• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    高效液相色譜法測(cè)定垂盆草-柴胡藥對(duì)不同比例配伍中槲皮素、山柰素、異鼠李素的含量

    2017-12-11 02:12:55蔣志濤呂玲燕汪銅芳陳曉峰巫靜華
    中國(guó)現(xiàn)代中藥 2017年11期
    關(guān)鍵詞:異鼠李素槲皮素

    蔣志濤,呂玲燕,汪銅芳,2,陳曉峰,巫靜華*

    (1.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬?gòu)埣腋坩t(yī)院 江蘇省企業(yè)研究生工作站,江蘇 張家港 215600;2.南京中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院,江蘇 南京 210023)

    高效液相色譜法測(cè)定垂盆草-柴胡藥對(duì)不同比例配伍中槲皮素、山柰素、異鼠李素的含量

    蔣志濤1,呂玲燕1,汪銅芳1,2,陳曉峰1,巫靜華1*

    (1.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬?gòu)埣腋坩t(yī)院 江蘇省企業(yè)研究生工作站,江蘇 張家港 215600;2.南京中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院,江蘇 南京 210023)

    目的考察垂盆草配伍柴胡后對(duì)總黃酮煎出量的影響。方法使用高效液相色譜法分別對(duì)單味垂盆草藥材的水煎液及不同比例垂盆草柴胡配伍后的單煎合液及合煎液中3種黃酮的總含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果不同比例垂盆草柴胡配伍的單煎合液中總黃酮的含量與垂盆草單煎液并無顯著性差異,合煎液中總黃酮的含量顯著增加。結(jié)論垂盆草配伍柴胡對(duì)總黃酮的煎出有促進(jìn)作用。

    垂盆草;柴胡;配伍;總黃酮

    垂盆草具有利濕退黃、清熱解毒的功能,可用于濕熱黃疸、小便不利、癰腫瘡瘍的治療,垂盆草與其他藥物配伍后可增強(qiáng)其疏肝健脾、利濕退黃的效果[1-3]。在中醫(yī)藥理論中,垂盆草配伍柴胡具有非常廣泛的應(yīng)用,如益肝樂顆粒,全方由垂盆草、柴胡、郁金等藥材組成,用于濕熱蘊(yùn)蒸、身目俱黃或兩脅痞滿、疼痛、體倦懶食、溲赤便溏、舌苔黃膩等,急、慢性肝炎屬上述證候者。垂盆草能利濕退黃、清熱解毒,柴胡則可疏肝解郁、升舉陽氣,兩藥配伍用有非常廣泛的藥理作用[4-6]。楊潔文等[7]通過使用不同劑量柴胡垂盆草湯灌胃對(duì)化療藥物(匹服平)所致的肝損傷小鼠的保護(hù)作用,發(fā)現(xiàn)治療組與模型組血清學(xué)測(cè)試及病理學(xué)表現(xiàn)均存在顯著性差異。垂盆草配伍柴胡前期多注重藥理學(xué)方面的研究,對(duì)其化學(xué)成分的研究卻很少見[8-10],本文以高效液相色譜法觀察垂盆草與柴胡不同比例配伍對(duì)垂盆草有效成分槲皮素、山柰素、異鼠李素3種黃酮總含量煎出率的影響。

    1 儀器與材料

    1.1 儀器

    Waters e2695高效液相色譜儀、Waters 2998二極管陣列檢測(cè)器、Epower2化學(xué)工作站、分析天平(Shimadzu Aux220)。

    1.2 材料

    槲皮素對(duì)照品、山柰素對(duì)照品、異鼠李素對(duì)照品(成都曼斯特科技開發(fā)有限公司,批號(hào)分別為13122506、14010701、13053007);甲醇為色譜純(德國(guó)默克);水為娃哈哈純凈水;鹽酸為分析純。

    垂盆草、柴胡藥材飲片均來自張家港市中醫(yī)醫(yī)院藥劑科,經(jīng)張家港市中醫(yī)醫(yī)院余輝副主任中藥師鑒定均符合2015版《中華人民共和國(guó)藥典》一部項(xiàng)下規(guī)定。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 樣品溶液的制備

    按表1規(guī)定處方量準(zhǔn)確稱取各味藥,充分混勻后分別置于1000 mL燒瓶中,加8倍量水,煮沸后1 h,用4層醫(yī)用紗布過濾,殘?jiān)?倍水重復(fù)以上過程,合并2次濾液,定容至藥材總重的20倍量,采取相同的加水倍數(shù)、煎煮次數(shù)及煎煮時(shí)間,分別煎煮,每組平行制備兩份。精密量取垂盆草及柴胡單煎液,配制成垂盆草與柴胡煎出液分別為2∶1、1∶1、1∶2的單煎合液適量。每組平行制備兩份即得1~8號(hào)樣品溶液。

