幾種殺蟲劑對酢漿草如葉螨的毒力及增效作用研究

楊麗紅，陳光升，賈小東，蘇瑞軍，朱利君

(綿陽師范學院生命科學與技術(shù)學院，四川綿陽 621006)

幾種殺蟲劑對酢漿草如葉螨的毒力及增效作用研究

楊麗紅*，陳光升，賈小東，蘇瑞軍，朱利君

(綿陽師范學院生命科學與技術(shù)學院，四川綿陽 621006)

采用藥膜法，研究了甲氰菊酯、氧樂果及毒死蜱對酢漿草如葉螨的毒力及增效作用。結(jié)果表明，酢漿草如葉螨對氧樂果最敏感，LC50為28.48 mg/L，甲氰菊酯次之，LC50為394.55 mg/L，毒死蜱最不敏感，LC50高達5876.43 mg/L；增效試驗表明，磷酸三苯酯(TPP)、增效醚(PBO)及順丁烯二酸二乙酯(DEM)對3種殺蟲劑均有一定的增效作用，總體上，TPP的增效最好，PBO次之，DEM增效作用稍差。因此，氧樂果和甲氰菊酯對酢漿草如葉螨有較好防治作用，應(yīng)減少毒死蜱使用；酯酶、多功能氧化酶及谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶是該螨最重要的解毒代謝酶。

殺蟲劑；酢漿草如葉螨；毒力；增效劑

紅花酢漿草Oxaliscorymbosa花色鮮艷、花期長、生長迅速且易于成活，現(xiàn)作為園林綠化新秀被廣泛應(yīng)用(秦雪峰等，2013)；據(jù)記載，酢漿草屬植物全草可入藥，具有清熱解毒、利濕消腫、清肺化痰的功效，對扁桃體炎、肺炎及肝炎等有療效(趙躍剛等，2011)；紅花酢漿草不僅花期長，而且花蜜和花粉豐富，蜜質(zhì)優(yōu)良，是優(yōu)良的蜜源植物之一(張中印等，2005)。酢漿草如葉螨Tetranychiinahatri，又名酢漿草巖螨，俗稱酢漿草紅蜘蛛，主要危害酢漿草屬植物，尤以危害紅花酢漿草為甚(鄭興國和洪曉月，2007)。該螨主要刺吸植物葉片汁液，造成植株枯黃，嚴重發(fā)生時，引起酢漿草“光桿”現(xiàn)象，影響植株光合作用。由于酢漿草的經(jīng)濟價值日益受到重視，種植面積隨之擴大，酢漿草如葉螨的危害愈來愈重，引起人們關(guān)注。

酢漿草如葉螨的研究進展有過較全面的報道(鄭興國和洪曉月，2007)。目前，對酢漿草如葉螨的研究主要集中在生物學特性及藥劑防治方面。藥劑防治方面，以化學防治為主，取得了較好效果(王答龍，2007；吳佩芳等，2009；秦雪峰等，2014)，但化學防治極易使該螨產(chǎn)生抗藥性(尤喜妹和梁國輝，2011)，給防治工作帶來嚴重阻礙。采用西北107種植物提取物對該螨的毒力作用研究(霍彥波等，2013)，為該螨的防治開辟了新途徑，具有重要的潛在研究價值。增效劑是一類對害蟲(螨)沒有毒性或毒性很小的一類化合物，但可抑制害蟲(螨)體內(nèi)的解毒代謝酶活性。增效醚(Piperonyl butoxide，PBO)、順丁烯二酸二乙酯(diethyl maleate，DEM)及磷酸三苯酯(Triphenyl phosphate，TPP)分別為多功能氧化酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶及酯酶的抑制劑，使殺蟲(螨)劑的作用增強。

通?？赏ㄟ^增效作用試驗，診斷害蟲(螨)對殺蟲(螨)劑的解毒代謝機制(Dalzieletal.，2009)。藥劑對害蟲(螨)的毒力回歸方程式，是衡量防治效果的重要參考依據(jù)。本文在前人對酢漿草如葉螨的研究基礎(chǔ)上，擬建立氧樂果、甲氰菊酯及毒死蜱等3種常用殺蟲劑對該螨的毒力回歸方程式，并通過增效試驗，診斷酢漿草如葉螨對這3種常用殺蟲劑的解毒代謝機制，為該螨的防治工作提供客觀的參考標準，以期為農(nóng)藥開發(fā)提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 供試螨源

