• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    不同卵巢反應(yīng)中IGF-1、IGFBP-1表達(dá)與IVF結(jié)局的關(guān)系

    2017-12-08 01:17:16姚海蓉劉永杰李旭麗郝苗苗
    寧夏醫(yī)學(xué)雜志 2017年11期
    關(guān)鍵詞:卵裂受精率顆粒細(xì)胞

    姚海蓉,劉永杰,李旭麗,杜 娟,郝苗苗

    ·論 著·

    不同卵巢反應(yīng)中IGF-1、IGFBP-1表達(dá)與IVF結(jié)局的關(guān)系

    姚海蓉,劉永杰,李旭麗,杜 娟,郝苗苗

    目的探討卵泡液胰島素生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)、胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1(IGFBP-1)水平與卵巢反應(yīng)性以及IVF結(jié)局之間的關(guān)系。方法選取因輸卵管因素在本中心行體外精(IVF)治療的不孕婦女109例。根據(jù)取卵日獲卵數(shù)分為3組:低反應(yīng)組、正常反應(yīng)組和高反應(yīng)組。收集卵泡液檢測(cè)IGF-1、IGFBP-1水平。收集患者獲卵數(shù)、胚胎數(shù)、優(yōu)胚數(shù)以及胚胎移植后的血人絨毛膜促性腺激素(HCG)水平和B超結(jié)果等病歷資料。結(jié)果3組一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。低反應(yīng)組卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平明顯低于高反應(yīng)組(P<0.05)。低反應(yīng)組卵泡數(shù)和獲卵數(shù)明顯降低(P<0.05),高反應(yīng)組卵泡數(shù)和獲卵數(shù)明顯升高(P<0.05)。卵泡液IGF-1水平與取卵日血清E2、卵泡數(shù)及獲卵數(shù)之間呈正相關(guān)(P均<0.05)。卵泡液IGFBP-1水平與卵泡數(shù)、獲卵數(shù)之間呈正相關(guān)(P均<0.05)。結(jié)論控制性卵巢刺激后,其卵泡液IGF-1 和IGFBP-1水平不同,可作為判斷反應(yīng)性的指標(biāo)。

    卵巢反應(yīng)性;胰島素生長(zhǎng)因子-1;胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1

    臨床中使用促性腺激素(Gn)進(jìn)行控制性卵巢刺激(COS)。卵巢對(duì)COS會(huì)出現(xiàn)不同的反應(yīng),包括低反應(yīng)、正常反應(yīng)和高反應(yīng)。不同患者在COS過(guò)程中,對(duì)外源性Gn的反應(yīng)性存在個(gè)體差異,這可能與卵巢儲(chǔ)備功能、卵巢組織、細(xì)胞的促性腺激素受體含量、卵巢局部的旁分泌和自分泌活動(dòng)程度有關(guān)。本研究以接受輔助生殖技術(shù)治療的卵巢儲(chǔ)備功能正常的患者為研究對(duì)象,分析血清雌二醇(E2),卵泡液E2、IGF-1、IGFBP-1在不同卵巢反應(yīng)組表達(dá)水平的變化以及與體外受精(IVF)結(jié)局之間的關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料:選取2013年5月-2015年1月因輸卵管因素在本中心行IVF治療的不孕婦女109例。納入標(biāo)準(zhǔn):①年齡24~38歲,月經(jīng)周期規(guī)律(25~35 d);血清PRL水平在正常范圍,卵巢儲(chǔ)備功能正常,即基礎(chǔ)卵泡刺激素(FSH)值≤10 mIU/mL,基礎(chǔ)竇卵泡計(jì)數(shù)>10個(gè),血基礎(chǔ)E2水平≤50 pg/mL,F(xiàn)SH/LH<3.6;②首次實(shí)施IVF;③配偶精液化驗(yàn)檢查正?!禬HO人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)手冊(cè)》第4版。排除標(biāo)準(zhǔn):子宮內(nèi)膜異位癥,子宮性不孕及反復(fù)流產(chǎn)史,既往有結(jié)核病史,有放、化療史,吸煙,麻醉藥品依賴者。

    1.2 分組:根據(jù)取卵時(shí)平均直徑在14 mm以上的卵泡數(shù)目分為3組,取卵日獲卵數(shù)≤3個(gè)的患者為低反應(yīng)組, 3個(gè)<獲卵數(shù)<15個(gè)的患者為正常反應(yīng)組,獲卵數(shù)≥15個(gè)的患者為高反應(yīng)組[1-2]。

    1.3 觀察指標(biāo)

    1.3.1 激素測(cè)定:血清基礎(chǔ)卵泡刺激素(FSH)、基礎(chǔ)黃體生成素(LH)、基礎(chǔ)睪酮(T)、E2、基礎(chǔ)孕激素(P) 、基礎(chǔ)泌乳素(PRL)水平;HCG日及取卵日患者肘靜脈血E2,卵泡液E2、IGF-1、IGFBP-1水平。

