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    貝牡莪消顆粒對PTU致大鼠甲狀腺腫組織形態(tài)的影響

    2017-12-13 09:51:22杜麗坤李新夢仲麗麗
    長春中醫(yī)藥大學學報 2017年6期
    關鍵詞:癭瘤濾泡中醫(yī)藥大學

    杜麗坤,李新夢,仲麗麗*

    (1.黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院,哈爾濱 150040;2.黑龍江中醫(yī)藥大學,哈爾濱 150040)

    貝牡莪消顆粒對PTU致大鼠甲狀腺腫組織形態(tài)的影響

    杜麗坤1,李新夢2,仲麗麗2*

    (1.黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院,哈爾濱 150040;2.黑龍江中醫(yī)藥大學,哈爾濱 150040)

    目的 通過丙硫氧嘧啶(PTU)造成大鼠甲狀腺腫的模型,觀察貝牡莪消顆粒對大鼠甲狀腺腫組織形態(tài)的影響,進而探究該藥物對本病的治療作用。方法 選取40只雄性SD大鼠,隨機選取其中10只作為空白組,其余30只給予丙硫氧嘧啶0.15 mg/g,1次/d,持續(xù)灌胃40 d。造模成功后,將30只大鼠隨機分為3組,即模型對照組(2 mL/d)、貝牡莪消組(22.2 mg /g)、優(yōu)甲樂組(0.08 μg /g)。30 d后處死大鼠,光鏡下觀察大鼠甲狀腺的組織形態(tài)。結(jié)果 肉眼觀察:PTU組大鼠甲狀腺較空白組體積明顯增大;鏡下觀察:PTU組與空白組對比,甲狀腺濾泡間的差異明顯,大小不一,呈圓形或橢圓形,濾泡腔變窄,呈現(xiàn)不規(guī)則的形狀,腔內(nèi)膠質(zhì)數(shù)量明顯降低。顯微鏡下觀察大鼠甲狀腺HE染色示:貝牡莪消組甲狀腺濾泡與上皮細胞恢復較好,形態(tài)較為規(guī)則,基本恢復正常;而優(yōu)甲樂組仍然可見到少許浸潤的炎性細胞存在于濾泡腔和間質(zhì)。結(jié)論 PTU能夠?qū)е麓笫蠹谞钕倌[大;貝牡莪消組甲狀腺細胞恢復程度明顯優(yōu)于優(yōu)甲樂組,并能使大鼠甲狀腺腫組織形態(tài)得到改善。

    貝牡莪消顆粒;大鼠;甲狀腺腫

    結(jié)節(jié)性甲狀腺腫是一種常見的良性甲狀腺疾病,多是由于甲狀腺良性上皮細胞增生太過而形成[1]。本病發(fā)病率約為7%以上,其中甲狀腺癌的比例為5%~15%左右[2-3],其影響因素多為年齡、性別、放射線接觸史、遺傳及其他[4]。以女性和老年人群發(fā)病率高,多表現(xiàn)為不同程度的甲狀腺腫大,可觸摸到甚至看到多個大小不等的結(jié)節(jié),早期也可只有單個結(jié)節(jié),本病病情進展緩慢,多數(shù)患者無自覺癥狀,或僅有頸部不適感[5]。本病隸屬于中醫(yī)“癭病”“癭瘤”“癭囊”“癭氣”的范疇[6]?!锻饪普凇ぐ`瘤論》認為:“夫人生癭瘤之癥,非陰陽正氣結(jié)腫,乃五臟濁氣、瘀血、痰滯而成”,認為氣滯、血瘀、痰凝壅結(jié)于頸前乃本病的基本發(fā)病機理?!吨赜唶朗蠞健ぐ`瘤論治》說:“夫癭瘤者,多由喜怒不節(jié),憂思過度,而成斯疾焉。大抵人之氣血,循環(huán)一身,常欲無滯留之患,調(diào)攝失宜,氣凝血滯,為癭為瘤”,其認為氣機郁滯、情志內(nèi)傷與癭瘤的發(fā)生密切相關[7-8]。本研究用PTU造成大鼠甲狀腺腫的模型,分別予以貝牡莪消顆粒、優(yōu)甲樂,觀察兩種藥物對大鼠甲狀腺腫組織形態(tài)的影響。

    1 材料與方法

    1.1 動物 40只SPF級健康雄性SD大鼠,體質(zhì)量約(123±8.5)g,由黑龍江中醫(yī)藥大學實驗動物中心供給,隨機分為8籠,每籠5只。

    1.2 藥品 貝牡莪消顆粒(由浙貝母30 g、莪術20 g、牡蠣30 g、玄參20 g、夏枯草20 g構(gòu)成)由黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院制劑室供給,每只大鼠22.2 mg/g,1次/d灌胃;PTU:上海朝暉藥業(yè)有限公司生產(chǎn),50 mg×100片/瓶,批號:國藥準字H31021082;優(yōu)甲樂:德國默克公司,50 μg × 100片/瓶,批號:H20140052。