酢漿草如葉螨采自四川省綿陽市高新區(qū)綠化帶的紅花酢漿草上，帶回實驗室飼養(yǎng)，飼養(yǎng)寄主為盆栽紅花酢漿草。

1.2 供試藥劑

20%甲氰菊酯乳油(湖北老河口富靈農(nóng)藥有限責任公司)；10%氧樂果乳油(山西省霍州市綠洲農(nóng)藥廠)；480 g/L毒死蜱乳油(山東省德州祥龍生化有限公司)；磷酸三苯酯(TPP，成都市科龍化工試劑廠)，分析純；96%順丁烯二酸二乙酯(DEM，成都格雷西亞化學技術(shù)有限公司)；95%增效謎(PBO，西亞試劑公司)；N,N-二甲基甲酰胺(DMF，成都市科龍化工試劑廠)，分析純。

1.3 研究方法

1.3.1藥膜制備

參照文獻(van Leeuwenetal.，2004；陳秋雙等，2012)，制作藥膜。將甲氰菊酯、氧樂果及毒死蜱分別用蒸餾水稀釋成5個濃度梯度，分別取1.5 mL加入到2 mL的離心管中，輕輕搖動，使之在管內(nèi)形成均勻藥膜，倒掉多余的液體，晾干，每個濃度處理5個重復，對照組用蒸餾水處理離心管。

1.3.2試蟲處理

向每個制作好的藥膜管接入30頭健康一致的雌成螨，在室溫條件下放置24 h后檢查螨的死亡情況。死亡標準為：用毛筆尖輕觸螨體，完全不動者視為死亡。以對照死亡率小于10%為有效測定，并用對照死亡率進行校正。

1.3.3增效劑處理

分別將增效劑(TPP、DEM和PBO)用N,N-二甲基甲酰胺(DMF)配成10 g/L的溶液。分別在各濃度梯度農(nóng)藥中加入一定量的增效劑，保證增效劑的濃度均為0.1 g/L，使增效劑對每個濃度殺蟲劑的增效作用一致(王圣印等，2012)，對照組的離心管用1% DMF進行處理。藥膜的制作、試蟲處理同1.3.1和1.3.2。

1.3.4數(shù)據(jù)分析

用SPSS 16.0軟件進行數(shù)據(jù)分析，分別求出各農(nóng)藥單劑及農(nóng)藥與增效劑混劑對酢漿草如葉螨的毒力直線回歸方程，計算相應(yīng)的LC50值。按Brindley的方法計算增效比(Synergy ratio，SR)(Brindley，1977)：增效比(SR)=單劑的LC50值/(單劑+增效劑)的LC50值。

2 結(jié)果與分析

2.1 甲氰菊酯對酢漿草如葉螨的毒力及增效作用

在無增效劑時，甲氰菊酯單劑對酢漿草如葉螨的LC50為394.55 mg/L，加入增效劑磷酸三苯酯(TPP)后，LC50降為217.60 mg/L，增效比為1.81(表1)，說明TPP對甲氰菊酯有較好的增效作用，提示TPP可抑制酢漿草如葉螨體內(nèi)酯酶的解毒代謝活性；PBO對甲氰菊酯也有一定的增效作用，LC50降低為340.54 mg/L，增效比為1.16，說明多功能氧化酶也參與了甲氰菊酯的代謝；DEM對甲氰菊酯的增效作用最弱，LC50僅稍有降低，為382.43 mg/L，增效比僅為1.03，提示谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶對甲氰菊酯的代謝能力相對較弱。

2.2 氧樂果對酢漿草如葉螨的毒力及增效作用

在無增效劑時，氧樂果單劑對酢漿草如葉螨的LC50為28.48 mg/L，加入TPP后，LC50降為15.06 mg/L(表1)，增效比為1.90，說明TPP對氧樂果亦有較好的增效作用，提示酯酶是酢漿草如葉螨體內(nèi)重要的解毒代謝酶，參與毒物氧樂果的分解代謝作用；DEM對氧樂果也有一定的增效作用，LC50降低為22.02 mg/L，增效比為1.29，說明該螨體內(nèi)的谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶也參與了氧樂果的代謝；PBO對甲氰菊酯的增效作用最弱，LC50僅稍有降低，為27.10 mg/L，增效比僅為1.05，提示多功能氧化酶對氧樂果的代謝能力不如前二者。

2.3 毒死蜱對酢漿草如葉螨的毒力及增效作用

在無增效劑時，毒死蜱單劑對酢漿草如葉螨的LC50為5876.43 mg/L，加入TPP后，LC50降為3221.66 mg/L(表1)，增效比為1.82，說明TPP對毒死蜱有較好的增效作用，再次提示酯酶是酢漿草如葉螨體內(nèi)重要的解毒代謝酶，可很好地分解代謝毒死蜱；PBO對毒死蜱的增效作用也較好，LC50為3466.03 mg/L，增效比為1.70，提示多功能氧化酶與毒死蜱的代謝也十分密切。DEM對毒死蜱也有一定的增效作用，LC50降低為5257.73 mg/L，增效比為1.12，說明谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶對毒死蜱的代謝能力不及酯酶和多功能氧化酶。

