不同溫度條件下6—芐氨基嘌呤對(duì)采后西蘭花貨架壽命的影響

尹攀攀+肖麗霞+胡花麗+張雷剛+羅淑芬+李鵬霞

摘要： 分別在10、15、20 ℃，相對(duì)濕度為85%～90%條件下進(jìn)行貨架模擬，以清水處理為對(duì)照，研究了30 mg/L 6-芐氨基嘌呤（6-benzylaminopurine，6-BA）浸泡處理10 min對(duì)采后西蘭花外觀品質(zhì)、色差、葉綠素含量、可溶性蛋白質(zhì)含量和可溶性糖含量的變化，及組織中內(nèi)源6-BA含量的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，6-BA處理能有效地減緩采后西蘭花的黃化和外觀品質(zhì)的下降，顯著延緩西蘭花葉綠素的分解，維持其較高的可溶性蛋白質(zhì)含量及可溶性糖含量；3個(gè)溫度條件下，6-BA含量的變化均為逐漸上升的趨勢(shì)；與對(duì)照相比，10、15、20 ℃條件下，6-BA處理可分別將西蘭花的保鮮期延長(zhǎng)1、3、4 d。結(jié)果表明，6-BA處理可延長(zhǎng)不同貯藏溫度下西蘭花的貯藏壽命。

關(guān)鍵詞： 西蘭花；6-芐氨基嘌呤；溫度；品質(zhì)

中圖分類號(hào)： S635.309+.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2017）22-0225-04

西蘭花（Brassica oleracea L.）別稱青花菜、花椰菜等，為十字花科蕓薹屬甘藍(lán)種中以綠色花球?yàn)楫a(chǎn)品的一個(gè)變種，富含蛋白質(zhì)、碳水化合物、維生素等營(yíng)養(yǎng)素，并具有防癌抗癌的功效，日益受到消費(fèi)者青睞 。西蘭花的食用部分為幼嫩的花球和花梗，采收之后呼吸代謝旺盛，在常溫下易黃化、失水萎蔫、開(kāi)花，嚴(yán)重影響西蘭花的品質(zhì)，對(duì)西蘭花產(chǎn)業(yè)的發(fā)展有很大的影響[3]。因此，研究西蘭花采后保鮮技術(shù)具有重要意義。

6-芐氨基嘌呤（6-benzylaminopurine，6-BA）是一種人工合成的植物生長(zhǎng)激素，主要作為促長(zhǎng)劑和保鮮劑使用，能夠促進(jìn)與調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育，具有防衰老、保鮮作用[4]。Xu等研究表明，200 mg/L 6-BA處理青花菜可顯著抑制葉綠素相關(guān)降解酶活性，從而減緩葉綠素的降解，保持青花菜的表觀顏色，延緩活性成分的下降，維持其營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)[5]。Siddiqui等報(bào)道，200 mg/L 6-BA處理后的花菜，能保持較高生物活性成分含量，維持較高的細(xì)胞膜透性和抗氧化活性[6]。梁鳳玲等也報(bào)道，25 mg/L 6-BA處理可顯著降低青菜貯藏期間的失質(zhì)量率，減緩維生素C的減少，延緩蔬菜葉片褐變，延長(zhǎng)貨架期[7]。另外，Zhang等研究表明，500 mg/L 6-BA可以防止桃采后軟化，降低細(xì)胞膜通透性，保護(hù)細(xì)胞膜免受氧化刺激，保持其良好的外觀品質(zhì)[8]。

目前，有關(guān)6-BA在西蘭花保鮮上的應(yīng)用已有一些報(bào)道[9-11]，但是關(guān)于不同銷售溫度下，6-BA處理對(duì)西蘭花貨架壽命的影響研究鮮有報(bào)道，關(guān)于6-BA處理后西蘭花組織中內(nèi)源6-BA水平的研究未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本試驗(yàn)以新鮮西蘭花為材料，探討6-BA處理對(duì)不同銷售溫度下西蘭花貨架壽命的影響，同時(shí)測(cè)定了6-BA處理后西蘭花組織中內(nèi)源 6-BA 含量的變化規(guī)律，旨在為西蘭花的貨架期保鮮提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料及處理

