• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    果膠糖基化改性乳清蛋白工藝優(yōu)化

    2018-01-02 08:16:58原秀玲王玉華劉景圣
    農(nóng)產(chǎn)品加工 2017年24期
    關(guān)鍵詞:機(jī)械性能乳清糖基化

    蔡 丹,原秀玲,王玉華,修 琳,劉景圣

    (吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,小麥和玉米深加工國家工程實(shí)驗(yàn)室,吉林長(zhǎng)春 130118)

    果膠糖基化改性乳清蛋白工藝優(yōu)化

    蔡 丹,原秀玲,王玉華,修 琳,*劉景圣

    (吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,小麥和玉米深加工國家工程實(shí)驗(yàn)室,吉林長(zhǎng)春 130118)

    以乳清蛋白為原料,與果膠通過美拉德反應(yīng)進(jìn)行干法糖基化改性,研究果膠與乳清蛋白配比、糖基化反應(yīng)時(shí)間和pH值對(duì)乳清蛋白膜成膜性的影響。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,通過正交試驗(yàn)確定最佳糖基化改性條件。試驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)果膠與乳清蛋白質(zhì)量配比為3∶1,反應(yīng)時(shí)間為76 h,乳化體系的pH值為8.4時(shí),乳清蛋白-果膠產(chǎn)物膜的拉伸強(qiáng)度(TS)為1 247.13±0.29 g,斷條伸長(zhǎng)率為31.52%,乳清蛋白-果膠糖基化產(chǎn)物接枝度為49.523%。

    乳清蛋白;果膠;糖基化;拉伸強(qiáng)度

    乳清蛋白是干酪生產(chǎn)副產(chǎn)物——乳清經(jīng)過特定工藝而加工得到的一類蛋白質(zhì),主要含有α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、血清白蛋白、免疫球蛋白、乳鐵蛋白、乳過氧化物酶和許多生物活性因子等[1],其中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白分別占乳清蛋白總量的20%和60%[2]。乳清蛋白作為優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)補(bǔ)充劑之一,富含多種人體必需氨基酸,具有營養(yǎng)價(jià)值高、易消化吸收、高生物效價(jià)等特點(diǎn)[3-4],因而又被稱為“蛋白之王”。隨著對(duì)乳清蛋白研究的不斷深入,其豐富的蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值及良好的功能特性被不斷發(fā)掘,目前乳清蛋白已成為保健食品和營養(yǎng)制品生產(chǎn)的重要原料和添加成分,廣泛應(yīng)用于食品生產(chǎn)中[5-7]。尤其是乳清蛋白可食用膜,已成為國內(nèi)外學(xué)者的研究熱點(diǎn)[8-9]。盡管如此,由于乳清蛋白本身功能特性不夠完善,具有致敏性、β-乳球蛋白的結(jié)構(gòu)等缺陷,這些問題嚴(yán)重限制了其應(yīng)用范圍。因此,近年來國內(nèi)外研究學(xué)者致力于乳清蛋白的改性研究,通過采用物理、化學(xué)和生物法對(duì)乳清蛋白進(jìn)行處理[10],改變?nèi)榍宓鞍椎姆肿恿看笮 被岬慕M成和空間排列構(gòu)象、電荷分布情況、疏水基團(tuán)的分布等,從而改善乳清蛋白的功能特性[11],提高乳清蛋白的利用率和應(yīng)用范圍。

    本研究以乳清蛋白(WPC) 和果膠(P) 為原料,采用干法糖基化改性的方法,使果膠與乳清蛋白發(fā)生美拉德反應(yīng),改變?nèi)榍宓鞍椎慕宦?lián)情況,使蛋白膜的結(jié)構(gòu)緊密,以成膜性為考核指標(biāo),確定糖基化改性乳清蛋白最佳工藝條件。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    濃縮乳清蛋白(質(zhì)量分?jǐn)?shù)79%),希爾瑪乳酪公司提供;果膠,SIGMA-ALDRICH,上海貿(mào)易有限公司提供。

    1.2 主要儀器與設(shè)備

    TA-XTplus型食品物性測(cè)試儀,英國Stable Micro Systems公司產(chǎn)品;K1100型全自動(dòng)凱氏定氮儀,濟(jì)南海能儀器有限公司產(chǎn)品;0.2型真空冷凍干燥機(jī),沈陽航天新陽速凍設(shè)備制造有限公司產(chǎn)品;PHS-3C型pH計(jì),上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;HPX-9162 MBE型數(shù)顯電熱恒溫恒濕培養(yǎng)箱,上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠產(chǎn)品;CP214型電子天平,奧豪斯儀器(上海)有限公司產(chǎn)品。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 乳清蛋白-果膠干法糖基化方法

