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    不同卵巢反應(yīng)中IGF-1、IGFBP-1表達(dá)與IVF結(jié)局的關(guān)系

    2017-12-08 01:17:16姚海蓉劉永杰李旭麗郝苗苗
    寧夏醫(yī)學(xué)雜志 2017年11期
    關(guān)鍵詞:卵裂受精率顆粒細(xì)胞

    姚海蓉,劉永杰,李旭麗,杜 娟,郝苗苗

    ·論 著·

    不同卵巢反應(yīng)中IGF-1、IGFBP-1表達(dá)與IVF結(jié)局的關(guān)系

    姚海蓉,劉永杰,李旭麗,杜 娟,郝苗苗

    目的探討卵泡液胰島素生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)、胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1(IGFBP-1)水平與卵巢反應(yīng)性以及IVF結(jié)局之間的關(guān)系。方法選取因輸卵管因素在本中心行體外精(IVF)治療的不孕婦女109例。根據(jù)取卵日獲卵數(shù)分為3組:低反應(yīng)組、正常反應(yīng)組和高反應(yīng)組。收集卵泡液檢測(cè)IGF-1、IGFBP-1水平。收集患者獲卵數(shù)、胚胎數(shù)、優(yōu)胚數(shù)以及胚胎移植后的血人絨毛膜促性腺激素(HCG)水平和B超結(jié)果等病歷資料。結(jié)果3組一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。低反應(yīng)組卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平明顯低于高反應(yīng)組(P<0.05)。低反應(yīng)組卵泡數(shù)和獲卵數(shù)明顯降低(P<0.05),高反應(yīng)組卵泡數(shù)和獲卵數(shù)明顯升高(P<0.05)。卵泡液IGF-1水平與取卵日血清E2、卵泡數(shù)及獲卵數(shù)之間呈正相關(guān)(P均<0.05)。卵泡液IGFBP-1水平與卵泡數(shù)、獲卵數(shù)之間呈正相關(guān)(P均<0.05)。結(jié)論控制性卵巢刺激后,其卵泡液IGF-1 和IGFBP-1水平不同,可作為判斷反應(yīng)性的指標(biāo)。

    卵巢反應(yīng)性;胰島素生長(zhǎng)因子-1;胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1

    臨床中使用促性腺激素(Gn)進(jìn)行控制性卵巢刺激(COS)。卵巢對(duì)COS會(huì)出現(xiàn)不同的反應(yīng),包括低反應(yīng)、正常反應(yīng)和高反應(yīng)。不同患者在COS過(guò)程中,對(duì)外源性Gn的反應(yīng)性存在個(gè)體差異,這可能與卵巢儲(chǔ)備功能、卵巢組織、細(xì)胞的促性腺激素受體含量、卵巢局部的旁分泌和自分泌活動(dòng)程度有關(guān)。本研究以接受輔助生殖技術(shù)治療的卵巢儲(chǔ)備功能正常的患者為研究對(duì)象,分析血清雌二醇(E2),卵泡液E2、IGF-1、IGFBP-1在不同卵巢反應(yīng)組表達(dá)水平的變化以及與體外受精(IVF)結(jié)局之間的關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料:選取2013年5月-2015年1月因輸卵管因素在本中心行IVF治療的不孕婦女109例。納入標(biāo)準(zhǔn):①年齡24~38歲,月經(jīng)周期規(guī)律(25~35 d);血清PRL水平在正常范圍,卵巢儲(chǔ)備功能正常,即基礎(chǔ)卵泡刺激素(FSH)值≤10 mIU/mL,基礎(chǔ)竇卵泡計(jì)數(shù)>10個(gè),血基礎(chǔ)E2水平≤50 pg/mL,F(xiàn)SH/LH<3.6;②首次實(shí)施IVF;③配偶精液化驗(yàn)檢查正?!禬HO人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)手冊(cè)》第4版。排除標(biāo)準(zhǔn):子宮內(nèi)膜異位癥,子宮性不孕及反復(fù)流產(chǎn)史,既往有結(jié)核病史,有放、化療史,吸煙,麻醉藥品依賴者。

    1.2 分組:根據(jù)取卵時(shí)平均直徑在14 mm以上的卵泡數(shù)目分為3組,取卵日獲卵數(shù)≤3個(gè)的患者為低反應(yīng)組, 3個(gè)<獲卵數(shù)<15個(gè)的患者為正常反應(yīng)組,獲卵數(shù)≥15個(gè)的患者為高反應(yīng)組[1-2]。

    1.3 觀察指標(biāo)

