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    基于模糊數(shù)學(xué)評價的植物基復(fù)合谷物酸奶的發(fā)酵工藝研究

    2023-12-07 15:31:32周志橋鄭驍陽劉金洋晏永球于有強王文鑫劉士偉馬喜山丁振江段盛林
    農(nóng)產(chǎn)品加工 2023年22期
    關(guān)鍵詞:發(fā)酵劑酸度酸奶

    周志橋,鄭驍陽,劉金洋,晏永球,王 俊,于有強,王文鑫,劉士偉,苑 鵬,柳 嘉,馬喜山,丁振江,*段盛林

    (1.中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院有限公司,北京 100015;2.功能主食創(chuàng)新與慢病營養(yǎng)干預(yù)北京市重點實驗室,浙江 寧波 315000;3.寧波御坊堂生物科技有限公司,浙江 寧波 315000)

    近年來,保護環(huán)境和堅持生態(tài)可持續(xù)發(fā)展已經(jīng)成為全人類的重大共識[1],發(fā)展植物蛋白食品可以顯著減少資源的消耗與氣體的排放[2]。越來越多的科學(xué)研究表明,如果在飲食中攝入更多的植物蛋白類食品,如大豆、豌豆等,與飲食相關(guān)的死亡率最高可降低5%~7%[3]。有關(guān)研究指出,植物基蛋白能顯著降低血脂和LDL(Low density ipoprotein,低密度脂蛋白) 水平[4]。植物性原料中的可溶性膳食纖維可輔助調(diào)節(jié)人體血糖和脂質(zhì)代謝,維護腸道菌群平衡[5]。植物性食品原料中含有的異黃酮具有降血糖和保護心血管作用[6],且異黃酮對乳腺癌、結(jié)腸癌等常見癌癥也有較好的抗癌作用;生物活性物質(zhì)皂苷具有明顯的降壓作用;亞精胺則能保護由年齡增長引起的記憶損害,具有預(yù)防老年癡呆的重要作用[7]。因此,隨著現(xiàn)如今人們對健康生活關(guān)注度日益增長的社會風(fēng)向逐漸盛行,越來越多民眾開始主動選擇更多的植物基食物來構(gòu)建一日食譜。

    酸奶作為一種被廣大消費者接受且老少皆宜的產(chǎn)品,市場占有率居高不下[8]。常規(guī)酸奶均是以牛奶等動物奶源進行發(fā)酵制得,市場上僅存在一些小眾的冷鏈植物基酸奶[9],成本不僅遠(yuǎn)高于動物酸奶[10],口感也較差。因此,純植物基發(fā)酵且口感可被廣大消費者接受的常溫酸奶的研究成為一大熱點,也是各大企業(yè)角逐的產(chǎn)品方向[11]。

    以含有大豆[12]、大米、紫蘇籽仁和火麻仁等組成的復(fù)合谷物蛋白粉為發(fā)酵底物[13],植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌[14]組成的復(fù)合菌為發(fā)酵劑進行發(fā)酵[15]。以產(chǎn)品外觀、適口性和滋味作為評價指標(biāo)建立模糊數(shù)學(xué)模型[16],通過正交試驗設(shè)計[17]優(yōu)化產(chǎn)品發(fā)酵時的料液比、發(fā)酵劑用量和發(fā)酵時間的最佳工藝參數(shù)[18]。制得的發(fā)酵液通過后續(xù)調(diào)配和加工工藝處理制備出風(fēng)味較好、產(chǎn)品穩(wěn)定的常溫植物基酸奶產(chǎn)品。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    1.1.1 材料與試劑

    大豆、稻米,市售;紫蘇籽仁,文登金剛食品有限公司提供;火麻仁,遼寧俏牌生物科技有限公司提供;發(fā)酵劑(嗜酸乳桿菌與植物乳桿菌配比為1∶1),潤盈生物工程(上海) 有限公司提供;氫氧化鈉(分析純),現(xiàn)代東方(北京) 科技發(fā)展有限公司提供。

    1.1.2 儀器設(shè)備

    膠體磨,沈陽航天新光超微粉碎機械有限公司產(chǎn)品;HOMOLAB-2 型高壓均質(zhì)機,意大利FBF 公司產(chǎn)品;PL203 型分析天平,賽多利斯科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;FE20 型pH 計,梅特勒儀器上海有限公司產(chǎn)品;DL-CJ2NDI 型超凈工作臺,北京松聯(lián)哈爾儀器制造有限公司產(chǎn)品;SPX-150B 型生化培養(yǎng)箱,天津泰斯特儀器有限公司產(chǎn)品;FT74 型超高溫瞬時殺菌機,上海雅程儀器設(shè)備有限公司產(chǎn)品。

