阿卡波糖干預(yù)新診斷2型糖尿病患者 腸道菌群分布及血清GDF-15水平的研究

朱雅欣，楊建榮，謝榮迪

阿卡波糖干預(yù)新診斷2型糖尿病患者 腸道菌群分布及血清GDF-15水平的研究

朱雅欣，楊建榮，謝榮迪

目的探討阿卡波糖對(duì)新診斷 2 型糖尿?。═2DM）患者腸道菌群分布及血清生長分化因子-15（GDF-15）水平的干預(yù)情況。

方法選擇我院新診斷的 120 例 T2DM 患者為研究對(duì)象，隨機(jī)分為試驗(yàn)組（n = 60）和對(duì)照組（n = 60），對(duì)照組予以安慰劑，試驗(yàn)組受試者服用阿卡波糖，連續(xù)治療 14 d。比較兩組受試者血糖以及血脂相關(guān)指標(biāo)。采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗夾心法（ELISA）測定兩組血清 GDF-15 的表達(dá)水平。對(duì)糞便樣本中所有細(xì)菌的 16SrRNA-V3 區(qū)進(jìn)行 DNA 測序，對(duì)腸道菌群中的分布及豐度進(jìn)行分析，同時(shí)做聚類分析。對(duì)腸道菌群通過實(shí)時(shí)定量 PCR 進(jìn)行定量檢測。

結(jié)果治療后，試驗(yàn)組和對(duì)照組受試者血糖及血脂相關(guān)指標(biāo)、腸道菌群的分布以及 GDF-15 的表達(dá)水平均存在明顯差異（P＜ 0.05）。治療后，試驗(yàn)組受試者腸道菌群發(fā)生明顯變化，且菌群改善組與未改善組血糖及血脂相關(guān)指標(biāo)存在明顯差異（P＜ 0.05）；血清中 GDF-15 表達(dá)水平與擬桿菌屬、IV 型梭菌屬、韋榮球菌屬豐度呈正相關(guān)（P＜ 0.05），與厚壁菌門、放線菌門、普雷沃菌屬、乳桿菌屬、Blautia 球菌-直腸真桿菌屬豐度呈負(fù)相關(guān)（P＜ 0.05）。

結(jié)論阿卡波糖可通過影響患者腸道菌群的分布以及GDF-15 的表達(dá)水平，對(duì)新診斷 T2DM 患者起到有效的治療作用。

糖尿病，2 型； 阿卡波糖； 生長分化因子 15； 腸道菌群

2 型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus，T2DM）是一種內(nèi)分泌代謝性疾病，胰島素分泌不足以及胰島素抵抗是其病理及生理基礎(chǔ)[1]。臨床流行病學(xué)資料顯示，在全球范圍內(nèi) T2DM 病人增長迅速[2]。腸道菌群由于可以影響能量和營養(yǎng)吸收，在一定程度上與糖尿病的發(fā)生相關(guān)[3-4]。有報(bào)道表明，T2DM病人的腸道菌群存在中度紊亂[5]。而 α-糖苷酶抑制劑類降糖藥物，如阿卡波糖，可以延遲葡萄糖的吸收、更改腸道吸收葡萄糖的位置而產(chǎn)生降糖效果。腸道菌群也會(huì)影響糖尿病患者的代謝情況[6-8]。本研究以新診斷的 T2DM 患者為研究對(duì)象，用以探究腸道菌群和腸道激素對(duì)于糖尿病患者代謝的影響及阿卡波糖的治療作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以 2013 年版《中國 2 型糖尿病防治指南》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)選擇我院新確診的 120 例 T2DM患者為研究對(duì)象，年齡 30 ～ 70 周歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肝、腎功能嚴(yán)重受損者；②短期內(nèi)服用影響血糖藥物者；③患有甲狀腺等內(nèi)分泌疾病者；④大便常規(guī)檢測異常者；⑤短期內(nèi)嚴(yán)重腹瀉者。受試者及家屬均簽署知情同意書。實(shí)驗(yàn)人員依據(jù)臨床指南的相關(guān)原則充分保障受試者的治療安全，對(duì)診療記錄保密，保護(hù)受試者的隱私權(quán)。如受試者退出試驗(yàn)或轉(zhuǎn)院治療，遵照入選和排除標(biāo)準(zhǔn)按 1∶1 比例補(bǔ)充。

1.2 方法

1.2.1 分組 遵循臨床試驗(yàn)的雙盲原則，將 120 例T2DM 患者隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，各 60 例。對(duì)照組予以安慰劑，安慰劑使用本院自制的與試驗(yàn)藥物外形一致的無藥理特性的淀粉制品；試驗(yàn)組受試者連續(xù)服用阿卡波糖 14 d，3 次/d，50 mg/次。

