沙門氏菌檢驗中不同培養(yǎng)基的檢出效果

周兆華，王志杰，楊一帆 （江蘇省常熟市疾病預(yù)防控制中心微生物檢驗科，江蘇常熟215500）

0 引言

沙門氏菌屬于腸桿菌科，革蘭氏陰性腸道桿菌。除可感染人外還可感染很多動物，屬于人畜共患疾病之一［1］。本研究探討了在沙門氏菌的檢驗中采用不同的培養(yǎng)基進(jìn)行檢驗的檢出效果，并將結(jié)果進(jìn)行了有效的分析，現(xiàn)報道如下。

1 材料和方法

1.1 樣品來源選擇2018年1至7月市面上進(jìn)行售賣的豬肉／羊肉進(jìn)行隨機(jī)購買，共計167份，在市場中進(jìn)行正常采購的同時，也隨機(jī)選取部分被污染的豬肉／羊肉，將其一同作為研究對象送于實驗室內(nèi)。

1.2 培養(yǎng)基SS培養(yǎng)基，基礎(chǔ)培養(yǎng)基為牛肉膏5 g／L，脙胨 5 g／L，三號膽鹽 3.5 g／L，瓊脂 17 g／L，乳糖10 g／L，檸檬酸鈉 8.5 g／L，硫代硫酸鈉 8.5 g／L，10%檸檬酸鐵溶液10 mL，1%中性紅溶液2.5 mL，0.1%煌綠溶液0.33 mL。將其溶入1000 mL蒸餾水中，并進(jìn)行均勻加熱攪拌，校正pH為7.0，制好后備用。

HE 培養(yǎng)基為牛肉膏 3 g／L，乳糖 12 g／L，蔗糖12 g／L，水楊素 2 g／L，膽鹽 20 g／L，氯化鈉 5 g／L，瓊脂 15 g／L，溴麝香草酚蘭 0.064 g／L，酸性復(fù)紅0.1 g／L，硫代硫酸鈉 6.8 g／L，檸檬酸鐵鈉 0.8 g／L，去氧膽酸鈉2 g／L。將其溶入1000 mL蒸餾水中，進(jìn)行均勻加熱攪拌，制好后備用。

XLD 培養(yǎng)液為牛肉膏 3 g／L，L-賴氨酸 5 g／L，乳糖 7.5 g／L，蔗糖7.5 g／L，木糖 3.75 g／L，氯化鈉5 g／L，硫代硫酸鈉 6.8 g／L，檸檬酸鐵銨 0.8 g／L，去氧膽酸鈉2.5 g／L，苯酚紅 0.08 g／L，瓊脂 15 g／L。 將其溶入1000 mL蒸餾水中，進(jìn)行均勻加熱攪拌，制好后備用［2］。

1.3 方法無菌操作稱取25 g（mL）樣品置于盛有225 mL BPW的無菌均質(zhì)袋中，用拍打式均質(zhì)器拍打 1～2 min于（36±1）℃培養(yǎng) 8～18 h。 輕輕搖動培養(yǎng)過的樣品混合物，移取1 mL轉(zhuǎn)種于10 mL TTB內(nèi)，于（42±1）℃培養(yǎng)18～24 h。 同時另取 1 mL轉(zhuǎn)種于10 mL SC 內(nèi)，于（36±1）℃培養(yǎng) 18～24 h。 分別用直徑3 mm的接種環(huán)取增菌液1環(huán)，劃線接種于SS、HE、XLD三種不同的培養(yǎng)基上，于（36±1）℃分別培養(yǎng) 40 h～48 h［］或 18～24 h，觀察各個平板上生長的菌落［3］。

1.4 觀察指標(biāo)沙門氏菌屬在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征分別為：SS瓊脂菌落為黑色有光澤、棕褐色或灰色，菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色，有些菌株形成灰綠色的菌落，周圍培養(yǎng)基不變；HE瓊脂菌落為藍(lán)綠色或藍(lán)色，多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色，有些菌株為黃色，中心黑色或幾乎全黑色；XLD瓊脂菌落呈粉紅色，帶或不帶黑色中心，有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心，或呈現(xiàn)全部黑色的菌落，有些菌株為黃色菌落，帶或不帶黑色中心。如發(fā)現(xiàn)可疑菌落則利用沙門氏菌生化鑒定或者M(jìn)ID細(xì)菌鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定［4］。

2 結(jié)果

對167份樣品進(jìn)行MID細(xì)菌鑒定系統(tǒng)檢驗，陽性檢出率為28.74%，48例，并以此作為金標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對比。樣品在3種不同培養(yǎng)基上的假陽性情況分別為SS培養(yǎng)基5.99%（10例），HE培養(yǎng)基9.58%（16例），XLD培養(yǎng)基10.78%（18例）。3種培養(yǎng)基在假陽性檢驗方面差異明顯。在檢出率結(jié)果中，SS培養(yǎng)基的檢出率為25.75%（43例），HE培養(yǎng)基的檢出率為19.76%（33例），XLD培養(yǎng)基的檢出率為17.37%（29例）。檢出率結(jié)果進(jìn)行對比，SS培養(yǎng)基的檢出率明顯高于HE培養(yǎng)基與XLD培養(yǎng)基，HE培養(yǎng)基與XLD培養(yǎng)基經(jīng)過對比，差異并不明顯。其中，SS培養(yǎng)基的敏感性為89.58%，特異性為87.5%，HE培養(yǎng)基的敏感性為82.16%，特異性為81.11%，XLD培養(yǎng)基的敏感性為79.85%，特異性81.45%。SS培養(yǎng)基敏感性與特異性均高于HE培養(yǎng)基與XLD培養(yǎng)基。

3 討論

沙門氏菌的檢驗較常采用的培養(yǎng)基為SS培養(yǎng)基、HE培養(yǎng)基以及XLD培養(yǎng)基［5］。這3種培養(yǎng)基在進(jìn)行檢驗培養(yǎng)時均有不同的優(yōu)缺點，在沙門氏菌的實際檢驗中，仍然存在一定的誤差，并不能十分有效并且準(zhǔn)確地檢出食物樣本中的沙門氏菌［6］。在本次檢驗中，SS、HE以及XLD 3種培養(yǎng)基對豬肉樣本進(jìn)行培養(yǎng)時，培養(yǎng)結(jié)果也有所不同。在3種培養(yǎng)基中，SS培養(yǎng)基的沙門氏菌檢出率明顯較高，其余兩種培養(yǎng)基的檢出率較差。SS培養(yǎng)基在進(jìn)行沙門氏菌檢驗時，擁有強(qiáng)選擇性，這就使SS培養(yǎng)基在進(jìn)行沙門氏菌檢驗時可以非常準(zhǔn)確地檢驗出食物樣本中包含的沙門氏菌，也可以與其余兩種培養(yǎng)基共同使用來確保沙門氏菌的檢出效果［7］。隨著沙門氏菌檢測方法不斷研究，更多新方法如科馬嘉顯色培養(yǎng)基均得到臨床應(yīng)用，并且可以較好地提高臨床檢出率，擁有更多優(yōu)點［8］。

綜上所述，沙門氏菌在不同的培養(yǎng)基中，有不同的檢出率，SS培養(yǎng)基的檢出率明顯高于HE培養(yǎng)基與XLD培養(yǎng)基，可以有效提高食品中沙門氏菌的檢出率。