    1.3.2 患者Gn的用藥支數(shù)、用藥天數(shù),雙側(cè)卵巢直徑14 mm以上的卵泡數(shù)及獲卵數(shù),受精率、卵裂率、優(yōu)胚率。IVF受精率=IVF受精數(shù)/IVF獲卵數(shù)×100%;ICSI受精率=ICSI受精數(shù)/MII;卵裂率=卵裂數(shù)/受精數(shù)×100%;妊娠率=妊娠例數(shù)/移植例數(shù)×100%;優(yōu)胚率=優(yōu)胚數(shù)/卵裂率×100%[3]。

    1.4 標(biāo)本的收集

    1.4.1 IVF 方案:均采用黃體中期長(zhǎng)方案,降調(diào)藥物均采用長(zhǎng)效曲普瑞林(商品名:達(dá)菲林,法國(guó)益普深制藥有限公司);月經(jīng)周期第2~5天使用促性腺激素(Gn);陰道B超監(jiān)測(cè)卵泡調(diào)節(jié)Gn用量,當(dāng)雙卵巢有2個(gè)卵泡平均直徑≥18 mm時(shí),使用HCG 5 000~10 000 U,肌肉注射;35~36 h后在陰道B超下取卵。按常規(guī)體外受精方法受精,培養(yǎng)至3 d移植1~3個(gè)胚胎到宮腔。采用黃體酮60 mg/d 肌肉注射支持黃體。移植4~5周后B超檢查于子宮內(nèi)見(jiàn)妊娠囊、胎芽及胎心搏動(dòng)為臨床妊娠。

    1.4.2 標(biāo)本采集和保存:血清標(biāo)本的采集?;颊咴谠陆?jīng)第2天注射FSH 前、注射HCG當(dāng)天及取卵日分別采空腹外周血檢查基礎(chǔ)性激素、注射HCG當(dāng)天及取卵日雌激素水平。 卵泡液的收集:取卵時(shí)抽取卵泡液,17~20 mm為大卵泡組,每例每組選取1~3個(gè)卵泡的未被血污染的卵泡液,用于卵泡液E2及IGF-1、IGFBP-1測(cè)定。

    2 結(jié)果

    2.1 一般資料:109例患者中,正常反應(yīng)組54例,低反應(yīng)組20例,高反應(yīng)組35例。比較3種反應(yīng)類型的年齡、體重指數(shù)、不孕年限、基礎(chǔ)FSH值、基礎(chǔ)LH值、基礎(chǔ)E2值、基礎(chǔ)T值,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表1。

    表1 3組患者一般資料比較

    2.2 3組患者HCG日、取卵日血清、卵泡液E2水平的變化:與正常反應(yīng)組比較,低反應(yīng)組HCG日、取卵日血清、卵泡液E2水平明顯降低(P<0.05),高反應(yīng)組HCG日、取卵日血清、卵泡液E2水平明顯升高(P<0.05)。同時(shí),低反應(yīng)組HCG日、取卵日血清、卵泡液E2水平明顯低于高反應(yīng)組(P<0.05),見(jiàn)表2。

    表2 3組患者HCG日、取卵日血清、卵泡液E2水平及Gn用藥總量,卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平及卵泡數(shù)和獲卵數(shù)的變化

    2.3 3組患者Gn用藥總量和取卵日血清E2水平的變化:與正常反應(yīng)組比較,低反應(yīng)組Gn用量明顯增高(P<0.05),高反應(yīng)組Gn用量明顯減少(P<0.05)。3組之間Gn使用天數(shù)差異無(wú)顯著性(P>0.05)。與正常反應(yīng)組比較,低反應(yīng)組取卵日血清E2水平明顯降低(P<0.05),高反應(yīng)組取卵日血清E2水平明顯降低(P<0.05),低反應(yīng)組取卵日血清E2水平明顯低于高反應(yīng)組(P<0.05),見(jiàn)表2。

    2.4 3組患者卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平的變化:與正常反應(yīng)組比較,低反應(yīng)組卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平明顯降低(P<0.05),高反應(yīng)組卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平無(wú)明顯變化(P>0.05)。低反應(yīng)組卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平明顯低于高反應(yīng)組(P<0.05),見(jiàn)表2。

    2.5 3組患者COS后卵泡數(shù)、獲卵數(shù)的變化:與正常反應(yīng)組比較,低反應(yīng)組卵泡數(shù)和獲卵數(shù)明顯降低(P<0.05),高反應(yīng)組卵泡數(shù)和獲卵數(shù)明顯升高(P<0.05)。低反應(yīng)組卵泡數(shù)和獲卵數(shù)明顯低于高反應(yīng)組(P<0.05),見(jiàn)表2。