表1 3種殺蟲劑對酢漿草如葉螨的毒力及增效作用

3 結(jié)論與討論

甲氰菊酯、氧樂果和毒死蜱是常用的殺蟲劑，常被用于葉螨的化學防治。本研究采用藥膜法研究了幾種常用殺蟲劑對酢漿草如葉螨的敏感性，根據(jù)研究結(jié)果可知，毒死蜱對酢漿草如葉螨的防效較差，致死中濃度LC50高達5876.43 mg/L，遠高于氧樂果和甲氰菊酯的LC5028.48 mg/L和394.55 mg/L，可見，這3種常用殺蟲劑中，酢漿草如葉螨對氧樂果的敏感性最高，甲氰菊酯次之，毒死蜱敏感性最低。甜菜夜蛾Spodopteraexigua及大螟Sesamiainferens的室內(nèi)毒力研究均表明，毒死蜱對其毒力明顯較低(馬沖等，2012；楊國慶等，2014)；氧樂果是防治害蟲敏感性較高的藥劑之一(衡雪梅等，2016)；氧樂果和甲氰菊酯對朱砂葉螨相對敏感品系的LC50分別為 67.86 mg/L 和600.36 mg/L，是比較敏感的藥劑(陳秋雙等，2012)，說明氧樂果和甲氰菊酯對葉螨有較好的防治作用。因此，在酢漿草如葉螨日常防治中，應(yīng)該盡量減少使用毒死蜱。氧樂果、甲氰菊酯和其它殺蟲劑輪換使用，減緩該螨抗藥性產(chǎn)生。

酯酶、多功能氧化酶及谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶是生物體內(nèi)3種重要的解毒代謝酶，TPP、PBO和DEM可分別抑制這3種酶的代謝活性，提高殺蟲劑的毒力。本研究發(fā)現(xiàn)，TPP、PBO和DEM對甲氰菊酯、氧樂果和毒死蜱均有不同程度的增效作用，TPP的增效作用最明顯，PBO次之，DEM再次之，說明酢漿草如葉螨體內(nèi)的酯酶、多功能氧化酶及谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶具有重要的解毒代謝作用。柑橘全爪螨Panonychuscitri田間抗藥性監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，TPP和PBO對甲氰菊酯均有明顯的增效作用(劉永華等，2010)；二斑葉螨T.urticae的抗性研究也表明，多功能氧化酶介導了該螨對甲氰菊酯抗藥性的產(chǎn)生(高新菊和沈慧敏，2011)。因此，TPP作為酯酶的抑制劑、PBO作為多功能氧化酶的抑制劑，在農(nóng)藥開發(fā)中可添加使用，提高甲氰菊酯藥劑的殺螨活性。陳秋雙等(2012)研究也發(fā)現(xiàn)，TPP、PBO和DEM均可提高甲氰菊酯對朱砂葉螨的殺螨活性，與本研究3種增效劑的增效作用基本一致。因此，在開發(fā)殺蟲(螨)農(nóng)藥時，可添加抑制酯酶、多功能氧化酶及谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的增效劑TPP、PBO和DEM。

3種常用殺蟲劑中，以氧樂果對酢漿草如葉螨的活性最高，甲氰菊酯次之，毒死蜱最差；增效作用研究表明，TPP、PBO及DEM對3種殺蟲劑都有增效作用，表明酯酶、多功能氧化酶及谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶是該螨重要的解毒代謝酶。

致謝：綿陽師范學院生命科學與技術(shù)學院本科生曹秀梅、陳妮、宋敏、王訊、曾媛媛、趙佳、向苓及胡昌濱同學在試螨飼養(yǎng)及試驗工作中付出了辛勤勞動，特此感謝！

)

Brindley WA. Synergist, differences as an alternate interpretation of carbaryl-piperonyl butoxide toxicity data [J].EnvironmentalEntomology, 1977, 6 (6): 885-888.

Chen QS, Zhao S, Zou J,etal. Monitoring of acaricide resistance inTetranychuscinnabarinus[J].ChineseJournalofAppliedEntomology, 2012, 49 (2): 364-369. [陳秋雙, 趙舒, 鄒晶, 等. 2012. 朱砂葉螨抗藥性監(jiān)測[J]. 應(yīng)用昆蟲學報, 2012, 49 (2): 364-369]

Dalziel AC, Rogers SM, Schulte PM.Linking genotypes to phenotypes and fitness: How mechanistic biology can inform molecular ecology [J].MolecularEcology, 2009, 18 (24): 4997-5017.