    1.2 試驗方法

    1.2.1 植物基復(fù)合谷物酸奶的制備工藝

    工藝流程:原料磨漿→一次均質(zhì)→一次殺菌→接菌發(fā)酵→終止發(fā)酵→二次均質(zhì)→二次殺菌→無菌灌裝→成品。

    操作要點:將大豆、大米、紫蘇籽仁和火麻仁等原料磨漿,于20~30 MPa 條件下,均質(zhì)1 遍,然后于溫度95 ℃,時間10 min 條件進行殺菌,將料液冷卻至發(fā)酵溫度,再進行接菌發(fā)酵。發(fā)酵時間結(jié)束后終止發(fā)酵,在破乳后進行二次均質(zhì)工藝(20~30 MPa 均質(zhì)2 遍)。均質(zhì)后料液進行UHT 超高溫瞬時殺菌[24],殺菌條件為溫度110 ℃,時間15 s,無菌灌裝后得成品。

    1.2.2 植物基復(fù)合谷物酸奶的酸度的測定

    酸度測試:根據(jù)GB 5009.239—2016《食品酸度的測定》中的酚酞指示劑法。

    1.2.3 模糊數(shù)學(xué)感官評價方法建立

    (1) 評價指標(biāo)集的確定。參考《GB 19302—2010 發(fā)酵乳》中發(fā)酵乳的感官要求內(nèi)容,以復(fù)合谷物酸奶的外觀(包括色澤和組織狀態(tài)) 和適口性(包括酸度、滋味和氣味) 作為評價指標(biāo)[20]。

    A1=外觀:色澤A11,組織狀態(tài)A12;

    A2=適口性:酸度A21,黏稠度A22;

    A3=滋味:香氣A31,有無異味A32。

    (2) 評價指標(biāo)集權(quán)重系數(shù)的計算。采用問卷調(diào)查方法完成權(quán)重系數(shù)計算[21]。主要是依據(jù)上文確定的評價指標(biāo)集,對調(diào)查結(jié)果按照重要程度進行排序。將各指標(biāo)給予相同重要程度的人數(shù)除以全部人數(shù),即可得到某一指標(biāo)的權(quán)重Xi。各項權(quán)重計算公式如下。

    式中:Xi——為第i 個指標(biāo)的權(quán)重;

    aj——為指標(biāo)賦值;

    nij——為選擇第i 個指標(biāo)的重要程度為j 的人數(shù);

    N——為參加的總?cè)藬?shù)。

    (3) 評價對象集的確定。將需要進行評價的產(chǎn)品集合定義為Y,Yi即為評價對象集,則通過正交試驗設(shè)計(或響應(yīng)面試驗設(shè)計,響應(yīng)面試驗設(shè)計數(shù)據(jù)量會比較大,預(yù)計27 個) 產(chǎn)生的測評產(chǎn)品Yi={Y1,Y2,Y3,Y4,Y5,Y6,Y7,Y8,Y9}。Yj代表對9 種樣品的綜合評價,其中j=1,2,3,4,5,6,7,8,9。

    (4) 評語集的確定。設(shè)定一個特定分值區(qū)域,并與評價集相對應(yīng),可將最終結(jié)果量化為具體評分[22]。首先設(shè)定評語集為:V={V1,V2,V3,V4};V1=很好,V2=良好,V3=一般,V4=較差。根據(jù)清晰質(zhì)量等級邊界模糊化法將分值區(qū)域清晰化,即取區(qū)域的中心值得到對應(yīng)的分值。

    評語集與分值區(qū)域?qū)?yīng)表見表1。

    表1 評語集與分值區(qū)域?qū)?yīng)表/分

    (5) 模糊矩陣的形成。評價人員分別對由正交設(shè)計試驗所制得的樣品,依照上述評價指標(biāo)集內(nèi)容的各個角度進行品評。將結(jié)果匯總于酸奶品質(zhì)評價統(tǒng)計表中,相同評語的人數(shù)除以總?cè)藬?shù)得到隸屬度,形成評價矩陣Rij。

    要求評價人員必須于品評前1 h 斷食,只可喝水,不得吸煙,確保品評期間具有正常的生理狀態(tài)。在進行感官品評前,評價人員不可使用化妝品或其他有明顯氣味的用品。每次品評包括4 份樣品(包含1 份參照樣品和3 份待品評樣品)。每位評價人員每天最多品嘗2 次,且時間需安排在飯前1 h 或飯后2 h 內(nèi)進行。其中,參照樣品為事先選出3 份試驗樣品,經(jīng)過一系列加工制備后,由評價人員進行3 次品評,選出各項評價指標(biāo)正常,綜合評分在80 分左右的樣品1 份,作為每次品嘗的參照樣品。

