粉防己堿的藥理作用研究進(jìn)展

朱洪劍，辛國松,2，王聰然，宋尚純，宋明昊

(1.哈爾濱商業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)與環(huán)境科學(xué)研究中心，黑龍江 哈爾濱 150076；2.國家教育部抗腫瘤天然藥物工程研究中心，黑龍江 哈爾濱 150076)

粉防己堿是從防己科(Menispermaceae)千金藤屬(Stephania)植物粉防己(StephaniatetrandraSMoore)根中提取出主要成分，是雙芐基異喹啉類化合物之一，其大約占粉防己根的1%。經(jīng)臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其具有調(diào)節(jié)壓、抗風(fēng)濕及鎮(zhèn)痛等作用[1]。近年來，研究發(fā)現(xiàn)粉防己堿具有抗腫瘤、抗多藥耐藥、防治心血管系統(tǒng)疾病、抗菌、防治消化系統(tǒng)疾病、抗炎的作用以及治療燙傷、眼科疾病等作用。本文通過查閱近年來與粉防己堿藥理作用相關(guān)的國內(nèi)外研究文獻(xiàn)，對粉防己堿的藥理作用進(jìn)行了整理與綜述，希望能為后續(xù)粉防己堿在新藥研發(fā)以及臨床應(yīng)用等領(lǐng)域提供充足的理論依據(jù)。

1 抗腫瘤作用

有報(bào)道發(fā)現(xiàn)粉防己堿對人肝癌7402細(xì)胞、人乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人宮頸癌HeLa細(xì)胞以及人胃癌BGC-823細(xì)胞等具有明顯的抑制作用，且呈時(shí)間濃度依賴關(guān)系[2]。Shen等[1]研究表明，粉防己堿抑制相關(guān)NF-κB的DNA活性是通過對阿霉素誘導(dǎo)的MDR1-mRNA和相關(guān)蛋白的合成來使其失去活性。鄧文英[3]通過四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法、集落形成實(shí)驗(yàn)觀察粉防己堿對人肝癌7402細(xì)胞有增殖抑制作用。隨著粉防己堿的劑量逐漸增加，其形成的集落也明顯增強(qiáng)，與對照組相比差異均有顯著性意義(P<0.01)，10%的抑制濃度(IC10)和50%的抑制濃度(IC50)分別為1.8 μg/mL和8 μg/mL。粉防己堿對人膀胱癌5637和T24細(xì)胞系具有明顯的抑制作用，大量的粉防己堿可以促進(jìn) caspase-9，caspase-8，caspase-3的活化以及PARP裂解，使線粒體膜電位降低的同時(shí)從線粒體內(nèi)向包漿釋放細(xì)胞色素C。

抗多藥耐藥:黃圓等[4]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Bads 200細(xì)胞在粉防己堿作用下有明顯的增殖抑制作用，并且抑制作用隨時(shí)間增加而增強(qiáng)。粉防已堿處理后的Bads 200細(xì)胞株主要被阻滯于G0/G1期，且凋亡率明顯高于正常生長的細(xì)胞。粉防己堿對腫瘤細(xì)胞有多種抑制作用方式，如直接增殖抑制作用、影響細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路、抗腫瘤血管生成等，為抗腫瘤藥物的研發(fā)提供了有效依據(jù)。

2 防治心血管系統(tǒng)疾病作用

2.1 抗心肌損傷作用

在心肌損傷過程中有三個(gè)要素，即自由基損傷、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡。粉防己堿可以分別從這三個(gè)方面來減輕心肌損傷，從而保護(hù)心肌細(xì)胞。張萌等[5]為了研究粉防己堿對心肌細(xì)胞的保護(hù)作用，通過使用異丙腎上腺素(ISO)建立大鼠心肌損傷模型來進(jìn)行研究。研究發(fā)現(xiàn)，粉防己堿給藥組可明顯降低小鼠的死亡率，能明顯改變受損細(xì)胞的狀態(tài)，這說明粉防己堿具有保護(hù)心肌的功能。同時(shí)發(fā)現(xiàn)粉防己堿能清除大鼠體內(nèi)自由基，增強(qiáng)大鼠抗氧化能力，從而減輕機(jī)體的氧化應(yīng)激損傷。

