硨蠔(Hippopus hippopus)的人工繁育*

張躍環(huán) 肖 述 李 軍 馬海濤 張 揚(yáng) 向志明 喻子牛

(中國(guó)科學(xué)院南海海洋研究所 熱帶海洋生物資源與生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 廣東省應(yīng)用海洋生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 廣州 510301)

硨蠔(Hippopus hippopus)的人工繁育*

張躍環(huán) 肖 述 李 軍 馬海濤 張 揚(yáng) 向志明 喻子牛①

(中國(guó)科學(xué)院南海海洋研究所 熱帶海洋生物資源與生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 廣東省應(yīng)用海洋生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 廣州 510301)

于2016年4—9月開(kāi)展了硨蠔(Hippopus hippopus)人工繁育技術(shù)研究。采用五羥色胺進(jìn)行催產(chǎn)、促使配子排放;精卵分別收集,進(jìn)行異體間受精以避免自交;受精卵經(jīng)過(guò)30h孵化,選出600萬(wàn)D形幼蟲(chóng)進(jìn)行培育。硨蠔的早期生活史與硨磲(Tridacnaspp.)相似,經(jīng)歷前期面盤(pán)幼蟲(chóng)、中期面盤(pán)幼蟲(chóng)、后期面盤(pán)幼蟲(chóng)、足面盤(pán)幼蟲(chóng)、單水管稚貝、雙水管稚貝、外套膜觸手稚貝、幼貝等階段。與硨磲不同的是,硨蠔懷卵量較少,但卵徑較大,D型幼蟲(chóng)也較大,幼蟲(chóng)趨光性更強(qiáng),殼長(zhǎng)2.0mm以后外套膜不伸出殼緣外,幼貝貝殼形態(tài)也不同于硨磲。同硨磲幼蟲(chóng)一樣,硨蠔幼蟲(chóng)需要構(gòu)建蟲(chóng)黃藻系統(tǒng)之后,才能出現(xiàn)鰓、次生殼等,從而完成變態(tài)成為稚貝。硨蠔幼蟲(chóng)變態(tài)率較低,僅為1.4%。中間育成期間,絲狀藻和錐形螺是稚貝培育的主要敵害,需及時(shí)清理才能確保稚幼貝正常生長(zhǎng)發(fā)育。經(jīng)過(guò)120d的精心飼育,培養(yǎng)出平均殼長(zhǎng)6.3mm幼貝500余個(gè)。本研究為進(jìn)一步開(kāi)展硨蠔人工繁育、中間育成、增殖放流、資源修復(fù)及移植保育提供了參考。

硨蠔;人工繁育;幼蟲(chóng)培育;附著變態(tài);蟲(chóng)黃藻;中間育成

硨蠔(Hippopus hippopus)隸屬硨磲科(Tridacnidae)硨蠔屬(Hippopus),分布于印度洋東部和太平洋西部及我國(guó)南海海域,主要棲息在珊瑚礁砂質(zhì)底中,是珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)的主要關(guān)鍵框架生物之一(董楊等,2015)。從全球范圍內(nèi)來(lái)看,硨蠔有兩種,一種是硨蠔,另一種叫作瓷口硨蠔(H.porcellanus)。在我國(guó)分布最多的是硨蠔,瓷口硨蠔只有零星分布(周勤等,2014)。硨蠔雖與硨磲(Tridacna)同為硨磲科,但二者外觀上仍有一些差別:首先二者貝殼形態(tài)明顯不同(楊文等,2013),其次硨蠔外套膜不翻出殼緣,而硨磲外套膜可以翻出殼緣;另外硨蠔外套膜顏色比較單一,而硨磲外套膜顏色多種多樣,五彩繽紛。