    表1 不同藥物配比組成

    2.2 HPLC檢測(cè)

    以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,色譜柱為Hedera ODS-2(200 mm×4.6 mm,5 μm);以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,選用不同比例的0.4%磷酸溶液(A)∶甲醇(B)為流動(dòng)相,梯度洗脫,條件見表2。

    2012年鎮(zhèn)江市積極采取措施進(jìn)行智慧城市建設(shè)并取得一定成效[2]。2016年在《鎮(zhèn)江市“十三五“規(guī)劃綱要》中,鎮(zhèn)江市人民政府明確提出要推進(jìn)“智慧鎮(zhèn)江”建設(shè),全面提升一體化基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)水平。2018年鎮(zhèn)江市榮獲“2018中歐綠色智慧城市獎(jiǎng)”。目前鎮(zhèn)江智慧城市建設(shè)已經(jīng)進(jìn)入發(fā)展新階段。揚(yáng)中市智慧城市建設(shè)一方面能夠?yàn)殒?zhèn)江下屬縣級(jí)市例如丹陽、句容、丹徒等提供建設(shè)樣本,以點(diǎn)帶面整體推進(jìn)鎮(zhèn)江全市范圍內(nèi)的智慧建設(shè);另一方面,揚(yáng)中市加強(qiáng)與鎮(zhèn)江產(chǎn)業(yè)合作創(chuàng)新,對(duì)傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)進(jìn)行升級(jí)轉(zhuǎn)型,促進(jìn)經(jīng)濟(jì)共享、資源共享、共同發(fā)展,為鎮(zhèn)江經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展貢獻(xiàn)力量,進(jìn)一步推動(dòng)“智慧鎮(zhèn)江”建設(shè)。

    表2 流動(dòng)相梯度洗脫程序

    2.3 溶液制備

    2.3.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取槲皮素、山柰素、異鼠李素19.20、5.01、5.25 mg,分別置于不同的10 mL容量瓶中,加適量甲醇溶解,并用甲醇定容至刻度,搖勻備用。分別取1 mL上述對(duì)照品溶液置于25 mL容量瓶中,用甲醇稀釋定容至刻度,制成每1 mL含槲皮素、山柰素、異鼠李素分別為0.076 8、0.020 04、0.021 mg的混合對(duì)照品溶液。

    2.3.2 供試品溶液的制備 精密吸取上述樣品溶液20 mL,置于蒸發(fā)皿中,水浴鍋上蒸干,精密量取甲醇-25%鹽酸溶液(4∶1)混合溶液25 mL,稱定重量,加熱回流1 h,放冷,用上述混合溶液補(bǔ)足重量,搖勻,過0.45 μm微孔濾膜,取續(xù)濾液,即得。

    2.4 方法學(xué)考察

    2.4.1 系統(tǒng)適用性考察 分別精密吸取混合對(duì)照品溶液和1號(hào)供試品溶液各10 μL,注入液相色譜儀,按2.2項(xiàng)下色譜條件測(cè)定。色譜圖見圖1。結(jié)果顯示,在供試品溶液中槲皮素、山柰素、異鼠李素與對(duì)照品有相同的保留時(shí)間。

    2.4.2 專屬性試驗(yàn) 在與樣品測(cè)定完全相同的條件下,精密吸取2號(hào)供試品項(xiàng)下的柴胡水煎液10 μL,連續(xù)進(jìn)2針,發(fā)現(xiàn)陰性無干擾,色譜圖見圖1中C。說明垂盆草中槲皮素、山柰素、異鼠李素專屬性較強(qiáng)。

    注:A.混合對(duì)照品;B.供試品;C.陰性樣品;1.槲皮素;2.山柰素;3.異鼠李素。圖1 對(duì)照品、供試品、陰性對(duì)照溶液的HPLC圖

    2.4.3 線性關(guān)系考察 精密吸取混合對(duì)照品溶液各1、2、4、6、10、12 μL進(jìn)樣,測(cè)定峰面積,以槲皮素、山柰素、異鼠李素的進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)X,以三者峰面積為縱坐標(biāo)Y,各自進(jìn)行線性回歸,槲皮素線性回歸方程:Y=3 072 031.2X-13 231.4,r=0.999 9;山柰素的線性回歸方程:Y=3 062 657.1X-6 241.3,r=0.999 8;異鼠李素的線性回歸方程:Y=2 583 461.7X-9 123.2,r=0.999 9。結(jié)果表明,槲皮素、山柰素、異鼠李素分別在0.076 8~1.92、0.020 04~0.501、0.021~0.525 μg線性關(guān)系良好。