    2.6 3組患者受精率、卵裂率、優(yōu)胚率和妊娠率的變化:3組患者受精率、卵裂率、優(yōu)胚率、妊娠率無(wú)明顯差異(P>0.05)。

    2.7 卵泡液IGF-1、IGFBP-1與妊娠的關(guān)系:109例患者中,妊娠61人,未妊娠48人。卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平在妊娠組和非妊娠組無(wú)明顯變化(P>0.05)。

    2.8 檢測(cè)指標(biāo)之間的相關(guān)性:卵泡液IGF-1水平與取卵日血清E2水平呈正相關(guān)(r=0.428,P<0.05),與卵泡數(shù)呈正相關(guān)(r=0.328,P<0.05),與獲卵數(shù)呈正相關(guān)(r=0.356,P<0.05)。卵泡液IGFBP-1水平與取卵日血清E2水平無(wú)相關(guān)性(r=-0.139,P>0.05),與卵泡液E2水平無(wú)相關(guān)性(r=0.110,P>0.05),與卵泡數(shù)呈正相關(guān)(r=0.346,P<0.05),與獲卵數(shù)呈正相關(guān)(r=0.314,P<0.05)。卵泡液IGF-1水平與受精率、卵裂率、優(yōu)胚率均無(wú)顯著相關(guān)性(r分別為-0.452、-0.266、-0.072,P值均>0.05),IGFBP-1水平與受精率、卵裂率、優(yōu)胚率均無(wú)顯著相關(guān)性(r分別為-0.163、0.033、0.018,P值均>0.05)。

    3 討論

    3.1 IGF-1和IGFBP-1與超促排卵時(shí)卵巢的反應(yīng)性:IGF-1是主要存在于血清及組織的多肽。有研究顯示IGF-1可作為對(duì)促性腺激素作用的一種放大效應(yīng),即FSH的放大器[4]。IGF-1在卵泡生長(zhǎng)發(fā)育、優(yōu)勢(shì)卵泡選擇、排卵以及卵泡閉鎖中也發(fā)揮重要的作用[5]。本研究發(fā)現(xiàn),在不同卵巢反應(yīng)性患者中,卵泡液IGF-1水平不同。其中低反應(yīng)組卵泡液IGF-1水平明顯低于正常反應(yīng)組,只有正常反應(yīng)組的43%。有研究發(fā)現(xiàn)IGF-1是由卵泡膜細(xì)胞產(chǎn)生的,它通過(guò)內(nèi)分泌和旁分泌的方式調(diào)節(jié)人顆粒細(xì)胞的增殖,并刺激自然周期和用藥周期中顆粒-黃體細(xì)胞DNA 的合成[6]。因此,我們推測(cè),在低反應(yīng)患者卵巢中,卵泡膜細(xì)胞產(chǎn)生的IGF-1減少,不能有效地刺激顆粒細(xì)胞增殖,造成卵泡發(fā)育障礙。此外,本研究結(jié)果顯示,COS周期取卵日的卵泡液IGF-1和E2水平呈正相關(guān),IGF-1水平的增高伴隨著E2水平的增高。這一相關(guān)性結(jié)果說(shuō)明,IGF-1可能是E2合成的調(diào)節(jié)因素。已有研究表明,從卵巢對(duì)促性腺激素的反應(yīng)來(lái)看,隨著獲卵數(shù)量的增加,卵泡液 IGF-1水平逐漸升高,IGF-1 通過(guò)促進(jìn)顆粒細(xì)胞對(duì)E2的合成使卵巢對(duì)促性腺激素的反應(yīng)性升高[4,7]。 因此,我們推測(cè),卵巢低反應(yīng)患者由于IGF-1水平的降低,顆粒細(xì)胞合成E2減少。IGF-1在卵巢中的作用,受胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白(IGFBPs)的調(diào)節(jié)。IGFBPs調(diào)節(jié)IGF-1轉(zhuǎn)運(yùn)及與細(xì)胞表面受體的結(jié)合過(guò)程。IGFBP-1與IGF-1有較高的親和力,類似IGF-1受體[6]。人卵泡液和黃素化顆粒細(xì)胞中含有IGFBP-1、IGFBP-1mRNA。在卵巢中,顆粒細(xì)胞產(chǎn)生的IGFBP-1能夠抑制IGF-1的促顆粒細(xì)胞DNA合成作用,也可抑制FSH與IGF-1的促顆粒細(xì)胞孕激素合成分泌作用。IGFBP-1通過(guò)自分泌和旁分泌作用抑制IGF-1對(duì)顆粒-黃體細(xì)胞的增殖作用[8]。本研究發(fā)現(xiàn),在低反應(yīng)患者的卵泡液中,IGFBP-1的水平明顯下降,是正常反應(yīng)組的76%。IGFBP-1是由大卵泡的顆粒細(xì)胞合成的,我們推測(cè),IGFBP-1水平的降低與低反應(yīng)患者大卵泡數(shù)量減少有關(guān)。在3種反應(yīng)類型中,卵泡液IGFBP-1水平,隨卵巢反應(yīng)性增高而增高,低反應(yīng)組低于正常反應(yīng)組和高反應(yīng)組,差異有顯著性(P<0.05)。這一結(jié)果說(shuō)明,卵泡中IGF-1的生物學(xué)活性是通過(guò)卵泡液中IGFBP-1水平變化來(lái)調(diào)控的。低反應(yīng)組卵泡液中IGFBP-1水平較低,從而保證有更高水平的游離IGF-1輔助調(diào)節(jié)卵泡發(fā)育;反之,高反應(yīng)組卵泡液中IGFBP-1水平較高,使游離IGF-1減少[9]。IGFBP-1間接影響卵泡發(fā)育。

