酶(酶活10000 U/g) 江蘇銳陽生物科技有限公司；鹽酸、氫氧化鈉、鄰苯二甲醛(OPA)、十二烷基硫酸鈉(SDS)、β-巰基乙醇、海藻酸鈉 均為分析純,實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水,所需溶液均為自配。

RJ-LDL-50G低速大容量多管離心機(jī) 無錫瑞江分析儀器有限公司;HH-S2系列恒溫水浴鍋 江蘇金壇市環(huán)宇科學(xué)儀器廠;NJL07-3 實(shí)驗(yàn)用微波爐 南京杰全微波設(shè)備有限公司;加熱磁力攪拌器、FE20 型pH計(jì) 德國IKA;ACPHA1-4型冷凍干燥機(jī) CHRIST公司;TGL-16G高速臺式離心機(jī) 上海安亭電子儀器廠;UV-1601 PC 紫外可見分光光度計(jì) 日本島津公司;B-191型實(shí)驗(yàn)型噴霧干燥機(jī) 瑞典Buchi公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 米渣蛋白的制備 采用去雜法制備米渣蛋白(Rice dreg protein,RDP),工藝流程如下:

脂酶脫脂的條件為:pH9.0、脂肪酶添加量為650 U/g、酶解溫度50 ℃、酶解時(shí)間90 min;脫脂米渣脫糖的條件為:液固比6、加酶量600 U/g、酶解溫度62.49 ℃、酶解時(shí)間88.44 min、超聲波功率139.88 W,在此條件下蛋白質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為92.68%(經(jīng)脫脂、脫糖后所得產(chǎn)物中的蛋白質(zhì)含量)。

1.2.2 米渣分離蛋白與海藻酸鈉共價(jià)接枝物的制備 參考陸鈁[12]的方法,稍作修改。準(zhǔn)確稱取一定量的米渣蛋白配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%(w/w)蛋白溶液,用1 mol/L NaOH調(diào)pH至12.0,在50 ℃下磁力攪拌30 min使蛋白溶解,冷卻至室溫,按一定配比加入海藻酸鈉,磁力攪拌20 min,使蛋白與海藻酸鈉充分混合均勻,用1 mol/L HCl或1 mol/L NaOH調(diào)節(jié)pH至所需值,磁力攪拌10 min。取米渣蛋白與海藻酸鈉混合溶液50 mL加入到100 mL圓底燒瓶中,置于實(shí)驗(yàn)用微波爐內(nèi),裝好回流裝置,采用間歇式微波加熱反應(yīng)。待反應(yīng)結(jié)束立即放入冰水浴中冷卻5 min,結(jié)束反應(yīng)。

1.2.3 接枝反應(yīng)評價(jià)指標(biāo)的測定

1.2.3.1 接枝度(DG)的測定 用鄰苯二甲醛(OPA)法[13]測定接枝度,其中OPA試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用。準(zhǔn)確稱取40.0 mg的OPA,用1.0 mL甲醇溶解,溶解完全后加入2.5 mL 20%(w/w)的十二烷基硫酸鈉(SDS),25.0 mL 0.1 mol/L硼砂,100 μLβ-巰基乙醇,最后用蒸餾水定容到50 mL。測定時(shí),取4.0 mL OPA試劑于試管中,加入200 μL冷卻的米渣蛋白與海藻酸鈉反應(yīng)溶液,混合均勻后在35 ℃水浴中反應(yīng)2 min,最后在340 nm下測吸光值A(chǔ)t,空白樣的配制為向4.0 mL OPA試劑中加入200 μL水,在340 nm測定的吸光度為A0。按如下公式計(jì)算接枝度。

公式中,DG:接枝度,%;A0:空白樣的吸光度;At:反應(yīng)2 min后溶液的吸光度。

1.2.3.2 褐變度的測定 參照Sun[14]的方法,準(zhǔn)確量取1.0 mL米渣蛋白與海藻酸鈉接枝反應(yīng)物,與5.0 mL 0.1%(w/w)SDS溶液混合,在420 nm下測定吸光值A(chǔ)420,以SDS溶液作空白,吸光度反映了美拉德反應(yīng)的褐變程度。

1.2.4 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 分別以接枝度和褐變度為指標(biāo),研究微波功率、微波時(shí)間、微波溫度、pH、海藻酸鈉:RDP質(zhì)量比對接枝反應(yīng)的影響:

1.2.4.1 微波功率對RDP與海藻酸鈉接枝反應(yīng)的影響 分別選取50、100、150、200、250 W微波功率,其它條件為:微波時(shí)間15 min、微波溫度90 ℃、調(diào)pH10.0、海藻酸鈉:RDP質(zhì)量比為3∶1。