    2.4.4 精密度試驗(yàn) 精密吸取每1 mL含槲皮素、山柰素、異鼠李素分別為0.076 8、0.020 04、0.021 mg的混合對(duì)照品溶液,按照2.2項(xiàng)下色譜條件,重復(fù)進(jìn)樣6次進(jìn)行分析測(cè)定,進(jìn)樣量均為10 μL。分別測(cè)定槲皮素、山柰素、異鼠李素峰面積,結(jié)果計(jì)算得出槲皮素、山柰素、異鼠李素的峰面積的RSD分別為0.7%、0.8%、1.2%,表明精儀器的精密度良好,可用于進(jìn)一步試驗(yàn)分析。

    2.4.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一份樣品(垂盆草單煎液)按供試品溶液的制備方法,于室溫(20~25 ℃)下放置,分別于0、2、4、6、8、10 h進(jìn)樣,每次進(jìn)樣10 μL,按2.2項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定,記錄6次峰面積,結(jié)果10 h內(nèi)RSD為0.98%,表明供試品溶液在10 h內(nèi)穩(wěn)定。

    2.4.6 重復(fù)性試驗(yàn) 精密吸取同一份樣品(垂盆草單煎液),按供試品溶液的制備方法,共平行制備6份,分別精密吸取10 μL,按2.2項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果槲皮素、山柰素、異鼠李素的平均含量分別為1.14、0.32、0.48 mg·g-1,各成分含量的RSD分別為1.2%、1.1%、1.4%,均符合要求,結(jié)果表明該方法重復(fù)性良好。

    2.4.7 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取同一份樣品(垂盆草單煎液)10 mL,共6份,分別精密加入一定量的槲皮素對(duì)照品溶液(1.92 mg·mL-1)、山柰素對(duì)照品溶液(0.501 mg·mL-1)、異鼠李素對(duì)照品溶液(0.525 mg·mL-1),上述溶液按2.1項(xiàng)下供試品溶液的制備方法分別制備6份,按2.2項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣,分析測(cè)定,測(cè)定方法的回收率。測(cè)定結(jié)果見表3~5。

    表3 槲皮素的加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

    表4 山柰素的加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

    表5 異鼠李素的加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

    2.5 樣品測(cè)定

    精密吸取2.1項(xiàng)下表1中除柴胡單煎液外的各樣品溶液,按供試品溶液的制備方法,每個(gè)配比平行制備兩分,共14份,分別精密吸取每1 mL含槲皮素、山柰素、異鼠李素分別為0.076 8、0.020 04、0.021 mg的混合對(duì)照品溶液及各供試品溶液各10 μL,連續(xù)進(jìn)2針,采用隨行標(biāo)準(zhǔn),用外標(biāo)一點(diǎn)法測(cè)定,即得各個(gè)樣品3種黃酮成分的總含量,結(jié)果見表6。

    表6 樣品測(cè)定結(jié)果(n=3)

    注:與垂盆草單煎液比較▲P< 0.01。

    精密吸取各樣品10 μL,分別進(jìn)樣3次,按外標(biāo)法計(jì)算3種黃酮類總含量,計(jì)算平均值,所得結(jié)果見表6。實(shí)驗(yàn)結(jié)束,采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(P<0.01)組間差異采用Dunett-t檢驗(yàn)。

    3 討論

    藥理學(xué)研究證明,垂盆草中黃酮類成分具有抗肝組織纖維化、保肝降酶、保護(hù)肝細(xì)胞的作用[11-16]?!吨腥A人民共和國(guó)藥典》2015版把槲皮素、山柰素、異鼠李素作為控制垂盆草藥材的質(zhì)量指標(biāo),因此,本實(shí)驗(yàn)研究以3種黃酮的總含量作為考察的指標(biāo)。垂盆草與柴胡相須為用,可增強(qiáng)保肝降酶、止痛之力。有研究表明,在垂盆草與柴胡配伍的諸多方劑中,兩者以1∶1配伍比例出現(xiàn)頻率最多。因此我們選擇2∶1、1∶1、1∶2的不同配伍比例進(jìn)行研究。

    在本實(shí)驗(yàn)選定的色譜條件下,3種黃酮成分得到較好的分離,無雜峰干擾測(cè)定。垂盆草單煎液與柴胡-垂盆草配伍水煎液是按照傳統(tǒng)中藥煎煮方法平行操作制得,以此來考察煎煮過程中柴胡對(duì)垂盆草總黃酮的影響。單煎合液采用兩種藥材單獨(dú)煎煮后所得的煎液按比例混合,以此考察兩者簡(jiǎn)單混合時(shí)柴胡對(duì)垂盆草總黃酮煎出率的影響。兩種情況綜合考慮,研究單獨(dú)煎煮合并和合煎的合理性,據(jù)此研究柴胡-垂盆草配伍對(duì)3種黃酮類成分的影響是科學(xué)可行的。