    3.2 IGF-1、IGFBP-1與IVF結(jié)局:目前有關(guān)IGF-1對(duì)胚胎質(zhì)量影響的觀點(diǎn)不一,Lamb JD等[10]報(bào)道取卵日卵泡液內(nèi)低水平的IGF-1,提示該卵母細(xì)胞受精后的胚胎發(fā)育較好;但亦有報(bào)道顯示卵泡液中IGF-1的濃度與卵母細(xì)胞的質(zhì)量呈正相關(guān)[11]。本研究顯示,隨著IGF-1水平增加, E2水平增加,卵泡數(shù)與獲卵數(shù)增加,預(yù)示著良好的卵巢反應(yīng)性和較多的成熟卵泡數(shù)。同時(shí)本研究顯示,3種反應(yīng)類型受精率、卵裂率、優(yōu)胚率比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)。卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平在妊娠組和非妊娠組無(wú)明顯變化(P>0.05),這一結(jié)果說(shuō)明,隨著IGF-1、E2水平增加,卵子的質(zhì)量并不受影響。有研究顯示卵子質(zhì)量、受精率和卵裂率在不同E2水平組均相似[12],與本研究結(jié)果一致。該結(jié)果進(jìn)一步提示E2、IGF-1水平是卵巢反應(yīng)性和發(fā)育卵泡數(shù)量的反映。卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平與 IVF 結(jié)局及妊娠結(jié)局沒(méi)有相關(guān)性。各項(xiàng)研究觀點(diǎn)不一,可能與研究病例數(shù)較少有關(guān),今后應(yīng)增加樣本量,進(jìn)行進(jìn)一步研究。

    [1] 陳婕,談?dòng)?控制性超促排卵周期中卵巢反應(yīng)性的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子及其效益[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2015,31(8):1358-1359.

    [2] Vural B,Cakiroglu Y,Vural F,et al.Hormonal and functional biomarkers in ovarian response[J].Arch Gynecol Obstet,2014,289(6):1355-1361.

    [3] 喬杰,馬彩虹,劉嘉茵,等.輔助生殖促排卵藥物治療專家共識(shí)[J].生殖與避孕,2015,4(35):216-217.

    [4] 梁瑩,杜惠蘭,穆玉霞,等.蒼附蓯仙湯對(duì)多囊卵巢綜合征患者卵巢顆粒細(xì)胞胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體基因表達(dá)的影響[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2015,22(1):29-32.

    [5] 李紅發(fā),孫永玉.正常人卵泡液中胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ的濃度及其與性激素、促性腺激素、胰島素的關(guān)系[J].同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2000,29(6):550-551.

    [6] 陳子江.人類生殖與輔助生殖[M].北京:科學(xué)技術(shù)出版社,2005:29-30.

    [7] 呂芳,張保合,陳智英.IVF-ET 患者IGFBP-3和IGF-1水平與卵泡發(fā)育、卵巢內(nèi)分泌、胚胎質(zhì)量及妊娠之間的關(guān)系[J].廣東醫(yī)學(xué),2016,37(12):1836-1839.

    [8] 喬杰.生育力保護(hù)與生殖儲(chǔ)備[M].北京:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社,2013:58-59.

    [9] 宮立國(guó),程?hào)|凱,翁寧,邱廣斌.ART中IGF-1、IGFBP-1與卵子質(zhì)量及妊娠結(jié)局的相關(guān)研究[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志,2009,7(17):107-108.

    [10] Lamb JD,Zamah AM,Shen S,et al.Follicular fluid steroid hormone levels are associated with fertilization outcome after intracyto plasmic sperm injection[J].Fertil Steril,2010,94(3): 952-957.

    [11] Bindu N Mehta,Natachandra M Chimote,Meena N Chimote,et al .Follicular fluid insulin like growth factor-1 (FF IGF-1) is a biochemical marker of embryo quality and implantation rates in in vitro fertilization cycles[J].J Hum Reprod Sci,2013,6(2): 140-146.

    [12] Wu CH,Kuo TC,Wu HH,et al.High serum estradiol levels are not detrimental to in vitro fertilization outcome[J].Taiwan J Ob-stet Gynecol,2007,46(1):54-59.

