阿昔洛韋微乳的制備及其理化性質(zhì)的測定

殷旭東,程 威,孔云虹,楊曉虹

(昆明學院生命科學與技術系,昆明 650214)

微乳制劑作為一種新劑型在醫(yī)藥領域已取得廣泛應用[1-3]。微乳載藥可提高藥物以及其他營養(yǎng)物質(zhì)的穩(wěn)定性[4-7],控制藥物釋放,延長藥物的血液循環(huán)時間,促進藥物吸收[8-10]。研究表明,微乳制劑可提高在水中難溶解藥物的溶解量,提高生物利用度[11-13]。

阿昔洛韋(acyclovir，ACV)為合成的嘌呤核苷類似物,相對分子質(zhì)量為225.21,可干擾單純皰疹病毒DNA多聚酶,抑制單純皰疹病毒的復制[14]。由于阿昔洛韋難溶于水,口服吸收差,研究人員采用將其制成納米顆?；蚓酆衔锬z束等方法,以提高阿昔洛韋的生物利用度[15-16]。為了克服阿昔洛韋在臨床應用的缺點,本文制備了阿昔洛韋微乳制劑,測定了阿昔洛韋微乳制劑的主要理化指標。

1 儀器與材料

1.1儀器 DDS-11D電導率儀(上海虹益儀器儀表有限公司)；79-1A恒溫加熱磁力攪拌器(蘇珀儀器有限公司)；FA1004電子天平(上海恒平科學儀器有限公司)；PHS-3C pH計(上海儀電科學儀器股份有限公司)；Nano-ZS 型馬爾文粒徑測定儀(英國馬爾文公司)；Tecnai-12 型透射電子顯微鏡(荷蘭Philips 公司)。

1.2材料 阿昔洛韋(江蘇常州康麗制藥有限公司,批號20160813)；蓖麻油聚氧乙烯醚(EL-60,山東濟寧銘達新材料有限公司,批號20150721)；油酸鈉、吐溫-80(遼寧美侖生物技術有限公司,批號：20160308,20160426)；其他試劑均為市售分析純。

2 方法

2.1三元相圖的繪制 將油酸與復合表面活性劑(油酸鈉、吐溫-80和EI-60)按照1∶8,2∶7,3∶6,4∶5,4.5∶4.5,5∶4,6∶3,7∶2和8∶1的質(zhì)量比,分別稱取,置于50 mL燒杯中,總質(zhì)量固定為2.5 g。在室溫條件下,磁力攪拌均勻后,逐滴加入去離子水,記錄體系由透明變渾濁或由渾濁變透明,即發(fā)生相變時加入水的質(zhì)量。以復合表面活性劑作為三元相圖的一個頂點,油和水分別為三元相圖的另外2個頂點,分別以O和W表示。在相圖上標示出相變點的位置,連接各相變點,繪制三元相圖。

2.2微乳電導率的測定 在50 mL的燒杯中加入油酸鈉1.0 g,滴入1.5 mL去離子水,在磁力攪拌下溶解，再分別加入吐溫-80、EI-60和油酸2.0,1.72和0.3 g，在磁力攪拌下混勻，加入1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0,12.0,14.0,16.0,18.0和20.0 mL去離子水,測定空白微乳電導率。

2.3空白微乳制劑的制備 室溫下,在50 mL燒杯中加入油酸鈉0.5 g,再加入吐溫-80和EI-60 1.0和0.8 g,滴入1.0 mL去離子水,在磁力攪拌下溶解；再加入油酸0.3 g,在磁力攪拌下,滴入5.0 mL去離子水,持續(xù)攪拌25 min。

2.4阿昔洛韋微乳制劑的制備 室溫下,在磁力攪拌下,將丙三醇0.5 g加入到2.3項下制備的空白微乳制劑中,攪拌10 min。再將阿昔洛韋0.1 g加入微乳體系中,持續(xù)攪拌20 min。

2.5空白微乳和阿昔洛韋微乳制劑粒子的表征 空白微乳和阿昔洛韋微乳制劑粒子的粒徑、電位、粒徑分散指數(shù)用激光散射儀測定；微乳pH值用PHS-3C pH計測量。重復測量3次,取平均值。

2.6阿昔洛韋微乳制劑微觀形態(tài)學觀察 將載有 Formvar 支持膜的銅網(wǎng)置于蠟板上,在膜上滴加2.4項下制備的阿昔洛韋微乳制劑1滴,自然晾干30 min,再滴加質(zhì)量濃度為20 g·L-1的磷鎢酸1滴,自然晾干10 min,用濾紙吸走多余的液體,置于Tecnai-12型透射電子顯微鏡下觀察微乳的形態(tài)。

3 結(jié)果與討論

3.1油酸/(油酸鈉,吐溫-80,EL-60)/水的相行為 以EI-60、吐溫-80和油酸鈉和油酸(O)和水(W)分別為擬三元相圖的3個頂點繪制擬三元相圖,見圖1。

圖1體系油酸/(EL-60,吐溫-80,油酸鈉)/水的三元相圖(25℃)