    垂盆草單煎液中總黃酮煎出量為(1.964 7±0.468 3)mg·g-1,合煎液3種配比組成總黃酮煎出量依次為(2.107 3±0.004 1)、(2.136 0±0.019 4)、(2.249 2±0.003 2)mg·g-1,單煎合液不同配比總黃酮含量依次為(1.932 9±0.001 6)、(1.923 2±0.008 8)、(1.946 4±0.020 2)mg·g-1。由上可知,單煎合液與垂盆草單煎液相比,不存在顯著性差異(P>0.01),說明在混合的過程中,柴胡對(duì)垂盆草中的總黃酮無顯著影響。合煎液中總黃酮煎出量與垂盆草單煎液相比含量顯著增加(P<0.01),說明柴胡垂盆草合煎后對(duì)垂盆草中的總黃酮溶出有促進(jìn)作用,不同配比之間沒有明顯的規(guī)律。故筆者推測(cè)垂盆草和柴胡配伍可能是在煎煮過程中通過影響總黃酮的含量來影響藥效的,而兩者單獨(dú)煎煮后混合并無顯著影響,也就是說兩者配伍不能簡(jiǎn)單地混合,必須共同煎煮才可行。中藥成分復(fù)雜,不能根據(jù)某一種或幾種有效成分的含量來判斷藥效,因此在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究中應(yīng)盡可能選取多指標(biāo)成分進(jìn)行研究,結(jié)合化學(xué)指標(biāo)和藥效學(xué)指標(biāo)進(jìn)行綜合考察。

    [1] 趙珂佳,楊丹紅.垂盆草沖劑治療非酒精性脂肪性肝病31例觀察[J].浙江中醫(yī)雜志,2015,50(8):618.

    [2] 李慧娟,杜成林,王曉靜,等.垂盆草的研究進(jìn)展[J].藥學(xué)研究,2015,34(11):661-663.

    [3] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典:一部[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出社,2015.

    [4] 譚雄斯.HPLC-UV-ELSD法測(cè)定益肝樂顆粒中槲皮素、山柰素、柴胡皂苷a和柴胡皂苷d [J].中成藥,2014,36(3):531-535.

    [5] 陳淑霞.益肝樂顆粒治療藥物性肝炎療效觀察[J].吉林醫(yī)學(xué),2013,34(17):3359-3360.

    [6] 董志偉.益肝樂膠囊制粒酒精性脂肪肝的臨床療效觀察[J].中國(guó)衛(wèi)生產(chǎn)業(yè),2012,29,66.

    [7] 楊潔文,劉云霞.柴胡垂盆湯對(duì)異環(huán)磷酰胺所致小鼠肝損傷保護(hù)作用的研究[J].浙江中醫(yī)雜志,2013,48(12):906-907.

    [8] 王俏豐.柴胡郁丹湯治療濕熱型脂肪肝50例[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技,2013,20(5):504.

    [9] 王大勇.柴胡疏肝散聯(lián)合西藥治療肝氣郁結(jié)型慢性乙型肝炎隨機(jī)平行對(duì)照研究[J].實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志,2015,29(8):121-123.

    [10] 史代萌.疏肝健脾湯辨治非酒精性脂肪性肝炎隨機(jī)平行對(duì)照研究[J].實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志,2016,30(10):34-36.

    [11] 林遠(yuǎn)燦,駱海鶯,陳紅淑,等.垂盆草總黃酮對(duì)肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1和Smad7 表達(dá)的影響[J].中國(guó)藥師,2015,18(12):2021-2024.

    [12] 林遠(yuǎn)燦,駱海鶯.垂盆草總黃酮對(duì)實(shí)驗(yàn)性肝纖維化干預(yù)作用的研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2015,33(8):1962-1966.

    [13] 林遠(yuǎn)燦,駱海鶯,金乾興.垂盆草總黃酮影響肝星狀細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制研究[J].中國(guó)中藥雜志,2015,40(16):3273-3277.

    [14] 楊嫆嫆,陸紅,吳蓮鳳,等.垂盆草提取物對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞-肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)分化和基質(zhì)累積的影響[J].溫州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2015,45(4):243-247.

    [15] 陳磊,俞雪峰,姚曉敏.垂盆草不同極性部位體外抗氧化活性的研究[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生,2016,54(24):120-124.