1.2.4.2 微波時(shí)間對RDP與海藻酸鈉接枝反應(yīng)的影響 分別選取5、10、15、20、25、30 min微波時(shí)間,其它條件為:微波功率250 W、微波溫度90 ℃、調(diào)pH10.0、海藻酸鈉:RDP質(zhì)量比為3∶1。

1.2.4.3 微波溫度對RDP與海藻酸鈉接枝反應(yīng)的影響 分別選取50、60、70、80、90 ℃微波溫度為實(shí)驗(yàn)條件,其它條件為:微波功率250 W、微波時(shí)間20 min、調(diào)pH10.0、海藻酸鈉:RDP質(zhì)量比為3∶1。

1.2.4.4 pH對RDP與海藻酸鈉接枝反應(yīng)的影響 分別選取pH8.0、9.0、10.0、11.0、12.0作為實(shí)驗(yàn)條件,其它條件為:固定微波功率250 W、微波時(shí)間20 min、微波溫度80 ℃、海藻酸鈉:RDP質(zhì)量比為3∶1。

1.2.4.5 海藻酸鈉:RDP質(zhì)量比對RDP與海藻酸鈉接枝反應(yīng)的影響 分別選取1∶2、1∶1、2∶1、3∶1、4∶1的海藻酸鈉:RDP質(zhì)量比,其它條件為:微波功率250 W、微波時(shí)間20 min、微波溫度80 ℃、調(diào)pH10.0。

1.2.5 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,根據(jù)Central Composite實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,以接枝度為響應(yīng)值,通過響應(yīng)面分析對RDP與海藻酸鈉接枝條件進(jìn)行優(yōu)化,獲得最優(yōu)接枝工藝條件。每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次,取其平均值。中心組合實(shí)驗(yàn)的因素水平如表1所示。

表1 中心組合實(shí)驗(yàn)因素水平表Table 1 The factors and levels of central composite design

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)均為三次實(shí)驗(yàn)平均值,誤差項(xiàng)為標(biāo)準(zhǔn)偏差;用Origin 8.5軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行圖形化處理;SPSS Statistics 17.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與討論

2.1微波功率對接枝反應(yīng)的影響

在前期的實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn),微波功率對接枝反應(yīng)影響顯著,并且微波功率高于300 W接枝反應(yīng)過于劇烈,難以控制,因此為便于操作控制選擇50～250 W進(jìn)行研究。由圖1可知,接枝率和褐變度都隨著微波功率的增加而增加。功率在50～150 W范圍內(nèi)時(shí),接枝率隨著功率的升高而逐漸增加;隨后,當(dāng)微波功率在150～200 W之間時(shí),接枝率的上升速度較快;微波功率大于200 W時(shí),接枝率上升速度變慢,此研究結(jié)果與華靜嫻[15]相同。

圖1 微波功率對接枝反應(yīng)的影響Fig.1 Effect of the power of microwave radiation on the grafting reaction

2.2微波時(shí)間對接枝反應(yīng)的影響

米渣蛋白與海藻酸鈉之間發(fā)生美拉德反應(yīng),主要是RDP分子中氨基酸側(cè)鏈上的自由氨基與海藻酸鈉分子末端的還原性羥基之間的羥胺反應(yīng)[16]。如圖2所示,在反應(yīng)5～30 min內(nèi),褐變度均呈上升趨勢。接枝率在10～20 min內(nèi)增加迅速,之后趨于平緩,20 min以后接枝率出現(xiàn)輕微下降趨勢。這是因?yàn)槲⒉訜崾沟鞍踪|(zhì)分子內(nèi)部的暴露出來,與多糖結(jié)合的幾率增加,接枝度隨之上升;但不斷加熱,高溫會促進(jìn)接枝物發(fā)生水解,不利于接枝反應(yīng)的進(jìn)行[17];并且酪氨酸在長時(shí)間加熱過程中結(jié)構(gòu)遭到破壞,與此同時(shí),蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的持續(xù)展開導(dǎo)致蛋白質(zhì)之間的相互作用也逐漸增大,并最終形成凝聚和沉淀,不利于接枝反應(yīng)的進(jìn)行。

圖2 微波時(shí)間對接枝反應(yīng)的影響Fig.2 Effect of the time of microwave radiation on the grafting reaction