本試驗(yàn)所用西蘭花購(gòu)買于南京眾彩物流市場(chǎng)，1 h內(nèi)運(yùn)回江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果蔬保鮮與加工實(shí)驗(yàn)室，選取花球鮮綠、無(wú)明顯機(jī)械損傷、成熟度均勻的西蘭花為試驗(yàn)材料。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果，選用30 mg/L 6-BA浸泡處理西蘭花10 min，以清水浸泡作為對(duì)照（CK）。瀝干后，將花球裝入21 L樂(lè)扣箱中，每箱15個(gè)花球，分別于10、15、20 ℃，相對(duì)濕度85%～90%條件下貯藏，處理與對(duì)照組分別定義為：6-BA-10 ℃、CK-10 ℃，6-BA-15 ℃、CK-15 ℃，6-BA-20 ℃、CK-20 ℃。定期取樣用于各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定。

1.2 方法

1.2.1 葉綠素含量測(cè)定

參照李合生等的方法[12]，采用乙醇浸提法測(cè)定葉綠素。稱取樣品1 g，加入10 mL 95%乙醇充分研磨后，浸提至組織變成白色。經(jīng)定容、過(guò)濾后，在波長(zhǎng)663、646、470 nm處測(cè)定吸光度，重復(fù)3次測(cè)定，計(jì)算葉綠素含量。

1.2.2 色差測(cè)定

參照紀(jì)淑娟等的方法[13]，利用CR-400全自動(dòng)測(cè)色色差計(jì)測(cè)定花球的色度，在a*、b*模式下，平行測(cè)定5次。a*表示綠色和紅色（或品紅色）之間的轉(zhuǎn)變程度（負(fù)值表示為綠色，正值表示顏色為紅色或品紅色），b*表示黃色和藍(lán)色之間的轉(zhuǎn)變程度（負(fù)值表示藍(lán)色，正值表示黃色）。

1.2.3 可溶性蛋白質(zhì)含量測(cè)定

參照羅淑芬等的方法[14]，稱取樣品1 g，加10 mL蒸餾水研磨成勻漿后，在4 ℃下 10 000 r/min 離心10 min，取上清液0.05 mL加入0.95 mL蒸餾水和5 mL考馬斯亮蘭G-250試劑搖勻，放置2 min后在595 nm下比色，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線查得可溶性蛋白質(zhì)含量。

1.2.4 可溶性糖含量測(cè)定

采用蒽酮法[15]測(cè)定可溶性糖含量，稱取樣品1 g，加10 mL蒸餾水研磨成勻漿后，塑料薄膜封口，于沸水中提取30 min（提取2次），提取液過(guò)濾入25 mL容量瓶中，反復(fù)沖洗試管及殘?jiān)?，定容至刻度。吸?.5 mL提取液依次加入1.5 mL蒸餾水、0.5 mL蒽酮乙酸乙酯、5 mL濃硫酸，充分混勻后放入沸水浴中保溫1 min。取出后自然冷卻至室溫，于630 nm下比色，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線查得可溶性糖含量。

1.2.5 6-BA含量測(cè)定

參照王麗萍等的方法[16]，利用高效液相色譜法測(cè)定6-BA含量。稱取2 g西蘭花樣品于 50 mL 離心管中，加入8 mL酸化甲醇，常溫超聲浸提30 min。10 000 r/min離心20 min，取上清；再加入3 mL酸化甲醇重復(fù)浸提，離心后合并上清。取5 mL上清用氮吹儀吹至1 mL，過(guò)C18小柱，先用5 mL水洗去水溶性雜質(zhì)，再用甲醇將6-BA洗出，定容至5 mL。用0.45 μm有機(jī)相濾膜過(guò)濾用于液相色譜儀（Agilent 1200）測(cè)定。液相色譜參考條件：色譜柱Xbridge C18（250 mm×4.6 mm×5.0 μm）；流動(dòng)相：A：甲醇 ∶ 乙腈=60 ∶ 5，45%；B：0.1%乙酸，55%；流速1.0 mL/min；柱溫 30 ℃；進(jìn)樣體積20.0 μL；測(cè)定波長(zhǎng)267 nm。endprint

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

所有數(shù)據(jù)均平行測(cè)定3次，數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用Origin 8.5軟件繪制圖表，顯著性采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行分析（α=0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度條件下6-BA對(duì)西蘭花外觀品質(zhì)的影響