    1.3 儀器 FA2004電子天平,低溫冰箱,光鏡,石蠟切片機,包埋機等。

    1.4 方法 造模:選取40只雄性SD大鼠,喂養(yǎng)1周后,隨機選取其中10只作為空白組,給予生理鹽水2 mL /d。其余30只予以PTU 0.15 mg /g,1次/d,連續(xù)灌胃40 d。造模成功后,將30只大鼠隨機分為3組,即模型對照組、貝牡莪消組、優(yōu)甲樂組,分別予以生理鹽水(2 mL /d)、貝牡莪消顆粒(22.2 mg /g)、優(yōu)甲樂(0.08 μg /g)。30 d后處死大鼠,鏡下觀察大鼠甲狀腺組織形態(tài)。樣本收集:各組大鼠禁食不禁水12 h(實驗當天禁水),10%水合氯醛(0.4 g /kg)腹腔注射麻醉[9]。剖取大鼠甲狀腺組織,鏡下觀察大鼠甲狀腺細胞形態(tài)。

    1.5 統(tǒng)計學方法 實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(x ± s )表示,組間差別的對照應用單因素方差分析,兩兩進行比較,用SPSS 16. 0統(tǒng)計學軟件進行分析,P < 0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    2.1 大鼠甲狀腺病理 由圖1可見,鏡下觀:PTU組與空白組對比,甲狀腺濾泡間的差異明顯,大小不一,呈圓形或橢圓形,濾泡腔變窄,呈現(xiàn)不規(guī)則的形狀,腔內(nèi)膠質(zhì)數(shù)量明顯降低,立方上皮細胞增生肥大,其中部分濾泡增生,融合而形成巨大的濾泡,可見大量的炎性細胞浸潤存在于濾泡腔和間質(zhì),在濾泡周邊可見到豐富的毛細血管,濾泡間有多少不一的纖維組織分隔,表示大鼠甲狀腺腫模型制造成功。

    圖1 大鼠甲狀腺造模前后

    2.2 貝牡莪消顆粒及優(yōu)甲樂對PTU致大鼠甲狀腺腫組織形態(tài)的影響 由圖2可見,顯微鏡下觀察大鼠甲狀腺HE染色[10],1)空白組:甲狀腺濾泡呈中等大小,上皮細胞呈現(xiàn)出立方狀或扁平狀,濾泡腔充滿著豐富的膠質(zhì)。2)模型對照組:與空白組對比,甲狀腺濾泡大小差異明顯,濾泡腔變小,形狀明顯不規(guī)則,腔內(nèi)膠質(zhì)量明顯降低,上皮細胞增生肥大,可見大量的炎性細胞侵潤存在于濾泡腔和間質(zhì),呈高度增生相,濾泡之間界線模糊。3)貝牡莪消組:甲狀腺濾泡與上皮細胞恢復較好,形態(tài)較為規(guī)則,基本恢復正常。4)優(yōu)甲樂組 :甲狀腺恢復至中等大小,濾泡和上皮細胞得到較好的修復,但仍然可見到少許浸潤的炎性細胞存在于濾泡腔和間質(zhì)。

    圖2 貝牡莪消顆粒及優(yōu)甲樂對PTU致大鼠甲狀腺腫組織形態(tài)的影響

    3 討論

    甲狀腺具有調(diào)節(jié)人體生長、發(fā)育、代謝等非常重要的生理功能,對人體各個系統(tǒng)和腺體影響重大,是人體內(nèi)最大的且具有特異性內(nèi)分泌功能性腺體,合成、分泌的激素主要包括甲狀腺素(T4)和三碘甲狀腺原氨酸(T3)[11]。甲狀腺疾病是內(nèi)分泌系統(tǒng)中的一種常見疾病,由于生活環(huán)境的變化,近年來甲狀腺疾病的發(fā)病率持續(xù)上升,而結(jié)節(jié)性甲狀腺腫是其中較為常見的疾病。病人常常沒有自覺癥狀,多是在體檢時經(jīng)觸診和檢測后發(fā)現(xiàn),其中經(jīng)過觸診而發(fā)現(xiàn)的甲狀腺結(jié)節(jié)約占4%,而根據(jù)高分辨率的超聲檢查,甲狀腺結(jié)節(jié)的檢出率約為17%到67%[12],本病可由缺碘、輻射、細胞因子、遺傳因素等引起[13]。對于本病,西醫(yī)多采用藥物和手術治療,其中手術治療復發(fā)概率高達18%~30%[14],而甲狀腺激素是目前傳統(tǒng)治療甲狀腺結(jié)節(jié)最為常用的藥物,但長期的甲狀腺激素替代會影響甲狀腺的正常生理功能[15]。優(yōu)甲樂即左旋甲狀腺素片,是一種人工合成的四碘甲狀腺原氨酸鈉,在體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)槿饧谞钕僭彼?,是目前臨床最常用的甲狀腺激素,能夠抑制TSH分泌,防止甲狀腺增大,阻止結(jié)節(jié)的形成,從而發(fā)揮對結(jié)節(jié)性甲狀腺腫的防治作用[16]。