    TherelationshipbetweentheexpressionofIGF-1andIGFBP-1andtheIVFoutcomesindifferentovarianresponse

    YAOHairong,LIUYongjie,LIXuli,DUJian,HAOMiaomiao.

    TheAssistedReproductiveCenter,YinchuanMaternalandChildrenHealthHospital,Yinchuan750001,China

    ObjectiveTo explore the expression of IGF-1,IGFBP-1 in different ovarian responsibility women,and to explore the relationship with the IVF outcomes.Methods109 cases of women undergoing IVF treatment were chosen for oviducal infertility in our reproductive center between May 2013 to Jan. 2015. All patients accepted the standard long protocol,FSH injected intramuscularly at the third day of menstrual cycle. Accorded the number of obtaining ova,all the patients were divided into three groups: normal responsibility group,poor responsibility group,high responsibility group. The level of IGF-1,IGFBP-1 were analyzed. Meanwhile,the data of the number of obtained ova,embryo,good embryo and serum HCG level and B-ultrasound were collected.ResultsGeneral data was not different in groups (P>0.05);Compared with high responsibility group,the level of follicular fluid IGF-1,IGFBP-1 were obviously decreased in poor responsibility group (P<0.05);Compared with normal responsibility group,the numbers of follicle and ova were decreased in poor responsibility group,and increased in high responsibility group (P<0.05);There were positive correlation between the level of follicular fluid IGF-1 with the level of serum E2in obtained ova day,and the number of follicle and ova (P<0.05). There were positive correlations between the level of follicular fluid IGFBP-1 with the number of follicle and ova (P<0.05).ConclusionIGF-1 and IGFBP could be the indicators for ovarian responsibility in controlled ovarian stimulation.

    Ovarianresponsibility;IGF-1;IGFBP-1

    R246

    A

    10.13621/j.1001-5949.2017.11.0961

    寧夏自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(NZ14250)

