PCR法宮頸分泌物沙眼衣原體、解脲支原體檢測在女性不孕癥患者檢查中的應(yīng)用

安愛平

(南陽市中心醫(yī)院 河南 南陽 473000)

PCR法宮頸分泌物沙眼衣原體、解脲支原體檢測在女性不孕癥患者檢查中的應(yīng)用

安愛平

(南陽市中心醫(yī)院 河南 南陽 473000)

目的分析聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)法宮頸分泌物沙眼衣原體(CT)、解脲支原體(UU)檢測在女性不孕癥患者檢查中的意義。方法選取南陽市中心醫(yī)院2016年8月至2017年7月婦產(chǎn)科門診收治的62例不孕癥患者作為觀察組，另選取同期62例健康體檢者作為對照組。采用PCR法檢測對比兩組CT、UU、CT+UU陽性率。結(jié)果觀察組UU陽性率為74.19%(46/62)、CT陽性率為82.26%(51/62)、CT+UU陽性率為66.13%(41/62)，高于對照組的14.52%(9/62)、17.75%(11/62)、8.06%(5/62)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論宮頸分泌物沙眼衣原體、解脲支原體感染與女性不孕癥密切相關(guān)，臨床應(yīng)重視其檢查，為不孕癥診治提供參考。

沙眼衣原體；解脲支原體；不孕癥

近些年，不孕不育在全球范圍內(nèi)呈上升趨勢，世界衛(wèi)生組織調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，已婚夫婦中不孕不育人數(shù)占10%～15%，其中女性不孕占全部的25%～36%，目前不孕癥已成為生殖領(lǐng)域研究的熱點[1]。沙眼衣原體(CT)、解脲支原體(UU)是泌尿生殖系統(tǒng)感染常見病原體之一，其主要經(jīng)性接觸進(jìn)行傳播，可引發(fā)宮頸炎、陰道炎、輸卵管炎等，是導(dǎo)致女性不孕重要因素[2-3]。同時妊娠期婦女一旦發(fā)生CT、UU感染，將會引發(fā)早產(chǎn)、流產(chǎn)等不良妊娠結(jié)局。為進(jìn)一步深入研究女性不孕癥與CT、UU關(guān)系，本研究選取南陽市中心醫(yī)院收治的62例不孕癥患者，另設(shè)對照組，分析PCR法宮頸分泌物CT、UU檢測在女性不孕癥患者中檢查的意義。

1 資料與方法

1.1一般資料選取南陽市中心醫(yī)院2016年8月至2017年7月婦產(chǎn)科門診收治的62例不孕癥患者作為觀察組?；颊吲R床上存在宮頸炎、陰道炎、輸卵管炎等疾病相關(guān)癥狀，或其他原因引起的陰道分泌物增多，排除先天性生殖系統(tǒng)缺陷、排卵異常、內(nèi)分泌障礙、子宮內(nèi)膜異位癥、男方精液異常等其他因素引起的不孕?；颊吣挲g為26～39歲，平均(32.24±4.88)歲，不孕時間為2～6 a，平均(3.45±1.03)a。另選取同期62例健康體檢者作為對照組，年齡為27～38歲，平均(31.77±4.23)歲，兩組年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2標(biāo)本采集用長棉棒擦拭宮頸表面黏液并丟棄，再用新棉棒插入宮頸深處轉(zhuǎn)動數(shù)圈，采集宮頸黏膜柱狀上皮細(xì)胞，停留10 s后取出，浸入無菌生理鹽水試管中送檢。

1.3儀器PCR法試劑盒由北京信科奧達(dá)科技有限公司提供，PCR擴(kuò)增儀(上海喬躍電子有限公司，JY-DTC-3G)，紫外透射儀(無錫博弗瑞德生物科技有限公司，BD-BMM1)。

1.4檢測方法嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，擴(kuò)增程序如下：93 ℃環(huán)境下預(yù)變性3 min，之后按照93 ℃(45 s)、55 ℃(40 s)、72 ℃(50 s)重復(fù)循環(huán)35次，最后1次72 ℃延長至5 min，提取15 μl生成物實施瓊脂糖電泳，在紫外透射儀下和陽性對照物在同一水平帶則定為陽性。

1.5觀察指標(biāo)檢測比較兩組CT、UU及CT+UU陽性率。

2 結(jié)果

觀察組UU陽性率為74.19%、CT陽性率為82.26%、CT+UU陽性率為66.13%，高于對照組的14.52%、17.75%、8.06%，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組UU、CT及兩者聯(lián)合檢測陽性率比較[n(%)]

