2，3-BD多次誘導(dǎo)對匍匐翦股穎抗褐斑病的效果

劉興菊,馬 源，馬暉玲,余倩倩

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 草業(yè)學(xué)院/草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/甘肅省草業(yè)工程實(shí)驗(yàn)室/中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展研究中心，甘肅 蘭州 730070； 2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，廣東 廣州 510642)

馬暉玲為通訊作者。

植物病害是威脅草坪生產(chǎn)和管理的主要因素，長期以來，人們主要通過反復(fù)利用化學(xué)農(nóng)藥等手段來防治和減輕草坪病害[1]?；瘜W(xué)農(nóng)藥的長期利用帶來了一系列副作用，如病原菌產(chǎn)生一定的抗藥性，環(huán)境受到污染，地下徑流中有毒有害的殘留物質(zhì)增加等，使得生態(tài)系統(tǒng)的可持續(xù)發(fā)展受到嚴(yán)重威脅。因此，探尋新型、高效、安全、無害的病害防控手段成為病害防治中的新方向[2]。近代病理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，植物體中都存在著潛在的抗病基因，經(jīng)過適當(dāng)?shù)耐饨缫蜃拥恼T導(dǎo)，能夠激發(fā)植物體內(nèi)抗性基因的表達(dá)，從而使植物獲得對病原物的抗性[3]。這種抗性具有廣譜性、系統(tǒng)性等特點(diǎn)，而且對環(huán)境友好，無毒副作用，有利生態(tài)系統(tǒng)的可持續(xù)發(fā)展。故而，探究和開發(fā)誘導(dǎo)植物抗病的激發(fā)子成為目前植物防治領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。而丁二醇(2,3-butanediol，2,3-BD)這一新型誘導(dǎo)劑是由假單胞菌等植物根際促生菌分泌的可揮發(fā)性有機(jī)物，常溫下為無色無味的透明液體，微生物常形成異構(gòu)體混合物[4]，具有安全、無毒、對環(huán)境友好等特性，在植物抗病方面獲得廣泛的關(guān)注。

匍匐翦股穎(Agrostissoionifera)為禾本科翦股穎屬多年生草本植物，由于其葉片質(zhì)地纖細(xì)柔軟，耐修剪，廣泛建植于高爾夫球場、保齡球場、運(yùn)動草地等地。但是，匍匐翦股穎的抗病性很差，易感病，嚴(yán)重影響草坪功能的發(fā)揮以及觀賞價值，給草坪生產(chǎn)和經(jīng)營帶來極大損失。因此，以ISR誘導(dǎo)抗病機(jī)制為基礎(chǔ)，采用新型誘導(dǎo)劑丁二醇誘導(dǎo)植株體內(nèi)的抗病能力從而抑制褐斑病的大量爆發(fā)。

試驗(yàn)采用新型誘導(dǎo)劑2,3-BD對匍匐翦股穎植株進(jìn)行多次誘導(dǎo)處理，通過病情指數(shù)和誘導(dǎo)效果以及抗病相關(guān)酶等觀察比較2,3-BD多次誘導(dǎo)后，匍匐翦股穎對褐斑病的誘抗效果，以尋找2,3-BD誘導(dǎo)匍匐翦股穎抗褐斑病的施用次數(shù)，有效提高抗病害效果，為丁二醇誘導(dǎo)植物抗病害提供理論基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試匍匐翦股穎品種為Penn-A4(Agrostisstoloniferacv. Penn-A4)，由北京克勞沃公司提供。誘導(dǎo)劑2,3-BD購自西亞試劑。病原物為立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani)，購自中國科學(xué)院菌種保存中心。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計

1.2.1 材料培育 營養(yǎng)土、沙、蛭石混合(2∶1∶1)，滅菌處理后于倒入600 mL塑料花盆，澆水，放置一夜后種植匍匐翦股穎種子。種植前種子處理，無菌水浸泡一夜，用70%乙醇溶液浸泡1 min，后用20%次氯酸鈉浸泡30 min，無菌水沖洗5～6次，種植于600 mL的花盆中，每盆0.3 g。培養(yǎng)在25℃的恒溫組培室中，出苗后進(jìn)行間苗處理。

