保定周邊地區(qū)豬圓環(huán)病病原、抗體水平調查及分析

劉子偉 翟含流/河北省保定市蓮池區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所

鄭朝朝 劉濤 鄒立宏/瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司

劉子偉 翟含流/河北省保定市蓮池區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所

吳浩/河北省保定市農業(yè)局

豬圓環(huán)病毒病（PCVD）是由圓環(huán)病毒引起的一種能導致豬群免疫抑制的傳染病，近幾年在我國廣泛流行，嚴重制約了我國養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。圓環(huán)病毒2型（PCV-2）主要導致斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)、豬皮炎與腎病綜合征(PDNS)、新生仔豬先天性震顫(CT)、豬增生性壞死性間質性肺炎(IP)、相關性腸炎以及懷孕母豬的繁殖障礙等一系列疾病。豬圓環(huán)病毒導致豬群免疫抑制，為其他病毒和細菌的感染提供了便利，豬群的死亡率大大增加。

為了解保定市周邊地區(qū)2015—2017年豬圓環(huán)病毒2型疫病流行情況，本試驗用PCR方法和ELISA方法對保定市周邊清苑、徐水、高陽、滿城、望都5個縣10個中型豬場及92個個體養(yǎng)豬場提取857份豬血清樣本，進行了豬圓環(huán)病毒病2型病原、抗體水平調查，為今后豬圓環(huán)病毒病的防治提供參考。

一、材料和方法

1.材料

（1）血清。采集自保定市周邊5縣的10個中型養(yǎng)豬場和92個個體養(yǎng)殖戶，母豬或仔豬靜脈血，離心、分離制備血清，分裝，-20℃保存、備用。豬群未表現(xiàn)明顯臨床癥狀，暫未出現(xiàn)因圓環(huán)病毒感染導致的損失。據(jù)調查10個中型養(yǎng)豬場、約50%個體養(yǎng)殖戶使用國產豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗進行免疫；

（2）檢測試劑。DNA/RNA提取試劑盒，購自大連寶生物工程有限公司；豬圓環(huán)病毒2型引物序列參考GenBank，由北京擎科生物技術有限公司合成；豬圓環(huán)病毒2-dCap-ELISA抗體檢測試劑盒，購自瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司。

2.方法

（1）病原檢測。按照核酸提取試劑盒說明書提取待檢血清樣品的DNA，做好標記；配制RT-PCR反應體系，設置RT-PCR程序擴增豬圓環(huán)病毒2型片段；對RTPCR產物進行凝膠電泳檢測，計算病原檢出率。結果判定標準：凝膠電泳出現(xiàn)目的條帶判為抗原陽性，沒有出現(xiàn)目的條帶判為抗原陰性；

（2）抗體檢測。按照豬圓環(huán)病毒2-dCap-ELISA抗體檢測試劑盒說明書，對待檢血清樣品進行400倍稀釋，檢測抗體水平，計算S/P。結果判定標準：S/P值≥0.25判為陽性；0.16＜S/P＜0.25判為可疑；S/P≤0.16判為陰性。

二、結果與分析

1.病原檢測結果。待檢血清樣品病原檢出結果如下表1：

表1 待檢血清PCV2病原檢測統(tǒng)計結果

如上表1數(shù)據(jù)顯示，自保定周邊縣采集的857份血清用RT-PCR法進行檢測，PCV2病原檢出率為10.2%。其中中型養(yǎng)殖場母豬、仔豬病原檢出率分別為5.0%和5.1%，個體養(yǎng)殖戶病原檢出率分別為9.8%和11.5%；仔豬病原檢出率高于母豬，中型養(yǎng)殖場的病原檢出率低于個體養(yǎng)殖戶。

2.抗體檢測結果。待檢血清樣品抗體檢測結果如下表2：

表2 待檢血清PCV2抗體檢測統(tǒng)計結果

如上表2數(shù)據(jù)顯示，自保定周邊縣采集的857份血清用ELISA抗體檢測試劑盒進行檢測，PCV2抗體合格率為70.6%。其中中型養(yǎng)殖場母豬、仔豬抗體合格率分別為100.0%和96.8%，個體養(yǎng)殖戶抗體合格率分別為69.5%和66.7%。母豬抗體合格率高于仔豬，中型養(yǎng)殖場的抗體合格率高于個體養(yǎng)殖戶。

三、討論

本實驗結果可以看出仔豬病原檢出率高于母豬，中型養(yǎng)殖場的病原檢出率低于個體養(yǎng)殖戶；母豬抗體合格率高于仔豬，中型養(yǎng)殖場的抗體合格率高于個體養(yǎng)殖戶。據(jù)調查，10個中型豬場均用國產豬圓環(huán)病毒滅活疫苗對母豬和仔豬進行免疫，豬群具有較高的抗體水平，對于豬圓環(huán)病的發(fā)生、發(fā)展起到了抑制作用，尤其是對母豬進行免疫能夠有效降低豬圓環(huán)病對于豬群的危害；而個體養(yǎng)殖戶豬圓環(huán)病免疫率僅在50%左右，因此病原檢出率高于中型養(yǎng)豬場，尤其是仔豬帶毒率高達13.6%。雖然目前豬群并沒有發(fā)生因圓環(huán)病毒感染導致的直接重大損失，但是高達10.2%的病原檢出率對養(yǎng)豬業(yè)也是很大的隱患。本實驗抗體檢測結果顯示合格率高于70%，與相關報道中80%以上陽性率相似，但是這個抗體水平到底是疫苗免疫獲得的保護性抗體，還是豬群受到野毒感染而獲得的抗體目前無法區(qū)分。

據(jù)報道被豬圓環(huán)病毒感染的豬群會產生免疫抑制，很容易繼發(fā)其他病毒病或者細菌病，從而影響豬群整齊度、降低飼料報酬，造成經濟損失，因此需要對豬圓環(huán)病毒病進行有效防控，不但需要提高對豬群的飼養(yǎng)管理水平，還要制定科學有效的免疫程序。

（略）