    1.3.1 激素測(cè)定:血清基礎(chǔ)卵泡刺激素(FSH)、基礎(chǔ)黃體生成素(LH)、基礎(chǔ)睪酮(T)、E2、基礎(chǔ)孕激素(P) 、基礎(chǔ)泌乳素(PRL)水平;HCG日及取卵日患者肘靜脈血E2,卵泡液E2、IGF-1、IGFBP-1水平。

    1.3.2 患者Gn的用藥支數(shù)、用藥天數(shù),雙側(cè)卵巢直徑14 mm以上的卵泡數(shù)及獲卵數(shù),受精率、卵裂率、優(yōu)胚率。IVF受精率=IVF受精數(shù)/IVF獲卵數(shù)×100%;ICSI受精率=ICSI受精數(shù)/MII;卵裂率=卵裂數(shù)/受精數(shù)×100%;妊娠率=妊娠例數(shù)/移植例數(shù)×100%;優(yōu)胚率=優(yōu)胚數(shù)/卵裂率×100%[3]。

    1.4 標(biāo)本的收集

    1.4.1 IVF 方案:均采用黃體中期長(zhǎng)方案,降調(diào)藥物均采用長(zhǎng)效曲普瑞林(商品名:達(dá)菲林,法國(guó)益普深制藥有限公司);月經(jīng)周期第2~5天使用促性腺激素(Gn);陰道B超監(jiān)測(cè)卵泡調(diào)節(jié)Gn用量,當(dāng)雙卵巢有2個(gè)卵泡平均直徑≥18 mm時(shí),使用HCG 5 000~10 000 U,肌肉注射;35~36 h后在陰道B超下取卵。按常規(guī)體外受精方法受精,培養(yǎng)至3 d移植1~3個(gè)胚胎到宮腔。采用黃體酮60 mg/d 肌肉注射支持黃體。移植4~5周后B超檢查于子宮內(nèi)見(jiàn)妊娠囊、胎芽及胎心搏動(dòng)為臨床妊娠。

    1.4.2 標(biāo)本采集和保存:血清標(biāo)本的采集?;颊咴谠陆?jīng)第2天注射FSH 前、注射HCG當(dāng)天及取卵日分別采空腹外周血檢查基礎(chǔ)性激素、注射HCG當(dāng)天及取卵日雌激素水平。 卵泡液的收集:取卵時(shí)抽取卵泡液,17~20 mm為大卵泡組,每例每組選取1~3個(gè)卵泡的未被血污染的卵泡液,用于卵泡液E2及IGF-1、IGFBP-1測(cè)定。

    2 結(jié)果

    2.1 一般資料:109例患者中,正常反應(yīng)組54例,低反應(yīng)組20例,高反應(yīng)組35例。比較3種反應(yīng)類型的年齡、體重指數(shù)、不孕年限、基礎(chǔ)FSH值、基礎(chǔ)LH值、基礎(chǔ)E2值、基礎(chǔ)T值,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表1。

    表1 3組患者一般資料比較

    2.2 3組患者HCG日、取卵日血清、卵泡液E2水平的變化:與正常反應(yīng)組比較,低反應(yīng)組HCG日、取卵日血清、卵泡液E2水平明顯降低(P<0.05),高反應(yīng)組HCG日、取卵日血清、卵泡液E2水平明顯升高(P<0.05)。同時(shí),低反應(yīng)組HCG日、取卵日血清、卵泡液E2水平明顯低于高反應(yīng)組(P<0.05),見(jiàn)表2。

    表2 3組患者HCG日、取卵日血清、卵泡液E2水平及Gn用藥總量,卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平及卵泡數(shù)和獲卵數(shù)的變化

    2.3 3組患者Gn用藥總量和取卵日血清E2水平的變化:與正常反應(yīng)組比較,低反應(yīng)組Gn用量明顯增高(P<0.05),高反應(yīng)組Gn用量明顯減少(P<0.05)。3組之間Gn使用天數(shù)差異無(wú)顯著性(P>0.05)。與正常反應(yīng)組比較,低反應(yīng)組取卵日血清E2水平明顯降低(P<0.05),高反應(yīng)組取卵日血清E2水平明顯降低(P<0.05),低反應(yīng)組取卵日血清E2水平明顯低于高反應(yīng)組(P<0.05),見(jiàn)表2。

    2.4 3組患者卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平的變化:與正常反應(yīng)組比較,低反應(yīng)組卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平明顯降低(P<0.05),高反應(yīng)組卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平無(wú)明顯變化(P>0.05)。低反應(yīng)組卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平明顯低于高反應(yīng)組(P<0.05),見(jiàn)表2。