    首先,將濃縮乳清蛋白溶于去離子水中,用磁力攪拌器迅速攪拌,邊攪拌邊緩慢加入適量的果膠,待充分溶解后,調(diào)節(jié)pH值,將溶解好的乳清蛋白-果膠混合物進(jìn)行真空冷凍干燥,得到乳清蛋白-果膠混合物固體樣品。將該樣品放入恒濕培養(yǎng)器內(nèi),在一定溫度下,每隔一段時(shí)間進(jìn)行取樣,得到乳清蛋白-果膠糖基化產(chǎn)物。

    1.3.2 成膜方法

    準(zhǔn)確稱取乳清蛋白-果膠糖基化產(chǎn)物配制一定濃度溶液,加入適量的甘油(g/g糖基化產(chǎn)物),脫氣后放入干燥箱中干燥,揭膜后放在恒溫恒濕培養(yǎng)箱中(溫度23℃,相對(duì)濕度50%) 平衡48 h,之后對(duì)膜的機(jī)械性能即拉伸強(qiáng)度(Tensile strength,TS)和斷裂伸長(zhǎng)率(Elongation at break,E)進(jìn)行測(cè)定。

    1.3.3 乳清蛋白-果膠干法糖基化條件優(yōu)化

    (1)單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)。將果膠與乳清蛋白按質(zhì)量比 (底物配比) 1∶1,2∶1,3∶1,4∶1,5∶1混合,調(diào)節(jié)pH值為7.0,7.2,7.4,7.6,7.8,8.0,8.2,8.4,8.6,8.8,9.0,冷凍干燥后放置于相對(duì)濕度為79%(飽和KBr溶液) 的條件下,反應(yīng)36,48,60,72,84 h,制備乳清蛋白-果膠糖基化產(chǎn)物,并制備成膜溶液,測(cè)定膜的機(jī)械性能。

    (2)響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)。根據(jù)單因素的分析結(jié)果,各因素對(duì)乳清蛋白-多糖糖基化產(chǎn)物膜的TS值和E值的影響是一致的。采用Design Expert(8.0.6) 中Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,建立拉伸強(qiáng)度(TS) 與乳清蛋白-果膠糖基化反應(yīng)時(shí)間、pH值、底物配比的回歸方程,確定乳清蛋白-果膠糖基化產(chǎn)物膜最優(yōu)制備工藝條件。相同條件下以乳清蛋白獨(dú)自成膜為對(duì)照組。

    1.4 膜機(jī)械性能的測(cè)定

    將在相對(duì)濕度50%條件下平衡48 h的膜裁成1 cm×5 cm的條狀后用物性儀測(cè)定,條件設(shè)定為初始夾距10 mm,拉伸距離45 mm,以3.3 mm/s的速度勻速拉伸,測(cè)定后分析膜的拉伸強(qiáng)度和斷裂伸長(zhǎng)率。拉伸強(qiáng)度為膜被拉伸斷裂時(shí)所受到的拉力最大值,斷裂伸長(zhǎng)率為膜被拉伸后長(zhǎng)度的增量占原長(zhǎng)度的百分比。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 乳清蛋白-果膠干法糖基化條件優(yōu)化單因素試驗(yàn)結(jié)果

    2.1.1 不同反應(yīng)時(shí)間對(duì)乳清蛋白-果膠膜機(jī)械性能的影響

    確定反應(yīng)溫度為60℃,pH值為8,底物配比為3∶1,相對(duì)濕度為79%,改變反應(yīng)時(shí)間分別為36,48,60,72,84 h制備乳清蛋白-果膠膜,測(cè)定其拉伸強(qiáng)度(TS) 和斷條伸長(zhǎng)率(E)。

    不同反應(yīng)時(shí)間對(duì)WPC-P膜TS和E的影響見圖1。

    圖1 不同反應(yīng)時(shí)間對(duì)WPC-P膜TS和E的影響

    由圖1可知,反應(yīng)時(shí)間會(huì)顯著影響(p<0.05)乳清蛋白-果膠膜的拉伸強(qiáng)度和斷條伸長(zhǎng)率,且在試驗(yàn)設(shè)計(jì)的時(shí)間范圍內(nèi),拉伸強(qiáng)度和斷條伸長(zhǎng)率的變化呈現(xiàn)一致性。在一定時(shí)間范圍內(nèi),果膠和乳清蛋白游離氨基的共價(jià)結(jié)合程度、糖基化程度與反應(yīng)時(shí)間呈正相關(guān),導(dǎo)致成膜過程中糖蛋白分子交聯(lián)形成的空間網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)逐漸致密;但隨著反應(yīng)時(shí)間的進(jìn)一步延長(zhǎng),糖蛋白分子的致密空間結(jié)構(gòu)被重新打破,從而引起乳清蛋白-果膠膜的機(jī)械性能降低。因而,隨著加熱時(shí)間的延長(zhǎng),乳清蛋白-果膠膜的機(jī)械性能呈先高后低的趨勢(shì)。在反應(yīng)時(shí)間為72 h時(shí),膜的機(jī)械性能最優(yōu)。

