某區(qū)208例地中海貧血基因檢測結(jié)果的分析

李 瓊

（重慶市渝北區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 401120）

某區(qū)208例地中海貧血基因檢測結(jié)果的分析

李 瓊

（重慶市渝北區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 401120）

目的檢測208例就診者α，β-地中海貧血基因，探討渝北區(qū)兒童、孕婦和其他人群α，β-地中海貧血的基因突變類型和頻率。方法采用PCR+膜反向點(diǎn)雜交技術(shù)（RDB）檢測缺失型α-地貧（--SEA、-α3.7、-α4.2）、2種突變型α-地貧（CS、QS）及11種突變型β-地中海貧血（41-42M、CD43、IVS-II-654、CD17、CD14-15、-28、-29、CD71-72、βE、IVSI-1、CD27-28）。結(jié)果208例就診者中地中海貧血基因變異總變異率達(dá)到29.81%（62/208）。其中α-地貧基因變異率12.50%（26/208），β-地貧基因變異率15.38%（32/208），αβ復(fù)合型地貧基因變異率為0.48%（1/208）。兒童25.64%（20/78），孕婦29.57%（34/115），其他人群53.33%（8/15）。結(jié)論渝北區(qū)兒童α-地中海貧血和β-地中海貧血基因變異率較高，應(yīng)開展地貧基因篩查，特別把好婚、孕、產(chǎn)檢三道關(guān)口地貧基因篩查，防止重型地中海貧血患兒的出生，提高人口素質(zhì)。

α，β-地中海貧血；基因變異；地貧篩查

地中海貧血是一種常染色體隱性單基因遺傳病，根據(jù)受損珠蛋白的不同分為α-地中海貧血（簡稱α-地貧）和β-地中海貧血（簡稱β-地貧）兩種常見類型。目前地貧發(fā)病機(jī)制、基因突變類型已清楚，其發(fā)病率在我國廣東、廣西、海南、四川、重慶等省市較高，人群發(fā)生率高達(dá)10%以上。重慶地區(qū)的人群攜帶率為5%左右[1]。

本院2016年率先在渝北區(qū)開展地中海貧血基因檢測，本文對渝北區(qū)的208例（兒童78例，孕婦115例、其他人群15例）單純小細(xì)胞或者小細(xì)胞低色素個(gè)體進(jìn)行地中海貧血基因檢測，結(jié)果分析如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：2016年10月至2017年6月在本院行地中海貧血基因檢測的兒童（78例）、孕婦（115例）和其他人群（15例）共208例就診者，年齡4月26天-63歲，男72例，女136例。兒童就診者以單純小細(xì)胞貧血為主，孕婦與其他人群就診者以小細(xì)胞低色素貧血為主，但均是小細(xì)胞或小細(xì)胞低色素貧血就診者，診斷標(biāo)準(zhǔn)（MCV≤80 fL，MCH≤27 pg，MCHC≤320 g/L）。

1.2 樣本采集和制備：抽外周靜脈血2 mL，EDTA抗凝，全血DNA（潮州凱普一步法核酸提取試劑盒提取DNA）。

1.3 主要儀器：基因擴(kuò)增熱循環(huán)儀SLAN-96P（上海宏時(shí)），醫(yī)用核酸分子雜交儀HB-2012A（潮州凱普）。

1.4 試劑：全血DNA提取和地中海貧血基因檢測試劑盒為潮州凱普生物化學(xué)有限公司，操作按說明書。

1.5 方法：采用PCR+膜反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)（RDB）檢測缺失型α-地貧（--SEA、-α3.7、-α4.2）、2種突變型α-地貧（αQS、αCS）及11種突變型β-地中海貧血（CD41-42M、CD43、IVS-II-654、CD17、CD14-15、-28、-29、CD71-72、βE、IVSI-1、CD27-28）。

2 結(jié) 果

從表1可見：兒童α，β-地貧基因變異率25.64%（20/78），孕婦α，β-地貧變異率29.57%（34/115），其他人群53.33%（8/15）；

表1 地貧基因變異率

從表2可見：α-地貧基因總變異率為12.50%（26/208），--SEA/αα變異率為5.77%（12/208），-α3.7變異率5.29%（11/208），-α4.2變異率0.48%（1/208），αQSα變異率0.96%（2/208）；

