桂枝湯加減對(duì)慢性特發(fā)性蕁麻疹的療效及血清MMP-9和25羥維生素D的檢測(cè)

李春鳥 王 鎦

(1 陜西省咸陽(yáng)市楊凌示范區(qū)醫(yī)院皮膚科，咸陽(yáng)，712100； 2 陜西省咸陽(yáng)市第一人民醫(yī)院皮膚科，咸陽(yáng)，712000)

桂枝湯加減對(duì)慢性特發(fā)性蕁麻疹的療效及血清MMP-9和25羥維生素D的檢測(cè)

李春鳥1王 鎦2

(1 陜西省咸陽(yáng)市楊凌示范區(qū)醫(yī)院皮膚科，咸陽(yáng)，712100； 2 陜西省咸陽(yáng)市第一人民醫(yī)院皮膚科，咸陽(yáng)，712000)

目的：探討桂枝湯加減對(duì)慢性特發(fā)性蕁麻疹的臨床療效，同時(shí)觀察期對(duì)患者外周血清基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)和25羥維生素D濃度的影響。方法：選取2015年1月至2016年12月陜西省楊凌示范區(qū)醫(yī)院皮膚科門診就診的慢性特發(fā)性蕁麻疹患者60例，隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組，每組30例。對(duì)照組患者服用氯雷他定10 mg/次，1次/d，聯(lián)合西替利嗪10 mg/次，1次/d，觀察組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上加用桂枝湯，2組均連續(xù)治療28 d，治療結(jié)束后觀察2組的臨床療效，同時(shí)采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)及蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blotting)觀察2組患者治療前后MMP-9及25羥維生素D濃度的變化。結(jié)果：1)觀察組總有效率86.67%，高于對(duì)照組的66.67%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2)經(jīng)過(guò)治療后，2組患者外周血25羥維生素D濃度均較治療前升高，其中觀察組升高的趨勢(shì)更為明顯，與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；3)經(jīng)過(guò)治療后2組患者外周血MMP-9濃度均較治療前下降，其中觀察組下降的幅度高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

慢性特發(fā)性蕁麻疹；桂枝湯；25羥維生素D；MMP-9

慢性特發(fā)性蕁麻疹(Chronic Spontaneous Urticaria，CSU)的發(fā)病原因錯(cuò)綜復(fù)雜，目前尚處于研究階段。有文獻(xiàn)顯示CSU患者體內(nèi)存在維生素D下降的現(xiàn)象，有研究人員通過(guò)嘗試添加維生素D治療CSU，取得一定的療效。CSU屬于變態(tài)反應(yīng)性疾病，其發(fā)病過(guò)程中性粒細(xì)胞發(fā)揮重要作用，而MMP-9免疫反應(yīng)性恰與中性粒細(xì)胞關(guān)系密切，更有文獻(xiàn)指出過(guò)敏原激發(fā)效應(yīng)可導(dǎo)致MMP-9濃度急劇上調(diào)，因此我們認(rèn)為觀察MMP-9的濃度變化對(duì)于評(píng)估CSU的病情是有據(jù)可循的。

目前臨床將抗組胺藥物視為治療CSU的一線用藥，誰(shuí)在短時(shí)間內(nèi)可明顯緩解患者的臨床癥狀，但長(zhǎng)期使用后帶來(lái)的耐藥、停藥后復(fù)發(fā)影響了患者的治療依從性。傳統(tǒng)中醫(yī)從整體出發(fā)，辨證論治，在治療諸多疾病均有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，筆者團(tuán)隊(duì)經(jīng)過(guò)多年的臨床經(jīng)驗(yàn)，以桂枝湯加減對(duì)CSU患者進(jìn)行干預(yù)，取得一定療效，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月至2016年12月陜西省咸陽(yáng)市楊凌示范區(qū)醫(yī)院皮膚科門診就診的慢性特發(fā)性蕁麻疹患者60例，隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組，每組30例。其中對(duì)照組男14例，女16例，年齡21～52歲，平均年齡(31.5±5.2)歲，病程1個(gè)月至3年，平均病程(6.7±0.5)個(gè)月。觀察組男13例，女17例，年齡20～55歲，平均年齡(31.8±6.1)歲，病程1個(gè)月至2.5年，平均病程(6.5±0.7)個(gè)月。2組患者在年齡、性別、病程等一般情況方面比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