迄今為止,硨蠔的人工繁育報(bào)道較少。關(guān)島大學(xué)海洋實(shí)驗(yàn)室描述了硨蠔幼蟲(chóng)及稚貝的早期生活史(Jameson,1976);菲律賓席麗曼大學(xué)海洋生物研究室報(bào)道了硨蠔產(chǎn)卵、幼蟲(chóng)培育及早期生長(zhǎng)情況(Alcalaet al,1986)和瓷口硨蠔配子排放及幼蟲(chóng)培育狀況(Alcazaret al,1987);以上報(bào)道均獲得了少量殼長(zhǎng)為600—800μm 的稚貝,但尚未見(jiàn)培育至幼貝的相關(guān)報(bào)道。本研究在突破了硨磲人工繁育技術(shù)的基礎(chǔ)上(張躍環(huán)等,2016),在我國(guó)首次成功進(jìn)行了硨蠔人工繁育,為進(jìn)一步開(kāi)展南海硨蠔資源修復(fù)及珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)多樣性保護(hù)提供了技術(shù)保障。

1 材料與方法

1.1 親本促熟

2016年4月上旬在南海采集活力強(qiáng)、健康無(wú)損,殼長(zhǎng) 36—40cm,鮮重為平均 5kg/indi.的親本 12個(gè),共重約60kg。按照15kg/m3的密度放置于中國(guó)科學(xué)院南海海洋研究所海南熱帶海洋生物實(shí)驗(yàn)站的2個(gè)2m3玻璃鋼水槽中。采用“微充氣+微流水”形式進(jìn)行人工促熟,流水量為每缸 12m3/d,經(jīng)過(guò)2周促熟,硨蠔性腺發(fā)育成熟。促熟期間,海水均經(jīng)兩次砂濾,海水水溫27.5—29.3°C,鹽度32—33,采用半遮光的方式控制光照強(qiáng)度。

1.2 受精產(chǎn)卵

選取 5個(gè)性成熟的硨蠔,注射濃度為0.8mg/mL的五羥色胺催產(chǎn)劑至外套膜中,之后置于盛有20L新鮮海水的塑料桶中,幾分鐘后親本開(kāi)始排放精子,再過(guò)幾分鐘,開(kāi)始排放卵子,單獨(dú)收集每個(gè)個(gè)體的精、卵,用20L塑料桶收集精子,50L塑料桶收集卵子。一共獲得5桶精子和5桶卵子。顯微鏡鏡檢發(fā)現(xiàn),其中 2個(gè)個(gè)體的卵子很圓,為黑色,發(fā)育整齊,故選用這2個(gè)個(gè)體的卵子作為母本;檢查精子發(fā)現(xiàn)5個(gè)個(gè)體精子均較好。采用異體間配對(duì)原則,利用另外3個(gè)個(gè)體精子與這組卵子受精(平均分為3份),精卵比例(體積比)為1︰60左右。受精后,每隔3—5min輕輕攪動(dòng)受精卵一次;受精 1h以后,將受精卵液倒入玻璃鋼池中微充氣孵化,其密度為15indi./mL。

1.3 幼蟲(chóng)培養(yǎng)

受精卵經(jīng)過(guò)30h孵化發(fā)育至D形幼蟲(chóng),利用對(duì)角線70μm篩絹網(wǎng)選優(yōu),共獲得600萬(wàn)個(gè)D形幼蟲(chóng)。將幼蟲(chóng)放置于3個(gè)1m3盛有清新海水的玻璃鋼桶中采用微充氣法進(jìn)行培育,密度控制在2indi./mL以?xún)?nèi);至受精后第6天,幼蟲(chóng)密度調(diào)整為0.5indi./mL。幼蟲(chóng)培育期間,每天換水一次,換水量控制在60%,餌料為金藻,投喂量在0.5×104—1.0×104cell/mL·d。在此期間,水溫為28.0—29.6°C,鹽度為32—33,pH在8.2—8.3之間,半遮光控制光照。

