金耳栽培技術(shù)研究進(jìn)展*

唐松明，何 俊，張小雷，王 麗，蘇開美，李樹紅**

（1.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所，云南 昆明 650223；2.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所，云南 昆明 650223）

金耳 （Tremella aurantialba） 隸為擔(dān)子菌綱（Basidiomycetes） 銀耳目 （Tremellales） 銀耳科（Tremellaceae） 銀耳屬（Tremella） 的寄生真菌，主要分布于我國(guó)云南、西藏等高海拔地區(qū)，野生資源稀有[1]。金耳的擔(dān)子果是由金耳菌寄生于毛韌革菌（Stereum hirsutum）上并由金耳菌絲和毛韌革菌菌絲扭結(jié)形成[2]。

金耳在我國(guó)民間藥用歷史悠久，《本草綱目》記載金耳能夠滋陰潤(rùn)肺，止咳化痰，生津，用于肺結(jié)核、虛癆、咳嗽、痰多、氣喘、盜汗、高血壓、糖尿病等癥狀的治療[3]。近些年由于受消費(fèi)者對(duì)生態(tài)、健康食材熱衷的影響，野生金耳資源遭到過度采集，資源瀕臨滅絕。為了珍貴的金耳資源的可持續(xù)利用，20世紀(jì)80年代，科學(xué)家開始探索金耳的人工栽培，但由于金耳自身生物學(xué)性狀的特殊性和菌種制作的獨(dú)特性導(dǎo)致了金耳菌種的不穩(wěn)定，人工栽培金耳產(chǎn)量極低。

近年來通過對(duì)金耳的菌種分離培養(yǎng)、接種方法、發(fā)菌條件、椴木栽培、袋料栽培和出菇條件等研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述，揭示了現(xiàn)階段金耳栽培存在的主要問題，對(duì)金耳產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展提出了建設(shè)性的意見。

1 野生金耳分布區(qū)域和生長(zhǎng)環(huán)境

野生金耳生于殼斗科的腐木上，其主要產(chǎn)自云南、福建、四川、山西、西藏、湖北、江西、貴州、吉林等省[4-9]，分布區(qū)域與溫度、植被類型、降水量等關(guān)系密切[10]。

2 金耳生活史

金耳的生活史比較復(fù)雜，包括1個(gè)有性世代的大循環(huán)和幾個(gè)無性世代的小循環(huán)，期間又有被寄生真菌毛韌革菌的相互參與，導(dǎo)致金耳的栽培難以人為控制。金耳菌從擔(dān)孢子到擔(dān)孢子的大循環(huán)過程，是由擔(dān)孢子萌發(fā)形成單一型的菌絲，單一型的菌絲形成初生菌絲，經(jīng)過扭結(jié)形成次生菌絲，次生菌絲分化形成金耳子實(shí)體，成熟金耳產(chǎn)生金耳擔(dān)孢子的整個(gè)有性世代，整個(gè)有性世代又伴著無性世代，其中包括初生菌絲在某些情況下斷裂，能形成雙核化的粉孢子和粉孢子鏈，以及擔(dān)孢子在一些特殊的條件下，以芽殖的方式產(chǎn)生大量的芽孢，芽孢再芽殖，繼續(xù)產(chǎn)生大量的芽孢[2]。

3 金耳擔(dān)子果形態(tài)結(jié)構(gòu)研究

金耳完整的擔(dān)子果呈腦狀，1983年黃年來[11]教授最先對(duì)金耳擔(dān)子果進(jìn)行研究，認(rèn)為金耳子實(shí)體表層是膠質(zhì)化的金耳菌絲組成的，而子實(shí)體的核心部分則是由毛韌革菌菌絲組成，2007年劉春卉[3]又得出同樣的結(jié)論。1984年楊紅[12]認(rèn)為金耳擔(dān)子果由金耳菌和毛韌革菌2種菌絲組成，擔(dān)子果里面2種菌絲并沒有明確的分界線。1994年劉正南[13]研究認(rèn)為金耳擔(dān)子果由金耳菌絲和被寄生真菌毛韌革菌菌絲組成，并由2種菌絲相互穿插混合組成金耳子實(shí)體，而且在金耳子實(shí)體內(nèi)部2種菌絲并沒有明顯的界限。

4 金耳馴化栽培簡(jiǎn)史

1822年，世界著名的菌物學(xué)家Eles Fries[14]首先對(duì)金耳的特異性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)金耳與親緣關(guān)系較近的銀耳屬中的一些種有所不同，所以專門論述并正式建立1個(gè)新屬耳包革屬Naematelia Fries，并強(qiáng)調(diào)金耳子實(shí)體系由外層的金耳與內(nèi)層革菌聯(lián)合組成的異質(zhì)復(fù)合體，此觀點(diǎn)得到世界各國(guó)菌物學(xué)家的認(rèn)可，并因此把金耳的引種馴化視為難關(guān)。1963年～1965年世界上著名的銀耳目專家R.J.Bandoni[15-16]教授，首次對(duì)金耳進(jìn)行了馴化培養(yǎng)，但是未獲得子實(shí)體[2]。