1.2.2 供試菌種制備 接種病原菌立枯絲核菌在PDA固體培養(yǎng)基中，25℃培養(yǎng)4 d，用滅菌的打孔器取6 mm直徑菌絲塊，于PD液體培養(yǎng)基，在25℃、100 r/min的搖床培養(yǎng)4～5 d，將培養(yǎng)好的立枯絲核菌用無菌水沖洗2～3次，研磨后無菌水配置成濃度為OD340=0.8的菌絲懸浮液，采用噴霧法接種。

1.2.3 種植后誘導(dǎo)和接種 根據(jù)前期研究采用不同濃度梯度2,3-BD誘導(dǎo)處理匍匐翦股穎，通過病情指數(shù)的調(diào)查和抗病相關(guān)酶等的測定，結(jié)果顯示250 μmol/L的2,3-BD是誘導(dǎo)匍匐翦股穎抗褐斑病的最佳濃度，此次試驗(yàn)選用250μmol/L濃度的2,3-BD為誘導(dǎo)劑。在幼苗生長第16 d開始進(jìn)行誘導(dǎo)處理。試驗(yàn)組分設(shè)4個處理(用D1、D2、D3、D4 )，每個處理3次重復(fù)，不做誘導(dǎo)處理為對照組，設(shè)計方案如下：

表1 試驗(yàn)處理設(shè)計方案

注： △為2，3-BD誘導(dǎo)劑處理；O為等量水處理

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 匍匐翦股穎褐斑病發(fā)病程度基本標(biāo)準(zhǔn) 接種后第7、10、15、20、25、30、35、40 d，參照文獻(xiàn)[5]牧草病害的調(diào)查與評定，進(jìn)行病情觀察，統(tǒng)計病葉率并計算病情指數(shù)。匍匐翦股穎褐斑病嚴(yán)重度的分級標(biāo)準(zhǔn)如下：0級：無癥狀；1級：葉片上有零星菌絲；2級：10%～40%的葉片上有菌絲；3級：40%～60%的葉片上有菌絲體生長并有壞死跡象；4級：60%～80%的葉片上有豐富的菌絲體和壞死現(xiàn)象；5級：全部植株普遍感病。

病情指數(shù)(%)=

1.3.2 生理指標(biāo)的測定 樣品噴菌處理后于第1、3、5、7、9 d進(jìn)行酶活性的測定，于第1、5、10、15、20 d進(jìn)行游離脯氨酸、丙二醛和葉綠素含量的測定。

（1）聚焦應(yīng)用能力培養(yǎng)。由于“茶產(chǎn)品分析與檢驗(yàn)”的實(shí)務(wù)性和技術(shù)性，教學(xué)目的主要使學(xué)生能夠應(yīng)用檢驗(yàn)分析的方法。所以，教學(xué)過程中要以應(yīng)用能力培養(yǎng)為導(dǎo)向，以此為目的組織教學(xué)內(nèi)容、選擇適合的教學(xué)方法。

超氧化物歧化酶(SOD)活性參照文獻(xiàn)[6]的方法并做修改，以1 min內(nèi)每克鮮重△OD560減少50%為1個酶活單位；

過氧化物酶(POD)活性的測定參照文獻(xiàn)[7]的方法，以每分鐘酶促反應(yīng)體系吸光度變化0.01為一個POD活力單位(U)；

過氧化氫酶(CAT)活力測定參照文獻(xiàn)[8]的方法并修改，以每分鐘反應(yīng)體系吸光度值變化0.01定義為1個酶活性單位(U)；

苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性參照文獻(xiàn)[9]的方法并修改，以每分鐘內(nèi)吸光度變化0.01為1個活性單位(U)，酶活性單位為U/(min·g·FW)；

丙二醛(MDA)的含量均參照文獻(xiàn)[10]的方法；

葉綠素含量的測定參照文獻(xiàn)[11]的測定方法略有改進(jìn)。

1.4 數(shù)據(jù)分析方法

運(yùn)用SPSS 19.0軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計算標(biāo)準(zhǔn)誤、并對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，利用Duncan法多重比較對差異性進(jìn)行分析，運(yùn)用Excel 2013進(jìn)行圖表制作。