幼蟲(chóng)經(jīng) 6d發(fā)育至足面盤(pán)幼蟲(chóng)后,將其放置于4×105—5×105cell/mL 的蟲(chóng)黃藻溶液中浸泡 2h,幼蟲(chóng)密度控制在30—40indi./mL。采用“微充氣+不換水”方式處理,7—10d幼蟲(chóng)完成變態(tài)。在此期間,水溫為28—30°C,鹽度為32—33,pH 為8.2—8.3,半遮光控制光照。

1.4 中間育成

當(dāng)幼蟲(chóng)完成變態(tài)后,建立了完整的蟲(chóng)黃藻系統(tǒng)。經(jīng)過(guò) 1個(gè)月的培育,稚貝殼長(zhǎng)達(dá) 400—500μm,形成雙水管,運(yùn)動(dòng)方式仍為爬行;經(jīng)過(guò) 2個(gè)月左右培育,殼長(zhǎng)達(dá)1—2mm,成為幼貝,與成體硨蠔外觀上非常相似,可站立起來(lái),利用足絲附著在容器底壁或者附著基上,完全依賴(lài)蟲(chóng)黃藻營(yíng)養(yǎng)。在此期間,采用“微充氣+微流水”方式飼育,定期清理培育容器上附著生物及各種藻類(lèi)等,半遮光控制光照,切忌光線過(guò)強(qiáng)。

1.5 測(cè)定指標(biāo)

受精率為卵裂受精卵數(shù)量與全部卵子數(shù)量之比;孵化率為D形幼蟲(chóng)數(shù)量與發(fā)生卵裂卵子數(shù)量之比;幼蟲(chóng)存活率為足面盤(pán)幼蟲(chóng)數(shù)量與 D形幼蟲(chóng)數(shù)量的比值;變態(tài)率為完成變態(tài)稚貝數(shù)量與足面盤(pán)幼蟲(chóng)數(shù)量比值;稚貝存活率為稚貝數(shù)量與剛剛完成變態(tài)稚貝數(shù)量比值;幼貝存活率為幼貝數(shù)量與剛形成幼貝時(shí)數(shù)量比值。

卵徑、幼蟲(chóng)和稚貝殼長(zhǎng)、殼高在顯微鏡下用目微尺測(cè)量;幼貝殼長(zhǎng)、殼高用電子游標(biāo)卡尺測(cè)量(精確值0.01mm);每個(gè)階段測(cè)量90個(gè)子代樣品。

2 結(jié)果

2.1 配子排放

注射五羥色胺催產(chǎn)劑后,硨蠔在5—7min后開(kāi)始排放精子,持續(xù)時(shí)間為6—8min;間隔9—10min后開(kāi)始排放卵子,持續(xù)時(shí)間為27—33min(表1)。為了避免自體受精,精卵嚴(yán)格分開(kāi)收集。

表1 注射催產(chǎn)劑后硨蠔親本排放配子情況Tab.1 Duration of gamete release after serotonin injection for horse’s hoof clam,Hippopus hippopus

2.2 受精孵化

硨蠔卵徑為120.08±0.30μm。按照1︰60的精卵比例進(jìn)行異體間配對(duì)受精,受精率(72.4±1.2)%。受精卵經(jīng)過(guò)第一極體、第二極體、2細(xì)胞、4細(xì)胞、8細(xì)胞、多細(xì)胞、囊胚期、原腸期、擔(dān)輪幼蟲(chóng)發(fā)育至 D形幼蟲(chóng)(表2,圖1),孵化率為93.4%±4.5%(表3)。在硨蠔受精卵中,發(fā)現(xiàn)了明顯的三級(jí)卵膜。