    寧夏銀川市婦幼保健院生殖醫(yī)學(xué)中心,寧夏 銀川 750001

    姚海蓉(1974-),女,副主任醫(yī)師,主要從事婦科及生殖輔助生育技術(shù)研究。

    http://kns.cnki.net/kcms/detail/64.1008.R.20171109.1543.024.html

    2017-05-14責(zé)任編輯王凱榮

    猜你喜歡
    卵裂受精率顆粒細(xì)胞
    植入前胚胎異常分裂對(duì)胚胎持續(xù)發(fā)育能力的影響
    種蛋受精率檢查的重要性和結(jié)果解釋
    提高種鵝受精率的幾項(xiàng)關(guān)鍵措施
    早期異常卵裂不影響囊胚染色體整倍性
    MicroRNA調(diào)控卵巢顆粒細(xì)胞功能的研究進(jìn)展
    大腿肌內(nèi)顆粒細(xì)胞瘤1例
    補(bǔ)腎活血方對(duì)卵巢早衰小鼠顆粒細(xì)胞TGF-β1TGF-βRⅡ、Smad2/3表達(dá)的影響
    中成藥(2017年9期)2017-12-19 13:34:22
    產(chǎn)蛋周齡對(duì)科寶父母代肉種雞受精率及孵化效果的影響
    廣東飼料(2016年3期)2016-12-01 03:43:11
    不同水平維生素E對(duì)雞受精率和孵化率的影響
    移植早期卵裂胚胎對(duì)IVF-ET妊娠結(jié)局的影響研究
    精品一区二区三区av网在线观看| 美女大奶头视频| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲av成人av| 毛片女人毛片| www.精华液| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 色在线成人网| 亚洲真实伦在线观看| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲熟女毛片儿| 999久久久国产精品视频| 久久香蕉精品热| 人妻夜夜爽99麻豆av| 动漫黄色视频在线观看| 国产精品亚洲美女久久久| 午夜日韩欧美国产| 欧美性长视频在线观看| 成人国产综合亚洲| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产亚洲av高清不卡| 日本黄大片高清| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产亚洲精品第一综合不卡| av在线播放免费不卡| 国产精品,欧美在线| cao死你这个sao货| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲一区中文字幕在线| 国产一区二区在线观看日韩 | 一本精品99久久精品77| 老司机在亚洲福利影院| 国产免费av片在线观看野外av| 51午夜福利影视在线观看| 久久久久性生活片| 在线国产一区二区在线| 亚洲成人精品中文字幕电影| 岛国在线免费视频观看| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 一本大道久久a久久精品| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 亚洲国产欧美人成| 99热6这里只有精品| 精品国产乱子伦一区二区三区| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 五月玫瑰六月丁香| av福利片在线| 啦啦啦韩国在线观看视频| 动漫黄色视频在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 久久久久九九精品影院| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产99白浆流出| 国产成年人精品一区二区| 变态另类丝袜制服| 母亲3免费完整高清在线观看| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲片人在线观看| 欧美zozozo另类| 国产成人欧美在线观看| 手机成人av网站| 国产一区在线观看成人免费| 麻豆av在线久日| √禁漫天堂资源中文www| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产精品一及| 高清毛片免费观看视频网站| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产精品免费视频内射| 岛国视频午夜一区免费看| a在线观看视频网站| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 欧美日韩精品网址| 国产成年人精品一区二区| 欧美乱妇无乱码| 91老司机精品| 午夜福利在线在线| 亚洲性夜色夜夜综合| 国内精品久久久久久久电影| 欧美精品啪啪一区二区三区| 精品乱码久久久久久99久播| 日本一区二区免费在线视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 三级国产精品欧美在线观看 | 在线播放国产精品三级| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲熟女毛片儿| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产亚洲欧美在线一区二区| 91国产中文字幕| 国产人伦9x9x在线观看| 一二三四在线观看免费中文在| 啦啦啦免费观看视频1| 岛国视频午夜一区免费看| 久久精品91无色码中文字幕| 亚洲av电影不卡..在线观看| 91九色精品人成在线观看| 我的老师免费观看完整版| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 91av网站免费观看| 国产视频内射| 亚洲av片天天在线观看| 岛国在线观看网站| 午夜福利高清视频| 他把我摸到了高潮在线观看| 欧美黑人巨大hd| 欧美3d第一页| 国产av麻豆久久久久久久| 国产视频一区二区在线看| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲乱码一区二区免费版| 18禁国产床啪视频网站| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 久久九九热精品免费| 国产单亲对白刺激| 午夜精品一区二区三区免费看| 婷婷亚洲欧美| 成人国产一区最新在线观看| 午夜免费观看网址| av视频在线观看入口| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 日韩欧美在线二视频| 无限看片的www在线观看| 午夜免费成人在线视频| 国产av不卡久久| www.www免费av| 国产亚洲欧美98| 日本在线视频免费播放| 一级毛片女人18水好多| 啦啦啦韩国在线观看视频| а√天堂www在线а√下载| 我要搜黄色片| 久久午夜亚洲精品久久| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 黄色毛片三级朝国网站| 国产黄片美女视频| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲男人天堂网一区| 69av精品久久久久久| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 日本一本二区三区精品| 日韩精品中文字幕看吧| 神马国产精品三级电影在线观看 | 久久久久国产一级毛片高清牌| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 91字幕亚洲| 久久久久久久久久黄片| 国产成人aa在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 欧美日本亚洲视频在线播放| av超薄肉色丝袜交足视频| 日本a在线网址| 亚洲欧美日韩高清专用| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 岛国视频午夜一区免费看| 午夜老司机福利片| 国产精品乱码一区二三区的特点| 中文字幕人妻丝袜一区二区| av福利片在线| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 精品乱码久久久久久99久播| 欧美色视频一区免费| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 久久久国产欧美日韩av| a级毛片在线看网站| 