包蟲(chóng)病診斷與預(yù)防疫苗研究發(fā)展

趙霞

（青海省河南縣托葉瑪鄉(xiāng)農(nóng)牧業(yè)技術(shù)服務(wù)站 811599）

1 包蟲(chóng)病的診斷技術(shù)

包蟲(chóng)病主要發(fā)生在我國(guó)西部地區(qū)，是影響放牧區(qū)農(nóng)牧人畜的主要疾病，嚴(yán)重阻礙了當(dāng)?shù)匦竽翗I(yè)的發(fā)展。包蟲(chóng)病在感染初期很難被診斷，一旦發(fā)現(xiàn)并采取治療時(shí)，就已經(jīng)進(jìn)入患病后期。包蟲(chóng)病的中間宿主主要是牛羊等動(dòng)物，對(duì)這些中間宿主進(jìn)行免疫診斷時(shí)，可以采取酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，將囊液和粗提原頭節(jié)蛋白作為抗原進(jìn)行檢測(cè)，其中粗提原頭節(jié)蛋白對(duì)檢測(cè)的特異性很強(qiáng)，較為敏感?？乖瑽是由包蟲(chóng)幼蟲(chóng)原頭節(jié)和包囊合成和分泌的一種高豐富蛋白。這種蛋白免疫原性很強(qiáng)，對(duì)包蟲(chóng)病的識(shí)別能力很強(qiáng)，大多數(shù)患病者都能被識(shí)別，可以有效對(duì)疾病宿主的免疫應(yīng)答反應(yīng)進(jìn)行調(diào)節(jié)。棘球蚴病抗原B在對(duì)棘球蚴病進(jìn)行差異表達(dá)的不同發(fā)育階段中，具有十個(gè)以上的單一基因。根據(jù)對(duì)不同國(guó)家采集到的病理材料進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)其在棘球蚴病幼蟲(chóng)以及成蟲(chóng)階段的每一個(gè)基因幾乎都是完全一致的，對(duì)比其DNA序列可以看到，棘球蚴病的發(fā)育階段是高度保守區(qū)。但棘球蚴病抗原B具有顯著的多態(tài)性和變異性，對(duì)差異PCR的結(jié)果進(jìn)行分析表明，這些基因?qū)τ诩蝌什〔煌A段的表達(dá)是不一樣的，存在一定差異，其中抗原B3可以表達(dá)棘球蚴病的所有生活階段。免疫PCR是檢測(cè)抗原的一種系統(tǒng)，通過(guò)PCR可以將已知DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增，災(zāi)后采取常規(guī)的檢測(cè)方式對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，通常在抗原抗體的復(fù)合物上進(jìn)行DNA片段的標(biāo)記。PCR檢測(cè)法比傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和酶免疫法具有更高的靈敏度。Im-muno-PCR對(duì)于一抗和二抗的識(shí)別具有極高的靈敏度，多應(yīng)用于對(duì)微量抗原的檢測(cè)，對(duì)包蟲(chóng)病的診斷過(guò)程中也可對(duì)此技術(shù)進(jìn)行借鑒[1]，能有效提升特異性及靈敏程度。

