血清游離輕鏈檢測(cè)在腎臟相關(guān)疾病中的診斷意義和應(yīng)用價(jià)值

余悠悠，潘秀軍

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院 檢驗(yàn)科,上海200092)

血清游離輕鏈檢測(cè)在腎臟相關(guān)疾病中的診斷意義和應(yīng)用價(jià)值

余悠悠，潘秀軍*

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院 檢驗(yàn)科,上海200092)

目的定量檢測(cè)血清游離輕鏈(serum free light chain,sFLC κ、λ )在慢性腎臟疾病(CKD)中的水平，分析在不同情況下腎損傷時(shí)血清游離輕鏈的變化，探討其在腎臟疾病中的臨床意義和應(yīng)用價(jià)值。方法將慢性腎臟疾病患者分為3組，62例非骨髓瘤性慢性腎臟疾病患者，22例骨髓瘤性腎病κ型患者，12例骨髓瘤性腎病λ型患者，另選取40例健康體檢人群作為對(duì)照，采用散射比濁法定量檢測(cè)血清游離輕鏈 (κ、λ)的含量并計(jì)算κ/λ，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果62例非骨髓瘤性慢性腎臟疾病患者sFLCκ和λ，κ/λ比值均升高,與健康對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05)；22例骨髓瘤性腎病κ型患者sFLCκ和λ，κ/λ比值與對(duì)照組比較，均有顯著性差異(P<0.05)；12例骨髓瘤性腎病λ型患者的sFLCκ 的結(jié)果與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)，sFLC λ結(jié)果與對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05)，κ/λ比值下降，與對(duì)照組比較亦有顯著性差異(P<0.05)。另外，隨著CKD分期的進(jìn)展，血清游離輕鏈 κ、λ進(jìn)行性地升高，尤其是在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期的慢性腎臟疾病中，腎臟功能的損傷對(duì)血清游離輕鏈λ比對(duì)血清游離輕鏈κ 的影響更顯著。結(jié)論血清多克隆游離輕鏈(sFLC κ、λ)水平檢測(cè)，尤其κ/λ比值可反映腎損傷程度，當(dāng)用于多發(fā)性骨髓瘤疾病的輔助診斷時(shí)，可作為腎損傷情況的評(píng)估，提高臨床診斷治療的準(zhǔn)確性。在CKD患者腎損傷程度評(píng)估中亦具有重要的臨床意義。

慢性腎臟疾??；骨髓瘤性腎病；血清游離輕鏈；散射免疫比濁

(ChinJLabDiagn,2017,21:2087)

健康人的免疫球蛋白(immunoglubin，Ig)由兩條重鏈和兩條輕鏈經(jīng)二硫鍵聯(lián)結(jié)而成的完整分子，其中輕鏈有兩型，即 Kappa(κ)和Lambda(λ)，在一個(gè)Ig分子中兩條輕鏈的比值接近2∶1[1]。輕鏈(light chain,LC)由B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，健康人每天產(chǎn)生LC約為0.5-1 g，多于重鏈(heavy chain,HC)[2]，部分輕鏈與重鏈以1∶1的比例結(jié)合形成完整的免疫球蛋白，還有部分未與重鏈結(jié)合而游離地存在于血清中,稱(chēng)為血清游離輕鏈(serum free light chain,sFLC)。對(duì)于正常成人而言，血清FLC主要通過(guò)腎臟清除和代謝，清除速率和分子大小有關(guān)。腎小球相對(duì)分子質(zhì)量在40-60×103的小分子物質(zhì)可以自由濾過(guò)，L鏈的相對(duì)分子質(zhì)量約22．5×103，因此可以自由通過(guò)腎小球，然后在近曲小管被重吸收和代謝。血清中L鏈的量最終取決于B細(xì)胞的合成分泌與腎臟清除的動(dòng)態(tài)平衡結(jié)果[3]。非骨髓瘤性慢性腎臟疾病和骨髓瘤性腎病患者都由不同病因造成腎臟損傷，本試驗(yàn)的主要目的是評(píng)價(jià)不同病因造成腎損傷時(shí)血清sFLC(κ、λ)結(jié)果變化及比值(κ/λ)的水平。以探討其在腎臟疾病中的臨床意義和應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象收集2015年11月至2016年6月上海交通大學(xué)附屬新華醫(yī)院34例多發(fā)性骨髓瘤患者，系臨床骨髓活檢、免疫電泳等確診患者，其中22例骨髓瘤性腎病κ型患者，12例骨髓瘤性腎病λ型患者。22例骨髓瘤性腎病κ型患者，男性13例，女性9例，平均年齡分別為63.9歲和57.8歲。12例骨髓瘤性腎病λ型患者，男性5例，女性7例，平均年齡分別為62.6歲和58.4歲。62例非骨髓瘤性腎臟疾病患者，男性34例，女性28例，且根據(jù)GFR的水平分為5期[4],各期病例數(shù)分別為8、8、16、15和15，平均年齡分別為34.8、55.4、62.4、64.1和69.1。健康體檢人群40例，其中男女性各20例，平均年齡分別為47.90歲和48.75歲。

