一例規(guī)模化豬場豬流行性腹瀉防控案例分析

林 艷，代洪波，周遠程

（四川華神獸用生物制品有限公司，四川 成都 610200）

豬流行性腹瀉（PED）是一種急性且高度傳染性的腸道疾病，臨床上主要以嚴重的腸炎、嘔吐、水樣腹瀉以及脫水為特征，感染仔豬死亡率極高。1973年開始，我國就有豬流行性腹瀉相關(guān)報道，但直到1984年才通過熒光抗體試驗和中和抗體試驗確定病原是流行性腹瀉病毒[1]。該病曾一度在我國大面積流行，后來疫情逐漸得到控制，各地僅呈偶爾散發(fā)態(tài)勢。2010年初，我國華南地區(qū)多個省份再次暴發(fā)了嚴重的流行性腹瀉疫情，哺乳仔豬死亡率超過80%，隨后疫情快速蔓延全國[2]。截止到2011年底，我國有超過100萬頭仔豬死于豬流行性腹瀉，到目前為止至少給我國養(yǎng)豬業(yè)造成千萬頭以上的仔豬死亡。美國自2013年4月開始暴發(fā)豬流行性腹瀉，并在第1年造成800萬頭以上仔豬死亡[3]。

豬流行性腹瀉病毒分子流行病學(xué)調(diào)查顯示，2010年以后的流行毒株S基因出現(xiàn)了較大變異，與傳統(tǒng)疫苗毒株相比同源性僅90%左右[4]。不斷有學(xué)者提出現(xiàn)有的PED滅活疫苗對變異毒株的保護效果有限，筆者通過對規(guī)?；i場豬流行性腹瀉疫情防控案例分析發(fā)現(xiàn)，在實際操作中，一旦發(fā)生腹瀉疫情，發(fā)病動物向環(huán)境中排毒量巨大，疫苗接種給豬群提供的免疫保護非常有限，唯有切斷傳染源、構(gòu)筑免疫屏障、加強飼養(yǎng)管理才能迅速控制疫情。

1 流行病學(xué)調(diào)查

四川某規(guī)?；B(yǎng)豬場，生產(chǎn)母豬存欄3 500頭左右，2017年1月引進后備母豬500頭，2017年2月初產(chǎn)房開始發(fā)生腹瀉疫情，豬場通過全群返飼加全群普免豬傳染性胃腸炎-豬流行性腹瀉二聯(lián)滅活疫苗的方式進行疫情控制；直到2017年4月中旬，疫情未得到有效控制，產(chǎn)房發(fā)病率高達90%以上，兩個月產(chǎn)房共死亡8 000頭左右仔豬。2017年4月下旬邀請技術(shù)專家進行會診，制定并實施本方案。

2 實驗室診斷

2.1 膠體金檢測

以安捷公司PEDV膠體金檢測試劑盒，采集腹瀉仔豬糞便進行病原檢測。從5份腹瀉仔豬糞便樣品中，檢出2份PEDV抗原陽性。

2.2 核酸檢測

將采集的5份糞便樣品，送鐵騎力士實驗室進行流行性腹瀉病毒（PEDV）、傳染性胃腸炎病毒（TGEV）核酸檢測；剖解3頭腹瀉仔豬，分別采集扁桃體、脾臟、肺臟，混合研磨制備組織樣品，提取核酸進行豬瘟病毒（CSFV）、藍耳病病毒（PRRSV）、偽狂犬病病毒（PRV）、圓環(huán)病毒2型（PCV2）病原檢測。5份糞便樣品中共檢出4份PEDV抗原陽性，未檢測到TGEV抗原；3份組織樣品中，共檢測到2份PCV2陽性，2份PRRSV變異株陽性，未檢測到PRV與CSFV抗原。

2.3 病原菌分離

將采集的5份糞便樣品接種血清瓊脂平板進行病原菌分離培養(yǎng)，5份樣品中均僅見糞鏈球菌與大腸桿菌生長，未分離到其它病原菌。

3 防控方案與效果

3.1 傳染源阻斷

任何疫病感染與發(fā)病動物都是最主要的傳染源，然而仔豬腹瀉疾病比其它疫病更為特殊。比如豬瘟、偽狂犬病等，病毒主要在動物組織中增殖，主要通過飛沫、血液、分泌物等體液排毒，這些疫病向環(huán)境中排毒的速度相對緩慢且排毒量不高。腹瀉病毒主要在動物腸道內(nèi)增殖，通過糞便排毒，并且糞便中病毒含量非常高，腹瀉疫病向環(huán)境中排毒的速度快，排毒量巨大。因此，在腹瀉疫情防控中，切斷傳染源就至關(guān)重要，具體操作如下。