2 結(jié)果與分析

2.1 丁二醇多次誘導(dǎo)對匍匐翦股穎植株病情指數(shù)的影響

2,3-BD有效降低匍匐翦股穎褐斑病的病情指數(shù)。接種后第7，10和15 d均差異顯著(P<0.05)。并且植株CK的病情指數(shù)顯著高于2,3-BD處理，2,3-BD處理的病情指數(shù)與CK相比有明顯的抗病效果，具有顯著性差異。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在第15 d，W+J處理的病情指數(shù)最高，植株基本感病且大面積死亡。而2,3-BD處理下植株的病情指數(shù)明顯得到了抑制，效果顯著(P<0.05)。通過比較發(fā)現(xiàn)，誘導(dǎo)2次的抗病效果最佳病情指數(shù)最低，為24.6%，分別比誘導(dǎo)1、3、4次提高了14.2%，7.3%和8.4%。說明通過對匍匐翦股穎進(jìn)行多次誘導(dǎo)，對植株抗病能力有一定的提高(圖1)。

2.2 丁二醇多次誘導(dǎo)對匍匐翦股穎植株抗病效果的影響

試驗(yàn)比較發(fā)現(xiàn)，匍匐翦股穎經(jīng)過多次誘導(dǎo)后能夠顯著提高植株的抗病效果，與誘導(dǎo)1次相比較，誘2，3和4次的處理抗病效果都有一定幅度的提升，分別是65.05%，60.31%和59.66%。說明誘導(dǎo)劑2,3-BD通過多次誘導(dǎo)處理能夠在一定程度上提升翦股穎植株的抗病能力(表2)。

圖1 丁二醇多次誘導(dǎo)處理下匍匐翦股穎的病情指數(shù)的影響Fig.1 Effects of 2,3-BD repeatedly induced on disease index of creeping bentgrass

誘導(dǎo)次數(shù)病情指數(shù)/%W+JBDO+J誘導(dǎo)抗病效果/%D176．4533．794355．80cD270．4524．621165．05aD374．4529．546760．31bD477．4531．243859．66b

2.3 丁二醇多次誘導(dǎo)對植株抗病相關(guān)酶活性的影響

2.3.1 丁二醇多次誘導(dǎo)對植株SOD酶活性的影響 2,3-BD誘導(dǎo)處理對植株SOD活性影響顯著。2,3-BD誘導(dǎo)處理的SOD活性在抗病初期顯著高于CK，且差異顯著(P<0.05)，接菌后第1 d植株的SOD活性迅速上升達(dá)到峰值，隨后呈逐漸降低的趨勢，但始終高于CK。CK植株SOD的活性在接種后第3 d達(dá)到峰值，之后逐漸下降，可見，2,3-BD處理能有效提高植株SOD的活性(圖2)。

通過多次誘導(dǎo)發(fā)現(xiàn)，D2和D3處理的SOD活性在前9 d都比CK活性高，下降趨勢也較D1和D4緩慢，D2處理SOD活性在第7 d時又出現(xiàn)上升現(xiàn)象，且始終比其他處理活性高，說明兩次誘導(dǎo)較好一些。

圖2 丁二醇多次誘導(dǎo)處理下匍匐翦股穎SOD的活性Fig.2 Effects of 2,3-BD repeatedly induced on superoxide dismutase of creeping bentgrass

2.3.2 丁二醇多次誘導(dǎo)對植株P(guān)OD酶活性的影響 與CK相比，2,3-BD誘導(dǎo)處理的植株能夠明顯提高植物體POD活性，且差異顯著(P<0.05)。接菌后植株體內(nèi)POD的活性大體呈先升高后降低再升高的趨勢，2,3-BD誘導(dǎo)處理整體較高。4個處理POD的活性都在第7 d有峰值，其中D1和D3有兩個峰值，且第7 d高于第3 d。D2處理的POD活性在第7 d最為活躍，分別比D1，D3 和D4處理提高了17.16%，6.67%和23.11%，是CK的1.36倍(圖3)。

2.3.3 丁二醇多次誘導(dǎo)對植株CAT酶活性的影響 接菌后植物體內(nèi)CAT活性隨時間變化整體呈現(xiàn)下降再逐漸上升趨勢。接種病原菌后CK處理在第3 d急劇下降，之后持續(xù)緩慢上升。4個處理中，2,3-BD誘導(dǎo)處理在第1 d植物體內(nèi)CAT的活性均比CK低，且有顯著差異(P<0.05)，之后其活性在第3～5 d呈緩慢下降現(xiàn)象，第7 d時又快速上升且達(dá)到峰值，與CK相比差異顯著。分別為CK的2.07、2.23、1.73、1.51倍，其中D2處理的CAT活性最強(qiáng)(圖4)。

