EGFR、Ki67在三陰性與非三陰性乳腺癌中的表達及其與TNBC病理特征的相關(guān)性

李華民

EGFR、Ki67在三陰性與非三陰性乳腺癌中的表達及其與TNBC病理特征的相關(guān)性

李華民

目的探討EGFR、Ki67在三陰性與非三陰性乳腺癌中的表達差異及兩者的表達與TNBC臨床病理特征的關(guān)系。方法分析non-TNBC與TNBC 患者的臨床病理資料，采用非生物素二步法檢測76例乳腺癌標本里EGFR、Ki67的表達，對比兩者在non-TNBC與TNBC中的區(qū)別。檢測EGFR與Ki67在TNBC中的陽性表達率，研究其與病理參數(shù)的相關(guān)性。結(jié)果和non-TNBC相比，TNBC多見于絕經(jīng)前婦女，組織學分級較差，較易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移，且出現(xiàn)較早。EGFR與Ki67在TNBC組織中的陽性表達率均高于在non-TNBC組織中的陽性表達率。EGFR、Ki67的表達與TNBC腫塊直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、組織學分級之間均具有相關(guān)性。結(jié)論EGFR與Ki67在TNBC中表達均升高。兩者的表達與腫塊直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、組織學分級之間均具有相關(guān)性。

EGFR；Ki67；三陰性乳腺癌；非三陰性乳腺癌

乳腺癌是一種異質(zhì)性較高的惡性腫瘤，在全身惡性腫瘤里，其發(fā)病率占7%～10%[1]，表現(xiàn)為分子生物學、病理、臨床、預(yù)后等方面的差異性。乳腺癌可以依據(jù)分子分型，分為5種亞型[2]，三陰性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)屬于其中一種，指表皮生長因子2(human epider growth factor receptor,HER)，孕激素受體(progesterone receptor,PR)，雌激素受體(estrogen receptor,ER)3種受體分子，均表達為陰性。TNBC具有侵襲性強、無靶向藥物治療指征、對激素不敏感、預(yù)后差、發(fā)病年齡相對較小、復(fù)發(fā)率高等特點[3-4]，因此引起了眾多研究者的廣泛關(guān)注與重視。Ki67、EGFR (epidermal growth factor receptor,表皮生長因子受體)在腫瘤細胞增殖過程里，起著重要的作用。TNBC的發(fā)生發(fā)展與細胞的異常增殖相關(guān)[5]。本研究對76例乳腺癌患者進行了回顧性分析，旨在分析探討EGFR、Ki67在TNBC與non-TNBC中的表達差異，及兩者的表達與TNBC臨床病理特征的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2017年1月我院收治的經(jīng)病理診斷確診為乳腺癌的女性患者76例，其中TNBC 13例，non-TNBC 63例?；颊吣挲g36～73歲。所有患者的病理資料均完整，包括腫瘤大小、年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、臨床分期、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況等。所有患者入院前，均未進行任何的治療，入院后，首先采取手術(shù)治療，且術(shù)前均未經(jīng)放療、化療。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器與試劑 SP免疫組化試劑盒及DAB顯色試劑盒均購自北京中杉金橋生物科技有限公司，兔抗人Ki67單克隆抗體及兔抗人EGFR單克隆抗體均購自福州邁新生物科技開發(fā)有限公司。

1.2.2 檢測方法 切除乳腺癌組織標本，以4%甲醛固定腫瘤標本，以石蠟包埋，經(jīng)切片機，取得4 μm厚切片，將切片放在烤片機上，烘烤2 h，置于60 ℃恒溫箱中一夜，以防脫片。采用非生物素二步法。染色結(jié)果采用DAB顯色。每次實驗用陽性組織切片(已知)作為陽性對照，用PBS液代替一抗作為陰性對照。

1.3 結(jié)果判定

EGER判斷標準：細胞膜出現(xiàn)連續(xù)性的棕黃色為EGER陽性細胞，按比例計數(shù)后，按百分比分類。陽性細胞數(shù)占比(細胞總數(shù)為200個)≤5%為陰性(-)，>5%～25%為弱陽性(+)，>25%～50%為陽性(++)，>50%就為強陽性(+++)。

Ki67判斷標準：細胞核內(nèi)有棕黃色顆粒為Ki67陽性細胞，按比例計數(shù)后，按百分比分類。陽性細胞數(shù)占比(細胞總數(shù)為200個)≤5%為陰性(-)，>5%～25%為弱陽性(+)，>25%～50為陽性(++)，>50%就為強陽性(+++)。

1.4 統(tǒng)計學方法

選擇SPSS 17.0軟件，計數(shù)資料用%表示，不同組別之間的比較采用χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 non-TNBC與TNBC患者的臨床病理特征比較

在76例患者里，經(jīng)病理檢查證實為非三陰性乳腺癌患者63例(82.89%)，三陰性乳腺癌患者13例(17.11%)。經(jīng)統(tǒng)計學處理，non-TNBC與TNBC在年齡、腫塊直徑、TNM分期、病理學類型方面相比，差異不明顯，無統(tǒng)計學意義。TNBC相比non-TNBC，多見于絕經(jīng)前婦女，組織學分級較差，較易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，較易發(fā)生復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移且較早出現(xiàn)，較易發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移，差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 non-TNBC與TNBC 患者的臨床病理資料分析