    2.1.2 不同pH值對(duì)乳清蛋白-果膠膜機(jī)械性能的影響

    確定反應(yīng)溫度為60℃,反應(yīng)時(shí)間為72 h,底物配比為3∶1,相對(duì)濕度79%,改變反應(yīng)體系的pH值分別為 7.0,7.2,7.4,7.6,7.8,8.0,8.2,8.4,8.6,8.8,9.0,制備乳清蛋白-果膠膜,測(cè)定其拉伸強(qiáng)度(TS) 和斷條伸長(zhǎng)率(E)。

    不同pH值對(duì)WPC-P膜TS和E的影響見圖2。

    圖2 不同pH值對(duì)WPC-P膜TS和E的影響

    由圖2可知,反應(yīng)體系的pH值會(huì)顯著影響(p<0.05) 乳清蛋白-果膠膜的機(jī)械性能。當(dāng)反應(yīng)體系pH值為8.4時(shí),乳清蛋白-果膠膜的拉伸強(qiáng)度和斷條伸長(zhǎng)率達(dá)到最大值,之后隨著pH值的不斷升高膜的機(jī)械性能呈現(xiàn)逐漸減小趨勢(shì)。有文獻(xiàn)[12]表明,自由氨基在酸堿條件下的反應(yīng)活性不同,在酸性條件下反應(yīng)活性低,在堿性條件下反應(yīng)活性較高。本質(zhì)上,糖基化反應(yīng)屬于堿催化反應(yīng),因此堿性條件下更有利于糖蛋白的結(jié)合,但是隨著糖基化反應(yīng)程度的進(jìn)一步加大會(huì)引起乳清蛋白-果膠膜空間網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)等疏松,從而使膜的機(jī)械性能降低。

    2.1.3 不同底物配比對(duì)乳清蛋白-果膠膜機(jī)械性能的影響

    在溫度為60℃,相對(duì)濕度為79%,反應(yīng)時(shí)間為72 h,pH值為8.4的條件下,改變底物配比(果膠/乳清蛋白) 分別為1∶1,2∶1,3∶1,4∶1,5∶1制備WPC-P膜,測(cè)定其TS和E。

    不同底物配比對(duì)WPC-P膜TS和E的影響見圖3。

    圖3 不同底物配比對(duì)WPC-P膜TS和E的影響

    由圖2可知,底物配比會(huì)顯著影響(p<0.05) 乳清蛋白-果膠膜的機(jī)械性能。在試驗(yàn)設(shè)計(jì)的底物配比范圍內(nèi),隨著果膠添加量的增加,乳清蛋白-果膠膜的機(jī)械強(qiáng)度呈先升高后降低的趨勢(shì),當(dāng)?shù)孜锱浔葹?∶1時(shí),乳清蛋白-果膠膜的機(jī)械性能最高。有研究表明[13],糖添加比例的升高增加了反應(yīng)體系中自由氨基與糖分子中羰基之間碰撞和接觸機(jī)率,促進(jìn)了糖蛋白分子直接的交聯(lián),從而提高了膜的機(jī)械強(qiáng)度。由于果膠本身溶解度和流動(dòng)特性的影響,當(dāng)反應(yīng)體系中繼續(xù)增加果膠的添加比例時(shí),反應(yīng)體系的黏度增大,分子流動(dòng)性變差,會(huì)影響反應(yīng)的進(jìn)行,同時(shí)過多的糖蛋白分子交聯(lián)會(huì)打亂原來有序的空間網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),從而導(dǎo)致膜的機(jī)械強(qiáng)度降低。這與華靜嫻等人[14]關(guān)于大米蛋白美拉德反應(yīng)的研究結(jié)果一致。

    2.2 乳清蛋白-果膠干法糖基化條件響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果

    2.2.1 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

    在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選取反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)體系的pH值和底物配比3個(gè)因素進(jìn)行Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

    響應(yīng)面分析因素與水平設(shè)計(jì)見表1,Box-Behnken分析方案及試驗(yàn)結(jié)果見表2,回歸方程的方差分析見表3。

    表1 響應(yīng)面分析因素與水平設(shè)計(jì)

    表2 Box-Behnken分析方案及試驗(yàn)結(jié)果

    由表2可知,響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)17個(gè)試驗(yàn)。通過用對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行的回歸分析及方差分析,得到的回歸方程為:

    Y=1 246.52+6.12A+3.23B+2.89C+1.55AB-0.54AC-0.76BC-9.96A2-10.55B2-3.70C2.