2.3反應(yīng)溫度對接枝反應(yīng)的影響

如圖3所示,接枝反應(yīng)的接枝率及褐變度都與溫度的變化呈正相關(guān)。溫度達(dá)到80 ℃后,接枝度的變化不明顯,但在反應(yīng)過程中褐變度均呈上升趨勢。升高溫度,會促進(jìn)美拉德反應(yīng)的進(jìn)行。這主要是因?yàn)楦邷剡€可能一方面使得蛋白質(zhì)發(fā)生水解,自由氨基含量增加[18],促進(jìn)接枝反應(yīng);另一方面是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)結(jié)構(gòu)打開內(nèi)部氨基暴露出來,與海藻酸鈉發(fā)生反應(yīng),會進(jìn)一步使反應(yīng)程度加大[19]。但隨著溫度的升高,接枝物發(fā)生水解,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)的水解率大于接枝率時(shí),反應(yīng)的接枝率出現(xiàn)下降的趨勢。

圖3 反應(yīng)溫度對接枝反應(yīng)的影響Fig.3 Effect of the temperature on the grafting reaction

2.4反應(yīng)體系pH對接枝反應(yīng)的影響

在美拉德反應(yīng)過程中,酸堿度對美拉德反應(yīng)的進(jìn)程具有重要影響。氨基酸分子在堿性溶液中帶正電荷,此時(shí)容易發(fā)生美拉德反應(yīng),但是堿性太強(qiáng)的環(huán)境會破壞蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu),造成如脫氨、脫羧和肽鍵斷裂等變化,反而對接枝反應(yīng)不利,因此一般情況下美拉德反應(yīng)體系的pH處于3.0～10.0之間[20]。

如圖4所示,當(dāng)pH<10,隨著堿性增強(qiáng),接枝反應(yīng)的接枝率和褐變度隨之增大;pH=10.0時(shí),接枝率最大,之后趨于穩(wěn)定并有下降趨勢。一方面是因?yàn)槊览路磻?yīng)是堿性條件下發(fā)生的反應(yīng),隨著堿性的增強(qiáng),氨基酸與還原糖之間的反應(yīng)效率增加[21];另外一方面是因?yàn)镽DP中90%為谷蛋白,谷蛋白是堿溶性蛋白,蛋白質(zhì)溶解度的增大也有利于反應(yīng)的進(jìn)行;但堿性太強(qiáng),會使蛋白質(zhì)發(fā)生水解,結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,對美拉德反應(yīng)不利。

圖4 反應(yīng)體系pH對接枝反應(yīng)的影響Fig.4 Effect of pH on the grafting reaction

2.5海藻酸鈉與米渣蛋白質(zhì)量比對接枝反應(yīng)的影響

在美拉德反應(yīng)體系中,多糖和蛋白兩種反應(yīng)底物的濃度對反應(yīng)程度均具有重要影響,當(dāng)體系中一種底物濃度固定時(shí),提高另一種底物的濃度會增加底物分子之間的相互碰撞機(jī)會[22-23],加速美拉德反應(yīng)的進(jìn)程;但隨著底物濃度的進(jìn)一步提高,當(dāng)另一種反應(yīng)物用量繼續(xù)增加至一定程度時(shí),兩種反應(yīng)物存在的空間位阻作用,阻隔了分子之間的碰撞,導(dǎo)致碰撞幾率下降,反應(yīng)受阻[24]。因此,反應(yīng)體系中適當(dāng)比例的多糖和蛋白質(zhì)能加速美拉德反應(yīng)的進(jìn)程。

如圖5所示,體系中海藻酸鈉濃度的增加,褐變度隨之增加,接枝度先增加后降低。這可能是因?yàn)殡S著體系中海藻酸鈉的濃度升高,溶液的粘度上升,蛋白質(zhì)和海藻酸鈉的空間位阻作用增強(qiáng)[25-26],當(dāng)海藻酸鈉:米渣分離的比例大于2∶1時(shí),空間位阻作用阻礙了RDP和海藻酸鈉相互接觸。

圖5 海藻酸鈉與RDP質(zhì)量比對接枝反應(yīng)的影響Fig.5 Effect of the ratio of RDP to sodium alginate(w/w)on the grafting reaction

2.6米渣分離蛋白與海藻酸鈉接枝反應(yīng)工藝條件的響應(yīng)面優(yōu)化

對表2中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行二次回歸擬合分析,得出如下回歸模型:

Y(%)=+35.56-1.42A-0.32B+2.19C+1.02D-1.10AB+0.00074AC+0.14AD-0.33BC-53BD-0.026CD-3.55A2-1.33B2-1.00C2-0.45D2

表2 中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table 2 Experimental design and results based on central composite design