精品国内亚洲2022精品成人| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲精品色激情综合| av片东京热男人的天堂| 久久精品91蜜桃| 亚洲性夜色夜夜综合| 日本三级黄在线观看| 国产99白浆流出| 99国产综合亚洲精品| 欧美中文综合在线视频| 国产男靠女视频免费网站| 国产高清有码在线观看视频 | 美女免费视频网站| 日韩有码中文字幕| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 亚洲人成77777在线视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产人伦9x9x在线观看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 一级毛片精品| 国产又色又爽无遮挡免费看| 最近在线观看免费完整版| 91九色精品人成在线观看| 免费av毛片视频| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲最大成人中文| 免费在线观看完整版高清| 夜夜夜夜夜久久久久| av福利片在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 美女扒开内裤让男人捅视频| av中文乱码字幕在线| 99riav亚洲国产免费| 国产亚洲精品av在线| 99久久精品热视频| 麻豆成人午夜福利视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| 91成年电影在线观看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产三级在线视频| 1024手机看黄色片| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 欧美日韩乱码在线| 中文字幕av在线有码专区| 两个人免费观看高清视频| av福利片在线| 麻豆成人av在线观看| 淫秽高清视频在线观看| 最新美女视频免费是黄的| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 曰老女人黄片| 叶爱在线成人免费视频播放| 欧美最黄视频在线播放免费| av欧美777| 可以在线观看的亚洲视频| 国产精品98久久久久久宅男小说| 搡老妇女老女人老熟妇| 成人精品一区二区免费| 免费在线观看完整版高清| 免费看日本二区| 妹子高潮喷水视频| 免费看十八禁软件| 国产免费男女视频| 色综合站精品国产| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 色在线成人网| 精品一区二区三区四区五区乱码| 亚洲一区二区三区色噜噜| 成人午夜高清在线视频| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 99久久99久久久精品蜜桃| 久久中文看片网| 国产亚洲欧美98| 日本黄大片高清| 免费人成视频x8x8入口观看| 99国产精品一区二区三区| 黄色视频不卡| 亚洲在线自拍视频| 宅男免费午夜| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲精品在线观看二区| 国产成人aa在线观看| 久久国产精品影院| 欧美成人性av电影在线观看| 久久精品国产综合久久久| 18禁国产床啪视频网站| 久久伊人香网站| 神马国产精品三级电影在线观看 | 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 精品久久久久久成人av| 啦啦啦免费观看视频1| 热99re8久久精品国产| 亚洲电影在线观看av| 一夜夜www| 国产av麻豆久久久久久久| 久久精品国产清高在天天线| 狂野欧美激情性xxxx| 一区二区三区高清视频在线| 中国美女看黄片| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 国产精品av视频在线免费观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲人成伊人成综合网2020| 免费观看精品视频网站| 久久精品91蜜桃| 波多野结衣高清作品| 一级作爱视频免费观看| 久久久久久久久中文| 国产野战对白在线观看| 亚洲一码二码三码区别大吗| 级片在线观看| 亚洲精品中文字幕在线视频| a级毛片a级免费在线| 精品日产1卡2卡| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 精品一区二区三区四区五区乱码| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲在线自拍视频| 日本五十路高清| 日本 欧美在线| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 波多野结衣高清作品| 国产高清videossex| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 91麻豆av在线| 人人妻人人澡欧美一区二区| 在线看三级毛片| 两个人的视频大全免费| 久久九九热精品免费| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 一个人免费在线观看电影 | 免费看a级黄色片| 99热只有精品国产| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲自拍偷在线| x7x7x7水蜜桃| 精品电影一区二区在线| 国产成人aa在线观看| 日本黄大片高清| 日韩高清综合在线| 欧美日韩精品网址| 国产成人精品久久二区二区91| 欧美日韩国产亚洲二区| av在线天堂中文字幕| 日日爽夜夜爽网站| 在线免费观看的www视频| 色尼玛亚洲综合影院| 国产不卡一卡二| 久久草成人影院| 午夜福利在线在线| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲 国产 在线| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产精品亚洲一级av第二区| 麻豆av在线久日| 欧美日韩精品网址| 精品久久久久久久末码| 婷婷精品国产亚洲av| 成人午夜高清在线视频| 欧美不卡视频在线免费观看 | 日本黄大片高清| 免费搜索国产男女视频| 91老司机精品| 亚洲精品一区av在线观看| 这个男人来自地球电影免费观看| 欧美日韩精品网址| 69av精品久久久久久| 搞女人的毛片| 成人午夜高清在线视频| 少妇熟女aⅴ在线视频| 极品教师在线免费播放| 国产熟女xx| 91成年电影在线观看| 中文字幕高清在线视频| 久久久国产精品麻豆| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 国产精品一区二区免费欧美| 国产免费av片在线观看野外av| 国产成人啪精品午夜网站| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 欧美另类亚洲清纯唯美| 少妇被粗大的猛进出69影院| 黄色丝袜av网址大全| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 免费看日本二区| 国产成人系列免费观看| 99热这里只有精品一区 | 天堂动漫精品| 免费观看精品视频网站| 久久久国产精品麻豆| 中文字幕高清在线视频| 丝袜美腿诱惑在线| 超碰成人久久| 久久久久久久精品吃奶| 国产精品一区二区精品视频观看| 麻豆av在线久日| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 久久精品成人免费网站| 妹子高潮喷水视频| 亚洲成人久久爱视频| 午夜视频精品福利| 无人区码免费观看不卡| 国产av在哪里看| 成年免费大片在线观看| 午夜福利欧美成人| 国产高清videossex| 午夜免费观看网址| 一级毛片女人18水好多| 国产精品爽爽va在线观看网站| netflix在线观看网站| 九九热线精品视视频播放| 欧美高清成人免费视频www| 黄色视频,在线免费观看| 国产成+人综合+亚洲专区| 日本a在线网址| 日本熟妇午夜| 男女视频在线观看网站免费 | 国产成人一区二区三区免费视频网站| 2021天堂中文幕一二区在线观| 欧美3d第一页| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 日韩欧美国产在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 免费一级毛片在线播放高清视频| 