    由表3可知,回歸方程因變量和自變量之間存在顯著的線性關(guān)系(R2=0.993 5),方程p<0.01,表明此回歸方程極其顯著;其中失擬項(xiàng)p=0.563 8>0.05,說明此回歸方程對(duì)試驗(yàn)的擬合度較好,證明了試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法的可靠性。

    2.2.2 各因素間相互作用

    表3 回歸方程的方差分析

    圖4 兩因素交互作用影響膜拉伸強(qiáng)度值的響應(yīng)曲面圖及其等高線

    兩因素交互作用影響膜拉伸強(qiáng)度值的響應(yīng)曲面圖及其等高線見圖4。

    由圖4可知,反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)體系的pH值、底物配比都極顯著地影響了乳清蛋白-果膠膜的拉伸強(qiáng)度值。通過對(duì)回歸方程求極值點(diǎn)得:A=75.73,B=8.43,C=3.35,Y=1 248.24,即得出的最優(yōu)工藝條件是反應(yīng)時(shí)間75.73 h,乳化體系的pH值8.43,底物配比3.35∶1,在此條件下WPC-P膜拉伸強(qiáng)度值理論上能達(dá)到1 248.24 g。為了進(jìn)一步驗(yàn)證響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)結(jié)果的準(zhǔn)確性,對(duì)上述結(jié)果進(jìn)行近似驗(yàn)證試驗(yàn),按照實(shí)際操作性將反應(yīng)時(shí)間設(shè)定為76 h,反應(yīng)體系的pH值設(shè)定為8.4,底物配比設(shè)定為3.0∶1,在此條件下進(jìn)行3次WPC-P糖基化反應(yīng),乳清蛋白-果膠膜的平均TS值為1 247.13±0.29 g,與理論預(yù)測(cè)值基本相符,證明Box-Behnken模型適用于該試驗(yàn)設(shè)計(jì),在此條件下E值為31.52%,糖基化產(chǎn)物接枝度為49.523%。在響應(yīng)面優(yōu)化確定的條件下干法培養(yǎng)乳清蛋白,得到乳清蛋白膜的平均TS值為353.61±0.51 g??梢钥闯鎏腔男缘娜榍宓鞍啄さ腡S值比對(duì)照乳清蛋白膜提高了2.5倍。

    3 結(jié)論

    本試驗(yàn)在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,通過正交試驗(yàn)確定乳清蛋白-果膠干法糖基化的改性工藝,當(dāng)果膠與乳清蛋白質(zhì)量配比3∶1,反應(yīng)時(shí)間76 h,反應(yīng)體系的pH值8.4時(shí),乳清蛋白-果膠產(chǎn)物膜的拉伸強(qiáng)度最高,比未改性的乳清蛋白膜提高了2.5倍。

    [1]梁翠,于國萍.乳清分離蛋白成膜工藝的研究 [J].食品工業(yè)科技,2010,31(6):279-282.

    [2]韓雪,孫冰.乳清蛋白的功能特性及應(yīng)用 [J].中國乳品工業(yè),2003,31(3):28-30.

    [3]Murthy H V V.Impact of pollution in and from dairy industries and its management[J].Pollution Management in Food Industries,1990 (4):178-184.

    [4]Hoffman J R,F(xiàn)alvo M J.Protein-Which is Best[J].Journal of Sports Science&Medicine,2004,3(3):118-130.

    [5]畢海丹,崔旭海,王占一,等.茶多酚和乳清蛋白對(duì)冷藏魚糜保鮮效果的影響 [J].食品科學(xué),2016,37(10):272-277.

    [6]張曦,李琦,景浩.乳清蛋白-木糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的成膜性及其膜包裹對(duì)核桃仁脂質(zhì)過氧化的抑制作用 [J].食品科學(xué),2011,32(5):58-64.

    [7]王翠娜.聚合乳清蛋白與多糖相互作用對(duì)其凝膠特性影響及應(yīng)用 [D].吉林大學(xué),2015.

    [8]王芳,張?zhí)m威.乳清蛋白可食用膜的研究進(jìn)展 [J].乳業(yè)科學(xué)與技術(shù),2007,30(3):109-112.

    [9]王雯丹,林慧玨,景浩.乳清蛋白及甘油濃度對(duì)乳清蛋白膜物理特性的影響 [J].食品科技,2009,34(5):96-102.

    [10]高金明,葛珊.乳清蛋白改性的研究進(jìn)展 [J].食品工業(yè)科技,2009(7):382-384.

    [11]莫重文.蛋白質(zhì)化學(xué)與工藝學(xué) [M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2007:188-234.

    [12]任東東.米渣蛋白提取改性及在高蛋白粉末油脂中的應(yīng)用 [D].南昌:南昌大學(xué),2008.

    [13]Scaman C,Nakai S,Aminlari M.Effect of pH,temperature and sodium bisulfite or cysteine on the level of Maillard-based conjugation of lysozyme with dextran,galactomannan and mannan[J].Food chemistry, 2006, 99(2):368-380.