2.2 抗脂質(zhì)過氧化

脂質(zhì)過氧化作用是在缺血-再灌注時(shí)自由基生成增多的同時(shí)產(chǎn)生的，此時(shí)脂質(zhì)過氧化作用會(huì)增強(qiáng)，改變膜受體、膜蛋白酶，以及離子通道的微環(huán)境。陳俊等[6]研究粉防己堿(Tet)對過氧化氫(H2O2)致新西蘭白兔陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用，體外培養(yǎng)新西蘭白兔陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞，隨機(jī)分為3組，對照組、H2O2組和粉防己堿+H2O2組。通過四甲基偶氮唑鹽還原實(shí)驗(yàn)來觀察兔陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞的存活率，將粉防己堿作用于H2O2誘導(dǎo)損傷的細(xì)胞；再應(yīng)用化學(xué)比色法觀察乳酸脫氫酶 (LDH)的釋放、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的變化。其結(jié)果顯示：培養(yǎng)細(xì)胞4 h后，細(xì)胞存活率降低，LDH釋放增加，MDA 含量增加，SOD活性降低。粉防己堿治療效果與治療量成正比關(guān)系，高濃度可以顯著提高細(xì)胞的生存率，由此可以看出粉防己堿對H2O2誘導(dǎo)損傷的新西蘭白兔陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞的損傷有保護(hù)作用，可能與其增強(qiáng)抗氧化功能、減少脂質(zhì)過氧化所造成的細(xì)胞損傷有關(guān)。

2.3 抗心率失常

慢性心律失常是心肌肥厚、心肌衰竭、心肌梗死、心肌缺血等患者的最終死因之一。細(xì)胞電生理研究表明，粉防己堿對心肌動(dòng)作電位O相上升幅度(APA)及速率(Vmax)無明顯影響，但可以延長動(dòng)作電位時(shí)程(APD)和有效不應(yīng)期(EPR)，這說明粉防己堿對Na+通道無影響，可能通過延長K+外流的時(shí)間使3相復(fù)極減慢所致動(dòng)作電位時(shí)程(APD)延長有效不應(yīng)期(EPR)，而對Na+內(nèi)流的抑制作用主要是抑制細(xì)胞膜上鈉離子通道。粉防己堿能有效抑制心室細(xì)胞的T型和L型鈣通道，從而發(fā)揮抗心律失常作用。有學(xué)者選用家兔為實(shí)驗(yàn)對象[7]，記錄家兔的右心室內(nèi)膜單向動(dòng)作電位(MAP)，觀察粉防己堿對室性心律失常的作用。研究表明實(shí)驗(yàn)組和對照組均可誘發(fā)早期后除極EAD，但與對照組的EAD幅度相比實(shí)驗(yàn)組更大，表明粉防己堿可能通過阻滯Ca2+慢通道、減少內(nèi)向電流從而發(fā)揮抗心律失常作用。