1.2.2 指標(biāo)

⑴治療后，比較兩組受試者血糖以及血脂相關(guān)指標(biāo)。血糖相關(guān)指標(biāo)包括：空腹血糖（FPG）、餐后2 h 血糖（2hPG）以及糖化血紅蛋白 A1c（HbA1c）。血脂相關(guān)指標(biāo)包括：甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）以及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）。

⑵比較兩組受試者治療前后腸道菌群分布的差異，并對(duì)菌群發(fā)生改善的與未發(fā)生改善的試驗(yàn)組受試者間血糖、血脂等指標(biāo)進(jìn)行比較。

1.2.3 腸道菌群檢測方法 對(duì)糞便樣本中所有細(xì)菌的 16SrRNA-V3 區(qū)通過 Illumina MiSeq 高通量測序平臺(tái)進(jìn)行 DNA 測序，對(duì)腸道菌群的分布及豐度進(jìn)行分析，同時(shí)做聚類分析。通過實(shí)時(shí)定量 PCR法進(jìn)行定量檢測。熒光定量 PCR：以標(biāo)準(zhǔn)菌種（濃度 101～ 108拷貝/μl）16SrRNA 基因片段的質(zhì)粒DNA 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，兩組中全部個(gè)體細(xì)菌數(shù)量以每克糞便中 16SrRNA 基因拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)值來表示。樣本定量數(shù)據(jù)通過 log10 轉(zhuǎn)換后經(jīng)由 SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件做出系統(tǒng)分析。

1.2.4 ELISA 法測定 GDF-15 水平 早 7 點(diǎn)提取空腹肘前靜脈血 3.0 ml，自然靜置 1 h 后3000 r/min 離心 15 min，采集血清，于 -20 ℃ 冰箱保存等候批量檢測。通過 ELISA 法檢測血清GDF-15 含量，解凍后血清進(jìn)行 1∶4 稀釋，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。96 孔板中每孔注入 100 μl 的測定稀釋劑（RD1-9），包含陰性對(duì)照及標(biāo)準(zhǔn)曲線。之后于每孔注入 50 μl 的待測樣品、標(biāo)準(zhǔn)品或空白試劑，膠帶覆蓋后置于水平搖床室溫 50 r/min 培育2 h。緩沖液洗板 3 次，添加 GDF-15 特異性抗體，水平搖床室溫 50 r/min 培育 1 h，洗板 3 次。注入 200 μl底物溶液，室溫避光培育 30 min。添加 50 μl 終止反應(yīng)液，直至溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色。30 min 內(nèi)通過酶標(biāo)儀 450 nm 波長檢測各孔吸光度值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件 SPSS19.0 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用±s表示，采用t檢驗(yàn)比較分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)比較分析，通過單因素相關(guān)分析探討腸道菌群變化與 GDF-15 水平的相關(guān)性，P＜ 0.05 代表差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療后兩組受試者血糖、血脂相關(guān)指標(biāo)比較

兩組受試者血糖以及血脂相關(guān)指標(biāo)均存在明顯差異（P＜ 0.05），其中對(duì)照組 FPG、2hPG、HbA1c、TC、TG、LDL-C 明顯高于試驗(yàn)組，對(duì)照組 HDL-C明顯低于試驗(yàn)組（表 1）。

表 1 治療后兩組受試者血糖、血脂相關(guān)指標(biāo)比較（±s ）（n = 60）Table 1 Comparison of blood glucose and blood lipid indexes between the two groups after treatment (±s ) (n = 60)

表 1 治療后兩組受試者血糖、血脂相關(guān)指標(biāo)比較（±s ）（n = 60）Table 1 Comparison of blood glucose and blood lipid indexes between the two groups after treatment (±s ) (n = 60)

FPG（mmol/L） 10.52 ± 1.38 4.83 ± 0.67 8.552 0.001 2hPG（mmol/L） 15.73 ± 0.55 9.27 ± 0.64 7.636 0.005 HbA1c（%） 10.72 ± 0.79 5.81 ± 0.36 10.221 0.000 TC（mmol/L） 5.51 ± 0.62 3.28 ± 0.44 11.384 0.000 TG（mmol/L） 2.47 ± 0.31 1.15 ± 0.15 9.067 0.000 LDL-C（mmol/L） 4.26 ± 0.29 2.87 ± 0.22 8.549 0.000 HDL-C（mmol/L） 0.70 ± 0.09 1.43 ± 0.12 7.247 0.001