Gao XJ, Shen HM. Research selection with fenpropathrin and the change of detoxification enzyme activities inTetranychusurticaeKoch (Acari: Tetranychidae) [J].ActaEntomologicaSinica, 2011, 54 (1): 64-69. [高新菊, 沈慧敏. 二斑葉螨對甲氰菊酯的抗性選育和解毒酶活力變化[J]. 昆蟲學報, 2011, 54 (1): 64-69]

Hen XM, Zhang ZG, Wang LX. 12 kinds of insecticides on the test of pontaniadolichura efficacy [J].Pesticide, 2016, 2: 150-152[衡雪梅, 張志剛, 王良緒. 12種殺蟲劑對柳厚壁葉蜂藥效試驗[J]. 農(nóng)藥, 2016, 2: 150-152]

Hu J, Wang C, Wang J,etal. Monitoring of resistance to spirodiclofen and five other acaricides inPanonychuscitricollected from Chinese citrus orchards [J].PestManagementScience, 2010, 66 (9): 1025-1030.

Huo YB, He J, Ma ZQ,etal. Acaricidal activities of acetone extracts from 107 plant species forTetranychinahatri[J].ActaAgrestiaSinica, 2013, 21 (6): 1200-1207. [霍彥波, 何軍, 馬志卿, 等. 107種植物丙酮提取物對酢漿草如葉螨的毒殺活性[J]. 草地學報, 2013, 21 (6): 1200-1207]

Liu YH, Jiang HB, Yuan ML,etal. Resistance monitoring and synergism on four acaricides againstPanonychuscitri[J].JournalofFruitScience, 2010, 27 (4): 570-574. [劉永華, 蔣紅波, 袁明龍, 等. 柑橘全爪螨對4種殺螨劑的抗性監(jiān)測及增效作用[J]. 果樹學報, 2010, 27 (4): 570-574]

Ma C, Lu XT, Liu Z,etal. Sublethal effects of chlorantraniliprol and chlorpyrifos on the growth, development and fecundity ofSpodopteraexigua[J].PlantProtection, 2012, 38 (4): 38-41. [馬沖, 路興濤, 劉震, 等. 氯蟲苯甲酰胺、毒死蜱亞致死劑量對甜菜夜蛾生長發(fā)育和繁殖力的影響[J]. 植物保護, 2012, 38 (4): 38-41]

Qin XF, Du KS, Lv WB,etal. Effiaccy test of four acaricides to controlPetrobia(Tetranychina)hatri(Ewing) [J].JournalofHenanInstituteofScienceandTechnology, 2014, 42 (4): 38-40. [秦雪峰, 杜開書, 呂文彥, 等. 四種藥劑防治酢漿草巖螨藥效試驗[J]. 河南科技學院學報, 2014, 42 (4): 38-40]

Qin XF, Wang GC, Wang LH,etal. Threshold temperature and effective accumulated temperature ofPetrobia(Tetranychina)hatri[J].PlantProtection, 2013, 39 (4): 103-105. [秦雪峰, 王國昌, 王劉豪, 等. 酢漿草巖螨的發(fā)育起點溫度和有效積溫[J]. 植物保護, 2013, 39 (4): 103-105]

馬克思指出，人們的“需要即他們的本性”，“你自己的本質(zhì)即你的需要”。所以說，需要是工程師恪守工程倫理，進行工程創(chuàng)新的動力，是他們實現(xiàn)全面發(fā)展的源泉。工程師從事工程活動不僅為了滿足自己生活資料的需要，而且也是為了滿足精神層面和社會層面的需要?；诖?，在工程倫理教育中，要偏重于精神的需要，培養(yǎng)工程師的“普世”情懷，讓他們在工程活動中心系“廣大民眾”，以民眾的最大福祉為工程活動的出發(fā)點。讓他們的心理需要和心理特征與大眾融合，讓他們的活動迎合社會的基本價值觀念，使工程活動在滿足人類需要的同時，實現(xiàn)工程最大的“善”，即工程與人、自然、社會的和諧共生。這才是工程倫理教育最終的歸宿。

Van Leeuwen T, Stillatus V, Tirry L. Genetic analysis and cross-resistance spectrum of a laboratory-selected chlorfenapyr resistant strain of two-spotted spider mite (Acari: Tetranychidae) [J].ExperimentalandAppliedAcarology, 2004, 32 (4): 249-261.