表2 α地貧基因檢測結(jié)果

從表3可見：β-地貧基因總變異率為15.38%（32/208），3種高位點(diǎn)突變頻率依次為：CD41-42變異率4.32%（9/208）、IVS-II-654變異率4.32%（9/208）、CD17變異率3.85%（8/208）；

表3 β地貧基因檢測結(jié)果

從表4可見：復(fù)合型地貧：--SEA復(fù)合α3.7變異率1.44%（3/208）、αβ雙重雜合子基因變異率為0.48%（1/208）。

表4 復(fù)合型地貧基因檢測結(jié)果

3 討 論

兒童比廣西北海市兒童群體地貧基因攜帶率17.86%高和比桂滇黔三省（區(qū)）交界地區(qū)的百色地區(qū)少數(shù)民族人群地中海貧血發(fā)生率高達(dá)19.8%高[2-3]（表1）；孕婦地貧變異率高于文傳芳、戴卓婭報(bào)道的重慶地區(qū)α地貧變異率[1]（表1）。雖然本次研究的對象兒童只有78例，孕婦115例，沒有足夠的群體代表性，但也表明渝北區(qū)兒童人群的地貧變異率處于較高的水平，鑒于此情況，渝北區(qū)應(yīng)是地中海貧血防控的重點(diǎn)對象。

兒童、孕婦地貧總變異率高的原因是靜止型的α-地貧患者臨床一般無癥狀，血液學(xué)無陽性表型、紅細(xì)胞形態(tài)無明顯異常，而輕型的患者有的血液學(xué)篩查表型僅表現(xiàn)小細(xì)胞癥，而不是典型的小細(xì)胞低色素癥，本院醫(yī)師，尤其是孕婦醫(yī)師嚴(yán)格按小細(xì)胞低色素表型的就診者檢測地中海貧血基因，小細(xì)胞表型不能夠做到及時(shí)就診，如果其配偶亦為α-地貧患者，其下一代可能為中間型或重型α-地貧患兒，對家庭造成嚴(yán)重的精神及經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。本研究的β-地貧基因突變檢出率，為CD41-42（4.32%）、IVS-II-654（4.32%）、CD17（3.85%，見表3），提示此3種突變位點(diǎn)為渝北區(qū)最常見的β-地中海貧血基因突變類型。本研究檢測的11種基因型覆蓋了我國突變類型的95%以上，開展這11種地中海貧血突變基因的產(chǎn)前診斷，能防止絕大多數(shù)重度β-地中海貧血患兒的出生。在β地貧基因突變攜帶者中αβ復(fù)合型地貧基因突變攜帶者變異率為0.48%（1/208）。當(dāng)夫妻雙方一方為αβ復(fù)合型地貧基因攜帶者，而另一方也為α-地中海貧血，則有1/4概率生育HbBart's水腫胎。因此，應(yīng)重視αβ復(fù)合型地貧基因攜帶者的檢測，以防止HbBart's水腫胎兒出生。

目前地貧尚無根本有效的治療方法，主要是給予輸血，預(yù)防感染，必要時(shí)作脾切除。地中海貧血重在預(yù)防地中海貧血患兒的出生，渝北區(qū)兒童地中海貧血陽性發(fā)生率較高，應(yīng)開展地貧篩查，特別把好婚、孕、產(chǎn)檢三道關(guān)口。從源頭上阻斷重型地貧患兒的出生，提升出生人口素質(zhì)。

[1] 文傳芳,戴卓婭,陶才莉,等.重慶市璧山區(qū)孕期人群地中海貧血流行病學(xué)研究[J].重慶醫(yī)學(xué),2015,44(9):1201-1202.

[2] 張雪睿,王玲.北海市10年間兒童貧血病因分析[J].西南國防醫(yī)藥,2012,22(7):747-750.

[3] 王俊利,農(nóng)樂根,潘紅飛.桂滇黔交界區(qū)域少數(shù)民族人群地中海貧血分子流行病學(xué)研究概況[J].右江醫(yī)學(xué),2012,40(1):101-103.

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1671-8194（2017）32-0166-02