    [16] 曾軍英,李勝華,伍賢進(jìn),等.垂盆草醇提物抑制HepG2細(xì)胞STAT-3信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究[J].中國(guó)中藥雜志,2014,39(17):3349-3352.

    DeterminationofContentofQuercetin,KaempferideandIsorhamnetininDrugPairHerbaSediSarmentosiandRadixBupleuriofDifferentProportionsbyHPLC

    JIANGZhitao1,LYULingyan1,WANGTongfang1,2,CHENXiaofeng1,WUJinghua1*

    (1.ZhangjiagangHospitalofTraditionalChineseMedicine,AffiliatedHospitalofNanjingUniversityofChineseMedicine;GraduateworkstationofenterprisesinJiangsuProvince,Zhangjiagang215600,China,2.NanjingUniversityofChineseMedicine,Nanjing210023,China)

    Objective:To examine the effect of drug pair Herba Sedi Sarmentosi and Radix Bupleuri in different proportions on extract amount of quercetin,kaempferide and isorhamnetin.MethodsThe contents of quercetin,kaempferide and isorhamnetin in decoctions of Herba Sedi Sarmentosi,Radix Bupleuri as well as Herba Sedi Sarmentosi and Radix Bupleuri in different proportions were determined by HPLC,respectively.ResultsThere was no significant difference in flavonoids content of separated decocted Herba Sedi Sarmentosi and Radix Bupleuri in different proportion,and Herba Sedi Sarmentosi decoction.The total flavonoid content in together decocted Herba Sedi Sarmentosi and Radix Bupleuri increased significantly.ConclusionRadix Bupleuri enhances the extraction of total flavonoid in Herba Sedi Sarmentosi decoction.

    Herba Sedi Sarmentosi;Radix Bupleuri;compatibility;total flavonoids

    蘇州市科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(SYSD2017161,SYSD2015165)

    *

    巫靜華,主管中藥師,研究方向:中藥制劑及質(zhì)量分析研究;Tel:(0512)56380621;E-mail:334582090@qq.com

    10.13313/j.issn.1673-4890.2017.11.028

    2017-02-11)