在貨架期過(guò)程中，10、15、20 ℃條件下，6-BA處理西蘭花的外觀品質(zhì)均顯著優(yōu)于CK（圖1）。例如，20 ℃條件下，6-BA 處理可延遲西蘭花黃化1～2 d；15 ℃條件下，6-BA處理可延遲西蘭花黃化3～4 d；10 ℃條件下，CK于8 d時(shí)黃化明顯，而6-BA處理于10 d時(shí)仍能保持西蘭花較好的外觀品質(zhì)。

2.2 不同溫度條件下6-BA對(duì)西蘭花葉綠素含量的影響

在整個(gè)貯藏過(guò)程中，不同溫度條件下西蘭花的葉綠素含量均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)（圖2）。同一溫度條件下，處理組西蘭花葉綠素的含量均顯著高于CK（P<0.05）。尤其在10 ℃條件下，貯藏10 d時(shí)，6-BA處理組西蘭花的葉綠素含量約為CK的5倍，從而說(shuō)明6-BA具有良好的護(hù)綠效果。

2.3 不同溫度條件下6-BA對(duì)西蘭花色差的影響

a*值為負(fù)表示綠色，b*值為正表示黃色，正值越大顏色越黃。不同溫度條件下，西蘭花花球a*值和b*值均呈現(xiàn)增大趨勢(shì)，表明西蘭花花球開(kāi)始變黃。所有CK組西蘭花的黃化趨勢(shì)均顯著高于6-BA組（P<0.05），說(shuō)明6-BA處理能有效減緩采后西蘭花的黃化進(jìn)程。其中，20 ℃貯藏西蘭花的黃化最為顯著。例如，貯藏6 d時(shí)，CK-20 ℃組a*值由初始值-12.06增加至-3.96，而6-BA-20 ℃組西蘭花a*值僅為-10.40；CK-20 ℃組b*值比6-BA-20 ℃組西蘭花b*值高12.37（表1）。

2.4 不同溫度條件下6-BA對(duì)西蘭花可溶性蛋白質(zhì)含量的影響

可溶性蛋白質(zhì)的含量隨貨架期時(shí)間的增長(zhǎng)而降低。不同溫度條件下，可溶性蛋白質(zhì)降低速率不同，溫度越高其下降速率越快。20 ℃條件下，西蘭花可溶性蛋白質(zhì)下降速率最快，與0 d相比，在貯藏6 d時(shí)，處理組和CK西蘭花可溶性蛋白質(zhì)含量分別下降了4.89、8.85 mg/g；而貯藏6 d時(shí)，6-BA-10 ℃ 組西蘭花的可溶性蛋白質(zhì)含量?jī)H下降了 0.40 mg/g（圖3）。

2.5 不同溫度條件下6-BA對(duì)西蘭花可溶性糖含量的影響

西蘭花的可溶性糖含量隨著貨架期時(shí)間的延長(zhǎng)持續(xù)下降，在整個(gè)貯藏期間，所有處理組西蘭花的可溶性糖含量均顯著高于CK（P<0.05）。10 ℃條件下，在貯藏8、10 d時(shí)，6-BA 處理組西蘭花的可溶性糖含量分別比CK高出1.93、1.38 mg/g（圖4）?？梢?jiàn)，6-BA處理能顯著延緩西蘭花貯藏期間可溶性糖含量的下降（P<0.05）。

2.6 不同溫度下6-BA對(duì)西蘭花內(nèi)源6-BA含量的影響

基于6-BA對(duì)西蘭花采后保鮮的上述有益影響，進(jìn)一步分[CM（25]析了不同溫度貯藏下6-BA處理對(duì)西蘭花組織內(nèi)源

6-BA含量的影響。不同貯藏溫度條件下，所有西蘭花組織中的6-BA含量均逐漸上升（圖5）。在貯藏前6 d，10、15、20 ℃ 這3個(gè)溫度條件下，處理組與CK的內(nèi)源6-BA含量之間無(wú)顯著差異；在貯藏結(jié)束時(shí)，不同溫度條件下，處理組與CK的內(nèi)源6-BA含量出現(xiàn)差異（P<0.05）。同時(shí)測(cè)定了貯藏于10 ℃ 10 d時(shí)，西蘭花煮熟后組織中的6-BA含量變化，通過(guò)熟制可降低約85%的內(nèi)源6-BA含量（圖6）。