2.4 對血管平滑肌的作用

血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)主要有收縮功能和合成與分泌細(xì)胞外基質(zhì)的功能，是血管壁的主要細(xì)胞組成部分，在血管內(nèi)膜的增生和血管的重塑中起著重要作用。成熟的VSMC是一種高度特異性的細(xì)胞，其功能以收縮舒張為主，會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)，但速度很慢。因此，在正常血管壁外側(cè)基質(zhì)的成分含量和成分指標(biāo)會(huì)相對保持一個(gè)恒定狀態(tài)。如果機(jī)體處于高血壓狀態(tài)，VSMC的功能就會(huì)發(fā)生改變，由最初的收縮表型變成合成表型，會(huì)增強(qiáng)其收縮和合成功能，最終使細(xì)胞外基質(zhì)含量增加，成分發(fā)生改變，VSMC的異常增殖遷移和表型改變是糖尿病(diabetes melitus，DM)動(dòng)脈粥樣硬化的重要環(huán)節(jié)。劉明華等[8]通過培養(yǎng)和建立糖尿病大鼠血管平滑肌細(xì)胞，觀察粉防己堿對糖尿病大鼠的VSMC增殖情況和NF-κB核運(yùn)轉(zhuǎn)的影響。通過細(xì)胞計(jì)數(shù)盒(CCK-8)測定粉防己堿對糖尿病及正常VSMC的抑制作用，利用免疫熒光-激光共聚焦顯微鏡檢測粉防己堿對糖尿病VSMC中的NF-κB核的轉(zhuǎn)運(yùn)情況的影響。結(jié)果顯示，粉防己堿可以不同程度的抑制糖尿病及正常VSMC的增殖，其IC50分別為(11.35±1.24)和(28.01±4.35)μmol/L；不同濃度的粉防己堿作用于糖尿病VSMC 24 h后會(huì)顯著抑制NF-κB的激活，從而減少核運(yùn)轉(zhuǎn)。粉防己堿還可以部分逆轉(zhuǎn)腎血管性高血壓所導(dǎo)致的大鼠左心室肥厚，使得其心肌膠原蛋白含量降低，導(dǎo)致肌球蛋白ATP酶的活性升高。近年來的報(bào)道發(fā)現(xiàn)[9]，粉防己堿可以顯著降低血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞體積，提高蛋白合成速率，使心臟血流動(dòng)力學(xué)發(fā)生明顯的改善，較突出的是心舒張功能，使鈣通道的受體密度降低，血管的異常反應(yīng)性改變，抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖。

2.5 調(diào)節(jié)高血壓作用

對電壓依賴性Ca2+離子通道中L型離子通道的阻滯是粉防己堿舒張血管、減緩高血壓癥狀的主要機(jī)制。還有其它的機(jī)制是由于其和血管平滑肌細(xì)胞膜上的α-腎上腺素產(chǎn)生了拮抗作用。由于L型鈣離子通道的細(xì)胞變少，粉防己堿就通過其他方式抑制鈣離子的進(jìn)入。在心肌細(xì)胞方面，粉防己堿抑制了L型離子通道和T型離子通道。還有研究表明[10]，粉防己堿對腎性高血壓也有一定作用，(內(nèi)皮素-1)ET-1是目前收縮血管作用最強(qiáng)的一種物質(zhì)。機(jī)體中的ET-1和NO相互制約，二者之間的動(dòng)態(tài)平衡對維持血壓穩(wěn)定、調(diào)節(jié)血管張力和血管平滑肌的功能起著重要的作用。朱祖成[11]采用兩腎一夾(2K1C)法建立大鼠腎血管性高血壓病模型，用隨機(jī)分組法將50只手術(shù)2 h后的尾動(dòng)脈血壓升高超過130 mm Hg的大鼠隨機(jī)分為3組，每組10只，分別為空白對照組、高血壓模型組、粉防己堿高劑量治療組、粉防己堿低劑量治療組及氯沙坦組。結(jié)果顯示，在給藥治療后的第4周，粉防己堿組的高、低劑量治療組都能顯著降低腎血管性高血壓大鼠的尾動(dòng)脈血壓。

2.6 抗心肌肥大

大部分心血管疾病可造成心肌細(xì)胞的肥大(cardiomyocyte hypertrophy)。心肌細(xì)胞再進(jìn)一步肥大，使心室的適應(yīng)性降低，心肌就會(huì)達(dá)到進(jìn)一步的缺血缺氧狀態(tài)，導(dǎo)致心肌細(xì)胞間的相互傳遞和生產(chǎn)受到阻礙，最終會(huì)引起一些心血管疾病。Shen DF[12]采用超聲心動(dòng)技術(shù)，觀察粉防己堿對心肌肥大細(xì)胞的作用并闡述其機(jī)制。采用灌胃法每天給藥3次，50 mg/(kg·d)。給藥1周后分別測量心臟重量和體質(zhì)量的比值，肺重量和體質(zhì)量的比值，心臟擴(kuò)張指數(shù)和心肌肥大的細(xì)胞標(biāo)記，最終實(shí)驗(yàn)表明，粉防己堿可以抑制炎性反應(yīng)和心肌纖維化的產(chǎn)生，其機(jī)制是阻止活性氧的產(chǎn)生以及激活ERK1/2-依賴的NF-κB和T細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子。由此可以得出結(jié)論，本實(shí)驗(yàn)說明粉防己堿是通過抑制ERK1/2通路來對抗心肌肥大從而改善心臟功能，ERK1/2通路是活性氧依賴性通路。

