血清維生素A、E水平及胎兒纖維連接蛋白與胎膜早破的相關(guān)性①

張 燕，孟祥楠，邢天容，張丹鳳

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

血清維生素A、E水平及胎兒纖維連接蛋白與胎膜早破的相關(guān)性①

張 燕，孟祥楠，邢天容，張丹鳳

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：觀察妊娠婦女血清中維生素A和維生素E的含量以及胎兒纖維連接蛋白(f FN )水平檢測，探討血清維生素A和維生素E及胎兒纖維連接蛋白(f FN )與胎膜早破的相關(guān)性。方法：收集佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科病房及門診孕婦，診斷胎膜早破；符合第8版《婦產(chǎn)科學(xué)》中有關(guān)胎膜早破妊娠婦女的病例資料100例，孕周為28～36周，胎膜早破孕婦 50例 , 作為觀察組 ；同時選擇相同期正常孕婦50例, 作為對照組。兩組孕婦均進(jìn)行血清維生素A、E水平及胎兒纖維連接蛋白(f FN )的水平檢測。結(jié)果:觀察組孕婦的血清維生素A、E水平明顯低于對照組妊娠孕婦，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，胎兒纖維連接蛋白(f FN )測定水平明顯高于對照組妊娠孕婦，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論： 對孕期婦女進(jìn)行血清維生素A、E及胎兒纖維連接蛋白(f FN )水平的預(yù)防性檢測了解機(jī)體氧化狀態(tài)，減少胎膜早破的發(fā)生。

維生素A；維生素E；胎兒纖維連接蛋白(f FN )；胎膜早破

胎膜早破會增加母體感染的風(fēng)險，同時會造成嚴(yán)重的并發(fā)癥，也會對患者精神及心理造成嚴(yán)重的不良影響等。本研究檢測胎膜早破孕婦血清維生素A、維生素E的含量及胎兒纖維連接蛋白(f FN )測定,討論三者之間與胎膜早破的相關(guān)性。及早診斷和預(yù)防胎膜早破，對胎膜早破患者進(jìn)行相應(yīng)干預(yù)措施，盡可能改善和減少胎膜早破的不良妊娠結(jié)局的發(fā)生。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集本院2015-01～2016-09產(chǎn)科收治的孕婦,胎膜早破孕婦50例作為觀察組,年齡20～41歲。同時選擇同期在本院的正常妊娠婦女50例,作為對照組,年齡20～41歲；孕周28～36周；兩組年齡、孕產(chǎn)次、孕周等一般情況無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

1.2 診斷和排除標(biāo)準(zhǔn)

診斷標(biāo)準(zhǔn)：觀察組所有的受孕婦女全部按照第8版婦產(chǎn)科教材胎膜早破的診斷標(biāo)準(zhǔn)；自覺有流液自陰道流出；陰道液pH值為6.5及以上；仔細(xì)核對產(chǎn)婦孕周；排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)排除妊娠并發(fā)癥；無臨床感染征象；(2)既往孕前及整個孕期未服用過類似維生素類營養(yǎng)物質(zhì)、無X線等有害物質(zhì)接觸史(3)兩組孕婦營養(yǎng)狀態(tài)中等；(4)在取樣前無性生活，無任何陰道操作；對羊膜破裂、中度到重度陰道炎癥的孕婦不能陰道取樣。

1.3 試劑及設(shè)備

本研究用高效液相色譜熒光檢測血清維生素 A、E 濃度，內(nèi)標(biāo)法定量計(jì)算含量，檢測儀器和試劑(檢測單位：黑龍江和合醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所 日本島津制作所)試劑為美國ThermoFisher公司 標(biāo)準(zhǔn)品：美國Sigma-Aldrich公司；胎兒纖維連接蛋白(f FN )采取定性檢測，試劑盒由北京熱景生物技術(shù)有限公司提應(yīng)。

1.4 樣本采集及處理

1.4.1 樣本采集：采靜脈血2mL，離心，取出血清后冷凍保存。胎兒纖維連接蛋白(f FN )在陰道消毒或其他操作前取樣，取樣動作要輕，于陰道后穹窿處取樣，必要時需避開黏稠分泌物取樣。充分浸潤后取出，來回震蕩，取出拭子后蓋上蓋子。

1.4.2 樣本處理：血清樣本應(yīng)避光解凍，放置至室溫輕微的搖晃振蕩后進(jìn)行短暫離心；用移液器定量移取血清樣本置于2mL圓底離心管中，加入0.2mL無水乙醇，搖晃均勻；放入正己烷混勻，特定溫度下離心，吸取上層液體，吹干、復(fù)溶。胎兒纖維連接蛋白(f FN )樣本將單人份包裝平衡至室溫(20～25℃)。取出150UL或者使用滴管滴4滴標(biāo)本加入加樣孔中，隨后判斷結(jié)果。注：(1)整個過程要保持樣本不要過于稠厚，吸取過程中有氣泡產(chǎn)生；取樣后如若未及時檢測，則需放于特定溫度下保存。(2)使用滴管滴加樣本時，請盡量保持滴管垂直滴加；(3)若樣本在檢測卡上出現(xiàn)無法流動的情況，可滴加1～2滴試劑盒中配備的稀釋液。

1.5 判斷標(biāo)準(zhǔn)

血清維生素A參考值范圍0.3～0.7mg/L，維生素 E 參考值范圍5～20mg/L[1]，維生素 A、E 低于此范圍診斷缺乏。f FN定性檢測結(jié)果判定，同時出現(xiàn)兩條線則為fFN陽性，如果只出現(xiàn)一條線則為陰性。質(zhì)控線和檢測線均呈現(xiàn)，則為結(jié)果為陽性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