圖3 丁二醇多次誘導(dǎo)處理下匍匐翦股穎POD的活性Fig.3 Effects of 2,3-BD repeatedly induced on peroxidase of creeping bentgrass

圖4 丁二醇多次誘導(dǎo)處理下匍匐翦股穎CAT的活性Fig.4 Effects of 2,3-BD repeatedly induced on catalase of creeping bentgrass

2.3.4 丁二醇多次誘導(dǎo)對植株P(guān)AL活性的影響 2,3-BD處理提高了PAL的活性，但是變化幅度較大。D1處理組，PAL的活性在第1 d達(dá)到最高值，是CK的1.19倍，之后降低，在第7 d又達(dá)到一個峰值，但與CK相比差異不顯著(P<0.05)；D2處理組中，PAL活性在第3、7 d出現(xiàn)2個峰值，與CK差異性顯著，其中，第3 d達(dá)到最高值，是CK的1.47倍，第7 d是CK的1.21倍。D3處理組中，2,3-BD誘導(dǎo)后植株體內(nèi)PAL活性也在第3、7 d有峰值，第3 d酶活性達(dá)到最高，是CK的1.32倍，但比2次誘導(dǎo)處理低一些；D4處理組中的酶活性呈逐漸降低后增高的趨勢，第7 d出現(xiàn)最低值，且與CK相比酶活性降低顯著，第1 d最高，是CK的1.14倍(圖5)。

2.4 丁二醇多次誘導(dǎo)對植株體內(nèi)葉綠素和MDA的影響

利用250 μmol/L的2,3-BD對匍匐翦股穎進(jìn)行多次誘導(dǎo)并接種褐斑病病原菌發(fā)現(xiàn)，2,3-BD對葉綠素的含量和MDA的含量有一定影響。經(jīng)過2,3-BD誘導(dǎo)的4個處理組植株體內(nèi)葉綠素的含量明顯高于CK，差異顯著(P<0.05)，但處理組間差異不顯著，說明多次誘導(dǎo)對葉綠素影響較小。

試驗(yàn)對MDA的含量比較發(fā)現(xiàn)，2,3-BD對MDA含量的影響較大，4個處理組中MDA的積累量均顯著低于CK，其中D2處理組的MDA積累量較其他處理組相比明顯最低(表3)。

圖5 丁二醇多次誘導(dǎo)處理下匍匐翦股穎PAL的活性Fig.5 Effects of 2,3-BD repeatedly induced on phenylalanine ammonia-lyas of creeping bentgrass

指標(biāo)處理1d5d10d15d20d葉綠素/(mg·g-1)D12．75a2．84a2．74a2．61a2．06aD22．83a2．89a2．85a2．72a2．14aD32．73a2．79a2．54ab2．49b2．11aD42．69a2．71a2．62ab2．55ab2．02aCK2．67a2．49b2．12c1．83c1．47b丙二醛含量/(μmol·L-1)D16．3a7．31c10．19c11．28d14．35dD26．67a7．15c9．26d10．15e12．93eD36．79a7．54bc11．78b12．35c15．21cD46．95a8．29b11．35b13．05b16．37bCK6．92a9．43a13．4a15．23a19．05a

注：同列數(shù)據(jù)不同字母表示差異顯著(P<0.05)

3 討論

植物誘導(dǎo)抗病性(ISR)是通過利用外界生物或非生物等激發(fā)因子提高植株自身抗病潛能的一種方式，最終達(dá)到抵抗外界病原菌侵染，控制住植株病害的擴(kuò)散或者發(fā)生，提高植物自身的抗病能力[12]。之前已經(jīng)對以丁二醇作為誘導(dǎo)劑使匍匐翦股穎對褐斑病產(chǎn)生抗性做了較多研究[13-19]。引起植物誘導(dǎo)抗性激發(fā)子以及產(chǎn)生誘導(dǎo)抗性的植物種類都是多樣，每一種誘導(dǎo)抗病植株都有其自身的特點(diǎn)。同時也包括一些共同的特征，即非特異性、不完全性、滯后性和耗能性等。高濃度的接種病原菌，尤其在低水平的誘導(dǎo)條件下，將會降低誘導(dǎo)抗病性的有效性。因此，試驗(yàn)?zāi)康氖菫榱颂骄客ㄟ^多次誘導(dǎo)，是否對植物的抗病能力得到增強(qiáng)。