表3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果方差分析Table 3 Variance analysis of experimental results

注:*.顯著(p<0.05),**.極顯著(p<0.01)。

根據(jù)表3中方差分析結(jié)果,對具有顯著相互交互影響的因素進(jìn)行響應(yīng)曲面分析,結(jié)果如圖6(a-f)所示。從圖6可以看出,海藻酸鈉:RDP對接枝度的影響要明顯大于pH對接枝度的影響(A>B);同時(shí),可從圖6(d)直觀看出加微波功率對接枝反應(yīng)的影響大于pH對接枝度的影響(C>B);而且從圖6(f)看出溫度對接枝度的影響大于pH對接枝度的影響(D>B)。因此,結(jié)合表3可得出在模型范圍內(nèi)各因素對接枝度的影響順序?yàn)?C>A>D>B。

由響應(yīng)面、等高線和回歸方程分析可知,RDP-海藻酸鈉接枝的最優(yōu)工藝參數(shù)為:海藻酸鈉:米渣分離蛋白質(zhì)量比1.88∶1、pH10.18、微波功率186 W、微波溫度77.7 ℃,在此條件下接枝度為36.87%,與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中心點(diǎn)的最大值37.03%誤差在5%范圍內(nèi)。為了操作的方便性對最優(yōu)參數(shù)進(jìn)行校正:米渣分離蛋白-海藻酸鈉質(zhì)量比1.9∶1、pH10.0、微波功率186 W、微波溫度78 ℃,在此條件下進(jìn)行三次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),實(shí)測接枝率分別為36.67%、36.12%、36.92%,得出三次平均值36.57%,與預(yù)測值的RSD%為0.81%,在誤差允許范圍內(nèi)。因此,所建立的優(yōu)化模型準(zhǔn)確可靠。

圖6 不同因素對接枝反應(yīng)的交互影響響應(yīng)面圖及等高線圖Fig.6 Surface and contour plots of mutual-influence of different factors on grafting reaction

3 結(jié)論

本研究以米渣分離蛋白和海藻酸鈉為原料,利用微波對米渣蛋白進(jìn)行接枝改性處理,通過單因素和中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),考察海藻酸鈉∶米渣分離蛋白質(zhì)量比、微波溫度、微波時(shí)間、微波功率、pH對接枝度和褐變度的影響,并建立米渣分離蛋白與海藻酸鈉接枝反應(yīng)的二次回歸模型,通過該模型得到米渣分離蛋白和海藻酸鈉接枝的最優(yōu)參數(shù)為:海藻酸鈉∶米渣分離蛋白質(zhì)量比1.88∶1、pH10.18、微波功率186 W、微波溫度77.7 ℃,且各因素對接枝反應(yīng)的影響順序?yàn)?功率>pH>海藻酸鈉:米渣分離蛋白質(zhì)量比>溫度,此條件下接枝度為36.87%。采用微波輔助米渣蛋白接枝海藻酸鈉進(jìn)行美拉德反應(yīng)改性,不僅耗時(shí)短、效率高,而且雜質(zhì)少,從米渣蛋白資源增值化利用的角度看,能為進(jìn)一步工業(yè)化生產(chǎn)提供依據(jù)。后續(xù)研究可對米渣蛋白與海藻酸鈉接枝反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)一步鑒定,闡明米渣蛋白與海藻酸鈉接枝反應(yīng)的機(jī)理,在此基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)對米渣蛋白美拉德反應(yīng)的調(diào)控,并探討接枝產(chǎn)物對食品體系穩(wěn)定性和食品品質(zhì)的影響。

[1]汪玉海. 大米加工現(xiàn)狀與趨勢[J]. 農(nóng)業(yè)工程技術(shù)(農(nóng)產(chǎn)品加工業(yè)),2008,6:18-22.

[2]羅舜菁,勤耿,顏小燕,等. 不同脫脂條件下脫脂米渣蛋白的結(jié)構(gòu)及功能性質(zhì)研究[J]. 食品科學(xué),2017,38(5):202-207.

[3]張美,李慶,李一林,等. 米渣營養(yǎng)成分測定及其蛋白質(zhì)提取工藝優(yōu)化[J]. 食品科學(xué)技術(shù)學(xué)報(bào),2015,33(6):65-71.

[4]趙貴川. 超高壓處理對米渣蛋白水解物抗氧化活性的影響[D]. 長沙:中南林業(yè)科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,2016:1-11.

[5]劉珊珊,陳季旺,陳露,等. 米渣發(fā)泡蛋白的理化性質(zhì)及形態(tài)結(jié)構(gòu)[J]. 中國糧油學(xué)報(bào),2015,30(4):33-38.