2.3 幼蟲(chóng)發(fā)育

經(jīng)過(guò)30h胚胎發(fā)育,獲得了D形幼蟲(chóng),殼長(zhǎng)×殼高為(170.13±0.95)×(140.25±0.72)μm,采用 260 目篩絹網(wǎng)進(jìn)行幼蟲(chóng)選育,放置于1000L玻璃鋼桶中,采用微充氣方式進(jìn)行幼蟲(chóng)培育,幼蟲(chóng)密度為2indi./mL。經(jīng)過(guò) 7d的幼蟲(chóng)培育,發(fā)育至足面盤(pán)幼蟲(chóng),幼蟲(chóng)足外伸,匍 匐 運(yùn) 動(dòng) , 殼 長(zhǎng) × 殼 高 為(200.05±1.05)×(170.49±0.57)μm(表2,圖1)。在整個(gè)浮游期,幼蟲(chóng)殼長(zhǎng)一直大于殼高,幼蟲(chóng)累計(jì)存活率為10.6%±1.9%(表3)。

2.4 附著變態(tài)

濃縮足面盤(pán)幼蟲(chóng),利用蟲(chóng)黃藻懸液浸泡 2h,促進(jìn)足面盤(pán)幼蟲(chóng)攝食蟲(chóng)黃藻,經(jīng)過(guò)反復(fù)比較,發(fā)現(xiàn)每次浸泡幼蟲(chóng)攝食比例在20%—30%。多次浸泡可以提高蟲(chóng)黃藻植入幼蟲(chóng)體內(nèi)的比率,促進(jìn)幼蟲(chóng)變態(tài)。經(jīng)過(guò) 7—14d培育,足面盤(pán)幼蟲(chóng)生活方式由浮游轉(zhuǎn)為底棲,完成變態(tài),出現(xiàn)鰓、次生殼,建立了蟲(chóng)黃藻系統(tǒng)。但是,變態(tài)率較低,變態(tài)率僅為1.4%±0.2%(表3)。

2.5 稚貝培育

采用“微充氣+微流水”的方式進(jìn)行稚貝培養(yǎng),不投喂任何單胞藻,保持水質(zhì)清新。受精后第25天,發(fā)育至單水管稚貝階段,殼長(zhǎng)×殼高=(331.75±18.66)×(270.69±13.52)μm;受精后第30天,發(fā)育至雙水管稚貝階段,殼長(zhǎng)×殼高=(450.19±32.47)×(361.42±24.16)μm;受精后第45天,發(fā)育至多觸手稚貝階段,殼長(zhǎng)×殼 高 =(920.46±75.22)×(901.55±62.58)μm, 即 將 進(jìn) 入幼貝階段(表2,圖1)。在此期間,稚貝存活率為14.8%± 2.7%(表3)。

表2 硨蠔早期生活史各階段的發(fā)育時(shí)間及其規(guī)格Tab.2 Early development stages and larval sizes of horse’s hoof clam Hippopus hippopus

2.6 幼貝培養(yǎng)

受精后第50天,當(dāng)稚貝殼長(zhǎng)≥1.20mm,進(jìn)入幼貝階段。與稚貝相比,貝殼加厚,變得不透明,外套膜外伸,可以站立起來(lái),進(jìn)行光合作用為機(jī)體提供營(yíng)養(yǎng)。受精后第120 天,殼長(zhǎng)×殼高=(6.32±0.60)×(3.95±0.45)mm,出現(xiàn)了貝殼形態(tài)轉(zhuǎn)換,有放射嵴,貝殼形態(tài)扭曲同成體硨蠔比較相似(表2,圖1)。在此期間,幼貝存活率為37.5%±5.4%(表3)。

圖1 硨蠔早期生活史Fig.1 Early life history of the horse’s hoof clam Hippopus hippopus

表3 受精率、受精卵孵化率和幼蟲(chóng)變態(tài)不同日齡存活率Tab.3 Fertilized rate,hatching rate,metamorphosis and survivals at different stages for horse’s hoof clam Hippopus hippopus

3 討論

3.1 繁殖特點(diǎn)