    [14]華靜嫻,陳正行,鐘芳.大米蛋白-葡聚糖接枝耦聯(lián)反應(yīng)的研究 [J].食品科學(xué),2008,29(12):45-50.◇

    Optimization by Glycosylation Modifications of Whey Protein-pectin

    CAI Dan,YUAN Xiuling,WANG Yuhua,XIU Lin,*LIU Jingsheng
    (National Engineering Laboratory for Wheat and Corn Deep Processing,College of Food Science and Engineering,Jilin Agricultural University,Changchun,Jinlin 130118,China)

    In order to improve the mechanical properties of whey protein concentrate(WPC) edible film,whey protein(WPC) -pectin(P) conjugate film was prepared by glycosylation modifications under dry-heating condition.The effects of Pectin/WPC ratio,reaction time and pH value on the tensile strength and elongation at break of WPC-SA conjugate film were analyzed.A single-factor and orthogonal test were employed to optimize the reaction conditions.The optimum reaction conditions were determined as Pectin/WPC radio of 3∶1,reaction time 76 h,pH value 8.4.Under these conditions,the experimental value of tensile strength (TS) of WPC-P conjugate film was 1 247.13±0.29 g and closely agreed with the theoretical value,the elongation at break(E) of WPC-P conjugate film was 31.52%,the graft degree of glycosylation products was 49.523%.

    whey protein;pectin;glycosylation;tensile strength

    TS201.2

    A

    10.16693/j.cnki.1671-9646(X).2017.12.037

    1671-9646(2017) 12b-0035-04

    2017-10-28

    吉林省教育廳“十二五”科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(2015187);國家“十二五”科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2013BAD18B07)。