2.2 治療后兩組受試者腸道菌群豐度比較

實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 結(jié)果顯示，治療后對(duì)照組受試者擬桿菌屬、IV 型梭菌屬、韋榮球菌屬豐度顯著高于試驗(yàn)組（P＜ 0.05），對(duì)照組受試者厚壁菌門、放線菌門、普雷沃菌屬、乳桿菌屬、Blautia 球菌-直腸真桿菌屬豐度明顯低于試驗(yàn)組（P＜ 0.05）；兩組間變形桿菌門、梭形桿菌門不存在顯著相關(guān)性（P＞ 0.05）（表 2）。

表 2 治療后兩組受試者腸道菌群豐度比較（±s ）（n = 60）Table 2 Comparison of intestinal flora abundance between the two groups after treatment (±s ) (n = 60)

表 2 治療后兩組受試者腸道菌群豐度比較（±s ）（n = 60）Table 2 Comparison of intestinal flora abundance between the two groups after treatment (±s ) (n = 60)

腸道菌群 Intestinal flora 對(duì)照組 Control group 試驗(yàn)組 Experimental group t P擬桿菌屬 Bacteroides 10.86 ± 1.83 9.11 ± 1.70 7.263 0.011厚壁菌門 Phylum firmicutes 11.96 ± 1.12 13.20 ± 1.21 6.158 0.006放線菌門 Actinomyces 5.97 ± 0.42 7.10 ± 0.49 7.349 0.005變形桿菌門 Proteobacteria 8.50 ± 1.23 8.22 ± 1.22 1.017 0.167梭形桿菌門 Fusiform bacillus 7.46 ± 1.02 7.31 ± 1.11 1.003 0.235普雷沃菌屬 Prevotella 6.22 ± 0.87 7.18 ± 1.20 8.557 0.002 IV 型梭菌屬 Clostridium IV 7.58 ± 0.63 6.11 ± 0.82 10.374 0.000乳桿菌屬 Lactobacillus 4.18 ± 0.36 5.10 ± 0.41 9.209 0.001韋榮球菌屬 Veillonella 8.90 ± 0.77 5.80 ± 0.60 8.156 0.003 Blautia 球菌 Blautia cocci 6.31 ± 0.90 7.00 ± 0.65 7.159 0.007雙歧桿菌屬 Bifidobacterium 4.80 ± 0.62 7.12 ± 1.00 9.662 0.000

表 3 治療前后試驗(yàn)組受試者腸道菌群變化情況（±s ）（n = 60）Table 3 Changes of intestinal flora in the experimental group before and after treatment (±s ) (n = 60)

表 3 治療前后試驗(yàn)組受試者腸道菌群變化情況（±s ）（n = 60）Table 3 Changes of intestinal flora in the experimental group before and after treatment (±s ) (n = 60)

擬桿菌屬 B a c t e r o i d e s 9 . 3 5 ± 1 . 6 3 9 . 1 1 ± 1 . 7 0 6 . 0 3 8 0 . 0 0 3厚壁菌門 P h y l u m f i r m i c u t e s 1 2 . 7 8 ± 1 . 0 5 1 3 . 2 0 ± 1 . 2 1 7 . 2 2 1 0 . 0 0 7放線菌門 A c t i n o m y c e s 6 . 3 3 ± 0 . 4 1 7 . 1 0 ± 0 . 4 9 7 . 3 5 6 0 . 0 0 5變形桿菌門 P r o t e o b a c t e r i a 8 . 3 4 ± 1 . 1 9 8 . 2 2 ± 1 . 2 2 1 . 3 3 9 2 . 0 2 9梭形桿菌門 F u s i f o r m b a c i l l u s 7 . 4 0 ± 1 . 0 6 7 . 3 1 ± 1 . 1 1 1 . 0 4 2 1 . 5 6 3普雷沃菌屬 P r e v o t e l l a 6 . 7 9 ± 0 . 9 6 7 . 1 8 ± 1 . 2 0 7 . 0 2 2 0 . 0 0 6 I V 型梭菌屬 C l o s t r i d i u m I V 7 . 0 5 ± 0 . 7 2 6 . 1 1 ± 0 . 8 2 1 0 . 3 4 7 0 . 0 0 0乳桿菌屬 L a c t o b a c i l l u s 4 . 6 9 ± 0 . 3 6 5 . 1 0 ± 0 . 4 1 9 . 2 0 8 0 . 0 0 0韋榮球菌屬 V e i l l o n e l l a 7 . 1 6 ± 0 . 6 8 5 . 8 0 ± 0 . 6 0 8 . 3 5 4 0 . 0 0 0 B l a u t i a 球菌 B l a u t i a c o c c i 6 . 8 6 ± 0 . 7 0 7 . 0 0 ± 0 . 6 5 8 . 2 9 9 0 . 0 0 0雙歧桿菌屬 B i f i d o b a c t e r i u m 5 . 9 0 ± 0 . 5 8 7 . 1 2 ± 1 . 0 0 1 1 . 0 6 4 0 . 0 0 0