1.2方法采用免疫散射比濁法。美國(guó)Beckman公司IMMAGE 800全自動(dòng)免疫散射濁度儀(Beckman Coulter)，英國(guó)The Binding Site公司(FreeliteTM)提供sFLCκ、λ檢測(cè)試劑。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。用直線(xiàn)回歸計(jì)算相關(guān)性，統(tǒng)計(jì)描述采用中位數(shù)(四分位數(shù))。兩樣本比較采用Mann-Whitney檢驗(yàn)，多個(gè)樣本之間的比較采用Kruskal Willis檢驗(yàn)，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1血清游離輕鏈(FLC κ 、λ )在非骨髓瘤性腎臟疾病，及骨髓瘤性腎病中的結(jié)果分析，采用中位數(shù)表示，見(jiàn)表1。

表1 各組血清游離輕鏈(sFLC κ 、λ )結(jié)果及比值(κ/λ)(M)

注：與健康對(duì)照組比較：*P<0.05

2.2健康對(duì)照組與CKD各期sFLC(κ 、λ )結(jié)果及比值比較，見(jiàn)圖1。

3 討論

CKD患者腎功能受損后，腎小球?yàn)V過(guò)率(GFR)下降，sFLC在腎臟中的代謝受到影響。隨著腎臟受損程度逐漸加重，腎臟清除功能進(jìn)行性下降，本文結(jié)果顯示非骨髓瘤性慢性腎臟疾病患者血清游離輕鏈(sFLC κ、λ)結(jié)果及比值(κ/λ)均升高，與正常對(duì)照組有顯著差異(P<0.05)。Desjardins L[5]等人也得出相同的結(jié)論。并且分子量大小不同的物質(zhì)腎臟對(duì)其的清除能力不相同[6]。因此當(dāng)腎臟受損后，由于FLC κ以單體形式存在，分子較FLC λ小，在 它在腎臟中更易濾過(guò)，在CKD早期它所受的影響較小(見(jiàn)圖2：在CKDⅠ期到Ⅲ期的進(jìn)展過(guò)程中，s FLC κ游離輕鏈的上升速度比sFLCλ的速度慢)。但FLC λ與腎臟功能變化比FLC κ關(guān)系更密切，更能準(zhǔn)確反映腎臟功能變化，有研究顯示血清游離輕鏈logκ和logλ與末期腎功能衰竭死亡因素密切相關(guān)，但是當(dāng)eGRF調(diào)節(jié)后，logκ顯著性的減少，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是logλ血清游離輕鏈仍然具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[7]。這個(gè)結(jié)果與本實(shí)驗(yàn)所獲得的數(shù)據(jù)結(jié)果一致。當(dāng)腎功能受損嚴(yán)重，網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)成為血清游離輕鏈κ、λ的主要清除部位。網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)對(duì)血清游離輕鏈的清除不受分子大小的影響，κ、λ型血清游離輕鏈的清除速度相近[8]。在病情進(jìn)展中，sFLC κ/λ比值應(yīng)呈現(xiàn)逐漸升高的表現(xiàn)。因此，CKD患者除了完善血清免疫固定電泳，sFLC檢測(cè)也是十分必要的，可以更早、更準(zhǔn)確地評(píng)估腎功能的損傷程度[1]。

