山東地區(qū)人群百日咳桿菌核酸檢測(cè)結(jié)果分析*

劉志 劉義慶 王澤筠 邵婧 李麗 田文君 劉春梅

山東地區(qū)人群百日咳桿菌核酸檢測(cè)結(jié)果分析*

劉志 劉義慶 王澤筠 邵婧 李麗 田文君 劉春梅

目的 分析山東地區(qū)人群中百日咳桿菌感染情況。方法 回顧性收集2015年1月～2016年12月在山東省立醫(yī)院門診就診和住院的患者1 989例，用BP-DNA方法進(jìn)行咽拭子百日咳桿菌核酸檢測(cè)。用spss21.08軟件分析人群中百日咳桿菌感染情況。結(jié)果 1 989例咽拭子標(biāo)本中，百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率為23.06%，男性百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率30.78%，略低于女性的34.75%，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率以0～1歲陽(yáng)性率最高，占38.72%，以后隨著年齡升高陽(yáng)性率逐漸降低，30歲以上組最低（占比14%）；不同季節(jié)之間百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。其中夏季檢測(cè)陽(yáng)性率最高（40.35%），明顯高于秋季的33.11%（P＜0.05），秋季明顯高于春季的24.8%（P＜0.05），春季略高于冬季的19.56%（P＞0.05）。結(jié)論 山東地區(qū)人群百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率存在年齡和季節(jié)差異，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)疑似患者的百日咳桿菌核酸檢測(cè)。

百日咳桿菌 核酸 山東

百日咳桿菌（Bordetella pertussis）屬于博德特氏菌屬，是一種小球狀的革蘭陰性桿菌[1]。百日咳桿菌不易在外環(huán)境中生存，僅能在上呼吸道粘膜中生長(zhǎng)繁殖，所以百日咳的傳播途徑主要通過飛沫傳播，人類是唯一的最終宿主。人群對(duì)百日咳普遍易感，小兒時(shí)期尤其是嬰幼兒時(shí)期最易感，這是因?yàn)槿焉锲谀阁w沒有百日咳桿菌抗體由胎盤傳給胎兒，因此，嬰兒極易被百日咳桿菌感染，且病死率高[2，3]，嚴(yán)重危害嬰幼兒的身體健康。所以，對(duì)于該病進(jìn)行早期診斷尤為重要?，F(xiàn)對(duì)山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院住院及門診患者咽部分泌物中的百日咳桿菌核酸檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，以了解患者的百日咳感染狀況，報(bào)告如下。

材料與方法

1 材料 收集本院2015年1月～2016年12月就診的疑似百日咳桿菌感染的患者1 989例，取咽拭子標(biāo)本進(jìn)行百日咳桿菌核酸檢測(cè)（BP-DNA）。其中，男性1 189例，女性800例。

2 儀器與試劑 BP-DNA檢測(cè)儀器為羅氏LC480II擴(kuò)增儀，試劑由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供。

3 方法 檢測(cè)患者的BP-DNA指標(biāo)，并進(jìn)行比較和分析。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率 共檢測(cè)標(biāo)本1 989例，陽(yáng)性率為32.38%。

2 百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率與性別的關(guān)系 男性患者百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率略低于女性，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.439，P＞0.05）。見表1。

3 百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率與年齡的關(guān)系 0～1歲患者中BP-DNA陽(yáng)性率最高，隨著年齡升高，BP-DNA陽(yáng)性率逐漸降低。不同年齡組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=50.657，P＜0.05），見表2。

表1 百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率的性別比較

表2 不同年齡組百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率的比較

4 百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率與季節(jié)的關(guān)系 百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率在不同季節(jié)間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=51.712，P＜0.05）。夏季百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率最高，明顯高于秋季（χ2=7.473，P＜0.05）；秋季陽(yáng)性率明顯高于春季（χ2=7.638，P＜0.05）；春季檢測(cè)陽(yáng)性率略高于冬季，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.472，P＞0.05），見表3。