    猜你喜歡
    異鼠李素槲皮素
    異鼠李素抗癌作用及其機(jī)制的研究進(jìn)展
    異鼠李素抗UUO大鼠腎臟纖維化作用及機(jī)制
    中成藥(2021年11期)2021-11-26 01:32:04
    槲皮素改善大鼠銅綠假單胞菌肺感染
    中成藥(2017年9期)2017-12-19 13:34:21
    異鼠李素(Isorhamnetin)在肺癌中的研究進(jìn)展
    我不是“輸”的代名詞
    我不是“輸”的代名詞
    異鼠李素抗癌活性研究
    槲皮素通過抑制蛋白酶體活性減輕心肌細(xì)胞肥大
    美女月嫂
    槲皮素金屬螯合物的研究與應(yīng)用
    久久精品成人免费网站| 欧美国产精品va在线观看不卡| 高清在线国产一区| 久久午夜亚洲精品久久| 69av精品久久久久久| 女性生殖器流出的白浆| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 妹子高潮喷水视频| 老司机在亚洲福利影院| 丝袜美足系列| 丰满迷人的少妇在线观看| 久久国产精品人妻蜜桃| www国产在线视频色| 久9热在线精品视频| 午夜免费激情av| 黄片大片在线免费观看| 18美女黄网站色大片免费观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 热99国产精品久久久久久7| 99国产精品99久久久久| 久久久久精品国产欧美久久久| 一级片'在线观看视频| 三级毛片av免费| 午夜精品久久久久久毛片777| 麻豆国产av国片精品| 18禁美女被吸乳视频| 久久久国产精品麻豆| 天堂动漫精品| 亚洲,欧美精品.| 国产成年人精品一区二区 | 国产麻豆69| 欧美色视频一区免费| 这个男人来自地球电影免费观看| 男人的好看免费观看在线视频 | 欧美精品一区二区免费开放| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 1024香蕉在线观看| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 在线国产一区二区在线| 女性被躁到高潮视频| 午夜两性在线视频| 免费在线观看影片大全网站| 国产亚洲精品第一综合不卡| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 精品久久久久久成人av| 成年人黄色毛片网站| 男女下面进入的视频免费午夜 | 午夜a级毛片| 999久久久国产精品视频| 亚洲在线自拍视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 久久影院123| 久久久久国产一级毛片高清牌| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产97色在线日韩免费| 日本vs欧美在线观看视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲人成伊人成综合网2020| 免费在线观看黄色视频的| 一进一出抽搐动态| 热99re8久久精品国产| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久香蕉激情| 久久性视频一级片| 久久久国产成人免费| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 极品教师在线免费播放| 夜夜爽天天搞| 日韩人妻精品一区2区三区| 免费搜索国产男女视频| 交换朋友夫妻互换小说| 久久亚洲真实| 中文欧美无线码| 日韩高清综合在线| 国产色视频综合| 欧美乱妇无乱码| 99在线视频只有这里精品首页| 国产熟女午夜一区二区三区| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 性欧美人与动物交配| 高清av免费在线| 欧美久久黑人一区二区| 亚洲精品av麻豆狂野| av国产精品久久久久影院| 国产av一区在线观看免费| www.熟女人妻精品国产| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲欧美激情综合另类| 国产97色在线日韩免费| 精品欧美一区二区三区在线| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 丰满迷人的少妇在线观看| 黄片播放在线免费| 国产亚洲精品一区二区www| 午夜福利影视在线免费观看| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 中文字幕高清在线视频| av电影中文网址| 欧美激情久久久久久爽电影 | 国产成人免费无遮挡视频| 9色porny在线观看| 美女福利国产在线| 午夜日韩欧美国产| 国产亚洲精品一区二区www| 国产精品1区2区在线观看.| 精品国产亚洲在线| 亚洲 国产 在线| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 91字幕亚洲| 一a级毛片在线观看| 精品人妻在线不人妻| 国产91精品成人一区二区三区| 五月开心婷婷网| 国产一区二区激情短视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 久久久水蜜桃国产精品网| 国产三级黄色录像| 一个人免费在线观看的高清视频| 午夜福利在线免费观看网站| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲人成电影观看| 久久性视频一级片| 日韩有码中文字幕| 亚洲成国产人片在线观看| www.精华液| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 色尼玛亚洲综合影院| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 男女下面插进去视频免费观看| 午夜影院日韩av| 国产又色又爽无遮挡免费看| 欧美在线黄色| av在线播放免费不卡| 国产一卡二卡三卡精品| 一进一出好大好爽视频| 天堂√8在线中文| 中文字幕人妻丝袜制服| 亚洲av第一区精品v没综合| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲人成电影观看| 久久久久九九精品影院| 国产熟女午夜一区二区三区| 久久香蕉激情| 久久久久国产一级毛片高清牌| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 制服人妻中文乱码| 久久久国产成人精品二区 | 精品福利观看| 精品电影一区二区在线| 成人三级黄色视频| 俄罗斯特黄特色一大片| x7x7x7水蜜桃| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲在线自拍视频| 91精品国产国语对白视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 热re99久久国产66热| 9热在线视频观看99| 少妇粗大呻吟视频| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 好男人电影高清在线观看| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲伊人色综图| 亚洲第一av免费看| 国产精品二区激情视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 交换朋友夫妻互换小说| 99热国产这里只有精品6| 性少妇av在线| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲男人的天堂狠狠| 色尼玛亚洲综合影院| 免费观看精品视频网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品卡一卡二卡四卡免费| 欧美国产精品va在线观看不卡| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 日韩免费av在线播放| 精品人妻1区二区| 日本欧美视频一区| 在线观看免费视频网站a站| 男女床上黄色一级片免费看| 