3 抗菌作用

3.1 對白色念球菌的作用

白色念球菌作為人體最常見，也是人體最主要的致病菌常寄居在人的皮膚、口腔等黏膜，會(huì)引起皮膚黏膜念球菌疾病。這種病在免疫力低下的人身上發(fā)病率最高,而且易出現(xiàn)多藥耐藥。近年，對如何防治這種疾病做了大量研究，發(fā)現(xiàn)哇類抗真菌藥可以有效治療此類疾病，粉防己堿可以抑制這種多藥耐藥。王凱麗[13]構(gòu)建小鼠念球菌陰道炎模型，將造模后的小鼠隨機(jī)分為10個(gè)組，分為漢防己甲素和氟康哇的高、低劑量組，同時(shí)設(shè)置空白給藥組作為對照組，接種后第2、6、11天分別取小鼠陰道組織進(jìn)行病理學(xué)檢查。參照CLSI推薦的M27-A抗真菌藥物敏感性實(shí)驗(yàn)方案，測定粉防己堿對白色念球菌酵母相的最大非細(xì)胞毒性劑量，把這個(gè)作為其聯(lián)合酮康唑時(shí)的劑量，比較對照組與粉防己堿聯(lián)用組對白色念球酵母相的MIC。接種11天后，發(fā)現(xiàn)粉防己堿聯(lián)用組載菌量明顯減少。進(jìn)一步證實(shí)了粉防己堿對酮康唑的抗白色念球菌活性有增效作用。結(jié)論表明粉防己堿具有抗白色念球菌的作用。石建萍等使用雌性小鼠隨機(jī)分為對照組和感染組，對照組的條件是給予生理鹽水，感染組條件是在尾靜脈注射白色念球菌懸液使其感染病毒，注射3 h后經(jīng)腹腔注射粉防己堿，分別觀察小鼠生存的時(shí)間、腎臟的載菌量和腎臟組織病理學(xué)檢查評估抗真菌的治療效果。在45 mg/L劑量以下，經(jīng)粉防己堿注射的給藥組與生理鹽水注射的對照組相比，存活時(shí)間、腎臟載菌量、真菌因子無明顯差異(P>0.05)。

3.2 對銅綠假單胞菌的作用

現(xiàn)在世界上各大醫(yī)院的臨床治療中，銅綠假單胞菌(PAE)或者由PAE所引起的感染疾病是非常難治療的一種疾病。國內(nèi)外學(xué)者對銅綠假單胞菌耐藥機(jī)制的研究，尤其是對喹諾酮類的耐藥機(jī)制研究最多，耐藥作用最為明顯的應(yīng)屬主動(dòng)外排系統(tǒng)[14]。黃勛等通過M-H 瓊脂稀釋法把經(jīng)過臨床分離的銅綠假單胞菌篩選出來，同時(shí)測定銅綠假單胞菌經(jīng)過不同濃度的粉防己堿作用不同時(shí)間后對氧氟沙星的最低抑菌濃度(MIC)的改變。通過這種方法來測定粉防己堿能否影響銅綠假單胞菌對氧氟沙星的敏感性。結(jié)果顯示，經(jīng)過100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、12.5 μg/mL、6.25 μg/mL等5個(gè)不同濃度的粉防己堿對銅綠假單胞耐藥菌分別作用60 min和180 min后，不同的細(xì)菌可將氧氟沙星的MIC降低為原來的23～27倍，結(jié)果顯示粉防己堿可以作為對銅綠假單胞菌抑制的一種藥物。