封鎖發(fā)病豬舍，主要封鎖發(fā)生仔豬腹瀉的產(chǎn)房，也包括出現(xiàn)腹瀉癥狀的妊娠舍與后備豬舍，避免發(fā)病動物排泄到環(huán)境中的病毒傳播到其它豬舍。發(fā)病豬舍相關(guān)人員與其它豬舍人員隔離，發(fā)病產(chǎn)房過道以生石灰消毒，產(chǎn)床腹瀉仔豬糞便通過干燥粉處理，每天清掃兩次以上，保持產(chǎn)床清潔。出現(xiàn)腹瀉癥狀的妊娠舍與后備舍，每天清掃兩次以上，并進行消毒處理，避免排泄物污染其它豬舍。

3.2 構(gòu)筑免疫屏障

仔豬腹瀉主要依靠母乳中sIgA進行被動免疫保護，我國目前尚無有效的豬流行性腹瀉口服疫苗，單純依靠肌肉注射或后海穴注射疫苗，難以激活母豬的腸道黏膜免疫。因此，規(guī)?；i場常通過返飼激活母豬黏膜免疫，再通過肌肉注射疫苗進行加強免疫。

返飼需要對病料進行嚴格篩選。首先要確保返飼病料中含有足夠的豬流行性腹瀉病毒，可以通過膠體金檢測，篩選強陽性病料進行返飼；其次，要對返飼病料進行豬瘟、偽狂犬病、豬藍耳病等病原檢測，避免返飼導(dǎo)致其它疫病傳播。腹瀉病毒的排毒期為2周左右，糞便中的病毒最高可存活4周以上[5]，排毒期內(nèi)環(huán)境中的腹瀉病毒含量極高，必須做好返飼豬群管理，每天進行兩次以上清掃與消毒，避免大量腹瀉病毒進入產(chǎn)房。主要返飼未發(fā)生過腹瀉的妊娠母豬與后備豬，以激活其腸道黏膜免疫；臨產(chǎn)母豬（產(chǎn)前6周以內(nèi)）不可進行返飼，避免排毒期尚未結(jié)束即進入產(chǎn)房生產(chǎn)，將大量病毒帶入產(chǎn)房。發(fā)生過腹瀉的母豬，腸道黏膜免疫已被激活，可以不進行返飼。所有妊娠母豬，在產(chǎn)前6周與產(chǎn)前3周進行兩次豬流行性腹瀉疫苗免疫，構(gòu)筑高水平免疫屏障，提高初生仔豬對豬流行性腹瀉病毒的免疫力。

3.3 加強飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)管理在腹瀉疫情控制中的作用比預(yù)防接種更為重要。首先關(guān)注臨產(chǎn)母豬體況，確保仔豬有較好的初生體況，關(guān)注母豬乳汁分泌情況，人工干預(yù)，確保所有初生仔豬都能采食到足夠的初乳；其次做好仔豬接產(chǎn)工作，加強產(chǎn)床保溫，及時清理母豬排泄物，做好產(chǎn)床清潔，確保產(chǎn)床干燥舒適。一旦出現(xiàn)腹瀉仔豬，及時對腹瀉糞便進行處理，若發(fā)病群體較小，可直接淘汰發(fā)病仔豬，切斷傳染源。做好引種與返飼豬群管理，確保排毒期的母豬不能進入產(chǎn)床。

3.4 防控效果

方案執(zhí)行1個月后，腹瀉疫情得到有效控制，發(fā)病率由90%以上降低到10%以內(nèi)。

4 案例分析

通過對本次案例的分析發(fā)現(xiàn)，引種、生物安全體系不健全，可能是導(dǎo)致本次疫情的主要原因。疫病初期對全群進行返飼，返飼后對全群進行疫苗加強免疫，疫情仍未得到有效控制，前期的返飼操作過程中存在較明顯的錯誤，產(chǎn)前母豬不適宜進行返飼，母豬排毒期未結(jié)束即進入產(chǎn)房，將大量的病毒帶給仔豬，導(dǎo)致疫情的持續(xù)發(fā)生。其次是忽略了豬流行性腹瀉疫病的特殊性，豬流行性腹瀉病毒主要在腸道內(nèi)增殖，感染后24 h以內(nèi)通過糞便排毒，筆者通過PED膠體金檢測發(fā)現(xiàn)，試紙條的檢測敏感性為105.5TCID50；即用棉簽粘取少量糞便（不足 0.1 g），稀釋成1 mL進行檢測，只要試紙條顯示陽性，證明樣品中病毒含量即高于105.5TCID50，每克糞便中病毒含量高于106.5TCID50；針對強陽性的糞便樣品，每克糞便中病毒含量超過108.5TCID50。目前我國常用腹瀉疫苗效力評價標準為：疫苗免疫無PED抗體的母豬或仔豬，免疫后對仔豬進行攻毒保護試驗，以103個MID的組織毒攻擊（導(dǎo)致無PEDV抗體仔豬發(fā)病的最低感染劑量為10-7稀釋，選用10-4稀釋構(gòu)建效檢攻毒模型），對照組4/5以上發(fā)病，免疫組4/5以上保護，即判定該疫苗有效。實驗室替代檢驗方案為：免疫豬群的中和抗體高于1∶32即判定為有效。