3.1 丁二醇誘導(dǎo)對植株體內(nèi)葉綠素和MDA的動態(tài)變化

試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，利用250 μmol/L的2,3-BD對匍匐翦股穎進(jìn)行多次誘導(dǎo)后能顯著提高植株的抗病能力。通過對接種病原菌后第1，7和15 d植株的病情指數(shù)觀察發(fā)現(xiàn)，2,3-BD處理能有效降低植株的病情指數(shù)，經(jīng)過兩次誘導(dǎo)的翦股穎植株其在抗病過程中病情指數(shù)最低，誘導(dǎo)效果最佳，達(dá)到了65.05%，比其他處理組的效果明顯。對植物葉綠素含量的測定以及MDA積累量的分析發(fā)現(xiàn)，2,3-BD處理能使葉綠素含量有所增加，當(dāng)植物受到病原菌侵染后，植物體內(nèi)葉綠素的含量隨時間的變化呈逐漸降低的趨勢，未誘導(dǎo)處理下降趨勢明顯。研究結(jié)果與徐秉良等[20]、金珠等[21]在馬齒莧抗霜霉病中葉綠素含量的變化結(jié)果相似，說明，葉綠素含量的變化與植物抗病之間存在密切的關(guān)系。葉綠素是植物光合作用的基礎(chǔ)，光合作用是衡量植物合成功能的重要生理指標(biāo)。葉綠素含量高,葉片光合作用越強(qiáng),積累的有機(jī)物質(zhì)也就越多,為抵御病原菌入侵提供的能量就越多，抗性也隨之增強(qiáng)。病原物侵染植物后，往往能與葉綠體發(fā)生相互作用，導(dǎo)致葉綠體解體，發(fā)病嚴(yán)重的甚至導(dǎo)致葉綠素合成受阻，出現(xiàn)葉片褪綠、黃化或花葉等癥狀。但通過對比多次誘導(dǎo)的4個處理發(fā)現(xiàn)，葉綠素的變化與誘導(dǎo)的次數(shù)沒有太大的相關(guān)性，因此，多次誘導(dǎo)對植株的抗病能力與葉綠素的變化無相關(guān)性。

而MDA作為膜脂過氧化作用的最終產(chǎn)物與細(xì)胞膜的損害程度直接相關(guān)，膜脂過氧化的加劇引起質(zhì)膜透性增大，致使大量電解質(zhì)外滲，說明MDA含量和電導(dǎo)率與細(xì)胞膜的損害程度直接相關(guān)[22]。其含量與植物抗病關(guān)系密切，通過研究發(fā)現(xiàn)，接菌后植物體內(nèi)MDA的含量隨時間的增加呈逐漸上升的趨勢，與CK相比，2,3-BD誘導(dǎo)處理明顯降低了植物體內(nèi)MDA的積累量。同時比較多次誘導(dǎo)的4個處理組發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過兩次誘導(dǎo)的植株，其MDA的積累量明顯比其他處理的低，說明2,3-BD多次誘導(dǎo)對植株的抗病能力有一定程度的提升。

3.2 丁二醇誘導(dǎo)對植株抗病相關(guān)酶活性的變化

植物抗病過程中伴隨著一系列的生理生化變化和物質(zhì)代謝，其中催化這些生理生化以及代謝反正的酶為關(guān)鍵因子，試驗(yàn)中2,3-BD誘導(dǎo)處理翦股穎后能在一定程度上增強(qiáng)SOD、POD、CAT、PAL這4種關(guān)鍵酶。SOD是植物體內(nèi)防御活性氧毒性的保護(hù)酶，它能清除超氧化物陰離子自由基，提高植物抗逆性，SOD酶的活性在第1 d達(dá)到最高，之后逐漸下降但與CK相比差異顯著且始終高于CK，通過進(jìn)行多次誘導(dǎo)比較發(fā)現(xiàn)4次誘導(dǎo)處理SOD活性在第7 d時又出現(xiàn)上升現(xiàn)象，且始終比其他處理組活性高，試驗(yàn)結(jié)果表明2,3-BD處理能有效提高植株SOD的活性，且兩次誘導(dǎo)的效果要更好一些。