3.3 對金黃色葡萄球菌的作用

金黃色葡萄球菌是人體內(nèi)常見的致病菌[15]，主要存在于人體的皮膚或者與外界相通的腔道中[16]，可通過食物等方式感染人體，可導(dǎo)致很多常見的疾病[17-18]，在自然界中也廣泛存在[19]。使用粉防己堿(抑菌濃度是250 μg/kg)和去污劑(EDTA，Tris，TX)聯(lián)用可以使菌株膜的滲透性增強(qiáng)，通過24 h的孵育，會(huì)使金黃色葡萄球菌的菌活性和OD的值降低96%。經(jīng)研究粉防己堿主要作用于細(xì)胞壁上的肽多糖，肽多糖是細(xì)胞壁上的主要成分之一，這可能與β-內(nèi)酰胺酶的協(xié)同作用有關(guān)系，粉防己堿使細(xì)胞壁部分組織失去作用，造成細(xì)胞壁功能缺失從而達(dá)到對金黃色葡萄球菌的作用[20]。有學(xué)者從粉防己堿具有耐藥性的17種耐甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株中選擇了3種進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)經(jīng)粉防己堿作用后，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株的生長受到了明顯的抑制。隨后又分為兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組，多數(shù)耐藥的流出泵酶作用物溴化乙錠和粉防己堿+溴化乙錠共同作用組，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，粉防己堿與溴化乙錠共同作用組可以更有效的抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的生長[21]。

4 防治消化系統(tǒng)疾病作用

4.1 抗肝纖維化作用

肝纖維化是由很多種慢性肝病發(fā)展而成的肝類疾病，最終會(huì)演變成為肝硬化等嚴(yán)重的肝類疾病[22-25]。這些引起疾病的因素包括酒精、藥物、毒物、寄生蟲等，現(xiàn)發(fā)現(xiàn)粉防己堿對肝纖維化的發(fā)生有抑制作用[26-27]。吳國棟[28]認(rèn)為，粉防己堿具有抗肝纖維化作用的原因是其可以使纖維母細(xì)胞發(fā)生改變。粉防己堿還能降低肝纖維化模型組動(dòng)物的Ⅰ型膠原含量，而無法改變Ⅲ型膠原含量，這說明粉防己堿可以減慢肝纖維化的發(fā)展。張欣[29]使用牛血清蛋白對小鼠致肝纖維化，并將90只SD大鼠隨機(jī)分為6個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組15只。即正常組、模型組、秋水仙堿陽性對照組(0.1 mg/kg)、粉防己堿高劑量組(8 mg/kg)、粉防己堿中劑量組(4 mg/kg)和粉防己堿低劑量組(2 mg/kg)。對小鼠灌胃給藥粉防己堿，連續(xù)給藥80 d，隨后主動(dòng)脈采血并取腎臟活體。檢測大鼠血清學(xué)指標(biāo)并觀察其肝臟病理組織學(xué)變化情況。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，粉防己堿高劑量組、中劑量組，低劑量組大鼠的血清指標(biāo)優(yōu)于模型組，壞死程度輕。所以粉防己堿對肝纖維化具有抑制作用。

4.2 對肺的保護(hù)