3 討論與結(jié)論

3.1 不同溫度條件下6-BA處理對(duì)西蘭花外觀品質(zhì)的影響

西蘭花頭部為顆粒狀致密排列的小花，采收時(shí)呼吸代謝旺盛，在室溫條件下極易褪綠、黃化，耐貯性差[17]。本試驗(yàn)表明，在10、15、20 ℃貯藏條件下，西蘭花外觀品質(zhì)的主要變化為褪綠、黃化，6-BA處理可有效延緩這3種溫度貯藏下西蘭花組織的黃化，保持其較好的外觀品質(zhì)。在西蘭花采后貯藏過(guò)程中，葉綠素含量的下降是其衰老的重要標(biāo)志[18]。本研究表明，6-BA處理可有效減緩西蘭花葉綠素含量的降低。Clarke等研究也表明，2.21×10-4 mol/L 6-BA能延緩西蘭花葉綠素降解[19]。汪峰等研究也顯示，15 mL/L 6-BA處理能保持食莢豌豆較高的葉綠素含量[20]。6-BA處理對(duì)組織葉綠素降解的這種抑制可能與其抑制葉綠素酶、脫鎂螯合酶和葉綠素降解相關(guān)過(guò)氧化物酶活性有關(guān)[21-22]。同時(shí)，我們觀察到，西蘭花組織葉綠素含量的下降導(dǎo)致其花蕾由深綠色變?yōu)榱咙S色，色差分析表明其組織的a*值和b*值均增加。林本芳等的研究也表明，在貯藏期間西蘭花的b*值呈上升的趨勢(shì)[23]。岳本芳等的研究也發(fā)現(xiàn)，在西蘭花貯藏過(guò)程中其葉綠素會(huì)逐漸分解，同時(shí)a*值上升[24]，本研究結(jié)果與之類似。

3.2 不同溫度條件下6-BA處理對(duì)西蘭花可溶性蛋白質(zhì)及可溶性糖含量的影響

蛋白質(zhì)的降解是果蔬組織衰老的重要標(biāo)志之一，可溶性蛋白質(zhì)含量可以間接地衡量西蘭花體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝活動(dòng)情況[25]。本研究發(fā)現(xiàn)，整個(gè)貯藏期內(nèi)處理組和對(duì)照組的可溶性蛋白質(zhì)含量均表現(xiàn)出下降趨勢(shì)（圖3），與陶煒煜等所進(jìn)行的乙醇處理對(duì)最小加工西蘭花蛋白質(zhì)含量的變化規(guī)律[26]類似?？梢?jiàn)，6-BA處理能夠延緩西蘭花可溶性蛋白質(zhì)的降解。

通常，可溶性糖可作為評(píng)價(jià)西蘭花的風(fēng)味和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的一個(gè)重要指標(biāo)。本研究結(jié)果表明，隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，西蘭花組織中的可溶性糖含量下降，這與敖靜等不同薄膜自發(fā)氣調(diào)包裝對(duì)西蘭花的保鮮效果的研究[27]類似。伍新齡等研究也證明，在貯藏期間西蘭花可溶性總糖含量逐漸降低[28]。

3.3 外源6-BA處理對(duì)采后西蘭花內(nèi)源6-BA含量變化的影響

目前，6-BA已被美國(guó)環(huán)境保護(hù)署認(rèn)證作為植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，并且在國(guó)際現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中，6-BA被豁免最大殘留限量，因而可作為生物防腐保鮮劑在食品領(lǐng)域應(yīng)用[29-30]。盡管如此，本試驗(yàn)分析了不同貯藏溫度下，西蘭花組織內(nèi)源6-BA含量的變化規(guī)律。研究發(fā)現(xiàn)，在整個(gè)貯藏過(guò)程中，不同溫度條件下，6-BA含量的變化均為逐漸上升的趨勢(shì)；熟制過(guò)后，能有效降低西蘭花內(nèi)源6-BA水平。endprint

綜上所述，6-BA處理可以更有效地減緩采后西蘭花的黃化和外觀品質(zhì)的下降，顯著減緩西蘭花葉綠素分解，維持其較高的可溶性蛋白質(zhì)及可溶性糖含量，因此延緩了西蘭花貯藏品質(zhì)的下降。總之，較對(duì)照相比，10、15、20 ℃條件下，6-BA 處理可使西蘭花的保鮮期分別延長(zhǎng)1、3、4 d。

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