POD是植物體內(nèi)存在的清除活性氧自由基的一種重要酶，防止過氧化物含量增多，活性的高低能反映出植物體內(nèi)自由基清除或抗氧化能力的強(qiáng)弱，可作為植物抗逆性的重要指標(biāo)。因此POD酶活性的增加有利于提高植物的抗病能力。結(jié)果顯示2,3-BD誘導(dǎo)處理的植株能夠明顯提高植物體POD活性，多次誘導(dǎo)的4個處理中POD的活性都在第7 d有峰值，但兩次誘導(dǎo)處理的POD活性在第7 d表現(xiàn)最為活躍，為效抵御病原菌的入侵提供條件。

CAT也是植物體內(nèi)重要的活性氧清除酶類，其作用是將H2O2降解成為無毒害的H2O和O2，維持體內(nèi)的活性氧代謝平衡，保護(hù)膜結(jié)構(gòu)，從而使植物能在一定程度上忍耐、減緩或抵抗逆境脅迫，因此，就成為植物在逆境中保護(hù)自身體系健康的酶系統(tǒng)中的一種。結(jié)果顯示，2,3-BD誘導(dǎo)處理使CAT的活性增加，接種病原菌后，其下降幅度也較對照緩慢，說明2,3-BD能夠使植株體內(nèi)的活性氧代謝達(dá)到平衡，增加其抗病性。

PAL酶是植物產(chǎn)生誘導(dǎo)抗病性的關(guān)鍵酶類，多個研究表明在植物受到病原菌侵染時，在植物抗病初期體內(nèi)的PAL酶活性會迅速升高，說明PAL酶活性的升高有利于提高植物對病原菌侵染的抗性。試驗(yàn)中在接種病原菌后，PAL酶的活性變化幅度較大，但在整體分析，2,3-BD提高了PAL酶的活性，多次誘導(dǎo)的4個處理，不同誘導(dǎo)次數(shù)對植株體內(nèi)酶的活性影響也不盡相同，其中經(jīng)過兩次誘導(dǎo)處理的酶活性始終較對照高。多數(shù)的研究都表明，酶活性的提高能使植株表現(xiàn)出良好的抗病效果，說明2,3-BD能提高植株的抗病效果。

4 結(jié)論

使用外源誘導(dǎo)劑處理能提高寄主植物SOD、POD、CAT、PAL等酶的活性，與寄主抗性呈正相關(guān)性[23-27]，而MDA含量的變化與植物的抗病性呈負(fù)相關(guān)[27]，研究所測定的4種酶活性的變化和MDA含量的變化與匐翦股穎抗性的關(guān)系，與多數(shù)學(xué)者研究結(jié)果相似。試驗(yàn)結(jié)果顯示2,3-BD能提高植株的抗病效果，且多次誘導(dǎo)抗病效果更顯著，其中施用兩次誘導(dǎo)劑的效果相對最好。

[1] 楊昆.珠江三角洲主要森林下植被和區(qū)域森林生物量的研究[D].廣州：中山大學(xué),2007.

[2] 邢家華,陳定花,朱衛(wèi)剛,等.植物化學(xué)誘抗劑[J].浙江化工,2002(33):51-52.

[3] Durrant,Dong X.Systemicacquired resistance[J]．Annuat Review of Phyto-pathology,2004,42:185-209.

[4] Mccorn M,Creelman R A,Bell E,etal.Jasmonate is essential for insect defenceArabidopsis[J].Proceedings of the National Academy of Seciences of USA,1997,94:5473-5477.

[5] 南志標(biāo).牧草病害的調(diào)查與評定[M]∥任繼周，草業(yè)科學(xué)研究方法).北京：中國農(nóng)業(yè)版社,1998:214-236.

[6] Beyer Jr W F,Fridovich I.Assaying for superoxide dismutase activity:some large consequences of minor changes in conditions[J].Analytical biochemistry,1987,161(2):559-566.