Wang DL. Effect of several miticides on controllingOxaliscorymbosarock acarid under field condition [J].GrasslandandTurf, 2007, 5: 60-61, 64. [王答龍. 幾種殺螨劑防治紅花酢漿草巖螨田間試驗[J]. 草原與草坪, 2007, 5: 60-61, 64]

Wang SY, Yu Y, Liu YJ. Cross-resistance and biochemical resistance mechanisms of emamectin-benzoate resistant population ofFrankliniellaoccidentalis[J].ActaPhytophylacicaSinica, 2012, 39 (2): 159-166. [王圣印, 于毅, 劉永杰. 西花薊馬抗甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽種群的交互抗性與生化抗性機制[J]. 植物保護學報, 2012, 39 (2): 159-166]

Wu PF, Chen W, Wu XY.Efficacy of several pesticides againstPtrobiabarihatrionOxaliscorybasa[J].AgrochemicalsResearch&Application, 2009, 4: 32-34. [吳佩芳, 陳偉, 吳雪源. 幾種藥劑對紅花酢漿草巖螨的防治效果評價[J]. 農(nóng)藥研究與應(yīng)用, 2009, 4: 32-34]

Yamamoto A, Yoneda H, Hatano R,etal. Genetic analysis of hexythiazox resistance in the citrus red mite,Panonychuscitri(McGregor) [J].JournalofPesticideScience, 1995, 20 (4): 513-519.

You XM, Liang GH. Study on the resistance ofPetrobiaharti[J].ModernAgriculturalScienceandTechnology, 2011, 5: 157. [尤喜妹, 梁國輝. 酢漿草巖螨抗藥性研究[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技, 2011, 5: 157]

Zhang ZY, Liu HF, Yu H,etal. Observation and study on nectar source ofOxaliscorybosa[J].JournalofBee, 2005, 11: 7-8. [張中印, 劉荷芬, 余昊, 等. 銅錘草蜜源的觀察與研究[J]. 蜜蜂雜志, 2005, 11: 7-8]

Zhao YG, Wang LS, Fan YJ,etal. Comparison on the contents of the total flavonoid in herbaOxalidiscomiculatae[J].LishizhenMedicineandMateriaMedicaResearch, 2011, 22 (1): 81-82. [趙躍剛, 王隸書, 等. 酢漿草藥材中總黃酮的含量測定[J]. 時珍國醫(yī)國藥, 2011, 22 (1): 81-82]

Zheng XG, Hong XY. An overview of the research on the oxalis spider mite [J].ChineseBulletinofEntomology, 2007, 44 (5): 647-651. [鄭興國, 洪曉月. 酢漿草如葉螨研究概述[J]. 昆蟲知識, 2007, 44 (5): 647-651]

Researchontoxicitiesandsynergismofseveralpesticidesagainsttheoxalisspidermite,Tetranychinahatri

YANG Li-Hong*, CHEN Guang-Sheng, JIA Xiao-Dong, SU Rui-Jun, ZHU Li-Jun

(College of Life Science and Biotechnology, Mianyang Teachers’ College, Mianyang 621006, Sichuan Province, China)

Using the residual contact vial method, the toxicities and synergism of fenpropathrin, omethoate and chlorpyrifos against the oxalis spider mite,Tetranychinahatriwere studied. The results showed thatT.hatriwas the most susceptible to omethoate and LC50was 28.48 mg/L, fenpropathrin followed and the LC50was 394.55 mg/L, but chlorpyrifos was worst and LC50was 5876.43 mg/L. The synergism study results showed that the toxicities of fenpropathrin, omethoate and chlorpyrifos to the mite increased by TPP, PBO and DEM on some extent. In total, the synergism of TPP was best, PBO followed, and DEM was worst. So, omethoate and fenpropathrin have better control effect onT.hatri, but chlorpyrifos should be used as little as possible. Esterases and mixed-functional oxidases are the most important detoxification enzymes in the mite.

Pesticides;Tetranychinahatri; toxicities; synergists

楊麗紅，陳光升，賈小東,等.幾種殺蟲劑對酢漿草如葉螨的毒力及增效作用研究[J].環(huán)境昆蟲學報，2017,39(6):1382-1386.

Q965.9;S433.7

A

1674-0858(2017)06-1382-05

四川省教育廳項目(12ZA078)；綿陽師范學院項目(2012A15，QD2013A06)

楊麗紅，女，1974年生，陜西漢中人，博士，副教授，研究方向為昆蟲學及有害生物控制，E-mail：yanglihong75@163.com

*通信作者Author for correspondence, E-mail: yanglihong75@163.com

Received: 2016-07-12; 接受日期Accepted: 2016-10-21