表 4 菌群改善與菌群無改善患者血糖及血脂相關(guān)指標(biāo)比較（±s ）Table 4 Comparison of indexes of blood glucose and blood lipid between flora improvement and no improvement of flora (±s )

表 4 菌群改善與菌群無改善患者血糖及血脂相關(guān)指標(biāo)比較（±s ）Table 4 Comparison of indexes of blood glucose and blood lipid between flora improvement and no improvement of flora (±s )

指標(biāo)Observed indicator菌群改善組（n = 28）Flora improvement group (n = 28)菌群無改善組（n = 32）Group with no improved flora (n = 32) t P FPG（mmol/L） 7.15 ± 0.31 10.35 ± 0.52 8.521 0.003 2hPG（mmol/L） 8.42 ± 0.42 15.55 ± 0.87 7.036 0.001 HbA1c（%） 7.07 ± 0.46 10.54 ± 1.02 6.225 0.006 TC（mmol/L） 4.32 ± 0.42 5.53 ± 0.78 8.012 0.000 TG（mmol/L） 1.72 ± 0.24 2.45 ± 0.36 10.337 0.000 LDL-C（mmol/L） 3.10 ± 0.25 4.28 ± 0.44 9.250 0.000 HDL-C（mmol/L） 1.60 ± 0.21 0.72 ± 0.06 8.177 0.000

2.3 治療前后試驗(yàn)組受試者腸道菌群變化情況

治療后，試驗(yàn)組受試者擬桿菌屬、IV 型梭菌屬、韋榮球菌屬豐度明顯降低（P＜ 0.05），厚壁菌門、放線菌門、普雷沃菌屬、乳桿菌屬、Blautia 球菌-直腸真桿菌屬豐度明顯升高（P＜ 0.05）；變形桿菌門、梭形桿菌門豐度未發(fā)生顯著變化（P＞ 0.05）（表 3）。

2.4 菌群改善與菌群無改善患者血糖相關(guān)指標(biāo)比較

根據(jù)治療后菌群改善情況，將試驗(yàn)組受試者進(jìn)一步分為菌群改善組以及菌群無改善組，檢測結(jié)果顯示，兩組受試者血糖以及血脂相關(guān)指標(biāo)均存在明顯差異（P＜ 0.05），其中菌群改善組 FPG、2hPG、HbA1c、TC、TG、LDL-C 明顯低于菌群無改善組，HDL-C 明顯高于菌群無改善組（表 4）。

2.5 對(duì)照組與試驗(yàn)組 GDF-15 表達(dá)水平比較

治療后，對(duì)照組受試者 GDF-15 表達(dá)水平明顯高于試驗(yàn)組[（3.03 ± 0.39）vs（2.87 ± 0.22），P＜ 0.05]。

2.6 腸道菌群豐度與血清中 GDF-15 表達(dá)水平的相關(guān)性分析

單因素相關(guān)分析結(jié)果（表 5）顯示，血清中GDF-15 表達(dá)水平與擬桿菌屬、IV 型梭菌屬、韋榮球菌屬豐度呈正相關(guān)（P＜ 0.05），與厚壁菌門、放線菌門、普雷沃菌屬、乳桿菌屬、Blautia 球菌-直腸真桿菌屬豐度呈負(fù)相關(guān)（P＜ 0.05）；與變形桿菌門、梭形桿菌門無關(guān)（P＞ 0.05）。

表 5 腸道菌群豐度與血清中GDF-15表達(dá)水平的相關(guān)性分析Table 5 Correlation between the abundance of intestinal flora and the expression level of GDF-15 in serum