1983年黃年來等[11]真菌學(xué)家沿用Eles Fries的論點(diǎn)，對(duì)金耳進(jìn)行馴化栽培，強(qiáng)調(diào)金耳制種必須在子實(shí)體內(nèi)外交界的有限部位，索取小塊組織，才能獲得金耳和毛韌革菌混合菌絲的出耳菌種，并成功地分離出了金耳的母種、原種，但是出耳率很不穩(wěn)定。1983年鄭淑芳、劉平[17]首次對(duì)金耳進(jìn)行人工栽培，第1次人工栽培出金耳子實(shí)體，但出耳率及產(chǎn)量很低，并提出金耳菌種分離技術(shù)、與金耳出耳相關(guān)的生態(tài)條件、金耳與革菌的關(guān)系等一系列問題是金耳栽培技術(shù)是否成功的關(guān)鍵。1984年楊紅[12]通過試驗(yàn)指出，金耳子實(shí)體的形成與金耳菌和毛韌革菌這兩種菌的比例有關(guān)，擴(kuò)大菌種或培養(yǎng)基不合適將引起2種菌絲的比例失調(diào)，這是導(dǎo)致金耳子實(shí)體不能形成的重要原因。

1985年劉平[18]開始對(duì)金耳進(jìn)行人工段木栽培研究，試驗(yàn)結(jié)果顯示段木栽培下金耳的出耳率為58%，說明段木栽培金耳對(duì)環(huán)境的要求不高，且適應(yīng)性廣，在云南廣大地區(qū)均可栽培，并首次提出段木栽培金耳對(duì)段木的要求。2000年桂明英[19]提出金耳段木栽培技術(shù)規(guī)范。1985年鄭淑芳[20]開展金耳的段木栽培和袋料栽培出菇對(duì)比試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明段木栽培金耳與袋料栽培金耳相比在初期、后期，以及在色澤、出菇率、是否出現(xiàn)金耳伴生菌等方面都存在明顯差異。1990年劉正南[21]研究金耳袋料栽培和轉(zhuǎn)色機(jī)制，采用袋內(nèi)封閉培養(yǎng)開放式半開放式出菇的金耳轉(zhuǎn)色、開瓣情況優(yōu)于瓶?jī)?nèi)封閉培養(yǎng)，并得出結(jié)論金耳的轉(zhuǎn)色情況與子實(shí)體暴露在空氣中的比例呈正相關(guān)。

5 金耳栽培技術(shù)的研究進(jìn)展

5.1 子實(shí)體發(fā)育的條件

1985年鄭淑芳[22]對(duì)金耳的生物學(xué)特性進(jìn)行研究，并得出金耳原種、栽培種最適生長(zhǎng)溫度為23℃～26℃，子實(shí)體分化的最適溫度為23℃～26℃，子實(shí)體生長(zhǎng)的最適溫度為18℃～23℃，子實(shí)體生長(zhǎng)空氣濕度需控制在 80%～90%，基質(zhì)的最適 pH 為 5.5～6.0，金耳正常轉(zhuǎn)色的光照強(qiáng)度為80 lx～150 lx。

5.2 金耳接種方法研究

1995年劉正南[23]提出金耳有效菌種的分離培養(yǎng)，是金耳引種馴化，特別是大面積段木、袋料栽培能否成功的首要問題和重要技術(shù)關(guān)鍵。在金耳段木栽培接種方面，劉平[24]于1985年使用金耳菌絲和革菌菌絲混合接種，劉正南[25]于1990年采用混有金耳原基的菌種進(jìn)行段木接種，而現(xiàn)在云南大部分金耳栽培菇農(nóng)使用金耳和革菌混合菌絲與金耳子實(shí)體組織塊進(jìn)行混合接種，成活率、出菇率明顯高于前面2種方法。袋料栽培研究略晚于段木栽培，1983年鄭淑芳等[1]首次對(duì)金耳袋料栽培技術(shù)進(jìn)行報(bào)道，隨后1989年汪欣等[26]采用直接投耳法對(duì)金耳進(jìn)行了袋料栽培，并獲得成功。1990年劉正南[21]采用投耳法，將金耳菌種里面的子實(shí)體直接用手術(shù)刀劃成1.5 cm×1.5 cm的小塊，直接接種在袋子內(nèi)，袋料栽培金耳獲得成功。目前云南地區(qū)金耳袋料栽培主要采用直接投耳法（直接接種金耳子實(shí)體）或接種菌料（金耳菌絲和毛韌革菌菌絲混合物）和金耳子實(shí)體2種方法，2種方法的出耳效果完全相同，但直接投耳法節(jié)省了大量的接種人力資源。