注： sFLCκ在健康人群及CKD各期中的水平(A)； sFLCλ在健康人群及CKD各期中的水平(B)； sFLCκ/λ在健康人群和及CKD各期中的水平(C)。

圖1健康對(duì)照組與CKD各期sFLC結(jié)果比較

本文結(jié)果還顯示22例骨髓瘤性腎病κ型患者sFLCκ顯著升高，λ值下降，κ/λ比值15.1,顯著升高，與對(duì)照組比較，均有顯著性差異；12例骨髓瘤性腎病λ型患者的sFLCκ 的結(jié)果與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異，而sFLC λ結(jié)果顯著升高，與對(duì)照組比較有顯著性差異，κ /λ比值0.20，與對(duì)照組比較亦有顯著性差異。與陳海飛等研究結(jié)果一致[3]。多發(fā)性骨髓瘤(MM)致腎損害常表現(xiàn)繼發(fā)性腎病綜合征，稱(chēng)為骨髓瘤性腎病，其特點(diǎn)是患者血清和尿中常能檢測(cè)到單一增殖的輕鏈Kappa(M)或Lambda(k)[9]。對(duì)于正常腎功能的漿細(xì)胞病(plasma celldyscrasia，PCD)患者只有L鏈量超出近曲小管的最大重吸收能力(10-309/d)才有可能形成溢出性蛋白尿，從而在終尿中檢測(cè)到。如L鏈的量繼續(xù)分泌增加遠(yuǎn)大于腎臟的重吸收能力進(jìn)入遠(yuǎn)曲小管并且可能形成管型堵塞腎小管，導(dǎo)致腎小球壞死腎功能下降，這樣，血清中的L鏈進(jìn)一步升高，而尿中L鏈減少，殘存的腎單位勢(shì)必濾過(guò)更多的L鏈，如此惡性循環(huán)，最終腎功能進(jìn)一步惡化。如上所述，血清L鏈水平上升提示病情進(jìn)展，尿中L鏈的下降無(wú)法區(qū)分是治療有效還是疾病進(jìn)展惡化。因此，血清FLC的水平和病情相關(guān)，尿L鏈水平則和病情不完全平行[3]。所以血清游離輕鏈分析提供了一個(gè)比尿蛋白電泳更準(zhǔn)確的檢測(cè)游離輕鏈的方法[10]。FLC測(cè)定的敏感度明顯優(yōu)于IFE和PE[11]。因此，在疑似為“非分泌型骨髓瘤” 時(shí)，免疫比濁法檢測(cè)sFLC是一種高度敏感的檢測(cè)方法,有助于NSMM患者輕鏈克隆性的判斷[12]。避免漏診和誤診。在臨床上90%的AL型淀粉樣變性患者存在血游離輕鏈水平升高和比值異常(<0．26或>1．65)，其中80%為λ輕鏈的異常。κ 輕鏈異常雖較少見(jiàn)，但患者臨床表現(xiàn)常較重，多伴腎功能不全。有觀察表明，患者游離輕鏈的水平與疾病的臨床表現(xiàn)和預(yù)后相關(guān)[13]。

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Diagnosticsignificanceandapplicationvalueofserumfreelightchaindetectioninkidneyrelateddiseases

YUYou-you,PANXiu-jun.

(Departmentoflaboratory,XinhuaHospitalAffiliatedtoShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200092,China)

ObjectiveQuantitative detection of serum free light chain (serum free light chain sFLC,kappa and lambda) in chronic kidney disease (CKD) in the level of analysis in renal injury changes of serum free light chain in different conditions,explore the kidney disease with clinical significance and application value.MethodsKidney disease patients were divided into 3 groups,62 cases of non tumor bone marrow of patients with chronic kidney disease,22 cases of myeloma nephropathy in patients with type κ,12 cases of myeloma nephropathy patients with type λ,the other 40 healthy cases were selected as control group,using nephelometry quantitative detection of serum free light chain (kappa,lambda) content and calculated the kappa/lambda,and the results were analyzed.Results62 cases of non myeloma kidney disease in patients with chronic sFLC kappa and lambda,kappa / lambda ratio were increased,there were significant differences between the control group and health (P<0.05); 22 cases of sFLC myeloma nephropathy patients with type k kappa and lambda,kappa/lambda ratio compared with the control group,there were significant differences(P<0.05);the results of 12 cases of myeloma nephropathy in patients with type λ sFLC kappa compared with the control group had no significant difference (P>0.05,sFLC).Results of lambda there was significant difference compared with the control group (P<0.05),kappa / lambda ratio decreased,compared with the control group,there was significant difference (P<0.05).In addition,with the CKD stage of development,serum free light chain kappa and lambda was increased,especially in patients with chronic kidney disease Ⅰ,Ⅱ and Ⅲ.In the effect of kidney on serum free light chain lambda is more significant than serum free light chain kappa.ConclusionPolyclonal serum free light chain (sFLC kappa,lambda) level detection,especially the kappa/lambda ratio can reflect the severity of kidney damage,when used in the diagnosis of multiple myeloma disease,can be used as the assessment of kidney injury,improve the accuracy of clinical diagnosis and treatment.In the evaluation of the degree of renal injury in CKD patients also has important clinical significance.

chronic kidney disease;bone marrow tumor nephropathy;serum free light chain;scattering immune turbidity

*通訊作者

1007-4287(2017)12-2087-04

R692

A

余悠悠，女，主管技師，主要從事免疫學(xué)項(xiàng)目檢驗(yàn)；潘秀軍，女，碩士，副主任技師，主要從事免疫醫(yī)學(xué)研究。

2016-09-15)