3 討論

當(dāng)前，研究人員普遍認(rèn)為環(huán)境以及遺傳等眾多因素的作用下產(chǎn)生的胰島 β細(xì)胞功能受損是引起T2DM 的主因[9]。腸道菌群能夠影響膽汁酸鹽代謝、宿主體重、激素、自身免疫反應(yīng)，從而影響T2DM 的發(fā)生、發(fā)展。在許多研究中發(fā)現(xiàn)，T2DM同腸道菌群間聯(lián)系緊密[10-12]。阿卡波糖屬于 α 葡萄糖苷酶抑制劑的一種，其能抑制小腸邊緣上皮細(xì)胞上的 α 葡萄糖苷酶，進(jìn)而減少、延緩葡萄糖吸收從而產(chǎn)生調(diào)節(jié)血糖作用，廣泛用于 T2DM 治療[13-14]。最近有研究發(fā)現(xiàn)，采取分子生物學(xué)的方法在食物中添加寡糖能夠大幅增加糖尿病大鼠腸道雙歧菌產(chǎn)生，減低腸道 pH 值，提高糞便中短鏈脂肪酸含量，胰島素分泌和糖耐量得到提高，體內(nèi)的炎癥和內(nèi)毒素血癥情況也得到改善[15]。因此若能提高下消化道的寡糖含量便能夠影響腸道菌群，從而影響糖代謝。本研究結(jié)果顯示，治療后，兩組受試者血糖及血脂相關(guān)指標(biāo)、腸道菌群的分布均存在明顯差異（P＜ 0.05）；治療后，試驗(yàn)組中菌群改善者與未改善者血糖及血脂相關(guān)指標(biāo)存在明顯差異（P＜0.05），證實(shí)了糖尿病的發(fā)生受到腸道菌群的影響。

轉(zhuǎn)化生長因子 β（TGF-β）超家族成員中的GDF-15 在健康的成人體內(nèi)的表達(dá)存在顯著的組織特異性，其在前列腺及胎盤中表達(dá)高，在胰臟及腎臟中的表達(dá)僅可以檢測到，而在其余器官及組織中的表達(dá)量較低或幾乎不表達(dá)[16-17]。在相關(guān)實(shí)驗(yàn)中觀察到，T2DM 和肥胖病人體內(nèi) GDF-l5 含量提高。脂肪因子和胰島素可以影響脂肪細(xì)胞生成GDF-l5，在如惡性腫瘤、氧化應(yīng)激、組織損傷等病理?xiàng)l件下，病灶部位的 GDF-l5 表達(dá)明顯提高，血漿 GDF-l5 含量也明顯提高[18-20]。糖尿病和糖尿病前期病人體內(nèi) GDF-l5 含量都有所提高，在空腹血糖受損以及正常糖耐量人群中其表達(dá)水平的差異十分明顯。相關(guān)報(bào)道表明，GDF-l5 可以作為檢測空腹血糖受損的新指標(biāo)[21]。GDF-l5 可以活化磷脂酰肌醇 3 激酶/蛋白激酶 B/內(nèi)皮型一氧化氮合酶信號(hào)路徑，對(duì)核因子-κB/c-Jun 氨基末端激酶信號(hào)路徑抵抗人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞凋亡過程進(jìn)行抑制。因此可以猜測，GDF-l5 通過負(fù)反饋而使高糖誘導(dǎo)的活性氧簇表達(dá)降低，進(jìn)而使胰島素抵抗情況得到間接改善。通過 GDF-l5 轉(zhuǎn)基因小鼠做胰島素耐量試驗(yàn)和腹腔內(nèi)葡萄糖耐量試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因小鼠的血糖大幅降低，可見 GDF-l5 能夠增加胰島素的敏感性使糖耐量得到改善。本研究表明，治療后，對(duì)照組受試者 GDF-15 表達(dá)水平明顯高于試驗(yàn)組，證實(shí) T2DM 的發(fā)展同 GDF-l5 之間存在關(guān)聯(lián)性[22]。

單因素相關(guān)分析結(jié)果顯示，血清中 GDF-15 表達(dá)水平與擬桿菌屬、IV 型梭菌屬、韋榮球菌屬豐度呈正相關(guān)（P＜ 0.05），與厚壁菌門、放線菌門、普雷沃菌屬、乳桿菌屬、Blautia 球菌-直腸真桿菌屬豐度呈負(fù)相關(guān)（P＜ 0.05）。雙歧桿菌屬以及乳桿菌屬可以生成乳酸，均有益生菌的特點(diǎn)。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中觀察到，高水平的雙歧桿菌屬、乳桿菌屬可以產(chǎn)生改善糖尿病的效果，但是 IV 型梭菌屬能加速糖尿病的產(chǎn)生。腸道內(nèi)一些細(xì)菌可以利用其他細(xì)菌生成的乳酸，將其轉(zhuǎn)變?yōu)槎∷?，丁酸有利于腸道合成黏蛋白，維持腸黏膜的健康。Blautia 球菌-直腸真桿菌屬是重要的產(chǎn)丁酸菌種之一，而普雷沃菌屬的重要作用是分解黏蛋白。韋榮球菌屬和 IV 型梭菌屬能夠通過乳酸及葡萄糖最終分解為短鏈脂肪酸，當(dāng)該類短鏈脂肪酸無法合成為黏蛋白時(shí)，會(huì)引起腸道黏膜的通透性的提高，引發(fā)炎癥。