    蔡 丹(1980— ),女,博士,副教授,研究方向?yàn)槭称飞锘瘜W(xué)工程與功能性食品。

    *通訊作者:劉景圣(1964— ),男,博士,教授,研究方向?yàn)榧Z食深加工與功能性食品。

    猜你喜歡
    機(jī)械性能乳清糖基化
    高壓電纜大截面分割導(dǎo)體焊接后的機(jī)械性能及緩沖阻水層設(shè)計(jì)
    電線電纜(2018年4期)2018-08-31 05:57:30
    硫化溫度對(duì)硅橡膠絕緣線機(jī)械性能的影響
    電線電纜(2018年2期)2018-05-19 02:03:43
    γ射線輻照對(duì)超高分子量聚乙烯片材機(jī)械性能和結(jié)晶度的影響
    核技術(shù)(2016年4期)2016-08-22 09:05:24
    糖基化終末產(chǎn)物與冠脈舒張功能受損
    透析乳清對(duì)雞生長(zhǎng)和小腸對(duì)養(yǎng)分吸收的影響
    飼料博覽(2014年7期)2014-04-05 15:18:33
    乳清低聚肽的制備及其抗氧化活性
    乳清生物技術(shù)處理研究進(jìn)展
    亞臨界電站鍋爐高溫過熱器管屏機(jī)械性能研究
    河南科技(2014年8期)2014-02-27 14:07:50
    油炸方便面貯藏過程中糖基化產(chǎn)物的變化規(guī)律
    糖基化終末產(chǎn)物對(duì)糖尿病慢性并發(fā)癥的早期診斷價(jià)值
    久久久久久人人人人人| 小说图片视频综合网站| 成人18禁在线播放| x7x7x7水蜜桃| 在线观看免费午夜福利视频| 久久亚洲真实| cao死你这个sao货| 丝袜美腿诱惑在线| 淫秽高清视频在线观看| 日韩欧美三级三区| 免费在线观看完整版高清| 久久99热这里只有精品18| 黄色女人牲交| 男女做爰动态图高潮gif福利片| av天堂在线播放| 嫩草影视91久久| 身体一侧抽搐| 国产精品98久久久久久宅男小说| av福利片在线观看| 一本大道久久a久久精品| 亚洲专区字幕在线| 91在线观看av| 一本精品99久久精品77| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产单亲对白刺激| www国产在线视频色| 一进一出抽搐动态| 一级作爱视频免费观看| 欧美日韩福利视频一区二区| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲人与动物交配视频| 久久这里只有精品19| 精品无人区乱码1区二区| 很黄的视频免费| 午夜老司机福利片| 午夜老司机福利片| av片东京热男人的天堂| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 久久香蕉精品热| 妹子高潮喷水视频| 一二三四在线观看免费中文在| 日本成人三级电影网站| 曰老女人黄片| 国产99白浆流出| 999久久久精品免费观看国产| 好男人电影高清在线观看| 成人av一区二区三区在线看| 97碰自拍视频| 少妇熟女aⅴ在线视频| 无限看片的www在线观看| 日本在线视频免费播放| 久久草成人影院| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲男人的天堂狠狠| 午夜成年电影在线免费观看| 黄片小视频在线播放| 91字幕亚洲| 少妇粗大呻吟视频| 免费在线观看影片大全网站| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久国产乱子伦精品免费另类| 久久久国产欧美日韩av| ponron亚洲| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 久久人人精品亚洲av| 妹子高潮喷水视频| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲熟女毛片儿| 午夜视频精品福利| 男女午夜视频在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 亚洲成人国产一区在线观看| 国产高清视频在线观看网站| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 99国产综合亚洲精品| 亚洲成人国产一区在线观看| ponron亚洲| 一级a爱片免费观看的视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | 男女视频在线观看网站免费 | 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 亚洲熟女毛片儿| 男人舔奶头视频| 国产成人系列免费观看| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产精品久久久人人做人人爽| 日本五十路高清| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲美女视频黄频| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产精品精品国产色婷婷| 久久久久久久精品吃奶| 久久性视频一级片| 香蕉国产在线看| 夜夜夜夜夜久久久久| 免费看日本二区| 亚洲在线自拍视频| 一级毛片女人18水好多| 中文资源天堂在线| 日本成人三级电影网站| 999久久久国产精品视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲欧美日韩无卡精品| 欧美午夜高清在线| 久久久精品欧美日韩精品| 日日干狠狠操夜夜爽| 制服丝袜大香蕉在线| 这个男人来自地球电影免费观看| 国产麻豆成人av免费视频| 性欧美人与动物交配| 国产精品一区二区免费欧美| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品野战在线观看| 无限看片的www在线观看| 久久精品91蜜桃| 两个人的视频大全免费| 精品久久久久久,| 18禁国产床啪视频网站| 天天添夜夜摸| 国产精品精品国产色婷婷| 一本久久中文字幕| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲一区高清亚洲精品| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 人人妻人人看人人澡| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲乱码一区二区免费版| 日本 av在线| 视频区欧美日本亚洲| 免费搜索国产男女视频| 一本久久中文字幕| 欧美丝袜亚洲另类 | 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产激情欧美一区二区| 岛国在线观看网站| 人妻夜夜爽99麻豆av| 美女免费视频网站| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| av视频在线观看入口| 在线观看免费午夜福利视频| 老司机福利观看| 国产1区2区3区精品| 不卡av一区二区三区| 成人特级黄色片久久久久久久| 大型黄色视频在线免费观看| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 99精品欧美一区二区三区四区| 搡老妇女老女人老熟妇| 欧美日韩国产亚洲二区| 免费看日本二区| 国产1区2区3区精品| 国产精品1区2区在线观看.