芪芍抗毒顆粒的提取工藝研究

景倩

摘 要：本文對芪芍抗毒顆粒中黃芪甲苷的提取工藝進行研究。最佳提取工藝為提取3次，第一次加入10倍量蒸餾水，提取1小時，第二次加入10倍量蒸餾水提取1小時，第三次加入10倍量蒸餾水提取1小時，濃縮。本方法可靠、簡單，可用于生產(chǎn)。

關(guān)鍵詞：芪芍抗毒顆粒；工藝；研究

黃芪為芪芍抗毒顆粒主要成分之一。黃芪的藥用迄今已有2000多年的歷史，近幾年來野生黃芪的數(shù)量急劇減少，為此確定該植物為漸危種，國家三級保護植物[1-3]。黃芪用于治療氣虛乏力，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，血虛萎黃，內(nèi)熱消渴，慢性腎炎，蛋白尿，糖尿病等?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，黃芪含皂甙、甜菜堿、膽堿、葉酸、多糖、蔗糖、多種氨基酸等多種微量元素，促進蛋白質(zhì)代謝，降血糖，改善腎功能，能消除實驗性腎炎蛋白尿，增強心肌收縮力，調(diào)節(jié)血糖含量。本文對芪芍抗毒顆粒中黃芪甲苷提取工藝進行研究。

1 儀器與試藥

Temp 300雙通道熱電偶式溫度計（塞默飛世爾科技水質(zhì)分析儀器）； HP系列無油真空泵（天津市恒奧科技發(fā)展有限公司）；R-210瑞士步琦旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海沃瓏儀器有限公司）；HN-6AL汗諾功率可調(diào)超聲波清洗（上海汗諾儀器有限公司）；Cascada III.I全新智能純水/超純水一體化系統(tǒng)（頗爾過濾器（北京）有限公司）；英國艾德姆PWC分析天平（艾德姆衡器（武漢）有限公司）；天瑞儀器LC-310液相色譜（江蘇天瑞儀器股份有限公司）。乙腈（上海埃彼化學(xué)試劑有限公司）、甲醇（上海埃彼化學(xué)試劑有限公司）、磷酸（上海埃彼化學(xué)試劑有限公司）、正丁醇（長沙江龍化工科技有限公司）、乙醇（上海埃彼化學(xué)試劑有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 水提

按處方稱取藥材，粉碎為粗粉，至于圓底燒瓶內(nèi)，分別加4倍、5倍、6倍、8倍、10倍水，浸泡0.5小時，提取二次，第一次2小時，第二次1小時，過濾，合并濾液，減壓濃縮至相對密度為1.20（70攝氏度測）。采用高效液相測定濃縮膏含量。

2.2 醇提

按處方稱取藥材，粉碎為粗粉，至于回流提取器內(nèi)，分別加4倍、5倍、6倍、8倍、10倍60%乙醇，浸泡0.5小時，提取二次，第一次2小時，第二次1小時，過濾，合并濾液，減壓濃縮至相對密度為1.20（70攝氏度測）。采用高效液相測定濃縮膏含量。

2.3 滲濾

按處方稱取藥材，粉碎為粗粉，至于滲濾罐內(nèi)，分別采用4倍、5倍、6倍、8倍、10倍60%乙醇進行滲漉，滲漉速度為每分鐘1升，合并滲漉液，減壓濃縮至相對密度為1.20（70攝氏度測）。采用高效液相測定濃縮膏含量。

2.4 浸泡

按處方稱取藥材，粉碎為粗粉，至于浸泡罐內(nèi)，分別采用4倍、5倍、6倍、8倍、10倍60%乙醇浸泡8小時，合并浸泡液，減壓濃縮至相對密度為1.20（70攝氏度測）。采用高效液相測定濃縮膏含量。

2.5 正交試驗設(shè)計

實驗結(jié)果表明，水提取工藝優(yōu)于其他工藝。選擇提取次數(shù)、加水倍數(shù)和提取時間作為考察因素，采用正交試驗法對影響提取效率的其它工藝條件進行優(yōu)選。采用3個考察水平，用L9（34）正交表進行試驗，因素水平表見表1。

表1 大黃酚提取工藝因素水平表

3 含量測定

3.1 色譜條件

色譜柱為Waters SunFire C18液相色譜柱 （規(guī)格250×4.6mm，5um）；以乙腈為流動相A，以水為流動相B，按下表進行梯度洗脫，漂移管溫度為105攝氏度；載氣流速為3.0ml/min；放大倍數(shù)為2[4-5]。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不得低于2000。

3.2 供試品溶液的制備

取芪芍抗毒顆粒濃縮膏，精密稱定，加20毫升水，超聲5分鐘，用水飽和過的正丁醇振搖提取四次，每次20毫升，合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次20毫升，棄去氨液，正丁醇層水浴蒸干，殘渣用甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5毫升容量瓶，用甲醇定容，搖勻，過0.45μm的濾膜，即得。

3.3 對照品溶液的制備

精密稱取黃芪甲苷對照品約50mg，置10毫升棕色容量瓶中，用甲醇超聲波振蕩溶解并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密吸取10毫升，置100毫升棕色容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL溶液中含黃芪甲苷0.5mg）。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

制備濃度為0.1mg·mL-1、0.2mg·mL-1、0.4mg·mL-1、0.6mg·mL-1、0.8mg·mL-1、1.0mg·mL-1、1.2mgomL-1、1.4mgomL-1、1.6mgomL-1、1.8mgomL-1、2.0mgomL-1的對照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值的對數(shù)A（μg）為橫坐標(biāo)，進樣量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程。試驗表明，黃芪甲苷對照品在0.1～2.0mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.5 回收率試驗

取已知含量的同一批供試品各6份，分別精密添加一定量的黃芪甲苷對照品，測定含量，計算回收率。平均回收率為98.3%，RSD為0.92%。

4 實驗結(jié)果

按照L9（34）正交設(shè)計表條件進行試驗，得到最佳提取工藝為提取3次，第一次加入10倍量蒸餾水，提取1小時，第二次加入10倍量蒸餾水提取1小時，第三次加入10倍量蒸餾水提取1小時，濃縮。本工藝穩(wěn)定、可行、收率高。

參考文獻

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