綜上所述，阿卡波糖可通過影響患者腸道菌群的分布以及 GDF-15 的表達(dá)水平，對(duì)新診斷T2DM 患者起到有效的治療作用，具有在臨床推廣應(yīng)用的前景。

[1] Wei YY, Liu X, Yu LP. Diagnosis, treatment and prevention of type 2 diabetes mellitus in patients over 65 years of age. E-J Translational Med, 2016, 3(7)：94-95. (in Chinese)韋瑛瑛, 劉瀟, 俞柳萍. 65歲以上 2型糖尿病患者的診治及預(yù)防.轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)電子雜志, 2016, 3(7)：94-95.

[2] Renner S, R?misch-Margl W, Prehn C, et al. Changing metabolic signatures of amino acids and lipids during the prediabetic period in a pig model with impaired incretin function and reduced β-cell mass. Diabetes, 2012, 61(8)：2166-2175.

[3] Cani PD, Geurts L, Matamoros S, et al. Glucose metabolism： focus on gut microbiota, the endocannabinoid system and beyond. Diabetes Metab, 2014, 40(4)：246-257.

[4] Karlsson FH, Tremaroli V, Nookaew I, et al. Gut metagenome in european women with normal, impaired and diabetic glucose control. Nature, 2013, 498(7452)：99-103.

[5] Qin QN, Chen HX, Li SL. Correlation betwween intestnal flora and type 2 diabetes mellttus in traditional Chinese medicine and western medicine. Asia-Pac Traditional Med, 2017, 13(5)：59-62. (in Chinese)覃俏娜, 陳紅霞, 李雙蕾. 腸道菌群與2型糖尿病的中西醫(yī)相關(guān)性研究. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥, 2017, 13 (5)：59-62.

[6] Ding XY. Analysis on efficacy and safety of acarbose combined metformin in treatment of type 2 diabetes. China Pharm, 2012, 21(15)：97-98. (in Chinese)丁祥云. 阿卡波糖聯(lián)合二甲雙胍治療 2 型糖尿病的療效和安全性分析. 中國藥業(yè), 2012, 21(15)：97-98.

[7] Hostalek U, Gwilt M, Hildemann S. Therapeutic use of metformin in prediabetes and diabetes prevention. Drugs, 2015, 75(10)：1071-1094.

[8] Hu YQ, Chen XW. Clinical comparative reseach of saxagliptin and acarbose on poor - controlled type 2 diabetes with overweight. Chin J Clin Rational Drug Use, 2016, 9(4)：13-15. (in Chinese)胡藝瓊, 陳曉文. 沙格列汀與阿卡波糖治療血糖控制不佳伴超重2型糖尿病患者的臨床療效比較. 臨床合理用藥雜志, 2016, 9(4)：13-15.

[9] Lucas R, Parikh SJ, Sridhar S, et al. Cytokine profiling of young overweight and obese female African American adults with prediabetes. Cytokine, 2013, 64(1)：310-315.

[10] Markle JG, Frank DN, Mortin-Toth S, et al. Sex differences in the gut microbiome drive hormone-dependent regulation of autoimmunity. Science, 2013, 339(6123)：1084-1088.

[11] Zhang XY, Han XY, Chen YL, et al. Effect of acarbose on intestinal flora in patients with pre diabetes.//Proceedings of the Fifteenth National Academic Conference of diabetes branch of Chinese Medical Association, 2012：343-344. (in Chinese)張秀英, 韓學(xué)堯, 陳穎麗, 等. 阿卡波糖對(duì)糖尿病前期患者腸道菌群的影響.//中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)第十五次全國學(xué)術(shù)會(huì)議論文集, 2012：343-344.

[12] Xu J, Su BL, Guan YF. Effect of acarbose on diabetic patients with intestinal bifidobacteria. Chin Med Innovation, 2013, 10(9)：37-38. (in Chinese)徐杰, 蘇本利, 關(guān)玉峰. 阿卡波糖對(duì)糖尿病患者腸道雙歧桿菌的影響. 中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新, 2013, 10(9)：37-38.