疫苗免疫僅能提供1 000個MID的基礎(chǔ)防護，在沒有發(fā)生腹瀉疫情的時候，豬場環(huán)境中PED的病毒含量很低，通過必要的消毒措施進行控制，加上合理的疫苗免疫，我們可以給豬群提供日常的保護。反復(fù)加強免疫優(yōu)質(zhì)的疫苗，可以不斷地提高免疫屏障，但是一旦部分豬群免疫水平低下形成有效感染和發(fā)病，發(fā)病豬群向環(huán)境中排放大量的腹瀉病毒，再好的疫苗都很難抵抗如此大劑量強毒攻擊。這也就是為什么一旦發(fā)病以后，豬場的情況會越來越糟糕，因為發(fā)病的豬越多，PED強毒在環(huán)境中的病毒含量就越高，這是一個逐級放大的過程。若不果斷采取傳染源切斷措施，疫情將在豬場內(nèi)愈演愈烈。

我國與仔豬腹瀉疫情的斗爭已經(jīng)持續(xù)了五六年之久，目前已經(jīng)摸索出一些行之有效的防控方案，比如本次案例中的“切斷傳染源-構(gòu)建高水平免疫屏障-加強飼養(yǎng)管理”方案。具體而言，日常工作做好PED的免疫，制定常年免疫計劃，大型豬場可以定期進行PED中和抗體檢測；構(gòu)建起有效的防疫屏障以后，就是做好日常消毒，降低環(huán)境中各種病原滴度，使環(huán)境中的強毒控制在防疫水平以下。一旦出現(xiàn)發(fā)病豬群，必須馬上采取隔離措施，封鎖發(fā)病群體，一旦確診為傳染性的腹瀉疫病，如果疫情范圍較小，必須馬上無害化處理發(fā)病豬群，切斷傳染源，避免環(huán)境中感染病毒不斷放大；如果疫情范圍較大，封鎖發(fā)病豬群，待排毒期過后，繼續(xù)觀察4周以上，才能對該豬群解除隔離，疫情也會隨之得到有效控制。

常規(guī)疫苗免疫難以激活母豬腸道黏膜免疫，在缺乏有效口服疫苗的情況下，返飼是不得已的選擇。強陽性病料中的腹瀉病毒含量比商品化疫苗高，但是返飼病料必須經(jīng)過專業(yè)化檢測，明確是否存在其它疫病，病毒含量是否足夠（膠體金檢測即可）。返飼是豬場內(nèi)的危險因素，返飼后所有動物都在排毒，環(huán)境中的病毒含量極高，如果此時環(huán)境中的返飼病毒進入產(chǎn)房，仔豬是無力抵抗的。因此臨產(chǎn)母豬（產(chǎn)前6周以內(nèi)）不能進行返飼，排毒期尚未結(jié)束就進入產(chǎn)房將導(dǎo)致疫情反復(fù)發(fā)生。此外，豬場生物安全體系建設(shè)、飼養(yǎng)管理等，對仔豬腹瀉疫情防控至關(guān)重要，只有迅速隔離發(fā)病豬群、切斷傳染源，在確保初生仔豬體況良好、做好產(chǎn)床清潔與保溫、保證采食足夠初乳的前提下，才能迅速控制疫情，再通過免疫防護屏障進行豬場日常維護。

[1]林耀明，宋萬杰，秦云，等.豬流行性腹瀉的流行現(xiàn)狀及防控策略[J].中國動物檢疫，2016，33（5）：62-64.

[2]Chen J,Wang C,Shi H,et al.Molecular epidemiology of porcine epidemic diarrhea virus in China[J].Arch Virol,2010,155(9):1471-1476.

[3]孫裴，高亞飛，高亞成，等.美國暴發(fā)豬流行性腹瀉后的控制策略及經(jīng)驗借鑒[J].中國豬業(yè)，2016（9）：68-71.

[4]劉孝珍，陳建飛，馮力，等.2011年豬流行性腹瀉病毒的遺傳變異分析[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報，2012，34（3）：180-183.

[5]廖學(xué)文，姜美建.控制PED病毒需要一個完善的生物安全策略[J].國外畜牧學(xué)-豬與禽，2015，35（1）：25-26.