血清骨膜蛋白和脂聯(lián)素聯(lián)檢診斷兒童支氣管哮喘價值研究

趙 靜 陳華琴 張 寧 崔 玥 宋麗華 顧 猛 李 林

摘? ?要：目的? 探討支氣管哮喘患兒血清骨膜蛋白及脂聯(lián)素（ADP）水平檢測對診斷支氣管哮喘的臨床價值。方法? 選取選取2017年1月～12月在常州兒童醫(yī)院兒科就診的40例支氣管哮喘患兒（哮喘組）和40名同期健康兒童體檢者（對照組）作為研究對象，ELISA法檢測哮喘組急性發(fā)作期和緩解期及對照組的血清Periostin、ADP及IgE水平;采用ROC曲線評價Periostin及ADP對支氣管哮喘病情評估效能預(yù)測。結(jié)果? 哮喘組患兒發(fā)作期及緩解期血清Periostin和血清ADP水平均高于對照組（P<0.05）且發(fā)作期高于緩解期（P<0.05）;采用血清Periostin和ADP水平診斷支氣管哮喘，其診斷靈敏度分別為85.02%和80.48%，特異度為92.51%和81.98%，當(dāng)血清Periostin和血清ADP分別在147.52 μg/L和20.31 mg/L時，其Youden 值最大，分別為0.7752和0.7504，其AUC分別為0.8262和0.7823，兩者聯(lián)檢可將靈敏度和特異性分別提高到87.03%和95.52%。支氣管哮喘急性發(fā)作期和緩解期血清Periostin與IgE的相關(guān)系數(shù)分別為0.9916和0.9358，而急性發(fā)作期和緩解期血清ADP與IgE的相關(guān)系數(shù)分別為0.4767和0.2344。結(jié)論 動態(tài)監(jiān)測支氣管哮喘患兒血清中Periostin及ADP水平有助于判斷支氣管哮喘病情轉(zhuǎn)歸效果;二者聯(lián)檢可作為排查兒童支氣管哮喘的指標(biāo)，血清Periostin可作為診斷支氣管哮喘良好血清學(xué)指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：支氣管哮喘;骨膜蛋白;脂聯(lián)素;兒童

中圖分類號：R725.6? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標(biāo)識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.21.019

文章編號：1006-1959（2018）21-0071-04

Diagnostic Value of Serum Periosteal Protein and Adiponectin in Children with

Bronchial Asthma

ZHAO Jing1，CHEN Hua-qin1，ZHANG Ning2，CUI Yue2，SONG Li-hua2，GU Meng2，LI Lin1

（Department of Pediatrics1，Department of Clinical Laboratory2，Changzhou Children's Hospital，Changzhou 213003，Jiangsu， China）

Abstract： Objective? To explore the clinical value of serum Periostin and Adiponectin in children with bronchial asthma. Methods? 40 children with bronchial asthma （asthma group） and 40 healthy children （control group） were selected as the subjects.The serum levels of Periostin， ADP and IgE in the acute and remission stages of the asthma group and the control group were detected by ELISA. The ROC curve was used to evaluate the efficacy of Periostin and ADP in evaluating the effectiveness of bronchial asthma.Results? The levels of serum Periostin and serum ADP in the asthmatic group were higher than those in the control group （P<0.05） and the attack period was higher than the remission period （P<0.05）. The diagnosis of bronchial asthma was diagnosed by serum Periostin and ADP levels. The sensitivity was 85.02% and 80.48%， and the specificity was 92.51% and 81.98%. When serum Periostin and serum ADP were 147.52μg/L and 20.31 mg/L， respectively， the Youden value was the highest， 0.7752 and 0.7504， respectively.The AUC was 0.8262 and 0.7823， respectively， and the combined detection increased the sensitivity and specificity to 87.03% and 95.52%， respectively. The correlation coefficients of serum Periostin and IgE in acute and remission stages of bronchial asthma were 0.9916 and 0.9358， respectively， while the correlation coefficients of serum ADP and IgE in acute attack and remission were 0.4767 and 0.2344， respectively. Conclusion? Dynamic monitoring of serum levels of Periostin and ADP in children with bronchial asthma can help to determine the outcome of bronchial asthma.The combined detection can be used as an indicator for bronchial asthma in children.Serum Periostin can be used as a good serological marker for diagnosing bronchial asthma.