[13] Guo XD, Liu YY, Cheng JF, et al. Effects of acarbose versus fenofibrate on insulin sensitivity and β cell secretion in impaired glucose tolerance with hypertrigtyceridemia. Chin J Geriatr, 2012, 31(5)：406-409. (in Chinese)郭行端, 劉衍宇, 成俊芬, 等. 阿卡波糖和非諾貝特對(duì)糖耐量低減伴高脂血癥患者胰島素敏感性和 β細(xì)胞分泌功能的影響. 中華老年醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 31(5)：406-409.

[14] Deng GJ. To compare the clinical effect of acarbose and metformin in treating pre diabetes. Chin Foreign Med Res, 2015, 13(18)：120-122. (in Chinese)鄧廣江. 阿卡波糖與二甲雙胍治療糖尿病前期的臨床效果對(duì)比.中外醫(yī)學(xué)研究, 2015, 13(18)：120-122.

[15] Liu B, Liu WS, Han BQ, et al. Effect of chitooligosaccharides and its derivatives on regulating plasma lipid and improving antioxidant ability in diabetic mouse induced by STZ. J Shandong Univ (Nat Sci), 2006, 41(4)：158-163. (in Chinese)劉冰, 劉萬順, 韓寶芹, 等. 殼寡糖及其衍生物對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠調(diào)節(jié)血脂和抗氧化作用. 山東大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版), 2006, 41(4)：158-163.

[16] Lu JM, Wang CY, Hu C, et al. GDF-15 enhances intracellular Ca2+ by increasing Cav1.3 expression in rat cerebellar granule neurons. Biochem J, 2016, 473(13)：1895-1904.

[17] Bloch SA, Lee JY, Syburra T, et al. Increased expression of GDF-15 may mediate ICU-acquired weakness by down-regulating muscle microRNAs. Thorax, 2015, 70 (3)：219-228.

[18] Fisher OM, Levert-Mignon AJ, Lord SJ, et al. MIC-1/GDF15 in Barrett’s oesophagus and oesophageal adenocarcinoma. Br J Cancer, 2015, 112(8)：1384-1391.

[19] Lee J, Fricke F, Warnken U, et al. Reconstitution of TGFBR2-mediated signaling causes upregulation of GDF-15 in HCT116 colorectal cancer cells. PLoS One, 2015, 10(6)：e0131506.

[20] Liu DD, Lu JM, Zhao QR, et al. Growth differentiation factor-15 promotes glutamate release in medial prefrontal cortex of mice through upregulation of T-type calcium channels. Sci Rep, 2016, 6：28653.

[21] Fiorentino TV, Suraci E, Arcidiacono GP, et al. Duodenal sodium/glucose co-transporter 1 expression under fasting conditions is associated with post-load hyperglycemia. J Clin Endocrinol Metab, 2017, 102(11)：3979-3989.

[22] Li DH, Xu X, Yang XF. Effects on growth differentiation factor 15 and hs-CRP in patients with aged type 2 diabetics with coronary heart disease by different treatment. Chin J Evid Based Cardiovasc Med, 2016, 8(9)：1053-1055. (in Chinese)李道鴻, 徐曉, 楊旭楓. 不同治療方法對(duì)老年冠心病合并2型糖尿病患者血糖控制前后生長分化因子15、hs-CRP的影響. 中國循證心血管醫(yī)學(xué)雜志, 2016, 8(9)：1053-1055.

www.cmbp.net.cn Chin Med Biotechnol, 2017, 12(6)：539-544

2017中國生物制品年會(huì)勝利召開

由中國醫(yī)藥企業(yè)發(fā)展促進(jìn)會(huì)、中國藥學(xué)會(huì)生物藥品與質(zhì)量研究專業(yè)委員會(huì)、中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)生物制品分會(huì)、中國醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會(huì)疫苗專業(yè)委員會(huì)、中國微生物學(xué)會(huì)生物制品專業(yè)委員會(huì)共同主辦，由《中國新藥雜志》有限公司、成都生物制品研究所有限責(zé)任公司承辦的“2017中國生物制品年會(huì)暨第十七次全國生物制品學(xué)術(shù)研討會(huì)”于11月20-21日在成都勝利召開。來自國內(nèi)外的 1500 余名代表參會(huì)。

本次大會(huì)旨在積極推進(jìn)生物醫(yī)藥領(lǐng)域技術(shù)、市場、資金、人才、管理等要素有效融合，展示我國生物醫(yī)藥發(fā)展成果，為參會(huì)的各位專家學(xué)者搭建溝通橋梁。會(huì)議期間，數(shù)十位海內(nèi)外專家學(xué)者帶來60場高質(zhì)量的前沿專題報(bào)告，內(nèi)容涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域的最新進(jìn)展、國內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域的最新研究成果以及我國生物醫(yī)藥研發(fā)政策法規(guī)等。