硨蠔與硨磲同為硨磲科,二者存在較多相似之處,但也存在部分差異。相似之處在于:(1)卵子中包含三級(jí)卵膜,三級(jí)卵膜多是腹足類(lèi)所特有的,具有提供營(yíng)養(yǎng)以及保護(hù)受精卵功能;(2)早期發(fā)育均經(jīng)歷了胚胎發(fā)育、幼蟲(chóng)、蟲(chóng)黃藻系統(tǒng)構(gòu)建、稚貝、幼貝等階段(張躍環(huán)等,2016)。不同點(diǎn)在于:(1)懷卵量不同(同樣大小的硨蠔懷卵量?jī)H為硨磲的一半左右);(2)卵徑大小不同(硨蠔卵徑為120μm,而硨磲的卵徑為95—100μm),差異顯著;(3)幼蟲(chóng)浮游趨光性不同(硨蠔幼蟲(chóng)具有較強(qiáng)的趨光性,經(jīng)常聚集在水面上,形成白色面粉狀小塊,需要較強(qiáng)的充氣或者水流將其驅(qū)散開(kāi)來(lái),而硨磲幼蟲(chóng)不具有這么強(qiáng)的趨光性);(4)對(duì)基質(zhì)要求不同(硨蠔幼蟲(chóng)在珊瑚砂底質(zhì)中容易完成變態(tài),而硨磲幼蟲(chóng)在珊瑚石底質(zhì)中具有較好的變態(tài)率);(5)稚幼貝外套膜伸展程度不同(在稚幼貝早期階段,二者均有外套膜觸手可以伸出殼外緣,當(dāng)硨蠔幼貝殼長(zhǎng)≥2mm后外套膜無(wú)法翻出殼外緣,而硨磲幼貝外套膜一直可以翻出殼外緣)(Jameson,1976)。

3.2 附著變態(tài)

大多數(shù)海洋無(wú)脊椎動(dòng)物均存在浮游幼蟲(chóng)階段,能否變態(tài)成功被看作是海洋軟體動(dòng)物生命周期中的里程碑,也是從浮游生活到底棲生活的一個(gè)橋梁(Yanet al,2006)。目前為止,僅有兩篇關(guān)于硨蠔幼蟲(chóng)發(fā)育的報(bào)道,其變態(tài)水平均極其低下,不足1%。本研究中,硨蠔幼蟲(chóng)的變態(tài)率僅為1.4%,這可能與硨蠔變態(tài)過(guò)程中需要構(gòu)建蟲(chóng)黃藻系統(tǒng)有關(guān)。此前,學(xué)者們?cè)陂_(kāi)展大硨磲(T.gigas)、無(wú)鱗硨磲(T.derasa)、鱗硨磲(T.squamosa)、長(zhǎng)硨磲(T.maxima)、諾瓦硨磲(T.nova)、番紅硨磲(T.crocea)的人工繁育時(shí),都發(fā)現(xiàn)幼蟲(chóng)變態(tài)率均≤1%,說(shuō)明硨磲幼蟲(chóng)變態(tài)水平偏低,這是限制硨磲苗種規(guī)?；庇淖畲笃款i。硨蠔、硨磲幼蟲(chóng)變態(tài)均需要建立蟲(chóng)黃藻系統(tǒng),沒(méi)有蟲(chóng)黃藻系統(tǒng)幼蟲(chóng)一定無(wú)法變態(tài)(Fittet al,1984)。在這個(gè)過(guò)程中,大部分幼蟲(chóng)由于蟲(chóng)黃藻系統(tǒng)構(gòu)建失敗被直接淘汰,死亡之后招來(lái)諸多原生動(dòng)物清理尸肉,這些原生動(dòng)物清理完死亡個(gè)體后,又會(huì)侵蝕健康的處于變態(tài)中或者剛剛完成變態(tài)的個(gè)體,從而造成變態(tài)水平極其低下。因此,在苗種繁育中,提高硨蠔幼蟲(chóng)變態(tài)率至關(guān)重要。

3.3 中間育成

中間育成包括稚貝培養(yǎng)和幼貝培養(yǎng),是生產(chǎn)貝類(lèi)大規(guī)格苗種的必要手段(張國(guó)范等,2010)。在硨蠔中間育成的過(guò)程中,發(fā)現(xiàn)兩種敵害是其能否成功的關(guān)鍵所在。