色综合站精品国产| 交换朋友夫妻互换小说| 两性夫妻黄色片| 极品人妻少妇av视频| 国产片内射在线| 9191精品国产免费久久| 老司机在亚洲福利影院| 欧美一区二区精品小视频在线| 午夜精品国产一区二区电影| 神马国产精品三级电影在线观看 | 一级a爱视频在线免费观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 久热这里只有精品99| 国产一区二区激情短视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 精品一区二区三区四区五区乱码| 免费av中文字幕在线| 看片在线看免费视频| 亚洲av五月六月丁香网| 少妇粗大呻吟视频| av欧美777| 嫩草影院精品99| 日韩高清综合在线| 中文字幕色久视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| av电影中文网址| 91字幕亚洲| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 五月开心婷婷网| 又大又爽又粗| 国产麻豆69| 黄色a级毛片大全视频| 国产熟女xx| 麻豆成人av在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 日韩欧美一区视频在线观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产一区二区激情短视频| 高清黄色对白视频在线免费看| 欧美色视频一区免费| 国产精品一区二区在线不卡| 美国免费a级毛片| 色哟哟哟哟哟哟| 一区二区日韩欧美中文字幕| 午夜福利在线免费观看网站| 在线观看午夜福利视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 一级毛片高清免费大全| 久热爱精品视频在线9| 涩涩av久久男人的天堂| 午夜老司机福利片| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产熟女xx| 久久久久久免费高清国产稀缺| 波多野结衣av一区二区av| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 三级毛片av免费| 久久 成人 亚洲| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲成人精品中文字幕电影 | 国产精品爽爽va在线观看网站 | 嫩草影院精品99| 丝袜人妻中文字幕| 中亚洲国语对白在线视频| 久久这里只有精品19| tocl精华| 久久久久久久久免费视频了| av免费在线观看网站| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 亚洲,欧美精品.| 夜夜爽天天搞| 亚洲欧美精品综合久久99| 看片在线看免费视频| 亚洲熟女毛片儿| 日本 av在线| 免费高清在线观看日韩| 香蕉国产在线看| 成年女人毛片免费观看观看9| 91精品国产国语对白视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 在线观看一区二区三区激情| 视频区欧美日本亚洲| 大香蕉久久成人网| 成人三级做爰电影| 亚洲欧美一区二区三区久久| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 在线看a的网站| 精品一区二区三区四区五区乱码| 久久人妻av系列| 亚洲色图av天堂| 亚洲美女黄片视频| 长腿黑丝高跟| 国产成人影院久久av| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 精品国产国语对白av| 女同久久另类99精品国产91| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 日日干狠狠操夜夜爽| 日本vs欧美在线观看视频| 日韩大尺度精品在线看网址 | 日韩精品中文字幕看吧| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产精品一区二区三区四区久久 | 黑人猛操日本美女一级片| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 午夜精品国产一区二区电影| 午夜福利,免费看| 又大又爽又粗| 校园春色视频在线观看| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产一区二区三区综合在线观看| 日韩有码中文字幕| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 国产97色在线日韩免费| av免费在线观看网站| 精品国产美女av久久久久小说| 人成视频在线观看免费观看| 成人18禁在线播放| 一区二区三区激情视频| 久久久国产精品麻豆| 老司机福利观看| 亚洲精品国产区一区二| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 久久人人97超碰香蕉20202| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 99在线视频只有这里精品首页| 精品久久久久久久久久免费视频 | 亚洲成人国产一区在线观看| 一级,二级,三级黄色视频| 国产99久久九九免费精品| 超碰97精品在线观看| 欧美日本中文国产一区发布| 后天国语完整版免费观看| 美女福利国产在线| 国产一区二区三区视频了| 天堂动漫精品| 麻豆国产av国片精品| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 两个人免费观看高清视频| 99精品久久久久人妻精品| 一区二区三区国产精品乱码| 两个人免费观看高清视频| 中文字幕人妻熟女乱码| 又黄又粗又硬又大视频| 88av欧美| 99riav亚洲国产免费| 午夜成年电影在线免费观看| 国产精品1区2区在线观看.| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 色精品久久人妻99蜜桃| 多毛熟女@视频| 九色亚洲精品在线播放| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 在线看a的网站| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| 一进一出抽搐gif免费好疼 | 亚洲一区二区三区色噜噜 | 午夜福利免费观看在线| 成人黄色视频免费在线看| 久久久久久久久中文| 99re在线观看精品视频| 超色免费av| 99国产精品99久久久久| 国产三级在线视频| 免费观看人在逋| 91麻豆av在线| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 免费av毛片视频| 久久九九热精品免费| 99国产精品99久久久久| 成人三级黄色视频| 视频区欧美日本亚洲| 三级毛片av免费| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲成人免费av在线播放| 这个男人来自地球电影免费观看| 99国产精品99久久久久| 国产又爽黄色视频| a在线观看视频网站| 在线国产一区二区在线| 免费av毛片视频| 欧美日韩福利视频一区二区| av电影中文网址| 亚洲片人在线观看| 制服诱惑二区| 99久久99久久久精品蜜桃| 久久久久亚洲av毛片大全| 亚洲av电影在线进入| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲午夜理论影院| av中文乱码字幕在线| 久久中文字幕人妻熟女| 亚洲免费av在线视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 大陆偷拍与自拍| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 亚洲视频免费观看视频| 无人区码免费观看不卡| 亚洲国产欧美网| 国产免费av片在线观看野外av| 69精品国产乱码久久久| 怎么达到女性高潮| 日韩欧美国产一区二区入口| 露出奶头的视频| 欧美成人免费av一区二区三区| 超碰成人久久| 