表3 不同季節(jié)之間百日咳桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性率的比較

討 論

百日咳是由百日咳桿菌所致的急性呼吸道傳染病。臨床特點(diǎn)為陣發(fā)性痙攣性咳嗽、雞鳴樣吸氣聲及外周血液中淋巴細(xì)胞增多。未經(jīng)治療可遷延2～3個(gè)月。故有“百日咳”之稱。世界衛(wèi)生組織（WHO）統(tǒng)計(jì)報(bào)道全球每年發(fā)生6 000萬(wàn)百日咳病例，其中50萬(wàn)～l00萬(wàn)死亡，并且百日咳的發(fā)病率有明顯上升趨勢(shì)[4]。許多國(guó)家自40年代開始實(shí)施百日咳疫苗接種，使之病死率降低。我國(guó)在20世紀(jì)60年代開始百日咳疫苗的接種，自1978年實(shí)施計(jì)劃免疫后有效控制了百日咳的流行，百日咳的發(fā)病率和死亡率大幅度下降。我國(guó)的百日咳發(fā)病率和死亡率近年維持在低水平。本文對(duì)在山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院就診的1 989例疑似患者進(jìn)行了百日咳桿菌核酸檢測(cè)，PCR檢測(cè)病原體特異性高，快速準(zhǔn)確，大大提高了檢出率，PCR檢測(cè)已成為美國(guó)疾病預(yù)防中心實(shí)驗(yàn)室確診標(biāo)準(zhǔn)之一[5，6]。

此次共檢測(cè)標(biāo)本1 989例，陽(yáng)性率為32.38%；其中女性陽(yáng)性率略高于男性。不同年齡被感染的幾率不同，調(diào)查中發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性率最高的年齡段在0～1歲，其次為1～5歲。在未實(shí)施疫苗接種前百日咳主要發(fā)生在5歲以下兒童，從表2中發(fā)現(xiàn)山東地區(qū)的百日咳病例主要發(fā)生在10歲以下兒童，死亡病例主要發(fā)生在5歲以下兒童。主要臨床表現(xiàn)為咳嗽后屏氣，窒息伴心動(dòng)過緩等[7，8]，且病情進(jìn)展迅速，合并心血管功能障礙時(shí)治療難度較大，病死率高[9]。WHO建議嬰兒出生6周后，應(yīng)盡快接種疫苗[10]，可以減少百日咳的發(fā)病率，降低其死亡率。從表3中可以看出，山東地區(qū)百日咳病例一般出現(xiàn)在夏秋季，3～5月發(fā)病開始升高，6～8月達(dá)到高峰。這與閆樂等研究的春夏季多發(fā)不同[11]，可能因?yàn)槲覈?guó)幅員遼闊，各地氣候不同等因素有關(guān)，說明百日咳的發(fā)病具有地域差異。

由于百日咳具有傳染性，為更好的預(yù)防百日咳的傳播，應(yīng)做好以下幾點(diǎn)：①應(yīng)控制傳染源：在流行季節(jié)，若有前驅(qū)癥狀應(yīng)及早就診。②切斷傳播途徑：由于百日咳桿菌對(duì)外界抵抗力較弱，無需消毒處理，但應(yīng)保持室內(nèi)通風(fēng)，衣物在陽(yáng)光下曝曬，對(duì)痰液及口鼻分泌物應(yīng)進(jìn)行消毒處理。③接種疫苗：提倡孕婦在懷孕期間接種百日咳疫苗，減低母嬰傳播，以利于嬰兒得到更好的保護(hù)[12，13]。④做好普及工作：通過對(duì)百日咳的普及，降低百日咳的傳播概率，有效的控制百日咳[14]。⑤早發(fā)現(xiàn)、早治療：為更好且盡早確診病情，臨床最好結(jié)合百日咳桿菌核酸結(jié)果。

1 潘殊男，盛玉博．中國(guó)百日咳疫苗的現(xiàn)狀及研發(fā)趨勢(shì)初探[J]．微生物學(xué)免疫進(jìn)展，2012，40（5）：72-77.

2 胡云鴿，劉泉波.兒童百日咳247例臨床特點(diǎn)及重癥百日咳危險(xiǎn)因素分析[J].中華兒科雜志 ，2015，53（9）：684-689.

3 李秀梅，梁樹人．65例百日咳患兒免疫學(xué)指標(biāo)分析[J].天津醫(yī)藥，2012，40（10）：1051-1053．

4 Guiso N，Wirsing von K?nig C H，F(xiàn)orsyth K，et a1．The Global Pertussis Initiative：report from a round table meeting to discuss the epidemiology and detection of pertussis，Paris，F(xiàn)rance，11–12 January 2010[J].Vaccine，2011，29（6）：1115-1121.

5 劉勇，黃海濤，劉鵬. 天津地區(qū)2013年百日咳感染狀況及分子流行病學(xué)特征分析[J]. 中華流行病學(xué)雜志 ，2014，35 （12）：1358-1361.