同時(shí)《意見》指出，被納入社?！昂诿麊巍钡氖胖黧w，經(jīng)辦機(jī)構(gòu)可結(jié)合實(shí)際情況以適當(dāng)方式督促失信主體在3個(gè)月內(nèi)整改。整改到位后，失信主體可提請(qǐng)經(jīng)辦機(jī)構(gòu)確認(rèn)，經(jīng)辦機(jī)構(gòu)應(yīng)在確認(rèn)后5個(gè)工作日內(nèi)將其移出社保“黑名單”；整改不到位的，經(jīng)辦機(jī)構(gòu)應(yīng)啟動(dòng)警示性約談程序。經(jīng)辦機(jī)構(gòu)應(yīng)對(duì)在規(guī)定期限內(nèi)整改不到位的失信主體主要負(fù)責(zé)人進(jìn)行一次警示性約談。約談?dòng)涗?包括拒絕約談或不配合約談等情形)記入失信主體信用記錄，納入全國(guó)信用信息共享平臺(tái)。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]根據(jù)第4版《臨床皮膚病學(xué)》中關(guān)于CSU的診斷：1)皮膚突發(fā)淡紅色風(fēng)團(tuán)，發(fā)無(wú)定處，可遍布全身，大小形態(tài)不一，風(fēng)團(tuán)周圍可見反射性紅暈。2)自覺瘙癢伴有灼熱感，部分患者可出現(xiàn)消化道癥狀，甚至可出現(xiàn)呼吸困難。3)風(fēng)團(tuán)時(shí)隱時(shí)現(xiàn)，多在24 h內(nèi)消退，癥狀消失后不留痕跡，4)風(fēng)團(tuán)可反復(fù)出現(xiàn)，每周發(fā)作次數(shù)≥2次，病程>6周。5)皮膚可出現(xiàn)白色抓痕。具有1)～4)中的任意2項(xiàng)以及5)即可診斷CSU。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) 1)具有食物及藥物過(guò)敏史者。2)近7 d內(nèi)服用任何抗組胺藥物、激素類藥物或其他抗過(guò)敏藥物者。3)哺乳期或妊娠期婦女。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) 1)符合1.2診斷標(biāo)準(zhǔn)者。2)年齡18～70歲。3)近7 d內(nèi)未服用任何抗組胺藥物、激素類藥物或其他抗過(guò)敏藥物者。4)意配合治療，并簽署知情同意書者。

純電動(dòng)汽車是電力驅(qū)動(dòng)的一種新能源汽車，純電動(dòng)汽車適合慢速行駛，這種汽車在停車狀態(tài)下不會(huì)消耗過(guò)多的電能，其主要以發(fā)電機(jī)為制動(dòng)電機(jī)，因此，可借助減速時(shí)的能量來(lái)減少石油資源的消耗量。同時(shí)，其他能源可轉(zhuǎn)化為車輛行駛所需的電能，維修保養(yǎng)工作相對(duì)簡(jiǎn)單，且工作壓力較小。但是蓄電池容量有限，且價(jià)格較高，需要完善的基礎(chǔ)設(shè)施支持，故而該類型汽車的投資較高。

頻率穩(wěn)定度是精密振蕩器的重要特性之一，也是衡量頻率標(biāo)準(zhǔn)穩(wěn)定性的重要指標(biāo)[15-16]。對(duì)于頻率穩(wěn)定度的精確測(cè)量即可以確定振蕩器的性能優(yōu)劣，同時(shí)可以促進(jìn)精密振蕩器的研制。頻率穩(wěn)定度的測(cè)量分為頻域測(cè)量和時(shí)域測(cè)量，文中主要在時(shí)域?qū)πl(wèi)星本振頻率穩(wěn)定度進(jìn)行測(cè)量分析。