黄色女人牲交| 黄色片一级片一级黄色片| 欧美日韩精品网址| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产高清国产精品国产三级| 久久精品91蜜桃| 久久久水蜜桃国产精品网| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产精品久久久久成人av| 91精品三级在线观看| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久久久亚洲av毛片大全| 日本免费a在线| 久久午夜综合久久蜜桃| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 五月开心婷婷网| 久久久国产成人精品二区 | 女性生殖器流出的白浆| 校园春色视频在线观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 欧美黄色片欧美黄色片| 午夜精品久久久久久毛片777| 色老头精品视频在线观看| 久久香蕉国产精品| 国产片内射在线| 国产精品综合久久久久久久免费 | 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲国产看品久久| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲午夜理论影院| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 精品一区二区三区四区五区乱码| 91老司机精品| 精品一区二区三卡| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 岛国在线观看网站| 久久人妻熟女aⅴ| 久久久久久久久中文| 久热这里只有精品99| x7x7x7水蜜桃| 又黄又爽又免费观看的视频| 精品人妻在线不人妻| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 咕卡用的链子| 男人舔女人下体高潮全视频| 波多野结衣一区麻豆| 亚洲视频免费观看视频| 国产免费现黄频在线看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产99白浆流出| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 黄色视频不卡| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 欧美午夜高清在线| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 午夜激情av网站| 国产黄a三级三级三级人| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 欧美精品亚洲一区二区| 黑丝袜美女国产一区| 黄片播放在线免费| av欧美777| 精品久久久久久电影网| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 亚洲av五月六月丁香网| 国产一区二区激情短视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| 欧美激情极品国产一区二区三区| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 99热国产这里只有精品6| 水蜜桃什么品种好| 女性生殖器流出的白浆| 国产激情久久老熟女| 亚洲国产精品sss在线观看 | 午夜成年电影在线免费观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 日韩欧美在线二视频| 欧美成人午夜精品| 露出奶头的视频| 人人澡人人妻人| 午夜a级毛片| 久久香蕉激情| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲av第一区精品v没综合| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产一卡二卡三卡精品| 美女扒开内裤让男人捅视频| 在线观看一区二区三区激情| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 成年版毛片免费区| 90打野战视频偷拍视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 免费av毛片视频| av片东京热男人的天堂| 亚洲五月色婷婷综合| 成在线人永久免费视频| 午夜免费鲁丝| 国产高清激情床上av| 欧美一级毛片孕妇| 婷婷精品国产亚洲av在线| 两性夫妻黄色片| 国产精品一区二区精品视频观看| 天堂中文最新版在线下载| 热re99久久国产66热| 一二三四社区在线视频社区8| 国产精品 欧美亚洲| 91成人精品电影| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产精品成人在线| 精品福利观看| 夜夜爽天天搞| 亚洲av五月六月丁香网| a级毛片在线看网站| 欧美性长视频在线观看| 亚洲成人精品中文字幕电影 | 伦理电影免费视频| 无遮挡黄片免费观看| 99热国产这里只有精品6| 身体一侧抽搐| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 国产精品久久久久久人妻精品电影| 窝窝影院91人妻| 婷婷六月久久综合丁香| 国产亚洲欧美精品永久| 最好的美女福利视频网| 亚洲人成电影免费在线| 妹子高潮喷水视频| 人成视频在线观看免费观看| av免费在线观看网站| 国产成人精品久久二区二区91| 美国免费a级毛片| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 日日夜夜操网爽| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 国产高清videossex| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 成在线人永久免费视频| 男男h啪啪无遮挡| 一二三四社区在线视频社区8| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产亚洲欧美精品永久| 一级a爱片免费观看的视频| 国产97色在线日韩免费| 啦啦啦免费观看视频1| 亚洲欧美精品综合久久99| 新久久久久国产一级毛片| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 不卡一级毛片| 99精品久久久久人妻精品| 少妇粗大呻吟视频| 后天国语完整版免费观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 亚洲黑人精品在线| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 欧美日韩乱码在线| 色播在线永久视频| 成人免费观看视频高清| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲精品美女久久av网站| 午夜免费鲁丝| 亚洲久久久国产精品| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 久久热在线av| 99热只有精品国产| 两个人看的免费小视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 免费不卡黄色视频| 男女午夜视频在线观看| 国产亚洲欧美98| 日本五十路高清| 两人在一起打扑克的视频| 国产深夜福利视频在线观看| 视频区图区小说| 婷婷精品国产亚洲av在线| 精品久久久久久电影网| 男女午夜视频在线观看| 欧美丝袜亚洲另类 | 黄色成人免费大全| 亚洲五月天丁香| 少妇 在线观看| a在线观看视频网站| 亚洲三区欧美一区| av福利片在线| 国产野战对白在线观看| 久久这里只有精品19| 黄色 视频免费看| 视频区图区小说| 精品人妻1区二区| 夜夜夜夜夜久久久久| 丁香欧美五月| 国产成人啪精品午夜网站| 国产精品久久久人人做人人爽| 黄色丝袜av网址大全| 国产精品一区二区三区四区久久 |