    (6) 模糊評判方法。依據(jù)模糊變換原理:Y=X○R 其中,Y 為上述的評價對象集,是對樣品的綜合評價集;X 為權(quán)重集;R 為評價矩陣;○為廣域模糊算子。

    式中:Yi=(X1×r1i)∨或∧(X2×r2i)?(Xn×rni)。這里“∨”表示兩者相比較后取較大者,“∧”表示兩者相比較較小值,根據(jù)酸奶感官評價的各指標(biāo)之間的關(guān)系,一級和二級因素的模糊變換根據(jù)最大運算法則選取“∨”。最后,根據(jù)評語集與分值區(qū)域相對應(yīng)表中的分值,將綜合品評結(jié)果轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的分值,作為結(jié)果帶入正交試驗[23]。

    1.2.4 單因素試驗

    將每個感官指標(biāo)評分均按照表1 中的分值區(qū)域進行打分,以感官評分作為因變量,酸度變化作為輔助參考因素,分別考查不同料液比(1∶2,1∶3,1∶4,1∶5,1∶6,1∶7),發(fā)酵劑不同添加量(0.01%,0.03%,0.05%,0.07%,0.09%,0.11%)、不同發(fā)酵時間(4,5,6,7,8,9 h) 和不同發(fā)酵溫度(36,38,40,42,44,46 ℃)。

    1.2.5 正交試驗設(shè)計

    通過單因素試驗結(jié)果,考慮發(fā)酵溫度的控制在實際生產(chǎn)中也有所浮動和產(chǎn)品落地加工的經(jīng)濟性,選取料液比、發(fā)酵劑添加量和發(fā)酵時間做自變量,以感官評分為因變量,進一步做三因素三水平的正交試驗設(shè)計,對酸奶發(fā)酵工藝參數(shù)進行優(yōu)化。

    正交試驗因素與水平設(shè)計見表2。

    表2 正交試驗因素與水平設(shè)計

    1.2.6 數(shù)據(jù)分析方法

    試驗樣品均需重復(fù)3 次,結(jié)果以(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差) 形式表示。試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 26.0 和Origin 8.6 進行統(tǒng)計分析、作圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 模糊感官評價方法制定

    2.1.1 感官評價的評價因素及各項權(quán)重

    通過統(tǒng)計分析調(diào)查的數(shù)據(jù),確定植物基復(fù)合谷物酸奶感官評價的評價因素及各項權(quán)重。

    品評標(biāo)準(zhǔn)及權(quán)重計算結(jié)果見表3。

    表3 品評標(biāo)準(zhǔn)及權(quán)重計算結(jié)果

    2.1.2 模糊評判隸屬度的確定

    通過統(tǒng)計9 名專業(yè)評價人員對9 個正交試驗樣品的評價結(jié)果,得出評語隸屬度,其中1 號樣品隸屬度結(jié)果如下(表4)。其余8 個樣品依照同樣方式進行統(tǒng)計。

    表4 1 號樣品各項指標(biāo)的隸屬度

    1 號樣品各項指標(biāo)的隸屬度見表4。

    2.1.3 評價結(jié)果計算

    對于指標(biāo)“外觀”A11,按模糊變換法則,通過模糊變換得出其評價結(jié)果為:

    歸一化的,

    同理可以計算出,

    進而得到樣品1 的評價隸屬度矩陣RA:

    根據(jù)最小計算法則,采用“∧”運算獲得1 號樣品的評價集:

    歸一化的:

    根據(jù)表4,得出1 號樣品得分=95×0.219+85×0.555+70×0.227+30×0.000=83.79(分)。同理,計算其他8 個樣品得分。

    9 個試驗樣品評分匯總見表5。

    表5 9 個試驗樣品評分匯總

    2.2 單因素試驗結(jié)果

    2.2.1 不同料液比對酸奶感官和酸度的影響

    不同料液比對酸奶感官和酸度的影響見圖1。

    圖1 不同料液比對酸奶感官和酸度的影響

    由圖1 可知,隨著原料調(diào)配時料液比的增加,感官評分先增加后降低,前段增加速度明顯快于后段下降速度。分析可能是料液比太低時,發(fā)酵菌增長較慢的原因,而料液比過高時營養(yǎng)密度變低,發(fā)酵菌的增長同樣受限[24]。通過酸度變化曲線可以看出,在料液比為1∶4,酸度為86.47 °T,說明乳酸菌增長最快,產(chǎn)酸也最豐富,產(chǎn)品更加符合消費者的風(fēng)味嗜好。因此,在單因素試驗中得出1∶4 的料液比為酸奶的最佳條件,平均得分達(dá)到89.33 分。