矽肺是一種職業(yè)病，矽肺產(chǎn)生的原因是因?yàn)殚L期吸入生產(chǎn)性粉塵所引起的，肺部纖維化或者肺部的炎癥等疾病會(huì)由于粉塵長期滯留在肺部[30]。但現(xiàn)在還缺少有效的根治方法，近年來發(fā)現(xiàn)粉防己堿可以較好緩解病情[31]。鄭艷艷等[32]取健康大鼠90只，并采用隨機(jī)分組的方法分為：粉防己堿組；陽性對照組(同期肺部吸入染塵)；陰性對照組(同期沒吸入染塵)3組，每組30只。并且在染塵后4天開始給藥，粉防己堿組給予粉防己堿灌胃，陽性對照組和陰性對照組給予純水灌胃。在治療期結(jié)束后，將大鼠處死，并且進(jìn)行大鼠病理學(xué)檢查，對大鼠整個(gè)肺部的干重和濕重進(jìn)行稱量，對羥脯氨酸進(jìn)行含量測定。結(jié)果顯示，各組大鼠體質(zhì)量都有增長(P<0.05)，但每組的變化趨勢不相同。粉防己堿組的體質(zhì)量比陽性對照組(同期肺部吸入染塵)的體質(zhì)量大(P<0.05)；并且粉防己堿組肺的干重和濕重也都比陽性對照組(同期肺部吸入染塵)低(P<0.05)。經(jīng)過染塵后的50天，粉防己堿組的羥脯氨酸含量與陰性對照組的含量相比沒有差異(P>0.05)。從粉防己堿病理學(xué)角度來說，粉防己堿組肺部病變的程度比陽性對照組低。陳林等[33]挑選矽肺病例46例并進(jìn)行治療，將其分為治療組和對照組(對照組使用常規(guī)的治療方法)，觀察肺的病變情況和肺的通氣功能等因素。結(jié)果顯示：通氣情況的差異性并沒有顯著變化，但對治療者的氣短、氣急、咳嗽、胸悶等癥狀有很大的改善。馬冬梅[34]選擇36例住院的男性矽肺病患者，隨機(jī)分為對照組和試驗(yàn)組2組，每組18例。兩組分別給予同等方法的基礎(chǔ)治療，治療加用粉防己堿治療，對照組僅用基礎(chǔ)治療。治療時(shí)間為1年。觀察兩組患者治療前后的肺功能變化、X病變、免疫球蛋白含量(IgG、IgA、IgM)。結(jié)果顯示，治療組比對照組的肺功能改變明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；X病變效果兩組無明顯變化，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；體液免疫指標(biāo)與治療前比較，治療組免疫球蛋白、補(bǔ)體明顯升高[35]。由此可見，粉防己堿可通過調(diào)節(jié)機(jī)體免疫對肺功能進(jìn)行改善，減輕矽肺癥狀。

4.3 降低門靜脈高壓

門靜脈高壓可由各種原因引起，最后會(huì)演變?yōu)楦斡不?繼而可能出現(xiàn)消化道出血[36]。王忠義等[37]通過CCL4造成大鼠肝硬化門靜脈高壓性胃病，并隨機(jī)分為2組。隨后采用粉防己堿給藥，劑量分別為15 mg/kg和30 mg/kg，連續(xù)給藥14 d。并且對丙氨酸轉(zhuǎn)氨酸(ALT)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、NO、前列環(huán)素代謝產(chǎn)物(6-keto-PGF1α)的含量進(jìn)行測量。最后測定胃黏膜下血管的面積并進(jìn)行分析和觀察。結(jié)果顯示：粉防己堿可以降低丙氨酸轉(zhuǎn)氨酸(ALT)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、NO、前列環(huán)素代謝產(chǎn)物(6-keto-PGF1α)的含量，使胃黏膜下血管的面積減少。30 mg/kg粉防己堿組治療效果最為明顯。粉防己堿對門靜脈高壓有明顯改善。