大會(huì)開幕式由中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)生物制品分會(huì)副主任委員沈心亮研究員主持。成都市人民政府副市長、成都高新區(qū)黨工委書記范毅、中國食品藥品檢定研究院副院長王佑春研究員和成都天府國際生物城的代表致開幕詞。

簡明的開幕式后，由桑國衛(wèi)院士、劉昌孝院士、林東昕院士、魏于全院士和王軍志研究員五位國內(nèi)著名專家分別帶來了精彩紛呈的主題報(bào)告。大會(huì)主題報(bào)告由中國藥學(xué)會(huì)生物藥品與質(zhì)量研究專業(yè)委員會(huì)主任委員王軍志與中國醫(yī)藥企業(yè)發(fā)展促進(jìn)會(huì)會(huì)長封多佳主持。報(bào)告期間會(huì)場掌聲不斷。

20-21日的分會(huì)場報(bào)告群英薈萃，55 位專家分別在“新型疫苗研發(fā)與評(píng)價(jià)”、“新型生物技術(shù)藥研發(fā)與評(píng)價(jià)”、“基因與細(xì)胞治療”3個(gè)分會(huì)場進(jìn)行精彩演講。

每一場學(xué)術(shù)報(bào)告都精彩紛呈，觀眾聽眾熱情高漲，掌聲跌宕起伏，整個(gè)會(huì)場學(xué)術(shù)氛圍相當(dāng)濃厚。

本次盛會(huì)多學(xué)科并進(jìn)，不僅大大開拓了科技人員的科研思路，更為基礎(chǔ)研究單位與應(yīng)用單位加強(qiáng)合作交流搭建了良好的平臺(tái)。

Study of the distribution of intestinal flora and serum levels of GDF-15 in patients with newly diagnosed type 2 diabetes by taking acarbose

ZHU Ya-xin, YANG Jian-rong, XIE Rong-di

ObjectiveTo investigate the distribution of intestinal flora and serum levels of GDF-15 in patients with newly diagnosed type 2 diabetes (T2DM) by taking acarbose.

MethodsWe selected 120 newly diagnosed T2DM patients in our hospital, who were randomly divided into the experimental group (n = 60) and the control group (n = 60). The patients in the control group were given placebo. The subjects in the experimental group were taken acarbose for 14 d. The blood glucose and lipid indexes of the two groups were compared. Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was used to determine the level of serum GDF-15 in the control group and the experimental group. The 16SrRNA-V3 region of all bacteria in fecal samples was sequenced. The distribution and abundance of intestinal flora were analyzed, and cluster analysis was carried out at the same time in DNA. The intestinal flora was quantitatively detected by real-time quantitative PCR.

ResultsAfter treatment, the blood glucose and lipid, intestinal flora and the expression level of GDF-15 were significantly different between the two groups (P＜ 0.05). The intestinal flora of the experimental group changed obviously, and there was a significant difference between the improvement group and the no improvement group in blood glucose and blood lipid (P＜ 0.05). The expression level of GDF-15 in serum was positively related to the abundance of Bacteroides, Clostridium IV and Veillonella (P＜0.05). It was negatively correlated with abundance of phylum firmicutes, Actinomyces, Prevotella, Lactobacillus, and Blautia cocci (P＜ 0.05).

ConclusionAcarbose can be effective in treating patients with newly diagnosed type 2 diabetes by affecting the distribution of intestinal flora and serum levels of GDF-15.

Diabetes mellitus, type 2; Acarbose; Growth differentiation factor 15; Intestinal flora

Author Affiliation:Department of Endocrinology, The Third People's Hospital of Longgang District, Shenzhen 518115, China

ZHU Ya-xin, Email： zhuyaxinsz84@163.com

10.3969/j.issn.1673-713X.2017.06.008

深圳市龍崗區(qū)經(jīng)濟(jì)與科技發(fā)展專項(xiàng)資金醫(yī)療衛(wèi)生科技計(jì)劃項(xiàng)目（2017040310345068）

518115 深圳市龍崗區(qū)第三人民醫(yī)院內(nèi)分泌科

朱雅欣，Email：zhuyaxinsz84@163.com

2017-09-11

www.cmbp.net.cn 中國醫(yī)藥生物技術(shù), 2017, 12(6)：539-544