6 Roorda L，Buitenwerf J，Ossewaarde M，et a1. A real-time PCR assay with improved specificity for detection and discrimination of all clinically relevant Bordetella species by the presence and distribution of three insertion sequence elements[J].BMC Res Notes，2011，l（4）：11-14.

7 Ferronato A E，Gilio A E，Vieira S E. Respiratory viral infections in infants with clinically suspected pertussis[J].J Pediatr，2013，89（6）：549-553．

8 Burr J S，Jenkins T L，Harrison R，et a1.The collaborative pediatric critical care research network critical pertussis study：collaborative research in pediatric critical care medicine [J].Pediatr Crit Care Med，2011，12（4）：387-392.

9 崔云，張育才，戎群芳.兒童重癥百日咳及類百日咳綜合征的臨床特征比較[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志，2014，29 （4）：270-273.

10 WHO Publication．Pertussis vaccines：WHO position paper-recommendations [J].Vaccine，2011，29：2355-2356.

11 閆樂，劉利英．北京市懷柔區(qū)2009-2013年百日咳疫情監(jiān)測(cè)情況分析[J]．黑龍江醫(yī)學(xué)，2014，38（7）：841-843．

12 許紅梅，鄭佳佳．百日咳臨床特點(diǎn)及流行病學(xué)研究進(jìn)展[J]．中華實(shí)用兒科臨床雜志，2014，29（22）：1681-1682.

13 張婉芳，陸敏．百日咳流行病學(xué)研究進(jìn)展[J]．國(guó)際兒科學(xué)雜志，2014，41（4）：361-364．

14 馬翠榮，張復(fù)臣．菏澤市2013-2014年百日咳流行病學(xué)監(jiān)測(cè)分析[J]．中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2016，4（13）：82-86.

Analysis of Results of Detection of Bordetella Pertussis in Shandong

LIU Zhi，LIU Yi-qing，WANG Ze-jun，et al.Department of Clinical Laboratory，Shandong Provincial Hospital Affiliated to Shandong University，Shandong Jinan250021

Objective Analysis of pertussis infection in Shandong area. Methods From January 2015 to December 2016 in Shangdong Provincial Hospital affiliated to Shandong University，BP-DNA analysis was used to detect Bordetella pertussis nucleic acid in 1989 patients. SPSS21.0 software was used to retrospectively analyse Bordetella pertussis infection in population. Results In 1989 throat swab specimens，the positive rate of nucleic acid detection of Bordetella pertussis was 23.06%，the positive rate of pertussis nucleic acid is 30.78% in male，slightly lower than the 34.75% of women，but there was not statistically significant difference between two groups （P＞0.05）； the positive rate of nucleic acid of Bordetella pertussis in the age group of 0-1 year old is the highest，accounting for 38.72%，the positive rate decreased gradually with the age increasing，and the positive rate is the lowest in above 30 years old group with 14%；there was significant difference between seasons of Bordetella pertussis nucleic acid detection positive rate （P＜0.05）.Among them，the highest positive rate was 40.35% in summer，which was significantly higher than that in autumn with33.11% （P＜0.05），the positive rate in autumn was significantly higher than that in spring with 24.8% （P＜0.05），and it was slightly higher in spring than in winter with 19.56% （P＞0.05）. Conclusions There was no significant difference in the positive rate of detection of Bordetella pertussis among population in Shandong area，but there were differences in age and season. We should strengthen the detection of Bordetella pertussis nucleic acid in suspected patients.

Bordetella pertussis Nucleic acid Shandong

R378.4+2 R392.11

A

1671-2587（2017）06-0589-03

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.06.017

*本課題受山東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No.ZR2016HM52；ZR2015PH016）；山東省臨床重點(diǎn)?？平ㄔO(shè)項(xiàng)目（No.魯衛(wèi)醫(yī)字[2013]26號(hào)）；山東省醫(yī)藥衛(wèi)生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（No.魯衛(wèi)科教國(guó)合字〔2013〕49號(hào)）資助

250021 濟(jì)南，山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)部

劉志（1988–），男，山東技南人，技師，學(xué)士，主要從事免疫性疾病指標(biāo)的檢測(cè)工作，（E-mail）344245685@qq.com。

劉義慶，男，主要從事免疫性疾病的基礎(chǔ)和臨床研究工作，（E-mail）yqliu1979@163.com。

2017-05-20）

（本文編輯：潘?。?/p>