[7] JIANG Aili,TIAN Shiping,XU Yong.Effects of controlled atmospheres with high-O2or high CO2concentrations on postharvest physiology and storability of ‘Napoleon’ sweet cherry[J].Acta Botanica Sinica,2002,44(8):925-930.

[8] Havir E A,Mchale N A.Biochemical and developmental characterization of multiple forms of catalase in tobacco leaves[J].Plant Physiology,1987,84(2):450-455.

[9] Latunde-Dada A O,Lucas J A.The plant defence activator acibenzolar-S-methyl primes cowpea seedlings for rapid induction of resistance[J].Physiological and Molecular Plant Pathology,2001,58(5):199-208.

[10] 李合生.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)[M].北京:高等教育出版社,2000.

[11] 鄒琦.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社,2006.

[12] Ton J,Van Pelt J A,Van Loon L C,etal.Differential effectiveness of salicylate-dependent and jasmonate/ethylene-dependent induced resistance in Arabidopsis[J].Molecular Plant-Microbe Interactions,2002,15(1):27-34.

[13] Suzuki S,He Y.Indole-3-acetic acid production in Pseudomonas fluorescens HP72 and its association with suppression of creeping bentgrass brown patch[J].CurrentMicrobiology.2003,47(2)：0138-0143.

[14] Ryu C,Farag M,Hu C,etal.Bacterial volatiles induce systemic resistance in Arabidopsis[J].Plant Physiology,2004,134,1017-1026.

[15] Cortes-Barco A M,Hsiang T,Goodwin P H.Induced systemic resistance against three foliar diseases of Agrostisstoloniferaby (2R,3R)-Butanediol or an isoparaffin mixture.Annals of Applied Biology[J].Plant Pathology,2010,157:179-189.

[16] Hsiang T,Goodwin P H,Cortes-Barco A M.Plant defense activators and control of turfgrassdiseases[J].Outlooks on Pest Management,2011,22(4):160-164.

[17] 馬暉玲,房媛媛.植物抗病性及誘導(dǎo)抗病性在匍匐翦股穎病害防治中的應(yīng)用[J].草業(yè)學(xué)報,2014,23(5):312-320.

[18] 馬祥,馬暉玲,安惠惠,等.誘導(dǎo)劑丁二醇對匍匐翦股穎抗病相關(guān)的防衛(wèi)酶活性的影響[J].草原與草坪，2012,32(3):37-42.

[19] 房媛媛,馬暉玲.2,3-丁二醇與水楊酸誘導(dǎo)匍匐翦股穎對鐮刀菌枯萎病的抗性[J].草原與草坪,2015,35(3):83-87.

[20] 徐秉良,李敏權(quán),郁繼華，等.苜蓿對白粉病的抗性與葉綠素含量的關(guān)系[J].草業(yè)科學(xué),2005(4):72-74.

[21] 金珠,匡晶,洪法水,等.馬齒莧抗霜霉病的生理基礎(chǔ)研究[J].淮北煤師院學(xué)報(自然科學(xué)版),1999(3):55-59.

[22] Brennan T C.Involvement of hydrogen peroxide in the regulation of senescence in pear[J].Plant Physiol,1997,59(2):411-416.

[23] 代春艷,朱振家,安翠香,等.誘抗劑BTH誘導(dǎo)甜瓜幼苗抗白粉病相關(guān)酶活性的研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報,2010,26(2):286-291．

[24] 孫嘉曼,傅俊范,嚴(yán)雪瑞,等.相關(guān)防御酶對人參銹腐病誘導(dǎo)抗性的響應(yīng)[J].植物病理學(xué)報,2012(4):396-403．

[25] 李堆淑,胡景江.寡聚糖激發(fā)子對楊樹防御酶系活性的影響[J].西北林學(xué)院學(xué)報,2012(2):26-29．

[26] 許晴晴,郜海燕,陳杭君.茉莉酸甲酯對藍(lán)莓貯藏品質(zhì)及抗病相關(guān)酶活性的影響[J].核農(nóng)學(xué)報,2014(7):1226-1231.

[27] 李波,祝一鳴,單體江,等.AXY22和苯并噻二唑的組合誘導(dǎo)對桉樹抗病相關(guān)酶活性和丙二醛的影響[J].中國森林病蟲,2016(6):1-5.