Fig.1 System oleic acid/(EL-60,Tween-80,sodium oleate)/water ternary phase diagram(25 ℃)

圖1中的W/O ME表示W(wǎng)/O型單相微乳液；O/W ME表示O/W 型單相微乳液；EM 表示乳狀液；LC 表示液晶；LC+ME 表示液晶與微乳液共存；EM O/W表示水包油乳狀液；EM W/O表示油包水乳狀液。結(jié)果顯示,在水或者油酸的的含量增加、表面活性劑較少時,形成區(qū)域較大的油包水或者水包油乳狀液區(qū)。

3.2空白微乳電導率的測定 微乳電導率隨含水量的變化見圖2。電導率值最高點為微乳成型的臨界點[17]。在水含量為33.3%時,電導率為4.2 ms·cm-1,為乳白色黏稠液體。隨含水量增加,液體逐漸透明,流動性增強,黏度減小,形成微乳區(qū)。在水的含量增加到70.0%時,陰離子表面活性劑水解使導電離子濃度增大,微乳液的電導率增加到最高值為10.6 ms·cm-1。此時,水包油達到極限。隨后繼續(xù)增加水的含量,微乳轉(zhuǎn)變成乳液發(fā)生相分離,微乳的電導率值減小,當水含量達到76.5 %時,體系的電導率為9.7 ms·cm-1。

圖2m(油酸)：m(油酸鈉、吐溫、EL-60)=1∶8時電導率值隨含水量變化的曲線(25℃)

Fig.2 The curve conductivity value with the water content changes whenm(oleic acid):m(sodium oleate,Tween,EL-60)=1∶8 (25 ℃)

3.3阿昔洛韋微乳制劑的制備 在阿昔洛韋微乳制劑中所用的復合表面活性中油酸鈉為陰離子表面活性劑,吐溫-80和EL-60為非離子表面活性劑。阿昔洛韋微乳形成模式見圖3?？瞻孜⑷榈暮繛?0%,油酸分子因具有親油基團在整個微乳體系的中間,在陰離子表面活性劑油酸鈉形成的膠束內(nèi)。非離子表面活性劑吐溫-80和EL-60在最外層,親油基團在內(nèi)部,其親水基團在外部與水分子作用吸附。當阿昔洛韋加入空白微乳液后,阿昔洛韋逐漸進入膠束內(nèi)部,阿昔洛韋分子被陰離子表面活性劑(油酸鈉)和非離子表面活性劑吐溫-80和EL-60親油基團吸附。

3.4空白微乳和阿昔洛韋微乳制劑的測定 阿昔洛韋微乳(A)和空白微乳(B)制劑見圖4。二者均為淡黃色透明液體,阿昔洛韋微乳顏色較深一些。

圖3阿昔洛韋微乳的形成模式

Fig.3 The formation of acyclovir microemulsion

圖4阿昔洛韋微乳(A)和空白微乳(B)

Fig.4 The acyclovir microemulsion (A) and blank microemulsion (B)

阿昔洛韋微乳(A)和空白微乳(B)制劑的理化參數(shù)見表1。微乳的粒子直徑和表面電荷與微乳的穩(wěn)定性以及藥物的吸收有關[18-20]。用馬爾文激光散射粒度測定儀,在 20 ℃下,光散射度為90 °測定空白微乳和阿昔洛韋微乳的粒徑。空白微乳和阿昔洛韋微乳制劑的平均粒徑分別為37.37和40.28 nm,粒徑分散指數(shù)分別為0.19和0.21,電位分別為-16.71 mV和-15.82 mV?？瞻孜⑷楹桶⑽袈屙f微乳pH值分別6.71和6.82。結(jié)果顯示,空白微乳和阿昔洛韋微乳制劑的粒子直徑較小,粒度范圍小,較為穩(wěn)定。

表1阿昔洛韋微乳(A)和空白微乳(B)的理化參數(shù)

Tab.1 Physical and chemical parameters of acyclovir microemulsion (A) and blank microemulsion (B)

制劑樣品平均粒徑/nm粒徑分散指數(shù)/PDI電位/mVpHA40.28±1.290.21±0.040-15.82±0.826.82±0.40B37.37±1.240.19±0.040-16.71±0.756.71±0.40

3.5阿昔洛韋微乳制劑的形態(tài)觀察 阿昔洛韋微乳制劑的透射電鏡圖見圖5。由圖5可知,阿昔洛韋微乳粒子的直徑為30～50 nm。阿昔洛韋微乳粒子成圓球形狀。

圖5阿昔洛韋微乳電鏡圖片

Fig.5 TEM photograph of acyclovir microemulsion

4 結(jié)論

在室溫下,以油酸為油相,通過復合表面活性劑油酸鈉(陰離子)、吐溫-80(非離子)和EL-60(非離子),以甘油為助劑制備了阿昔洛韋微乳制劑,粒子平均直徑為40.28 nm,粒度范圍小,較為穩(wěn)定。阿昔洛韋微乳制劑pH值為6.82,接近中性,有利于對其展開進一步研究。

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