| 午夜视频精品福利| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 久久久国产精品麻豆| 男女视频在线观看网站免费 | 757午夜福利合集在线观看| 亚洲精品在线美女| 亚洲欧美日韩无卡精品| 老汉色av国产亚洲站长工具| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 欧美乱妇无乱码| 首页视频小说图片口味搜索| 国内精品久久久久精免费| 欧美最黄视频在线播放免费| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 嫩草影视91久久| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 天堂√8在线中文| 免费人成视频x8x8入口观看| bbb黄色大片| 国产激情久久老熟女| 国产精品电影一区二区三区| 国产精品国产高清国产av| 老汉色∧v一级毛片| 男人舔女人下体高潮全视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 久久精品91无色码中文字幕| 久久久久性生活片| 九色国产91popny在线| 中文资源天堂在线| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲av成人av| 日日干狠狠操夜夜爽| 日本一区二区免费在线视频| 日韩欧美在线二视频| 亚洲av成人一区二区三| 欧美成人午夜精品| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 51午夜福利影视在线观看| 成年人黄色毛片网站| 欧美成人免费av一区二区三区| 免费一级毛片在线播放高清视频| 成年版毛片免费区| 亚洲成人久久性| 精品乱码久久久久久99久播| 欧美zozozo另类| 老司机午夜十八禁免费视频| 久久人妻av系列| 精品福利观看| 成人三级黄色视频| 色综合站精品国产| 亚洲成av人片免费观看| 午夜福利成人在线免费观看| 在线国产一区二区在线| 欧美高清成人免费视频www| 午夜激情av网站| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产精华一区二区三区| 操出白浆在线播放| 观看免费一级毛片| 手机成人av网站| 亚洲精品在线观看二区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 色播亚洲综合网| 女人被狂操c到高潮| 91在线观看av| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 十八禁网站免费在线| 男人的好看免费观看在线视频 | 亚洲精品在线美女| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 成人亚洲精品av一区二区| 久久久久久久久中文| 国产亚洲精品久久久久久毛片| av欧美777| 香蕉丝袜av| 亚洲人成电影免费在线| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久精品91蜜桃| 黄片小视频在线播放| 久久久久九九精品影院| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 日韩欧美在线乱码| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 哪里可以看免费的av片| 99久久无色码亚洲精品果冻| 女人被狂操c到高潮| 日日爽夜夜爽网站| 国产精品一区二区精品视频观看| 成人三级黄色视频| 欧美日韩乱码在线| 首页视频小说图片口味搜索| 超碰成人久久| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 最近视频中文字幕2019在线8| 日本一区二区免费在线视频| 91大片在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产精品久久久人人做人人爽| 18美女黄网站色大片免费观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 久久精品国产亚洲av高清一级| www国产在线视频色| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 1024手机看黄色片| 久久久久久久久免费视频了| 黑人操中国人逼视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 老司机在亚洲福利影院| 色噜噜av男人的天堂激情| 久久精品国产亚洲av高清一级| 人妻久久中文字幕网| 超碰成人久久| 在线观看一区二区三区| 精品免费久久久久久久清纯| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 无限看片的www在线观看| 色在线成人网| 搡老妇女老女人老熟妇| 最新在线观看一区二区三区| 久久精品国产综合久久久| 免费看a级黄色片| 成在线人永久免费视频| 99热6这里只有精品| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 999久久久精品免费观看国产| 国产免费男女视频| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 久久久久久大精品| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| 久久精品国产综合久久久| 午夜影院日韩av| 两个人视频免费观看高清| 中文字幕最新亚洲高清| 人妻夜夜爽99麻豆av| 18禁国产床啪视频网站| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 久久草成人影院| 又黄又粗又硬又大视频| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 国产精品 国内视频| 精品一区二区三区av网在线观看| 悠悠久久av| 九九热线精品视视频播放| 国产区一区二久久| 国产乱人伦免费视频| 亚洲成人国产一区在线观看| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产av麻豆久久久久久久| 亚洲欧美日韩无卡精品| 久久久久久久精品吃奶| 日韩欧美在线二视频| 亚洲电影在线观看av| 九色成人免费人妻av| 99久久精品国产亚洲精品| 不卡av一区二区三区| 国产免费av片在线观看野外av| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 黄色a级毛片大全视频| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 国产精品av久久久久免费| 亚洲男人的天堂狠狠| 妹子高潮喷水视频| 亚洲无线在线观看| e午夜精品久久久久久久| 久久久久久久久中文| 国产在线观看jvid| 中国美女看黄片| 精品国内亚洲2022精品成人| 免费看a级黄色片| 国产精品 国内视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 午夜福利在线在线| 免费看美女性在线毛片视频| 婷婷丁香在线五月| 国语自产精品视频在线第100页| 在线永久观看黄色视频| 精品欧美国产一区二区三| 久久 成人 亚洲| 国产在线观看jvid| 嫁个100分男人电影在线观看| 99热这里只有是精品50| 男女午夜视频在线观看| 老鸭窝网址在线观看| 精品一区二区三区av网在线观看| ponron亚洲| 狠狠狠狠99中文字幕| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 不卡一级毛片| 舔av片在线| 午夜福利成人在线免费观看| 午夜两性在线视频| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美色欧美亚洲另类二区| 老司机在亚洲福利影院| 国产高清视频在线观看网站| 国产97色在线日韩免费| 一二三四在线观看免费中文在| 免费高清视频大片| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 日韩欧美在线乱码| 草草在线视频免费看| 欧美乱妇无乱码| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 丰满人妻一区二区三区视频av | 国产在线精品亚洲第一网站| 一区二区三区高清视频在线| 变态另类丝袜制服| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 婷婷精品国产亚洲av| 99精品欧美一区二区三区四区| 成年免费大片在线观看| 成年版毛片免费区| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲一区高清亚洲精品| 麻豆成人av在线观看| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产单亲对白刺激| 国产视频一区二区在线看| 亚洲中文av在线| 精品欧美一区二区三区在线| 不卡一级毛片| 亚洲七黄色美女视频| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲av片天天在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| 