中醫(yī)濕熱證動(dòng)物模型研究

許勝杰，潘 志

（1.長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130117；2.長春中醫(yī)藥大學(xué)人參科學(xué)研究院，吉林 長春 130117）

目前，中醫(yī)藥逐漸被國內(nèi)外學(xué)者重視，隨著對中醫(yī)藥研究的不斷深入，一些問題逐漸也被凸顯，需要用現(xiàn)代科學(xué)方法對多數(shù)的中醫(yī)理論方法和臨床經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行研究和闡釋。其中，中醫(yī)動(dòng)物模型的建立尤為重要，也是中醫(yī)藥國際化的必經(jīng)之路。中醫(yī)動(dòng)物模型是依據(jù)中醫(yī)病因病機(jī)理論，利用特定的致病因素，在動(dòng)物身上復(fù)制出與人類疾病癥狀和病理改變相同或相似的證候[1]。最早的中醫(yī)動(dòng)物模型是中醫(yī)理論模型，到了唐代，陳藏器的《本草拾遺》中便記載了中醫(yī)實(shí)體模型，及至20世紀(jì)60年代后期，中醫(yī)動(dòng)物模型被逐步地建立和復(fù)制，對中醫(yī)動(dòng)物模型的研究有助于提高中醫(yī)臨床及理論的形成發(fā)展及診療水平，如果利用人與動(dòng)物的生理病理共同特征，根據(jù)中醫(yī)病因病機(jī)理論，從現(xiàn)代的分子生物學(xué)等不同方面建立中醫(yī)動(dòng)物模型，以闡釋和明確中醫(yī)理論實(shí)質(zhì)，將對中醫(yī)藥現(xiàn)代化的發(fā)展起到至關(guān)重要的作用。因此建立標(biāo)準(zhǔn)化中醫(yī)動(dòng)物模型是推動(dòng)中醫(yī)藥現(xiàn)代化的重要環(huán)節(jié)[2]。中醫(yī)濕熱證動(dòng)物模型的建立是研究中醫(yī)濕熱證的重中之重，本文對中醫(yī)濕熱證動(dòng)物模型進(jìn)行歸納總結(jié)，為中醫(yī)濕熱證動(dòng)物模型的應(yīng)用提供參考。

1 中醫(yī)濕熱證溯源

濕熱既是常見的致病因素，又是疾病過程中機(jī)體的特殊病理狀態(tài)。中醫(yī)對濕熱證的認(rèn)識(shí)在古醫(yī)籍中早有記載，《素問》中提到：“四之氣，褥暑濕熱相搏，爭于左之上，民病黃癢而為附腫”；《脈經(jīng)》云：“傷寒有濕溫，其人常傷于濕，因而中暍，濕熱相搏，則發(fā)濕溫。及至明清時(shí)期，濕熱證更加為人們所熟知。如薛生白所說：“太陰內(nèi)傷，濕飲停聚，客邪再至，內(nèi)外相引，故病濕熱”，同時(shí)外邪犯肺，胸悶咳嗽，氣機(jī)升降失常，又可傷及脾胃，致濕從內(nèi)生，郁而化熱，形成濕熱；又如葉天士《外感溫?zé)崞罚骸坝钟芯瓶?，里濕素盛，外邪入里，里濕為合”，濕熱證總以脾胃虛弱為內(nèi)因，外邪侵襲為誘因?！皾褡琛笔菨駸嶙C的主要病機(jī)，多由“外濕”與“內(nèi)濕”互相影響而致病。葉天士根據(jù)濕與熱的偏重分為濕重于熱、濕熱并重、熱重于濕三種類型[3]。近代劉景源等[4]在溫病辨治匯講中詳細(xì)提出了濕熱病病在上、中、下三焦的辨治。到了現(xiàn)代，吳仕九教授對濕熱證的研究起到了卓越的貢獻(xiàn)，其闡述了三焦及現(xiàn)代疾病的濕熱證候表現(xiàn)，并指出在臨床研究中發(fā)現(xiàn)很多醫(yī)學(xué)疾病均具有濕熱特性，包括流感、膽道感染等，為中醫(yī)濕熱證的臨床研究打下了深厚的基礎(chǔ)。近年來，濕熱證動(dòng)物模型的研究尤為廣泛，濕熱證動(dòng)物模型研究較早見于1983年，熊啟逵等建立了衛(wèi)氣營血證候動(dòng)物模型，卻出現(xiàn)大便溏瀉等濕熱下注的癥狀，由此將該模型定名為濕熱證模型。后又由程方平、郭明陽等發(fā)展完善，引入濕熱證動(dòng)物模型對深入研究濕熱證發(fā)揮了重要作用。

