包裝飲用水銅綠假單胞菌檢測(cè)的相關(guān)問題及污染控制探討

□ 周 斌 徐雪梅 白雯靜 田妮娜 劉 荔 蘭州市食品藥品檢驗(yàn)所

2017年某單位對(duì)全省包裝飲用水的生產(chǎn)單位、銷售單位的包裝飲用水進(jìn)行了監(jiān)督抽檢。共抽檢602批次，不合格48批次，不合格率為8.0%，不合格的主要是大桶裝的包裝飲用水，不合格的主要項(xiàng)目是銅綠假單胞菌。銅綠假單胞菌通常會(huì)引起黏膜、傷口感染化膿。包裝飲用水衛(wèi)生的新國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 19298-2014，要求水樣中不得檢出銅綠假單胞菌。

包裝飲用水中銅綠假單胞菌的檢測(cè)是依據(jù)GB8538-2016，實(shí)驗(yàn)中要用的材料、儀器、方法如下。

1 材料與方法

1.1 樣品

樣品主要來源于省內(nèi)的生產(chǎn)、銷售單位，共計(jì)603批。

1.2 試劑和培養(yǎng)基

銅綠假單胞菌選擇性CN 瓊脂培養(yǎng)基、金氏B 瓊脂養(yǎng)基、乙酰胺液體培養(yǎng)基、綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基、十六烷三甲基溴化銨瓊脂、乙酰胺瓊脂培養(yǎng)基、氧化酶試劑、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、納氏試劑。

1.3 儀器設(shè)備

生物安全柜、恒溫培養(yǎng)箱、顯微鏡、膜過濾系統(tǒng)、全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)（VITEK 2）和紫外儀。

1.4 方法

《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》（GB 8538-2016）57中采用濾膜法，將250mL水樣用孔徑為0.45 μm的濾膜過濾，并將濾膜移至CN瓊脂選擇性培養(yǎng)基上，于（36±1）℃恒溫箱中培養(yǎng)20～48h，典型菌落能夠在CN瓊脂選擇性培養(yǎng)基上生長(zhǎng)并產(chǎn)生綠膿菌素，或者能夠在溴化十六烷基三甲基選擇性培養(yǎng)基上生長(zhǎng)并且氧化酶呈陽(yáng)性、紫外光（360±20）nm照射下能發(fā)熒光，能夠利用乙酰胺產(chǎn)氨的革蘭氏陰性無芽孢桿菌，經(jīng)證實(shí)為銅綠假單胞菌，則其檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。

2 結(jié)果

共抽檢樣品602份，檢出銅綠假單胞菌的有48份，檢出率達(dá)到8.0%，可見在桶裝飲用水銅綠假單胞菌的檢出率是相當(dāng)高的。

3 檢驗(yàn)過程中應(yīng)注意的問題

第一，水樣過濾完畢在貼濾膜的過程中一定要注意濾膜要平鋪并避免在濾膜和培養(yǎng)基之間夾留氣泡。若不注意留有氣泡就會(huì)影響后期的判定，因?yàn)闅馀菰谧贤鉄粝乱矔?huì)產(chǎn)生熒光，這樣同產(chǎn)熒光的銅綠假單胞菌互相干擾，給后期的鑒定造成麻煩且會(huì)增加多余的工作量。

第二，培養(yǎng)時(shí)應(yīng)將平板倒置于36℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，并防止干燥。

第三，培養(yǎng)時(shí)間也很重要，在20～24h時(shí)一定要觀察是否長(zhǎng)菌或者長(zhǎng)菌的多少，若長(zhǎng)菌要觀察是否有可疑菌落，有可疑菌落就要挑取做下一步的實(shí)驗(yàn)。若等到培養(yǎng)40～48h再進(jìn)行觀察，菌長(zhǎng)得多的平板上可疑菌就有可能會(huì)重疊或者菌落過分生長(zhǎng)而出現(xiàn)菌落融合，不利于下一步的實(shí)驗(yàn)，有可能造成漏檢或誤判。

第四，在紫外線下檢查濾膜時(shí)，應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間在紫外光下照射，否則可能會(huì)將平板上的菌落殺滅，從而導(dǎo)致可疑菌無法在證實(shí)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，造成目標(biāo)菌的漏檢。

4 污染控制探討

銅綠假單胞菌是一種重要的水源性致病菌，廣泛生存于各類型水中。GB 19298-2014規(guī)定每250mL水樣中銅綠假單胞菌不得檢出。由于隨著社會(huì)的發(fā)展，人類對(duì)環(huán)境污染也屢有報(bào)道，進(jìn)一步也影響到人們?nèi)粘５纳钣盟?，所以現(xiàn)在許多人選擇飲用大包裝的桶裝水。但近年來包裝飲用水中檢出銅綠假單胞菌的通報(bào)也不是什么新鮮事，全國(guó)多地都有。對(duì)于飲用了被銅綠假單胞菌污染的水是否會(huì)損害健康，取決于水中銅綠假單胞菌含量和不合格水的飲用量。

第一，飲用桶裝水的生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)在源頭上杜絕水源的污染，首先做好水源水的檢驗(yàn)，若水源水中檢出銅綠假單胞菌應(yīng)調(diào)差分析可能存在的污染，分析污染是有何種情況造成的，然后針對(duì)問題研究解決的方案。

第二，企業(yè)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)人員的培訓(xùn)，不斷提高人員的專業(yè)技能和自身綜合素質(zhì)，使生產(chǎn)人員講究衛(wèi)生規(guī)范操作，以免人為的因素污染產(chǎn)品；同時(shí)企業(yè)也應(yīng)重視硬件設(shè)施的更新和維護(hù)，生產(chǎn)的環(huán)境應(yīng)符合相關(guān)的規(guī)定。

第三，食藥監(jiān)管部門應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)生產(chǎn)企業(yè)的監(jiān)管，尤其在夏季，環(huán)境的濕度大，溫度也最適宜銅綠假單胞菌的生長(zhǎng)（銅綠假單胞菌的最適生長(zhǎng)溫度是（36±1）℃，督促企業(yè)規(guī)范生產(chǎn)，做好日常檢驗(yàn)或委托檢驗(yàn)，食藥監(jiān)管部門和企業(yè)雙管齊下相信包裝飲用水的質(zhì)量會(huì)越來越好。

消費(fèi)者購(gòu)買桶裝水時(shí)選擇品牌商的授權(quán)網(wǎng)點(diǎn)。飲用時(shí)，最好在一周內(nèi)飲用完，開封一個(gè)月的桶裝水最好煮沸后再飲用，避免滋生細(xì)菌，合格的桶裝水沒必要煮沸飲用。礦泉水因水源取自地殼深處不會(huì)受污染，建議直接飲用。

[1]王燕梅,唐震,喬昕,等．江蘇省桶裝飲用水中銅綠假單胞菌污染情況調(diào)查[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2015(12):2019-2020.