丝袜美腿诱惑在线| 免费无遮挡裸体视频| 国模一区二区三区四区视频 | 日本精品一区二区三区蜜桃| 麻豆一二三区av精品| 九九热线精品视视频播放| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | av有码第一页| 91在线观看av| 欧美在线一区亚洲| 亚洲电影在线观看av| 久久香蕉激情| 久久人人精品亚洲av| 女人被狂操c到高潮| 搡老岳熟女国产| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲精品色激情综合| 日日爽夜夜爽网站| 91av网站免费观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 久久午夜亚洲精品久久| 日韩欧美国产一区二区入口| 91麻豆av在线| 丰满人妻一区二区三区视频av | 国产成人av教育| 婷婷精品国产亚洲av在线| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 91大片在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 日韩欧美在线乱码| 69av精品久久久久久| 在线观看免费视频日本深夜| 欧美日韩一级在线毛片| 在线视频色国产色| 国产久久久一区二区三区| 国产精品一及| 男男h啪啪无遮挡| 久久久水蜜桃国产精品网| 久久午夜综合久久蜜桃| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 色综合婷婷激情| 亚洲熟妇熟女久久| 精品国产乱子伦一区二区三区| 日韩三级视频一区二区三区| 国产午夜精品论理片| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产精品亚洲一级av第二区| 一进一出抽搐动态| 国产真人三级小视频在线观看| 精品久久久久久久久久久久久| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲国产欧美网| 精品免费久久久久久久清纯| 全区人妻精品视频| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产熟女xx| 在线观看一区二区三区| e午夜精品久久久久久久| 好男人电影高清在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 婷婷精品国产亚洲av| 成人午夜高清在线视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 欧美一区二区国产精品久久精品 | 欧美+亚洲+日韩+国产| av福利片在线| 在线观看www视频免费| 久久精品成人免费网站| 国产精品1区2区在线观看.| 搡老妇女老女人老熟妇| 又黄又粗又硬又大视频| 听说在线观看完整版免费高清| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 日韩三级视频一区二区三区| 波多野结衣巨乳人妻| 我要搜黄色片| 欧美不卡视频在线免费观看 | 亚洲第一电影网av| 国产亚洲精品av在线| 变态另类丝袜制服| 脱女人内裤的视频| 国产av一区二区精品久久| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 人人妻人人澡欧美一区二区| 淫妇啪啪啪对白视频| 99re在线观看精品视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲国产精品sss在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 亚洲美女黄片视频| 女人被狂操c到高潮| 亚洲精品一区av在线观看| 久久久久性生活片| 午夜免费成人在线视频| 精品一区二区三区四区五区乱码| 国产爱豆传媒在线观看 | 免费无遮挡裸体视频| 69av精品久久久久久| 曰老女人黄片| 色播亚洲综合网| 婷婷精品国产亚洲av| 午夜福利在线观看吧| 麻豆成人av在线观看| 又大又爽又粗| 欧美成人午夜精品| tocl精华| 动漫黄色视频在线观看| 十八禁人妻一区二区| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 男女视频在线观看网站免费 | 99久久无色码亚洲精品果冻| 日本熟妇午夜| 成人午夜高清在线视频| 欧美不卡视频在线免费观看 | 亚洲真实伦在线观看| 国产av一区在线观看免费| 久久久国产精品麻豆| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 日韩欧美免费精品| 曰老女人黄片| 女警被强在线播放| 国产一区在线观看成人免费| 亚洲第一电影网av| 88av欧美| 国产亚洲精品一区二区www| a在线观看视频网站| av中文乱码字幕在线| 日韩欧美国产在线观看| 九色成人免费人妻av| 国内精品一区二区在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 国产一区在线观看成人免费| 日日夜夜操网爽| 亚洲黑人精品在线| 日韩精品青青久久久久久| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 一个人免费在线观看的高清视频| 日本成人三级电影网站| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲成人国产一区在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 给我免费播放毛片高清在线观看| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 黄色成人免费大全| 久久这里只有精品19| 国产欧美日韩一区二区三| 亚洲成av人片在线播放无| 久久久久九九精品影院| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产探花在线观看一区二区| 日韩欧美免费精品| 老司机靠b影院| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲无线在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 免费在线观看亚洲国产| 日韩欧美三级三区| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 欧美黑人精品巨大| 日日爽夜夜爽网站| 国模一区二区三区四区视频 | 亚洲av第一区精品v没综合| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产久久久一区二区三区| 最近视频中文字幕2019在线8| av福利片在线观看| 国产区一区二久久| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 白带黄色成豆腐渣| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 欧美午夜高清在线| 老司机深夜福利视频在线观看| 一级作爱视频免费观看| 久久99热这里只有精品18| 国产午夜精品论理片| 国产欧美日韩一区二区精品| 草草在线视频免费看| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 后天国语完整版免费观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 成人欧美大片| 最近最新免费中文字幕在线| 欧美日本亚洲视频在线播放| 免费在线观看日本一区| 亚洲五月天丁香| 国产亚洲精品第一综合不卡| 日韩大尺度精品在线看网址| av超薄肉色丝袜交足视频| 午夜影院日韩av| 成人一区二区视频在线观看| 免费看十八禁软件| 丁香欧美五月| 国产成人精品久久二区二区免费| 久久性视频一级片| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久久久免费精品人妻一区二区| 精品欧美国产一区二区三| 亚洲美女视频黄频| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲人成电影免费在线| 宅男免费午夜| 日韩精品中文字幕看吧| 在线看三级毛片| 亚洲熟妇熟女久久| 一边摸一边做爽爽视频免费| 老司机福利观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 精品国产亚洲在线| 国产久久久一区二区三区| 欧美日韩乱码在线|