2 中醫(yī)濕熱證動(dòng)物模型的造模機(jī)理

已有關(guān)于建立中醫(yī)濕熱證動(dòng)物模型的研究文獻(xiàn)表明[5]，中醫(yī)濕熱證動(dòng)物模型的造模機(jī)理可分為以下幾種：郭金龍等[6]依據(jù)中醫(yī)病因?qū)W原理，模擬盛夏的氣候特點(diǎn)，制造濕熱環(huán)境，并過食肥甘的方法初步復(fù)制了濕阻證動(dòng)物模型；王新華[7]在上述模型基礎(chǔ)上，增加大腸桿菌、內(nèi)毒素等生物致病因子，建立了溫病濕熱證動(dòng)物模型。吳仕九[8]以中醫(yī)溫病理論為指導(dǎo)，采用五種因素，六種造模方法等致病因素進(jìn)行造模，其所建立的濕熱證模型，無論從發(fā)病條件，還是主要癥狀體征均與中醫(yī)濕熱證型相似，具有操作便捷及模型實(shí)用的特點(diǎn)。程方平等[9]根據(jù)由口鼻而入的病因?qū)W原理，提出了“經(jīng)口腔灌胃”使動(dòng)物感染微生物的致病方法，延長了造模的時(shí)間，建立了濕熱證動(dòng)物模型，更加符合濕熱證生于長夏起病緩慢的中醫(yī)學(xué)特點(diǎn)。唐雪春等[10]研究表明濕熱證的形成與流感病毒也有關(guān)。潘沅等[11]采用濕熱環(huán)境、高脂飲食、流感病毒以及滴鼻的方式感染小鼠，復(fù)制了小鼠流感病毒肺炎濕熱證模型。呂冠華等[12]在溫病濕熱證模型的基礎(chǔ)上，根據(jù)脾胃濕熱證病因及發(fā)病學(xué)原理建立了脾胃濕熱證模型，符合臨床脾胃濕熱證發(fā)病特點(diǎn)。

上述濕熱證模型，其造模方法均遵循“外濕引動(dòng)內(nèi)濕”、“太陰內(nèi)傷，濕飲停聚，客邪再至，內(nèi)外相引，故病濕熱”的病因理論。以“肥甘飲食”制造內(nèi)濕，以“濕熱環(huán)境”制造外濕，以“生物致病因子”模擬客邪；濕熱環(huán)境可使細(xì)菌等病原微生物易于生長繁殖，且抑制機(jī)體的抗病力，增加易感性；肥甘飲食可導(dǎo)致臟腑功能的損傷；而生物致病因子的致熱和炎性效應(yīng)與濕熱證的主要癥狀和病理改變相似。上述三個(gè)因素中，任意單一因素，均很難造成穩(wěn)定的濕熱證模型，該造模方法取得了廣泛的認(rèn)同。但已有的模型無法區(qū)分濕熱輕重，無法體現(xiàn)中醫(yī)治療濕熱證的優(yōu)勢，影響模型的實(shí)用價(jià)值。也有學(xué)者[13]認(rèn)為，中醫(yī)證候動(dòng)物模型應(yīng)該在病因、病機(jī)、病理過程以及癥狀體征等方面與人類疾病相同。根據(jù)中醫(yī)濕熱證的特殊致病因素及其病理變化特點(diǎn)，濕與熱為一陰一陽的特征，因此，需要對中醫(yī)濕熱證各種致病因素與證候之間進(jìn)行梳理、對濕、熱偏重形成過程中的相互關(guān)系及濕、熱偏重不同時(shí)期的濕熱量化作進(jìn)一步研究。