5 抗炎作用

近年來，在抗炎藥物的研究方面，天然藥物具有多作用靶點(diǎn)的特點(diǎn)[38]，吸引了很多國內(nèi)外研究者進(jìn)行研究，但學(xué)者們發(fā)現(xiàn)這些藥物的作用機(jī)制大不相同[39-40]。羅福玲等[41]采用脂多糖(LPS)RAW264.7細(xì)胞，隨后建立炎癥細(xì)胞模型。然后使用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法比較不同濃度的粉防己堿對RAW264.7細(xì)胞的增殖或抑制情況。隨后用激光共聚焦掃描顯微鏡觀察粉防己堿對細(xì)胞核因子-κB(NF-κB)核轉(zhuǎn)運(yùn)的影響，再通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA0)檢測細(xì)胞上清中白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)含量的變化。結(jié)果可以看出，當(dāng)粉防己堿濃度小于1 μmol/L時(shí)，單獨(dú)培養(yǎng)或者與1 μmol/L的脂多糖(LPS)共同培養(yǎng)對RAW264.7細(xì)胞基本無作用；當(dāng)粉防己堿濃度大于10 μmol/L時(shí)，RAW264.7細(xì)胞的生長都呈現(xiàn)增殖抑制效果；粉防己堿可抑制IL-6、TNF-α的釋放，對IL-10的表達(dá)有促進(jìn)效果。通過激光共聚焦掃描顯微鏡觀察顯示，大劑量組的細(xì)胞核紅染的陽性細(xì)胞顯著減少，以陰性細(xì)胞為主。粉防己堿可以抑制細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，其抗炎機(jī)制可能與抑制細(xì)胞核因子NF-κB、減少炎癥因子白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)，促進(jìn)抗炎細(xì)胞因子IL-10的表達(dá)有關(guān)。張樂之[42]向大鼠胸腔內(nèi)注射角叉菜膠(10 mg/kg)導(dǎo)致胸膜炎，并且在致炎癥前30 min向大鼠胸腔注射粉防己堿，使用常規(guī)方法測量胸腔的滲出量，使用試管稀釋法計(jì)算細(xì)胞液中滲出的白細(xì)胞量，再測定胞質(zhì)內(nèi)游離Ca2+濃度。發(fā)現(xiàn)粉防己堿可以拮抗Ca2+通道，使炎癥白細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)的Ca2+濃度降低。使得磷酸二酯酶(PDE)活性受到抑制，cAMP的降解量減少，從而發(fā)揮抗炎作用。

6 治療燙傷

孟德勝[43]研究發(fā)現(xiàn)，燙傷后的炎癥反應(yīng)是造成組織破壞的重要原因，粉防己堿在皮膚外使用可治療燙傷，使血管通透性降低，減小傷口愈合后的傷疤。此外粉防己堿可通過影響燙傷后皮膚中白細(xì)胞介素1、腫瘤壞死因子(TNF)組織胺的產(chǎn)生來治療燙傷。

7 治療眼科疾病

粉防己堿可明顯抑制實(shí)驗(yàn)性葡萄膜炎和角膜炎[44]；粉防己堿能明顯抑制晶狀體后囊膜混濁和人工晶狀體前膜的形成[45]，粉防己堿可修復(fù)眼部局部損傷[46-47]，體外研究顯示其對兔皮膚纖維細(xì)胞及纖維瘤細(xì)胞生長有顯著抑制作用[48]。目前發(fā)現(xiàn)粉防己堿作為一種Ca2+阻斷劑，在治療一類眼科疾病上有著很大的發(fā)展前景。張曉斌等[49]建立SD大鼠角膜堿燒傷模型，給藥后，觀察各個(gè)大鼠新生的角膜生長情況，并用免疫組織化學(xué)法測定MMP-2表達(dá)。結(jié)果顯示：正常的對照組生長的角膜呈透明狀，會(huì)分泌較少的MMP-2；生成新血管最多的是堿燒傷對照組；在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)粉防己堿治療組角膜新生的血管均比燒傷對照組少，治療組的MMP-2表達(dá)與燒傷對照組相比也明顯降低。三組各時(shí)間段MMP-2的表達(dá)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。粉防己堿可能通過抑制MMP-2的表達(dá)來抑制新生血管的生成，從而治療眼部疾病。

8 結(jié)語

綜上所述，粉防己雙芐基異喹啉類化合物粉防己堿在抗腫瘤、抗多藥耐藥、防治心血管系統(tǒng)疾病、抗菌、防治消化系統(tǒng)疾病、抗炎、治療燙傷和眼科疾病等方面均有明顯作用，對于粉防己堿的研究還有待繼續(xù)，本文可以為粉防己堿的臨床應(yīng)用提供思路。