1.6 治療方法 對(duì)照組患者服用氯雷他定(開瑞坦，上海先靈葆雅制藥有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字H10970410)10 mg，1次/d。鹽酸西替利嗪(成都恒瑞制藥有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字H20030191)10 mg，1次/d。觀察組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上加用桂枝湯加減，組方如下：桂枝12 g、白芍9 g、生姜3片、炙甘草6 g、大棗5枚、瘙癢嚴(yán)重者加蟬蛻9 g、防風(fēng)9 g，發(fā)熱重者加石膏9 g、黃芩9 g、梔子9 g、連翹6 g，風(fēng)團(tuán)鮮紅者加生地黃9 g、赤芍12 g、川芎9 g，消化道癥狀者加茯苓12 g、白術(shù)12 g。1劑/d，200 mL早晚溫服分服。2組患者均接受為期28 d的治療。

湖州一個(gè)富家兒媳，丈夫死后想改嫁，而公公不允許，迫她守寡。她便向“疙瘩老娘”求援，“疙瘩老娘”開價(jià)是一字百兩銀子，向她要了一千六百兩銀子，寫了張十六字的狀子。

圖1c)的仿真結(jié)果表明：當(dāng)港口群內(nèi)干線泊位的處理能力增強(qiáng)時(shí)，某些干線港口的樞紐地位進(jìn)一步得到鞏固，如圖中上海港，但該類型港口的承載壓力也將會(huì)加重，見表4。

1.7.1 ELISA檢測(cè)治療前后25羥維生素D濃度的變化 治療前、治療28 d，于安靜清醒狀態(tài)下、上午8～9時(shí)取血測(cè)定，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，根據(jù)購(gòu)自上海谷研實(shí)業(yè)有限公司ELISA試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作，檢測(cè)25羥維生素D。

2.2 2組25羥維生素D濃度變化 經(jīng)過(guò)治療后2組患者外周血25羥維生素D濃度均較治療前升高，其中觀察組升高的趨勢(shì)更為明顯，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見圖1。

1.8 療效判定標(biāo)準(zhǔn) 參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[4]對(duì)患者瘙癢程度、風(fēng)團(tuán)數(shù)量及大小，發(fā)作頻率進(jìn)行評(píng)定，計(jì)算出總積分，療效指數(shù)=(治療前積分-治療后積分)/治療前積分×100%。療效指數(shù)≥90%視為痊愈；50%≤療效指數(shù)≤89%視為顯效；20%≤療效指數(shù)≤49%視為有效；療效指數(shù)<20%視為無(wú)效。

1.7 觀察指標(biāo)

表1 臨床療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果

2.1 2組臨床療效比較 治療28 d后2組患者均獲得一定療效，其中觀察組總有效率86.67%，高于對(duì)照組的66.67%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組臨床療效結(jié)果比較

1.7.2 Western Blotting檢測(cè)治療前后MMP-9水平的變化 取治療前、治療28 d患者前臂外周血5 mL置于肝素鈉包被的抗凝管中，用人淋巴細(xì)胞分離液分離出外周血單核細(xì)胞200 μL，加入100 μL裂解液進(jìn)行細(xì)胞分裂，放入4 ℃振蕩器中持續(xù)震蕩30 min，并將液體用移液槍轉(zhuǎn)移至事先預(yù)冷離心管，再次置于4 ℃離心機(jī)中以5 000 r/min轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心15 min，用移液槍將上清液抽取至新的離心管中備用。利用BCA試劑盒測(cè)定蛋白濃度，并在100 ℃水浴中進(jìn)行蛋白變性7 min，并計(jì)算上樣量。事先配制好SDS-PAGE膠體，用移液槍將蛋白加之膠體中進(jìn)行電泳，隨后將蛋白轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜上，隨后用脫脂奶粉進(jìn)行封閉2 h，用PBS清洗2次，10 min/次，加1∶500稀釋的一抗(MMP-9)及內(nèi)參抗體(β-acting，1∶3 000)室溫孵育2 h，用PBS清洗2次，10 min/次，隨后加入辣根過(guò)氧化酶HRP-二抗，室溫下輕搖2 h取出繼續(xù)PBS清洗2次，10 min/次，最后利用ECL顯影，拍照，統(tǒng)計(jì)分析。