一是絲狀藻。在流水培養(yǎng)過(guò)程中,經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)大量絲狀藻粘在硨蠔稚貝或者幼貝殼面上,之后將整個(gè)個(gè)體包圍,導(dǎo)致無(wú)法開(kāi)殼進(jìn)行光合作用,因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)匱乏或者窒息死亡(Fatherree,2006)。目前發(fā)現(xiàn)兩種主要的絲狀藻,一種為綠色,毒害作用不強(qiáng),稚、幼貝死亡率不高,一般在30%以下;還有一種為黑色,毒害作用很強(qiáng),一旦暴發(fā),稚幼貝死亡率在90%以上,甚至全軍覆沒(méi)。為了有效防止絲狀藻對(duì)稚、幼貝的危害,在其繁育過(guò)程中一定要以防為主,從源頭上消滅絲狀藻的孢子來(lái)源,這樣就可以有效防止絲狀藻滋生。

二是一種小型錐形螺(Turbonillasp.)。這種錐形螺會(huì)從稚、幼貝足絲孔部位吮吸軟體部組織,從而引起個(gè)體死亡(Fatherree,2006)。錐形螺是小塔螺科(Pyramidellidae)下的一個(gè)屬,這類(lèi)螺通常個(gè)體較小,最大在10mm左右,具吻,多營(yíng)體外寄生生活,通過(guò)口針刺進(jìn)寄主軟體組織中,然后吸食寄主體液及軟體組織,大多寄生在多毛類(lèi)、棘皮類(lèi)、貝類(lèi)或者甲殼類(lèi)等無(wú)脊椎動(dòng)物體外。由于錐形螺與硨蠔繁殖期比較一致,在自然界中,硨蠔稚、幼貝經(jīng)常與錐形螺生活在一起,故對(duì)硨蠔存活造成一定程度的危害(陳志云等,2011)。在中間育成過(guò)程中,如果出現(xiàn)這種小規(guī)格錐形螺,一定要及時(shí)清理,否則會(huì)造成稚幼貝不斷死亡,直到全部死光。為了防止這種小規(guī)格釘螺造成傷害,需要勤觀察,發(fā)現(xiàn)后及時(shí)清理即可。

4 結(jié)論

本文通過(guò)親貝促熟、催產(chǎn)孵化、幼蟲(chóng)培育、稚貝培養(yǎng)及中間育成等技術(shù)環(huán)節(jié),在我國(guó)首次培育出硨蠔幼貝,同時(shí)比較了硨蠔與硨磲的表型差異,填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)相關(guān)研究空白,為南海硨蠔資源恢復(fù)及珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)修復(fù)奠定了良好的基礎(chǔ)。

楊 文,蔡英亞,鄺雪梅,2013.中國(guó)南海經(jīng)濟(jì)貝類(lèi)原色圖譜.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,194—196

陳志云,張素萍,2011.小塔螺科系統(tǒng)分類(lèi)學(xué)研究現(xiàn)狀與展望.海洋科學(xué),35(10):123—127

張國(guó)范,閆喜武,2010.蛤仔養(yǎng)殖學(xué).北京:科學(xué)出版社,64—70

張躍環(huán),肖 述,李 軍等,2016.鱗硨磲的人工繁育和早期發(fā)生.水產(chǎn)學(xué)報(bào),40(11):1713—1723

周 勤,王玉芬,姜秀鳳,2014.硨磲研究現(xiàn)狀及在我國(guó)南海開(kāi)展養(yǎng)殖的前景.熱帶海洋學(xué)報(bào),33(2):87—93

董 楊,李向民,2015.硨磲資源保護(hù)、開(kāi)發(fā)及其產(chǎn)業(yè)化發(fā)展前景.水產(chǎn)科學(xué),34(3):195—200