3 討論

女性不孕癥是孕齡期婦女常見疾病。據(jù)統(tǒng)計，近些年我國女性不孕癥有逐年增加趨勢，其主要由輸卵管阻塞、生殖系統(tǒng)感染、排卵異常、遺傳、內(nèi)分泌紊亂等原因造成，其中生殖器感染造成的不孕患者所占比例高達(dá)50%左右[4]。CT、UU等微生物入侵引起生殖系統(tǒng)炎癥在所有病原菌中占首位，由此引發(fā)的不孕癥受到臨床廣泛關(guān)注[5]。

CT經(jīng)性行為進(jìn)行傳播，可發(fā)生泌尿生殖道感染，損傷子宮頸管黏膜組織，導(dǎo)致子宮頸管黏液栓屏障保護(hù)作用減弱或消失，CT感染繼而上行引發(fā)子宮炎及輸卵管炎，使輸卵管阻塞，從而影響受精卵著床導(dǎo)致不孕。另外CT與宿主細(xì)胞受體結(jié)合后，其代謝產(chǎn)物具有一定細(xì)胞毒性，可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性體液及細(xì)胞免疫，引發(fā)超敏反應(yīng)及免疫病理性損傷，進(jìn)而造成不孕。韓燕媚等[6]研究指出，女性不孕患者中，宮頸分泌物CT感染陽性率高達(dá)15%～30%。此外支原體是細(xì)胞生物屬中能獨(dú)立生存最小的微生物，其種類繁雜多樣，其中UU主要寄生于泌尿生殖道，黏附性極強(qiáng)，其能分解脲酶生成堿性NH4，從而破壞機(jī)體生殖系統(tǒng)天然屏障，改變酸性環(huán)境，引發(fā)感染。多數(shù)感染者早期無自覺癥狀，隨著病情加重，出現(xiàn)尿頻、尿急、白帶增多、子宮頸水腫、充血、糜爛等癥狀，可使生殖道發(fā)生粘連、阻塞，進(jìn)而引發(fā)不孕。當(dāng)孕婦感染時，可上行進(jìn)入胎膜、羊水，引發(fā)胎兒感染。由此可知CT、UU均為不孕的潛在致病因素。本研究對有宮頸炎、陰道炎、輸卵管炎等不孕患者采用PCR法進(jìn)行CT、UU檢測，結(jié)果顯示，UU陽性率、CT陽性率、CT+UU陽性率均高于健康體檢者(P<0.05)，提示在女性不孕癥患者中，可將UU、CT檢測作為病因診斷項目之一，以為臨床治療提供參考。此外PCR法屬于一種酶促化學(xué)反應(yīng)，可在試管內(nèi)將待檢測的目的基因在短時間內(nèi)迅速擴(kuò)增至數(shù)十萬倍至上千萬倍，從而降低分析難度，提高基因診斷敏感度。

綜上，宮頸分泌物UU、CT感染與女性不孕癥密切相關(guān)，臨床應(yīng)重視其檢查，為不孕癥診治提供參考。

[1] 李會平,霍新年.不孕不育夫婦生殖道解脲支原體、沙眼衣原體感染及抗精子抗體、抗子宮內(nèi)膜抗體關(guān)系探討[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2014,22(1):108-109.

[2] 李素芳,徐宏仙,黎世貴.沙眼衣原體與解脲支原體感染與女性不孕癥相關(guān)性分析[J].中國性科學(xué),2016,25(11):105-107.

[3] 丁楠,王芳,簡啟亮,等.解脲支原體、沙眼衣原體感染與女性不孕癥相關(guān)性的meta分析[J].中國計劃生育學(xué)雜志,2014,22(12):803-807.

[4] 趙曉萍.不孕癥患者宮頸分泌物和盆腔液中解脲支原體與沙眼衣原體的檢測及其意義[J].中國醫(yī)師進(jìn)修雜志,2014,37(9):52-53.

[5] 郭宏亮,劉惠謹(jǐn),黃榮芳.女性下生殖道感染與不孕癥的相關(guān)性[J].昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2015,36(6):138-140.

[6] 韓燕媚,康嵐,史春,等.不孕婦女解脲脲原體、沙眼衣原體感染水平分析[J].中國地方病防治雜志,2017,32(2):184-186.

R 711.6

10.3969/j.issn.1004-437X.2017.22.037

2017-09-23)