1.5 脫落與剔除標(biāo)準(zhǔn) 1)治療過(guò)程中配合差者。2)患者自行退出本研究。3)出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥或并發(fā)癥者。4)雖然完成試驗(yàn)，但服藥量不在應(yīng)服量的80%～120%范圍內(nèi)；5)泄盲或緊急揭盲的病例。

圖1 2組患者25羥維生素D比較

2.3 2組MMP-9濃度變化 經(jīng)過(guò)治療后2組患者外周血MMP-9濃度均較治療前下降，其中觀察組下降的幅度高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見圖2、表3。

(3)根據(jù)生產(chǎn)管理系統(tǒng)的數(shù)據(jù)，編制水泥生產(chǎn)流程的成本分布表、全月的成本總表，以完整體現(xiàn)水泥生產(chǎn)成本的分布情況。

圖2 2組患者M(jìn)MP-9 Western Blotting結(jié)果比較

3 討論

慢性特發(fā)性蕁麻疹是皮膚科常見疾患，全身性反復(fù)發(fā)作性風(fēng)團(tuán)伴皮膚瘙癢是其主要臨床表征。目前慢性特發(fā)性蕁麻疹的發(fā)病機(jī)制仍處于探索階段，國(guó)內(nèi)外均有文獻(xiàn)顯示組胺、白三烯、細(xì)胞因子等炎性反應(yīng)介質(zhì)的濃度變化在慢性特發(fā)性蕁麻疹的發(fā)病中有重要作用，因此抗組胺藥目前已然成為治療慢性特發(fā)性蕁麻疹的首選藥物，同時(shí)聯(lián)合激素、白三烯受體拮抗劑等輔助治療，亦可獲得理想療效。然而臨床上發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期服用上述西藥雖在短時(shí)間內(nèi)可一定程度改善臨床癥狀，但無(wú)法從根本上治愈慢性特發(fā)性蕁麻疹。因此臨床迫切需要一類即可理想改善臨床癥狀又可減少不良反應(yīng)的藥物。近10余年，中藥因其治療效果佳、不良反應(yīng)小逐漸進(jìn)入臨床工作者的視線。

慢性特發(fā)性蕁麻疹屬于中醫(yī)學(xué)“癮疹”“風(fēng)疹”范疇，機(jī)體受七情內(nèi)傷，致陰陽(yáng)失衡，營(yíng)衛(wèi)不調(diào)，衛(wèi)外不固，導(dǎo)致風(fēng)邪侵襲機(jī)體誘發(fā)此病，而風(fēng)為百病之長(zhǎng)，善行而數(shù)變，因此可出現(xiàn)病情反復(fù)[5-8]。風(fēng)邪與寒邪相搏結(jié)合而風(fēng)寒之邪，風(fēng)邪與熱邪相搏結(jié)合而風(fēng)熱之邪，風(fēng)寒及風(fēng)熱之邪留戀于肌膚皮毛腠理之間[9-10]。因此祛風(fēng)止癢，并視不同證型臨證加減，本研究使用桂枝湯對(duì)觀察組患者進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果顯示該湯藥明顯提高了臨床療效。桂枝湯具有祛風(fēng)解表、調(diào)和營(yíng)衛(wèi)之功，直中慢性特發(fā)性蕁麻疹的病因病機(jī)。方中桂枝為君藥，助衛(wèi)陽(yáng)，通經(jīng)絡(luò)，解肌發(fā)表而祛在表之風(fēng)邪，芍藥為臣藥，益陰斂營(yíng)，斂固外泄之營(yíng)陰。桂枝芍藥合用可體現(xiàn)營(yíng)衛(wèi)同治，邪正兼顧，兩藥相輔相成，散中有收，組成了內(nèi)調(diào)營(yíng)衛(wèi)、陰陽(yáng)的基本結(jié)構(gòu)。生姜辛溫，可助桂枝祛風(fēng)解肌之功，大棗甘平，既能益氣補(bǔ)中，又可滋脾生津，甘草可調(diào)和諸藥藥性。本研究還根據(jù)不同的病癥臨證加減，予蟬蛻、防風(fēng)等加強(qiáng)搜風(fēng)祛風(fēng)之功，生地黃、川芎、赤芍加強(qiáng)涼血活血作用，石膏、黃芩、梔子、連翹助化熱之功，提高了臨床療效。