    中醫(yī)認為,本病多與情志所傷、飲食勞倦、水土失宜及體質(zhì)因素等有關,發(fā)病機理多是肝旺克脾,脾失健運,氣機阻滯,導致氣聚痰凝,壅結(jié)于頸前而發(fā)為癭。中醫(yī)治療結(jié)節(jié)性甲狀腺腫累積了豐富的經(jīng)驗,大多數(shù)醫(yī)家應用含碘量豐富的藥物,如海藻、昆布、貝母、牡蠣等治療本病[17]。本研究采用的復方中藥制劑貝牡莪消顆粒,針對其氣滯、痰凝、血瘀的主要病機,以活血行氣、消癭散結(jié)為治療方法,標本同治,其中貝母、莪術清熱化痰,消腫止痛,破血行氣;牡蠣、夏枯草軟堅化痰,清肝瀉火,散結(jié)消腫,收斂固澀;玄參清熱涼血,滋陰解毒。本方寒溫并調(diào),氣血并調(diào),咸味藥和辛味藥聯(lián)合應用,共奏活血行氣、消癭散結(jié)之功效。根據(jù)實驗結(jié)果,PTU能夠?qū)е麓笫蟮募谞钕倌[大,貝牡莪消組的甲狀腺細胞恢復程度明顯優(yōu)于優(yōu)甲樂組,能使甲狀腺腫大鼠的甲狀腺組織形態(tài)得到改善。

    [1]高天舒,齊騰澈.碘過量與富碘中藥對碘缺乏大鼠甲狀腺內(nèi)氧化應激的比較研究[J].中華內(nèi)分泌代謝雜志, 2012,28(10):855-858.

    [2-3]劉衛(wèi)國,張文兵.分析探討甲狀腺疾病的臨床診斷與治療[J].中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè), 2014, 49(29):150-151.

    [4]朱榮娟,王季良.王季良主任治療甲狀腺結(jié)節(jié)經(jīng)驗[J].云南中醫(yī)中藥雜志, 2015, 36(3):07.

    [5]孫寧,劉一飛,田大宇.目前國內(nèi)甲狀腺結(jié)節(jié)的診斷要點綜述[J].醫(yī)藥論壇雜志, 2014, 35(2):138-140.

    [6]李楠,杜麗坤.中醫(yī)藥治療結(jié)節(jié)性甲狀腺腫的研究進展[J].吉林中醫(yī)藥, 2016, 36(8):850-852.

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    [10]李學農(nóng).現(xiàn)代病理與實驗診斷技術[M].北京 :人民軍醫(yī)出版社, 2003.

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    [15]周聰,禇斌斌,梁琳.甲狀腺激素治療甲狀腺結(jié)節(jié)的臨床研究[J].重慶醫(yī)學, 2016, 45(6):724-726.

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    Effect of granule on the morphology of goitre induced by PTU in rats

    DU Likun1, LI Xinmeng2, ZHONG Lili2*
    (1.First Aff i liated Hospital of Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China;2.Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China)

    Objective To investigate the effect of shellfish granule on the morphology of goiter in rats by probiotics (PTU), and to explore the therapeutic effect of the drug on the disease. Methods Forty male SD rats were randomly selected, and 10 of them were randomly selected as the blank group. The other 30 rats were given 0.15 mg/g of propylthiouracil and once/d for 40 days. Thirty rats were randomly divided into three groups: model control group (2 mL/d), shellfish (22.2 mg/g) and excellent group (0.08 μg/g). Rats were sacrificed 30 days later and the histomorphology of the thyroid was observed under light microscope. Results The naked eye: PTU group signif i cantly increased the volume of thyroid gland compared with the blank group; Microscopic view: PTU group compared with the blank group, the difference between the thyroid follicles were signif i cant, and sizes of them were different, round or oval, follicles cavity narrowed, showing irregular shape, the number of intracavity gel decreased significantly.Under the microscope, HE staining showed that the thyroid follicle and epithelial cells recovered from the shellf i sh were better than those in the control group. The morphological changes were normal and the control group showed that the inf i ltration of inf l ammatory cells was still cavity and interstitial. Conclusion PTU can lead to thyroid enlargement in rats. The recovery of thyroid cells in the shellf i sh was signif i cantly better than that in the excellent group, whichcould improve the thyroid tissue morphology and treatment was safe and effective.

    shellf i sh eruca particles; rat goiter; PTU

    R285.5

    A

    2095-6258(2017)06-0877-03

    10.13463/j.cnki.cczyy.2017.06.006

    黑龍江省自然科學基金項目(H201484) ; 黑龍江省博士后科研啟動金資助項目( LBH-Q13164) 。

    杜麗坤(1973 -),女,博士后,主任醫(yī)師,碩士研究生導師,主要從事中醫(yī)藥治療內(nèi)分泌代謝疾病的研究。

    *通信作者:仲麗麗,電話-18846421768,電子信箱- 516333572@qq.com

    2017-02-27)

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