Key words： Bronchial asthma;Periostin;Adiponectin;Children

支氣管哮喘（bronchial asthma）是由多種炎癥細胞或因子參與，以氣道高反應(yīng)相關(guān)的反復(fù)發(fā)作性喘息、氣促和咳嗽為主要臨床癥狀的可逆的氣道慢性炎癥性變態(tài)反應(yīng)性疾病[1]。因其病情反復(fù)，較難根治，嚴(yán)重影響患兒的生活質(zhì)量。其病因和發(fā)病機制目前尚不明確，目前疾病的早期識別及嚴(yán)重程度的判斷主要是通過臨床表現(xiàn)及過敏原檢測等進行診斷，缺乏特異性臨床檢測指標(biāo)。近年來文獻報道的診斷支氣管哮喘的血清學(xué)指標(biāo)日益增多，血清骨膜蛋白（periostin）、嗜酸粒細胞趨化因子（eotaxin）、痰硫化氫、半乳糖凝集素3（galectin-3）等均可能成為診斷哮喘的潛在生物標(biāo)志物[2-4]，且也有報道顯示YKL-40[5]、ADP、IL-31及IL-32等可作為評估支氣管哮喘嚴(yán)重程度的生物標(biāo)志物，另外，像內(nèi)脂素、生長素、外泌體、髓樣分化蛋白2（MD-2）可能為潛在診斷哮喘的生物標(biāo)志物[6，7]。Periostin是一種由IL-4和IL-13誘導(dǎo)產(chǎn)生，在間葉細胞和支氣管上皮細胞表達的蛋白質(zhì)，在Th2型免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用[8]。ADP是一種主要由白色脂肪分泌的，可參與體內(nèi)炎癥反應(yīng)的脂肪因子。研究表明，ADP可增強內(nèi)皮細胞內(nèi)皮素1的表達和釋放，而與過敏性炎癥密切相關(guān)，但兩者對于支氣管哮喘的作用機制，目前尚不清楚[9]。本研究對支氣管哮喘患兒進行血清Periostin和ADP水平進行了測定，旨在評價其對預(yù)測其在診斷支氣管哮喘上的臨床價值。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取2017年1月～12月在常州兒童醫(yī)院小兒呼吸科門診或住院就診并治療的40例支氣管哮喘患兒及同期本院健康體檢兒童40例為研究對象。本研究經(jīng)常州兒童醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，且所有受試者均簽署知情同意書。其中，哮喘組男26例，女14例，年齡1～14歲，平均年齡（6.52±4.71）歲，身高62～167 cm，平均身高（102.24±32.52）cm，體重4.8～54.3 kg，平均體重（38.02±15.48）kg均為初發(fā)病例;對照組男20例，女20例，年齡2～14歲，平均年齡（6.91±3.65）歲，身高64～161cm，平均身高（106.56±33.42）cm，體重4.6～52.8 kg，平均體重（39.06±15.17）kg均無過敏性疾病、遺傳代謝病及近期肺部感染等。兩組研究對象在性別、年齡、身高及體重情況比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），可對比。

1.2方法

1.2.1外周血采集? 所有患兒均于診斷第1天及治療后1個月，采集外周靜脈血3 ml，對照組兒童在體檢時采集外周靜脈血3 ml，自然凝固后分離血清，分裝后-86 ℃凍存用于血清Periostin及ADP水平的檢測。

1.2.2血清Periostin、ADP及IgE水平的檢測? ELISA法測定空腹血清Periostin、ADP及IgE水平，美國Awareness Stat Fax 4700酶標(biāo)讀數(shù)儀由圣吉儀器有限公司代理，試劑盒均由奧地利的BIOMEDICA生產(chǎn)，北京榮志海達生物有限公司提供，操作嚴(yán)格按試劑說明書進行。

1.3小兒支氣管哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)? 小兒支氣管哮喘臨床診斷依據(jù)我國2016年修訂的《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》中診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]。急性發(fā)作期是指喘息、咳嗽、氣急和胸悶等癥狀突然發(fā)生，或原有癥狀加重，常伴有呼吸困難。緩解期是指經(jīng)過或未經(jīng)過治療，哮喘癥狀、體征消失，肺功能恢復(fù)到急性發(fā)作前水平，并保持4周以上。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理? 采用SPSS 20.0 軟件包進行統(tǒng)計學(xué)分析。本實驗中計量資料均以（x±s）表示，兩小樣本的比較經(jīng)方差齊性分析后，進一步選擇t檢驗或t'檢驗。多組間比較采用單因素方差分析，治療前后Periostin及ADP水平的比較采用配對t檢驗。依據(jù)血清Periostin及ADP檢測結(jié)果進行分析，繪制ROC曲線圖，用ROC曲線下面積（AUC）來衡量檢測指標(biāo)對支氣管哮喘的預(yù)測情況，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.001表示統(tǒng)計學(xué)意義極顯著。

2 結(jié)果

2.1治療前后血清Periostin、ADP及IgE水平的比較? 哮喘組患兒發(fā)作期及緩解期血清Periostin、ADP及IgE水平均高于對照組，且發(fā)作期高于緩解期，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2血清Periostin和ADP水平預(yù)測支氣管哮喘的最佳診斷截點? 采用血清Periostin和ADP水平診斷支氣管哮喘，其診斷靈敏度分別為85.02%和80.48%，特異度為92.51%和81.98%，當(dāng)血清Periostin和血清ADP分別在147.52 μg/L和20.31 mg/L時，其Youden 值最大，分別為0.7752和0.7504，其AUC分別為0.8262和0.7823，其預(yù)測支氣管哮喘的價值，見表2。兩者聯(lián)檢可將靈敏度和特異性分別提高到87.03%和95.52%，聯(lián)合診斷支氣管哮喘的ROC曲線見圖1。提示兩者聯(lián)檢對預(yù)測支氣管哮喘的價值最高。