2.2 EGFR與Ki67在non-TNBC與TNBC中的表達

EGFR與Ki67在TNBC組織中的陽性表達率均高于在non-TNBC組織中的陽性表達率，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 EGFR與Ki67在non-TNBC與TNBC中的表達(例，%)

2.3 EGFR與Ki67的表達與TNBC 病理參數(shù)的關(guān)系

在13例TNBC患者中，EGFR、Ki67的表達與絕經(jīng)狀態(tài)、發(fā)病年齡、病理學類型之間無相關(guān)性(P>0.05)，與腫塊直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、組織學分級之間均具有相關(guān)性(P<0.05)，見表3。

表3 EGFR與Ki67的表達與TNBC 病理參數(shù)的關(guān)系(例，%)

注：各分層EGFR總陽性例數(shù)應(yīng)為9例、Ki67總陽性例數(shù)應(yīng)為12例。

3 討論

EGFR為酪氨酸激酶受體家族，其與乳腺癌的增殖、生長有密切的關(guān)系[6-7]。據(jù)報道，在乳腺腫瘤患者里，有27%～30%的患者有EGFR過表達，在TNBC里，更是有45%～70%的高表達概率[8]。在本次研究里，EGFR在TNBC里有69.23%的表達率，高于其在non-TNBC里的表達率，差異明顯，具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。同時，在TNBC里，EGFR的陽性表達率與腫塊直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、組織學分級相關(guān)(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計學意義，提示EGFR的高表達極有可能在TNBC的增殖發(fā)展中起著重要的作用。EGFR是通過調(diào)控細胞增殖、分裂以及血管形成等過程，來增加乳腺癌的侵襲性[9]，因而，若是能找到抑制EGFR蛋白作用的作用靶點，就可能抑制部分non-TNBC向TNBC轉(zhuǎn)化，以阻斷惡性增殖的能力。所以，可以考慮將EGFR作為靶向藥物治療TNBC的重要突破口。

Ki67位于細胞核內(nèi)，與細胞增殖密切相關(guān)[10-12]。Ki67為目前較為確定的核增殖標志物，其半衰期很短，脫離了細胞周期后就會快速降解[13]，因而在評估腫瘤細胞增殖活性時，其成為了重要標志物。在本次研究里，TNBC里Ki67的陽性表達率，明顯高于non-TNBC里Ki67的陽性表達率，正如Bauer等研究所表明的，在多種惡性腫瘤實體里，Ki67的表達率會遠高于正常的組織，與多種惡性腫瘤的發(fā)展，轉(zhuǎn)移以及預(yù)后相關(guān)[14]。

Ki67在TNBC里的陽性表達率為92.31%，為高度表達。同時，在TNBC里Ki67的陽性表達率與腫塊直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、組織學分級相關(guān)(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計學意義，提示Ki67陽性者易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，癌細胞增殖程度增高，乳腺癌易生長，侵襲能力增強。 Ki67的表達可作為判斷TNBC惡性程度的重要指標，對臨床治療方案的制定有重要影響。

綜上所述，三陰性乳腺癌在乳腺癌里為一種高危的類型，其多見于絕經(jīng)前婦女，患者較易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、組織學分級較差。EGFR的表達在TNBC的增殖發(fā)展中起著重要的作用，可將EGFR作為靶向藥物治療TNBC的重要突破口。Ki67的表達可作為判斷三陰性乳腺癌惡性程度的重要指標，指導(dǎo)臨床治療方案的制定。

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TheExpressionofEGFRandKi67inTripleNegativeandNon-TripleNegativeBreastCancerandtheRelationshipwithClinicalPathologyofTNBC

LIHuamin.

WeinanCentralHosptial,Weinan,714000

ObjectiveTo analyze the differential expression of EGFR and Ki67 in triple negative and non-triple negative breast cancer (TNBC),and the relationship with TNBC clinical pathology.MethodsThe clinicopathologic data of 76 patients with non-TNBC and TNBC were analyzed,and Two-Step Non-biotin was used to detect the expression of EGFR and Ki67 in 76 patients with non-TNBC and TNBC.Compared the difference of the expression of EGFR and Ki67 in non-TNBC and TNBC,the positive expression rates of EGFR and Ki67 were detected in TNBC.The relationship between the positive expression rate and pathological parameters in TNBC was analyzed.ResultsCompared with non-TNBC,TNBC was more common in premenopausal women,who had poor histologic grade and were prone to lymph node metastasis,recurrence metastases and distant metastases at early time.EGFR and Ki67 have higher positive expression rates in TNBC than non-TNBC.The positive expression of EGFR and Ki67 was relevant to the diameter of the tumor,lymph node metastasis,TNM staging,and histological gradation.ConclusionPositive expression rate of EGFR and Ki67 in TNBC are higher than non-TNBC,And the positive expression of EGFR and Ki67 is relevant to the diameter of the tumor,lymph node metastasis,TNM staging,and histological gradation.

EGFR；Ki67;Triple negative breast cancer(TNBC);Non-TNBC

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1759～1762)

714000 陜西省渭南市中心醫(yī)院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.11.006

R737.9

A

1001-5930(2017)11-1759-04

2017-05-09

2017-07-10)

(編輯：甘艷)