表3 MMP-9/內(nèi)參(IOD比值)的情況

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05

在對(duì)中藥作用機(jī)制的進(jìn)一步探討中我們對(duì)25羥維生素D以及MMP-9這2項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)加用桂枝湯組患者外周血25羥維生素D的濃度高于對(duì)照組，MMP-9的濃度低于對(duì)照組，這說(shuō)明桂枝湯治療慢性特發(fā)性蕁麻疹的作用機(jī)制可能與上述2個(gè)因子有密切關(guān)聯(lián)。25羥維生素D是機(jī)體主要代謝物，近年來(lái)25羥維生素D與過(guò)敏性疾病的關(guān)系逐漸受到重視，已有文獻(xiàn)證實(shí)25羥維生素D的缺乏是誘發(fā)哮喘的主要危險(xiǎn)因素，因此我們認(rèn)為25羥維生素D濃度下降對(duì)于慢性特發(fā)性蕁麻疹而言屬于一種誘因[11-15]，其水平的變化誘發(fā)免疫炎性反應(yīng)而導(dǎo)致此病。此外，我們還發(fā)現(xiàn)降低MMP-9的水平可一定程度改善慢性特發(fā)性蕁麻疹的病情，有研究表明MMP-9可破壞細(xì)胞基膜，導(dǎo)致炎性反應(yīng)細(xì)胞進(jìn)一步侵潤(rùn)更深層次的組織，由此加劇本病。

總之，通過(guò)分子生物學(xué)層面的探析我們進(jìn)一步證實(shí)桂枝湯治療慢性特發(fā)性蕁麻疹有明確臨床療效，并且安全可靠，臨床建議進(jìn)一步推廣運(yùn)用。

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CurativeEffectsofGuizhiDecoctiononChronicIdiopathicUrticariaandtheDetectionofSerumLevelsofMMP-9and25-hydroxyvitaminD

Li Chunniao1, Wang Liu2

(1DepartmentofDermatology,YanglingDemonstrationZoneHospital,Xianyang712100,China; 2DepartmentofDermatology,XianyangFirstPeople′sHospital,Xianyang712000,China)

Objective:To investigate the clinical curative effect of Guizhi decoction on chronic idiopathic urticaria, at the same time to observe the impact on matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) and 25-hydroxyvitamin D concentrations in the peripheral blood of the patients.MethodsA total of 60 cases of patients with chronic idiopathic urticaria who visited the dermatology clinic in our hospital included in the research were randomly divided into the control group and the observation group. The control group took loratadine 10 mg/times, 1 time/day, combined with cetirizine 10 mg/times, 1 time a day. The observation group had Guizhi decoction on the basis treatment of the control group. Both of the 2 groups had treatment for 28 days. The clinical curative effects of 2 groups after treatment was observed, and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and protein immunoblot (Western Blotting) was used to observe the concentration changes of MMP-9 and 25-hydroxyvitamin D in the 2 groups before and after treatment.Results1) The total effective rate of the observation group was 86.67%, higher than that the total effective rate 66.67% of control group. The differences were statistically significant (P<0.05). 2) 25-hydroxyvitamin D concentration in the peripheral blood of the 2 groups increased after treatment, and the increasing trend of observation group was more significant. Compared with the control group, the difference was statistically significance (P<0.05); 3) The MMP-9 concentrations of peripheral blood of the 2 groups declined after treatment compared with before the treatment, and the falling range of the observation group was higher than control group. The differences were statistically significant (P<0.05).

Chronic idiopathic urticarial; Guizhi decoction; 25-hydroxyvitamin D; MMP-9

R285.6；R758.24

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.12.035

2014年陜西省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014JM4100)

李春鳥(19810.06—)，女，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向：中西醫(yī)結(jié)合皮膚病學(xué)，E-mail:781596021@qq.com

王鎦(1976.02—)，女，本科，主治中醫(yī)師，研究方向：中醫(yī)皮膚與性病學(xué)及中醫(yī)美容，E-mail：945852443@qq.com

(2017-05-11收稿 責(zé)任編輯：張文婷)