Alcala A C,Solis E P,Alcazar S N,1986.Spawning,larval rearing and early growth inHippopus hippopus(Linn.)(Bivalvia:Tridacnidae).Silliman Journal,33:45—53

Alcazar S N,Solis E P,Alcala A C,1987.Serotonin-induced spawning and larval rearing of the China clam,Hippopus porcellanusRosewater (Bivalvia:Tridacnidae).Aquaculture,66(3—4):359—368

Fatherree J,2006.Giant clams in the sea and the aquarium.Liquid Medium.Florida:Tampa Press,197—198

Fitt W K,Fisher C R,Trench R K,1984.Larval biology of tridacnid clams.Aquaculture,39(1—4):181—195

Jameson S C,1976.Early life history of the giant clamsTridacna croceaLamarck,Tridacna maxima(R?ding),andHippopus hippopus(Linnaeus).Pacific Science,30(3):219—233

Yan X W,Zhang G F,Yang F,2006.Effects of diet,stocking density,and environmental factors on growth,survival,and metamorphosis of Manila clamRuditapes philippinarumlarvae.Aquaculture,253(1—4):350—358

致謝 感謝中國(guó)科學(xué)院海南熱帶海洋生物實(shí)驗(yàn)站對(duì)本文的大力幫助。

ARTIFICIAL BREEDING OF HORSE’S HOOF CLAMHIPPOPUS HIPPOPUSIN SOUTH CHINA SEA

ZHANG Yue-Huan, XIAO Shu , LI Jun, MA Hai-Tao, ZHANG Yang, XIANG Zhi-Ming, YU Zi-Niu
(Key Laboratory of Tropical Marine Bio-resources and Ecology,Guangdong Provincial Key Laboratory of Applied Marine Biology,South China Sea Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences,Guangzhou510301,China)

Artificial breeding of horse’s hoof clamHippopus hippopuswas conducted at the Tropical Marine Biological Research Station in Hainan in April—September,2016.The results show that serotonin can effectively promote gamete release.Six million D-shaped larvae were obtained after 30-h incubation by cross-fertilization to avoid self-fertilization.The horse progeny underwent early veliger,middle veliger,late veliger and pedi-veliger larvae,single-siphon and double-siphon spat,mantle tentacles spat,and youth during the early history life stage,which is same to that of fluted giant clams excepted that the fecundity of horse’s hoof clam is less than that of fluted giant clam,while egg size and D larvae are larger than those of fluted giant clam.Light phototaxis of horse’s hoof clam larvae was stronger than that of fluted giant clam,and shell shape is different from each other.Larvae can complete metamorphosis forming spat after establishing the zooxanthellae tubular system,growing out gill,second shell,etc.Metamphosis of larvae was only 1.4% during the settling stage.Filamentous algae and Oncomelania are offspring of cultivating key predators during the grow-out stage.Hence,the predators should be cleaned out regularly to ensure normal growth and development for progeny.Some 500 youth progeny in shell length of 6.3 mm were obtained after 120-day rearing.This study on the artificial breeding for horse’s hoof clam may provide theoretical basis and reliable techniques for conducting giant clam aquaculture and transplantation work.

Hippopus hippopus;artificial breeding;larval rearing;metamorphosis;zooxanthellae;grow-out stage

S961.6

10.11693/hyhz20170300069

* 中國(guó)科學(xué)院戰(zhàn)略先導(dǎo)A專(zhuān)項(xiàng),XDA13020200號(hào);中國(guó)科學(xué)院STS項(xiàng)目,KFJ-EW-STS-123號(hào);中國(guó)科學(xué)院重點(diǎn)部署項(xiàng)目,KGZD-EW-609號(hào);國(guó)家貝類(lèi)現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)項(xiàng)目,CARS-47號(hào)。張躍環(huán),博士,副研究員,Email:yhzhang@scsio.ac.cn

① 通訊作者:喻子牛,研究員,博士生導(dǎo)師,Email:carlzyu@scsio.ac.cn

2017-03-24,收修改稿日期:2017-05-18