2.3支氣管哮喘患兒血清Periostin、ADP水平與IgE的相關(guān)性? 支氣管哮喘患兒血清Periostin水平與IgE有著良好的正相關(guān)性，而血清ADP水平與IgE無明顯相關(guān)性，見表3。

3討論

支氣管哮喘是由氣道炎性細胞、結(jié)構(gòu)細胞和細胞因子等共同參與的一種慢性炎癥性變態(tài)反應(yīng)性疾病，病毒感染、冷空氣刺激或劇烈運動等均可導(dǎo)致可逆性氣流受限而引發(fā)喘息、氣急、胸悶和咳嗽癥狀，長期可使氣道出現(xiàn)不可逆狹窄或氣道重塑。其發(fā)病機制目前尚不明確，主流觀點認為是Th1/Th2平衡失調(diào)。已有研究表明，Periostin主要參與Th2型細胞免疫應(yīng)答，通過促進纖維母細胞的趨化因子生成、嗜酸細胞集聚或激活轉(zhuǎn)化生長因子，引發(fā)肺部炎癥[8]。在體外試驗中，IL-13可刺激上皮細胞分泌Periostin，導(dǎo)致慢性上皮纖維化和氣道彈性降低[11]。本研究結(jié)果表明，無論是哮喘急性發(fā)作期，還是緩解期，血清Periostin水平均明顯升高，且發(fā)作期水平高于緩解期，提示Periostin可能參與Th2介導(dǎo)的氣道炎癥反應(yīng)，在支氣管哮喘的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸中發(fā)揮重要作用。

脂肪組織除了作為能量儲備的器官外，還可分泌大量生物活性物質(zhì)，如ADP、脂肪源性腫瘤壞死因-a、IL-6等。而氣道上皮、肺泡上皮中存在多種脂肪因子受體，脂肪因子可通過自分泌或旁分泌來引起氣道病變。ADP可從脂肪細胞分離而來，哮喘是由多種炎性細胞參與的氣道慢性炎癥，所以ADP在支氣管哮喘的發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮一定的作用[12]。由于支氣管哮喘對患兒的危害極大，而目前能及時預(yù)測支氣管哮喘的特異性指標(biāo)極其有限，目前仍以血常規(guī)中的嗜酸性粒細胞比率、過敏原檢測為主，嚴(yán)重制約其及時診斷和治療。近年來，一些能快速反映支氣管哮喘的一些非創(chuàng)傷性指標(biāo)如Periostin、ADP等，越來越受到臨床的關(guān)注。

本研究結(jié)果表明，支氣管哮喘患兒血清Periostin和ADP水平高于健康兒童，且經(jīng)治療后均下降，提示Periostin和ADP高表達可能與支氣管哮喘的發(fā)病有關(guān)。在考察血清Periostin和ADP作為臨床診斷標(biāo)志物的診斷效能研究中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)血清Periostin和ADP分別在1.935和158.5 U/L時，其Youden 值最大，分別為0.7778和0.7815，其對支氣管哮喘診斷的靈敏度分別為77.78%和81.48%，特異度為84.78%和82.61%，對支氣管哮喘的陽性預(yù)測值分別為0.7500和0.7333，陰性預(yù)測值為0.8667和0.8837;兩個指標(biāo)聯(lián)合檢測對支氣管哮喘的陽性預(yù)測值為0.9259，陰性預(yù)測值為0.9565，提示兩者聯(lián)檢對預(yù)測支氣管哮喘的價值最高。支氣管哮喘組血清Periostin及ADP水平經(jīng)治療后雖有下降，但仍高于對照組，提示支氣管哮喘患兒炎癥較重，對呼吸道的損傷程度更嚴(yán)重的慢性過程，恢復(fù)較為緩慢、費時，與臨床相符。在血清Periostin及ADP與支氣管哮喘常用指標(biāo)IgE的相關(guān)性研究中，血清Periostin與IgE呈高度正相關(guān)，而血清ADP與IgE的相關(guān)性不強，說明血清Periostin用于診斷支氣管哮喘有較強的特異性，而血清ADP用于診斷支氣管哮喘的特異性不強。

綜上所述，動態(tài)監(jiān)測支氣管哮喘患兒血清Periostin及ADP水平有助于判斷支氣管哮喘病情嚴(yán)重程度及治療效果，二者聯(lián)檢對支氣管哮喘的預(yù)測價值更高。

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