3 中醫(yī)濕熱證動(dòng)物模型研究

3.1 濕熱并重模型

濕熱證初期多為熱輕濕重，隨著病程進(jìn)展，濕邪漸轉(zhuǎn)化為熱邪；至中期有濕熱并重、熱重濕輕等病理表現(xiàn)。若脾虛與胃熱并重者，則多呈濕熱并重。后世醫(yī)家多認(rèn)為濕熱并重亦當(dāng)立足于祛濕，配合清熱，濕去熱清。廖榮鑫等制造濕熱的環(huán)境，加以高脂、高糖（豬油、蜂蜜）等飼料喂養(yǎng)大鼠10天，置于造模箱8天，第9天灌胃，給予大鼠鼠傷寒沙門氏菌1次，24 h后再感染1次，將大鼠從造模箱中移出，12 h后灌服蒸餾水，7天后動(dòng)物處死做相關(guān)檢查。中醫(yī)濕熱證濕熱并重模型大鼠出現(xiàn)大便溏泄癥狀，血漿胃動(dòng)素增高，而血漿胃泌素降低。通過上述表現(xiàn)來看，濕熱環(huán)境+肥甘飲食+生物致病因子是建立濕熱并重模型較為理想的路線。模型“病”的特性由生物致病因子主導(dǎo)，而模型“證”的特性由飲食和環(huán)境因素主導(dǎo)，比較符合中醫(yī)濕熱證的特征。但目前濕熱證濕熱并重模型的研究還存在一些不足之處：模型的復(fù)制僅從“外濕”、“內(nèi)濕”考慮，建立的模型只能籠統(tǒng)地表現(xiàn)濕熱證，而濕熱證因中氣虛實(shí)不同而有濕熱偏重之象卻被忽略。

3.2 濕重于熱模型

濕熱證病因不僅有內(nèi)濕、外濕之分，其病機(jī)尚有濕熱輕重之別，而清熱與祛濕治療矛盾，必須合理應(yīng)用兩種方法，才是治療濕熱證的關(guān)鍵。閆翔等[14-15]認(rèn)為溫病濕熱證模型的建立，需對應(yīng)建立濕重于熱，熱重于濕的模型。人體若中陽虛者病偏于太陰，表現(xiàn)為濕重?zé)彷p。廖榮鑫[16]采用高糖高脂、造模箱、白酒、大腸桿菌等因素建立了濕偏重造模組。其以高糖高脂飼料喂養(yǎng)大鼠10天，然后置于造模箱，同時(shí)灌服北京產(chǎn)二鍋頭，第19天開始灌胃，給予大腸桿菌2次，移出造模箱并灌服蒸餾水，7天后動(dòng)物處死做相關(guān)檢查。濕偏盛者，熱勢不揚(yáng)，大便溏薄，小便不清，并出現(xiàn)嗜睡懶惰，反應(yīng)遲緩，飲食量減輕，渴不引飲。灌服大腸桿菌后，大鼠蜷縮茸毛，體溫較低，恢復(fù)緩慢。Na+-K+-ATP酶活性下降，造成細(xì)胞內(nèi)液Na+積聚，引起細(xì)胞水腫，濕重于熱動(dòng)物模型紅細(xì)胞Na+-K+-ATP酶活性的變化較濕熱并重動(dòng)物模型更為顯著，經(jīng)治療后Na+-K+-ATP酶活性逐漸恢復(fù)正常[17]。

遵循傳統(tǒng)中醫(yī)理論，依據(jù)中氣虛實(shí)的病機(jī)特點(diǎn)，合理應(yīng)用了清熱與祛濕的總體治法，通過動(dòng)物模型與“內(nèi)濕”“外濕”等因素結(jié)合，又采用了改變飲食、增加致病生物因子等方法復(fù)制了中醫(yī)濕熱證濕重于熱動(dòng)物模型。雷氏芳香化濁丸治療后，各種理化指標(biāo)及其癥狀得到明顯改善，證明濕熱證濕重于熱動(dòng)物模型有確切的臨床意義。有研究者為了區(qū)分模型的濕熱輕重，將大鼠造成“中氣虛”的體質(zhì)，但缺少客觀的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，難以推廣。