    2.2.2 發(fā)酵劑不同添加量對酸奶感官、酸度的影響

    發(fā)酵劑不同添加量對酸奶感官、酸度的影響見圖2。

    圖2 發(fā)酵劑不同添加量對酸奶感官、酸度的影響

    由圖2 可知,酸奶的感官評分呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢,前段上升趨勢較為緩慢,后段下降趨勢較快。分析可能是隨著發(fā)酵劑添加量增加發(fā)酵效果越好,如果添加過高的發(fā)酵劑,會導(dǎo)致前期快速產(chǎn)酸,使得中后期菌種之間產(chǎn)生拮抗作用,影響發(fā)酵效果。結(jié)合酸度變化曲線可以判斷出發(fā)酵劑添加量過高酸度會變高,進而影響口感[25]。一定范圍內(nèi),隨著發(fā)酵劑添加量增加會增加發(fā)酵效率,但是綜合考慮產(chǎn)業(yè)化成本和發(fā)酵過程的易控制程度,確定發(fā)酵劑添加量為0.05%時,平均評分最高為89.33 分,酸度為87.08 °T。

    2.2.3 不同發(fā)酵時間對酸奶感官、酸度的影響

    不同發(fā)酵時間對酸奶感官、酸度的影響見圖3。

    圖3 不同發(fā)酵時間對酸奶感官、酸度的影響

    由圖3 可知,隨著發(fā)酵時間的延長,酸奶的感官評分先增加后下降,酸度變化一直處于上升趨勢。初步判斷是隨著發(fā)酵時間的增加,有機酸產(chǎn)生的量不斷得到積累,后段得分不斷下降,由酸度曲線可以看出酸度水平較高,影響到了消費者的適口性。綜合考慮,確定最佳發(fā)酵時間為6 h,這時平均得分為89.67 分,酸度為86.49 °T。

    2.2.4 不同發(fā)酵溫度對酸奶感官、酸度的影響

    不同發(fā)酵溫度對酸奶感官、酸度的影響見圖4。

    圖4 不同發(fā)酵溫度對酸奶感官、酸度的影響

    由圖4 可知,隨著發(fā)酵溫度的增加,感官評分越來越高,增加到42 ℃后評分呈現(xiàn)下降趨勢,但是酸度變化一直不大,需要進一步進行有機酸組成分析。初步判斷原因是隨著發(fā)酵溫度的增加,發(fā)酵劑的活力不斷得到釋放,發(fā)酵效率不斷增加,但是過高的溫度又會抑制發(fā)酵劑的活力,影響發(fā)酵效率。因此,確定酸奶的最佳發(fā)酵溫度為42 ℃,此時平均得分為89.00 分,酸度為87.29 °T。

    2.3 正交試驗結(jié)果

    正交試驗結(jié)果見表6,正交試驗方差分析見表7。

    表6 正交試驗結(jié)果

    通過計算R 值,可知將感官評分作為正交試驗的考查指標(biāo)時,復(fù)合發(fā)酵劑添加量為0.06%的試驗組感官評分較高,由表6 可知,各因素對植物基復(fù)合谷物酸奶感官評分的影響順序為RB>RA>RC,即發(fā)酵劑添加量>料液比>發(fā)酵時間。結(jié)合方差分析綜合研究發(fā)現(xiàn),發(fā)酵劑添加量具有顯著影響(p<0.05),最佳發(fā)酵工藝方案為料液比1∶4,發(fā)酵劑添加量0.06%,于42 ℃條件下發(fā)酵6.5 h。

    3 結(jié)論

    通過構(gòu)建模糊數(shù)學(xué)評價模型,利用單因素試驗和正交設(shè)計試驗得出植物基復(fù)合谷物酸奶的制作時的料液比、發(fā)酵劑用量和發(fā)酵時間的最佳工藝參數(shù)分別是料液比1∶4,發(fā)酵劑添加量0.06%,于42 ℃條件下發(fā)酵6.5 h 時,根據(jù)該評價模型得到的最終評分達(dá)91.02 分。

    該研究僅從實驗室樣品進行的相關(guān)感官評價,未考查酸奶保質(zhì)期和保質(zhì)期內(nèi)的酸奶感官變化。研究涉及的植物基復(fù)合谷物酸奶中的發(fā)酵底物是由大豆、大米、紫蘇籽仁和火麻仁等組成。植物蛋白在酸性條件下不易形成穩(wěn)定體系,尤其是火麻仁蛋白更是在殺菌受熱過程中極易不穩(wěn)定,后續(xù)在常溫植物基酸奶的穩(wěn)定體系構(gòu)建上還需要開展系列研究。以期通過后續(xù)調(diào)配和加工工藝處理制備出風(fēng)味較好、產(chǎn)品穩(wěn)定的常溫植物基酸奶產(chǎn)品。

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