觀察組患者血清維生素A、維生素E水平明顯低于對照組(P<0.05)。 見表1；觀察組患者胎兒纖維連接蛋白(f FN )測定水平明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表2。

表1 兩組妊娠婦女血清維生素A及維生素E水平檢測

表2 兩組妊娠婦女胎兒纖維連接蛋白(f FN)測定水平比較(n=50)

3 討論

發(fā)生在妊娠37周前出生的嬰兒，早產(chǎn)風(fēng)險仍然是這一時期最危險的，與新生兒和產(chǎn)婦的發(fā)病率和死亡率的預(yù)后密切相關(guān)[2]。破水使病菌入侵后能夠沿生殖道進(jìn)入母體血液循環(huán)中和宮腔內(nèi)，從而增加了母體感染和胎兒的感染[3]；很難對個別婦女的風(fēng)險進(jìn)行準(zhǔn)確的估計(jì)，目前胎膜早破的發(fā)生機(jī)理和病因還尚不明確,根據(jù)第8版婦產(chǎn)科教材引起胎膜早破原因可能為以下幾點(diǎn)：①孕婦在圍產(chǎn)期發(fā)生創(chuàng)傷。②孕婦在圍產(chǎn)期感染。③胎兒的先露部下降不理想。④孕婦的羊膜腔壓力增高。⑤孕婦的宮頸內(nèi)口松弛。盡管未足月前破水的頻率及潛在病理生理機(jī)制目前是未知的，一個不正確的診斷，會導(dǎo)致不適當(dāng)?shù)母深A(yù)措施；胎膜的機(jī)械強(qiáng)度是由于一個細(xì)胞外膠原基質(zhì)產(chǎn)生的。有研究指出婦女胎膜早破與在羊膜膠原總含量降低和體內(nèi)的活性氧含量相關(guān)，活性氧可以激活膠原降解和損害胎膜的細(xì)胞膜的完整性，會對正常機(jī)體造成嚴(yán)重的損害[4]。維生素E是抗氧化劑同時可以使性激素的分泌增加，對生育能力有一定的影響[5]。有研究顯示維生素A可以抑制膜脂質(zhì)過氧化，同時也具有抗氧化作用和清除體內(nèi)自由基功能。兩種之間又具有協(xié)同效應(yīng)，本研究中在胎膜早破孕婦組中血清維生素A、維生素E水平明顯低于未破水正常孕產(chǎn)婦組(P<0.05)，說明胎膜早破孕婦體內(nèi)維生素A、維生素E水平降低，更容易發(fā)生破水。

研究表明金屬基質(zhì)蛋白酶MMP-9在未分娩前其表達(dá)量較低，主要表達(dá)于絨毛滋養(yǎng)層，在分娩時其表達(dá)量明顯上調(diào)，進(jìn)而降解Ⅳ型膠原(胎膜的韌性是由于細(xì)胞外膠原基質(zhì)決定的)[6]。在宮頸成熟和擴(kuò)張還有胎膜破裂中起到關(guān)鍵作用，破水時羊膜總膠原含量與減少，發(fā)動分娩引起早產(chǎn)，MMP-9水平升高[7，8]。胎兒纖維連接蛋白(f FN)屬于人體纖維蛋白，主要由絨毛和蛻膜細(xì)胞外的基質(zhì)產(chǎn)生，高濃度存在于胎盤組織、羊水中，而構(gòu)成胎膜細(xì)胞外基質(zhì)的種種膠原蛋白是保持胎膜的韌性和相對完整的主要成分，妊娠期間由滋養(yǎng)層細(xì)胞產(chǎn)生，主要位于胎盤胎膜與子宮壁交界處，可將胎兒與子宮內(nèi)膜黏連在一起[9]。本試驗(yàn)中兩組f FN水平，破水組明顯升高，統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義(P<0.05)。此結(jié)果說明在胎膜早破孕婦組中胎兒纖維連接蛋白(f FN)顯著增高；有研究表明使抗氧化劑的濃度升高可以使胎膜早破孕婦體內(nèi)的基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1、MMP-2、MMP-9)酶的活動性和相對濃度下降[10]，本實(shí)驗(yàn)中胎兒纖維連接蛋白(f FN)測定水平升高，說明胎膜早破孕婦體內(nèi)發(fā)生的氧化反應(yīng)可能引起MMP-9水平升高從而使f FN水平升高，本研究與其研究結(jié)果一致，氧化應(yīng)激的增加可能會加速過早的細(xì)胞衰老，衰老相關(guān)的炎癥和蛋白水解，這可能會使他們破裂；氧化應(yīng)激也可引起不良妊娠結(jié)局，因此，維生素A、E相互協(xié)同保持機(jī)體氧化與抗氧化的平衡,避免機(jī)體損傷,同時維持胎膜的韌性和相對完整,因此對孕期孕婦進(jìn)行預(yù)防性檢測，根據(jù)兩者下降程度適量補(bǔ)充減少并發(fā)癥，使孕婦的生活質(zhì)量提高。對于維生素A、E和f FN三者之間的相互作用需要日后更加深入的研究，本次實(shí)驗(yàn)樣本量少，存在一定的誤差，這些都是在日后研究中亟待改進(jìn)的地方。

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張燕(1973～)女，黑龍江佳木斯人，碩士，副主任醫(yī)師，碩士研究生導(dǎo)師。

孟祥楠(1988～)女，黑龍江肇東人，在讀碩士研究生。E-mail:496876245@qq.com。

R714.43+3

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1008-0104(2017)06-0109-02

2016-11-17)