2 包蟲(chóng)病預(yù)防疫苗研究進(jìn)展

2.1 中間宿主疫苗

中間宿主疫苗有六鉤蚴抗原疫苗及重組蛋白EG95疫苗。六鉤蚴是一種蟲(chóng)卵，由細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)成蟲(chóng)產(chǎn)生，由于六鉤蚴表面具有特殊的蛋白，能與特異性抗體進(jìn)行結(jié)合，因此，采用六鉤蚴的分泌物或者天然抗原可有效保護(hù)羊的棘球蚴病感染問(wèn)題，其免疫程度高達(dá)99%。重組蛋白EG95包含6個(gè)轉(zhuǎn)錄成分，目前已經(jīng)有研究者對(duì)重組EG95蛋白成功克隆和表達(dá)。雖然棘球蚴成蟲(chóng)等蟲(chóng)體在各個(gè)階段具有不同的基因組表達(dá)，但重組EG95蛋白能在這些階段中全部表達(dá)，說(shuō)明重組EG95具有很高的生物活性。在中間宿主羊的體內(nèi)，重組EG95蛋白能引起免疫應(yīng)答，對(duì)包蟲(chóng)病進(jìn)行有效的抵抗，并且此種蛋白在中間宿主羊的體內(nèi)還能有效抑制棘球蚴蟲(chóng)體的發(fā)育。通過(guò)新西蘭及澳大利亞進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，選用重組EG95蛋白對(duì)羊進(jìn)行免疫保護(hù)，可以大大提升羊抗包蟲(chóng)病的能力，起保護(hù)率高于96%，并且在實(shí)驗(yàn)一年后再對(duì)羊體內(nèi)的抗體進(jìn)行檢測(cè)，其保護(hù)率依舊在86%以上，說(shuō)明重組EG95對(duì)感染棘球蚴病具有很高的免疫保護(hù)作用。

2.2 終末宿主疫苗

在實(shí)際生活中，包蟲(chóng)病的中間宿主要顯著多于終末宿主，比如在同一牧場(chǎng)中，羊數(shù)量是犬類(lèi)的幾十倍甚至上百倍，而且通過(guò)對(duì)犬類(lèi)感染棘球蚴病的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，年齡低的犬類(lèi)比年齡高的犬類(lèi)身體中棘球蚴成蟲(chóng)數(shù)量要多，表明犬類(lèi)具有抵抗棘球蚴病的能力，因此，對(duì)終末宿主進(jìn)行免疫，控制包蟲(chóng)病的病情。

目前主要有蟲(chóng)體粗抗原疫苗、重組蛋白疫苗等。早期棘球絳蟲(chóng)的疫苗主要是利用天然的蟲(chóng)體蛋白作為抗原，采用棘球蚴的原頭節(jié)及其他蟲(chóng)體蛋白對(duì)犬類(lèi)進(jìn)行免疫處理，發(fā)現(xiàn)這些蛋白能有效減少犬類(lèi)體內(nèi)的棘球蚴蟲(chóng)體數(shù)量，并且具有抑制蟲(chóng)體生長(zhǎng)的作用。另外采用動(dòng)感凍干的原頭節(jié)或滅活原頭節(jié)對(duì)犬類(lèi)進(jìn)行免疫，也可以有效抑制犬類(lèi)體內(nèi)蟲(chóng)體的生長(zhǎng)，減少棘球蚴蟲(chóng)體的數(shù)量。通過(guò)PCR技術(shù)從棘球蚴蟲(chóng)體中分離出表達(dá)序列，并獲得重組蛋白，將這種蛋白對(duì)犬類(lèi)進(jìn)行免疫也能抑制蟲(chóng)體的生長(zhǎng)，并且還能影響到蟲(chóng)卵及胚胎的發(fā)育情況，具有很高的保護(hù)率。由于包蟲(chóng)病的流行范圍較廣，想要徹底解決包蟲(chóng)病的傳播問(wèn)題還比較艱難[2]，采取終末宿主免疫的方式，能控制棘球蚴蟲(chóng)卵的產(chǎn)生，從而控制包蟲(chóng)病的流行。

3 結(jié)束語(yǔ)

到目前位置，包蟲(chóng)病的預(yù)防疫苗在在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中取得良好的保護(hù)效果，所以還需要進(jìn)行大規(guī)模實(shí)驗(yàn)，以求早日進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)。終末宿主的免疫處理能有效控制棘球絳蟲(chóng)的傳播，并采取相應(yīng)的措施進(jìn)行處理，從而切斷包蟲(chóng)病的傳播途徑，較少包蟲(chóng)病的感染及感染率。包蟲(chóng)病疫苗的發(fā)展，能提升動(dòng)物的免疫能力，減少包蟲(chóng)病的危害。