5.3 金耳培養(yǎng)條件的研究

金耳由金耳菌菌絲和毛韌革菌菌絲共同組成，然而2種菌的生長(zhǎng)條件并不完全相同，因此金耳的培養(yǎng)過程直接決定著金耳栽培是否能夠出菇。1987年鄭淑芳[22]首次對(duì)金耳的生物學(xué)性狀進(jìn)行了研究，從而奠定了金耳栽培的基礎(chǔ)。1985年劉平[24]首次研究了金耳的段木栽培，并指出金耳段木接種應(yīng)該采用現(xiàn)砍伐現(xiàn)接種的方法，接種后保持段木里面的含水量，3個(gè)月后空氣加濕到80%～90%進(jìn)行出菇管理，至此金耳的段木栽培初步獲得成功。2000年桂明英[19]對(duì)金耳段木栽培的成功關(guān)鍵進(jìn)行了總結(jié)，對(duì)段木準(zhǔn)備、菌種保藏、接種、栽培管理等進(jìn)行了詳細(xì)說明。

金耳袋料栽培的培養(yǎng)條件明顯比段木栽培要復(fù)雜，段木栽培金耳的營(yíng)養(yǎng)來源主要是以段木營(yíng)養(yǎng)為主，其含氮量較低，金耳的伴生菌革菌不會(huì)生長(zhǎng)得太旺盛，所以金耳的段木栽培對(duì)溫度等條件要求不高。金耳的袋料栽培往往會(huì)添加一些輔料，增加金耳袋料內(nèi)的含氮量，所以金耳袋料栽培獲得成功的關(guān)鍵因素之一是金耳袋料培養(yǎng)條件。1987年鄭淑芳[22]對(duì)金耳的發(fā)菌條件、原基的形成條件、子實(shí)體形成條件進(jìn)行了詳細(xì)的描述。

6 人工栽培金耳與野生金耳營(yíng)養(yǎng)成分比較

1995年劉正南等[27]對(duì)金耳的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和開發(fā)利用狀況進(jìn)行研究，并將野生金耳、人工栽培金耳做了詳細(xì)的成分分析對(duì)比，試驗(yàn)結(jié)果表明人工栽培的金耳所含必須氨基酸種類較齊全，并且含量均高于野生金耳。而野生金耳資源有限，且金耳從成熟到采摘的時(shí)間短，加之金耳本身喜歡長(zhǎng)在陰暗潮濕的環(huán)境，在野外采摘的金耳，有的已經(jīng)成熟過了，有的還未成熟，基本失去食用價(jià)值。

7 人工栽培金耳存在的問題與展望

金耳現(xiàn)在的栽培方式主要有段木栽培和袋料栽培2種方式，而云南地區(qū)主要以段木栽培方式為主，由于金耳段木栽培每年需要砍伐大量的櫟樹，且多數(shù)地區(qū)只砍伐不種植櫟樹，導(dǎo)致櫟木資源越來越貧瘠。同時(shí)金耳段木栽培存在周期長(zhǎng)、生物轉(zhuǎn)化率低、人工成本高等缺點(diǎn)，所以使用段木栽培金耳的菇農(nóng)也日益減少。

隨著人們生活水平的提高，人們對(duì)金耳的需求越來越高，云南省部分企業(yè)開始對(duì)金耳的袋料栽培技術(shù)進(jìn)行研究，但取得的成效并不明顯。目前金耳袋料栽培存在的主要問題是金耳菌種的純度要求較高，金耳原基形成時(shí)會(huì)產(chǎn)生黃水，從而導(dǎo)致原基容易被細(xì)菌污染，出菇不整齊，生物轉(zhuǎn)化率低等，使得金耳袋料栽培難以推廣和規(guī)模化生產(chǎn)。

因此，今后金耳的研究方向主要有以下幾點(diǎn)：大量收集全國(guó)各地的金耳菌株樣品，并針對(duì)這些樣品采用分子手段研究金耳菌跟被寄生菌之間的關(guān)系，以及各地金耳菌株之間的親緣關(guān)系，以期從中篩選出可以規(guī)?；a(chǎn)的菌株；制作金耳優(yōu)良菌種的方法；控制金耳的被寄生菌使其向有利于金耳子實(shí)體生長(zhǎng)的方向發(fā)育；研究金耳原基形成時(shí)黃水產(chǎn)生的機(jī)理，消除或減少黃水的產(chǎn)生。