欧美日韩福利视频一区二区| 欧美激情久久久久久爽电影| 变态另类丝袜制服| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 亚洲国产高清在线一区二区三| 精品久久久久久久毛片微露脸| 国产片内射在线| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 国产单亲对白刺激| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | √禁漫天堂资源中文www| 老熟妇仑乱视频hdxx| 一级片免费观看大全| 一级毛片高清免费大全| 国产免费av片在线观看野外av| 亚洲免费av在线视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 日本免费a在线| 免费观看精品视频网站| 久久久国产欧美日韩av| 香蕉国产在线看| 日本熟妇午夜| АⅤ资源中文在线天堂| 精品日产1卡2卡| 18禁观看日本| 男女视频在线观看网站免费 | 国产精品久久久人人做人人爽| 99热6这里只有精品| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久中文字幕人妻熟女| xxx96com| 99re在线观看精品视频| 午夜精品久久久久久毛片777| 国内精品一区二区在线观看| 免费高清视频大片| 国产精品久久电影中文字幕| ponron亚洲| 久久久久九九精品影院| 国产免费男女视频| 床上黄色一级片| 色尼玛亚洲综合影院| 国产男靠女视频免费网站| 日韩大码丰满熟妇| 国产亚洲精品av在线| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 麻豆久久精品国产亚洲av| av视频在线观看入口| 国产1区2区3区精品| 宅男免费午夜| 一边摸一边抽搐一进一小说| 制服人妻中文乱码| 美女午夜性视频免费| 精品久久久久久久末码| 精品一区二区三区av网在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产精品久久久久久久电影 | 国产精品久久久久久久电影 | 成人特级黄色片久久久久久久| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 老司机福利观看| 一级黄色大片毛片| 国产精品精品国产色婷婷| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 国产又色又爽无遮挡免费看| 很黄的视频免费| 人妻夜夜爽99麻豆av| 最近最新免费中文字幕在线| 国产伦在线观看视频一区| 一二三四社区在线视频社区8| 午夜成年电影在线免费观看| 久久久国产欧美日韩av| 国产日本99.免费观看| 欧美一区二区精品小视频在线| www.www免费av| 激情在线观看视频在线高清| 黄色视频,在线免费观看| 黄色毛片三级朝国网站| 老汉色av国产亚洲站长工具| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 成人三级黄色视频| 精品无人区乱码1区二区| 日韩欧美 国产精品| 亚洲成av人片免费观看| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 男女之事视频高清在线观看| 中文字幕高清在线视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 日韩欧美国产在线观看| 国产不卡一卡二| 亚洲欧美激情综合另类| 黄色 视频免费看| 午夜福利视频1000在线观看| 国产精品一区二区精品视频观看| 黄频高清免费视频| 亚洲午夜理论影院| 亚洲熟妇熟女久久| 国产精品一区二区免费欧美| 男女做爰动态图高潮gif福利片| www国产在线视频色| 午夜影院日韩av| x7x7x7水蜜桃| 久久久久久人人人人人| 欧美色视频一区免费| 久久久久久免费高清国产稀缺| a级毛片在线看网站| 国产精品一区二区精品视频观看| 大型av网站在线播放| 欧美性长视频在线观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产成+人综合+亚洲专区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲在线自拍视频| 少妇被粗大的猛进出69影院| 99久久综合精品五月天人人| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国内精品久久久久久久电影| 免费在线观看影片大全网站| 好男人在线观看高清免费视频| 欧美成人午夜精品| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 国产黄a三级三级三级人| 制服人妻中文乱码| 一进一出好大好爽视频| 正在播放国产对白刺激| 一级a爱片免费观看的视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 午夜视频精品福利| 国产成人aa在线观看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 成人av在线播放网站| 悠悠久久av| 操出白浆在线播放| 国产爱豆传媒在线观看 | 精品国产亚洲在线| 久久性视频一级片| 不卡一级毛片| 最近在线观看免费完整版| 999精品在线视频| 精品熟女少妇八av免费久了| 老汉色∧v一级毛片| 成人av在线播放网站| 999精品在线视频| 99在线视频只有这里精品首页| 在线观看www视频免费| tocl精华| 人妻夜夜爽99麻豆av| 麻豆成人午夜福利视频| 久久婷婷成人综合色麻豆| 麻豆国产av国片精品| 18禁观看日本| 99久久国产精品久久久| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲欧美激情综合另类| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 操出白浆在线播放| 久久久久久人人人人人| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲精品一区av在线观看| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 精品久久蜜臀av无| 国产成人系列免费观看| 久久草成人影院| 美女午夜性视频免费| 国产久久久一区二区三区| 在线视频色国产色| 国产单亲对白刺激| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产久久久一区二区三区| 国产欧美日韩一区二区三| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产成年人精品一区二区| 日韩大尺度精品在线看网址| 哪里可以看免费的av片| 波多野结衣巨乳人妻| 久久中文字幕一级| 757午夜福利合集在线观看| 国产成人精品久久二区二区91| 亚洲色图av天堂| 久久久久九九精品影院| 国产精品久久久久久久电影 | 精品人妻1区二区| 又爽又黄无遮挡网站| 一区福利在线观看| 精品久久久久久久久久久久久| 美女黄网站色视频| 欧美久久黑人一区二区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 中文字幕久久专区| 九九热线精品视视频播放| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产成人精品无人区| 女同久久另类99精品国产91| a级毛片在线看网站| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 午夜精品久久久久久毛片777| 日韩欧美国产一区二区入口| 精品欧美一区二区三区在线| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产伦在线观看视频一区| av视频在线观看入口| 午夜两性在线视频| 久99久视频精品免费| 亚洲欧美日韩无卡精品| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 黄片小视频在线播放| 一级毛片高清免费大全| 黄频高清免费视频| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 后天国语完整版免费观看| 神马国产精品三级电影在线观看 | 亚洲精品在线观看二区|