[6]Bozkurt-Cekmer H,Davidson P M. 11-Microwaves for microbial inactivation—efficiency and inactivation kinetics[M]. The Microwave Processing of Foods(Second Edition). Cambridge:Woodhead Publishing,2016:220-251.DOI:10.1016/B978-0-08-100528-6.00011-5.

[7]Liu C,Ma X. Study on the mechanism of microwave modified wheat protein fiber to improve its mechanical properties[J]. Journal of Cereal Science,2016,70:99-107. DOI:10.1016/j.jcs.2016.05.018.

[8]王治平,何榮海,丁文慧,等. 葡萄糖接枝改性對米渣分離蛋白乳化性及結(jié)構(gòu)的影響[J]. 中國糧油學(xué)報(bào),2017,32(2):43-48.

[9]杜研學(xué),史蘇華,熊華,等. 米渣谷蛋白卡拉膠糖基化改性及功能性質(zhì)[J]. 食品科學(xué),2011,32(16):11-15.

[10]華靜嫻,陳正行,鐘芳. 大米蛋白-葡聚糖接枝耦聯(lián)反應(yīng)的研究[J]. 食品科學(xué),2008,29(12):45-50.

[11]Quitain A T.,Daimon H,Fujie K,et al. Microwave-assisted hydrothermal degradation of silk protein to amino acids[J]. Industrial & Engineering Chemistry Research,2006,45(13):4471-4474.

[12]陸鈁. 美拉德反應(yīng)改進(jìn)大米蛋白功能性質(zhì)的研究[D]. 無錫:江南大學(xué),2008:29-40.

[13]史蘇華. 米渣谷蛋白-卡拉膠糖基化改性及其價(jià)接枝物乳化性能研究[D]. 南昌:南昌大學(xué),2011:13-14.

[14]Sun W W,Yu S J,Zeng X A,et al. Properties of whey protein isolate-dextran conjugate prepared using pulsed electric field[J]. Food Research International,2011,44(4):1052-1058.

[15]華靜嫻. 米蛋白-葡聚糖微波加熱接枝耦聯(lián)反應(yīng)的研究[D]. 無錫:江南大學(xué),2008:18-25.

[16]張智剛,聶小華,王寧,等. 微波場中米蛋白-葡聚糖接枝反應(yīng)的工藝研究[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,1(8):1019-1022.

[17]李超,程云輝,黃強(qiáng),等. 微波場中大米蛋白-糊精接枝反應(yīng)的工藝研究[J]. 食品工業(yè)科技,2012,33(3):263-267.

[18]Ajandouz E,Desseaux V,Tazi S,et al. Effects of temperature and pH on the kinetics of caramelisation,protein cross-linking and Maillard reactions in aqueous model systems[J]. Food Chemistry,2008,107(3):1244-1252.

[19]趙磊,趙磊,王旋,等. 大豆分離蛋白-多糖美拉德反應(yīng)共聚物的制備及性能研究[J]. 食品科技,2015(8):256-261.

[20]管軍軍,裘愛泳,劉曉亞,等. 微波輻射大豆分離蛋白-糖接枝反應(yīng)條件的研究[J]. 食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào),2005,24(5):16-20.

[21]Ta N G N L,G Kmen V. Effect of alkalization on the Maillard reaction products formed in cocoa during roasting[J]. Food Research International,2016,89,Part 2:930-936.

[22]Abdelhedi O,Mora L,Jemil I,et al. Effect of ultrasound pretreatment and Maillard reaction on structure and antioxidant properties of ultrafiltrated smooth-hound viscera proteins-sucrose conjugates[J]. Food Chemistry,2017,230:507-515.

[23]Yang S,Lee S,Pyo M C,et al. Improved physicochemical properties and hepatic protection of Maillard reaction products derived from fish protein hydrolysates and ribose[J]. Food Chemistry,2017,221:1979-1988.

[24]Spotti M J,Martinez M J,Pilosof A M R,et al. Influence of Maillard conjugation on structural characteristics and rheological properties of whey protein/dextran systems[J]. Food Hydrocolloids,2014,39:223-230.

[25]Evans M,Ratcliffe I,Williams P A. Emulsion stabilisation using polysaccharide-protein complexes[J]. Current Opinion in Colloid & Interface Science,2013,18(4):272-282.

[26]Semenova M. Protein-polysaccharide associative interactions in the design of tailor-made colloidal particles[J]. Current Opinion in Colloid & Interface Science,2017,28:15-21.