3.3 熱重于濕模型

人體若中陽旺者病偏于陽明或濕漸化熱者，多表現(xiàn)為熱重濕輕。廖榮鑫[18]制定出高糖高脂+附子干姜煎劑+鼠傷寒沙門氏菌的造模方法，復(fù)制了熱重濕輕造模組。喂養(yǎng)大鼠高糖高脂飼料10天，將其移于造模箱，然后灌服附子干姜煎劑8天，第9天開始灌胃，給予鼠傷寒沙門氏菌2次，將大鼠移出并灌服蒸餾水，7天后動(dòng)物處死做相關(guān)檢查。熱偏盛者，熱勢較高，較為活躍，激進(jìn)好斗，大便秘結(jié)，煩躁不安，小便短赤，渴不喜飲，肛溫明顯升高。灌服鼠傷寒沙門氏菌后，上述癥狀進(jìn)一步加重。

大鼠模型表現(xiàn)的癥狀符合熱重于濕的濕熱證特點(diǎn)，說明了中氣虛實(shí)也是造成濕熱證熱重于濕模型的重要因素。熱重濕輕模型比濕重?zé)彷p模型的體溫高，說明熱偏重模型中大鼠“熱邪”入里，里熱蒸迫，熱勢較高的特點(diǎn)，表明濕熱證熱重于濕模型是成功的。但不同的熱環(huán)境也會(huì)對模型造成很大的影響，沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。

4 小 結(jié)

中醫(yī)濕熱證動(dòng)物模型的研究，有助于闡明濕熱證的本質(zhì)及清熱除濕的治療機(jī)理，促進(jìn)新藥的開發(fā)。因此，該模型的應(yīng)用將為濕熱類溫病的發(fā)展指明方向，并提供重要的手段和方法。無論是哪種濕熱證模型，其造模方法均遵循“外濕引動(dòng)內(nèi)濕”的基本要領(lǐng)。濕熱證有濕熱輕重之分，醫(yī)家在治療時(shí)要把握濕與熱的平衡，旨在消解濕熱，達(dá)到濕去熱消之目的。綜上所述，所建立的濕熱證模型均符合薛生白《濕熱病篇》的理論。模型在建立的過程中，濕熱環(huán)境及動(dòng)物品種的不同、使用致病微生物的種類及用量的不同都對模型質(zhì)量產(chǎn)生至關(guān)重要的影響，而對施加這些因素的影響尚缺乏系統(tǒng)性的標(biāo)準(zhǔn)，有待考證[19]。

5 中醫(yī)濕熱證模型的展望

目前，隨著對濕熱證的深入研究，動(dòng)物模型逐漸由簡單的中醫(yī)證候模型，發(fā)展為從臨床角度、從證入手的“病證結(jié)合”動(dòng)物模型，使動(dòng)物模型不僅具備中醫(yī)濕熱證的特點(diǎn)，而且具備西醫(yī)疾病的病理特征、病理演變過程和發(fā)展規(guī)律[20]。因此，合理運(yùn)用該動(dòng)物模型進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)，如指標(biāo)檢測、藥理實(shí)驗(yàn)、相關(guān)模型間比較等，將促進(jìn)溫病濕熱證“證”本質(zhì)的研究和治療機(jī)理的闡明。將實(shí)驗(yàn)與臨床研究相結(jié)合，故應(yīng)建立系統(tǒng)的濕熱證臨床研究體系，并獲取較為完整的臨床資料，為模型的研制提供重要的思路和方法，對模型的應(yīng)用和推廣也有促進(jìn)作用。相信隨著中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究的不斷深入，不同中醫(yī)濕熱證模型的對比及優(yōu)化研究會(huì)越來越受到重視，也必將取得更大的突破。

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