    2.5 3組患者COS后卵泡數(shù)、獲卵數(shù)的變化:與正常反應(yīng)組比較,低反應(yīng)組卵泡數(shù)和獲卵數(shù)明顯降低(P<0.05),高反應(yīng)組卵泡數(shù)和獲卵數(shù)明顯升高(P<0.05)。低反應(yīng)組卵泡數(shù)和獲卵數(shù)明顯低于高反應(yīng)組(P<0.05),見(jiàn)表2。

    2.6 3組患者受精率、卵裂率、優(yōu)胚率和妊娠率的變化:3組患者受精率、卵裂率、優(yōu)胚率、妊娠率無(wú)明顯差異(P>0.05)。

    2.7 卵泡液IGF-1、IGFBP-1與妊娠的關(guān)系:109例患者中,妊娠61人,未妊娠48人。卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平在妊娠組和非妊娠組無(wú)明顯變化(P>0.05)。

    2.8 檢測(cè)指標(biāo)之間的相關(guān)性:卵泡液IGF-1水平與取卵日血清E2水平呈正相關(guān)(r=0.428,P<0.05),與卵泡數(shù)呈正相關(guān)(r=0.328,P<0.05),與獲卵數(shù)呈正相關(guān)(r=0.356,P<0.05)。卵泡液IGFBP-1水平與取卵日血清E2水平無(wú)相關(guān)性(r=-0.139,P>0.05),與卵泡液E2水平無(wú)相關(guān)性(r=0.110,P>0.05),與卵泡數(shù)呈正相關(guān)(r=0.346,P<0.05),與獲卵數(shù)呈正相關(guān)(r=0.314,P<0.05)。卵泡液IGF-1水平與受精率、卵裂率、優(yōu)胚率均無(wú)顯著相關(guān)性(r分別為-0.452、-0.266、-0.072,P值均>0.05),IGFBP-1水平與受精率、卵裂率、優(yōu)胚率均無(wú)顯著相關(guān)性(r分別為-0.163、0.033、0.018,P值均>0.05)。

    3 討論

    3.1 IGF-1和IGFBP-1與超促排卵時(shí)卵巢的反應(yīng)性:IGF-1是主要存在于血清及組織的多肽。有研究顯示IGF-1可作為對(duì)促性腺激素作用的一種放大效應(yīng),即FSH的放大器[4]。IGF-1在卵泡生長(zhǎng)發(fā)育、優(yōu)勢(shì)卵泡選擇、排卵以及卵泡閉鎖中也發(fā)揮重要的作用[5]。本研究發(fā)現(xiàn),在不同卵巢反應(yīng)性患者中,卵泡液IGF-1水平不同。其中低反應(yīng)組卵泡液IGF-1水平明顯低于正常反應(yīng)組,只有正常反應(yīng)組的43%。有研究發(fā)現(xiàn)IGF-1是由卵泡膜細(xì)胞產(chǎn)生的,它通過(guò)內(nèi)分泌和旁分泌的方式調(diào)節(jié)人顆粒細(xì)胞的增殖,并刺激自然周期和用藥周期中顆粒-黃體細(xì)胞DNA 的合成[6]。因此,我們推測(cè),在低反應(yīng)患者卵巢中,卵泡膜細(xì)胞產(chǎn)生的IGF-1減少,不能有效地刺激顆粒細(xì)胞增殖,造成卵泡發(fā)育障礙。此外,本研究結(jié)果顯示,COS周期取卵日的卵泡液IGF-1和E2水平呈正相關(guān),IGF-1水平的增高伴隨著E2水平的增高。這一相關(guān)性結(jié)果說(shuō)明,IGF-1可能是E2合成的調(diào)節(jié)因素。已有研究表明,從卵巢對(duì)促性腺激素的反應(yīng)來(lái)看,隨著獲卵數(shù)量的增加,卵泡液 IGF-1水平逐漸升高,IGF-1 通過(guò)促進(jìn)顆粒細(xì)胞對(duì)E2的合成使卵巢對(duì)促性腺激素的反應(yīng)性升高[4,7]。 因此,我們推測(cè),卵巢低反應(yīng)患者由于IGF-1水平的降低,顆粒細(xì)胞合成E2減少。IGF-1在卵巢中的作用,受胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白(IGFBPs)的調(diào)節(jié)。IGFBPs調(diào)節(jié)IGF-1轉(zhuǎn)運(yùn)及與細(xì)胞表面受體的結(jié)合過(guò)程。IGFBP-1與IGF-1有較高的親和力,類似IGF-1受體[6]。人卵泡液和黃素化顆粒細(xì)胞中含有IGFBP-1、IGFBP-1mRNA。在卵巢中,顆粒細(xì)胞產(chǎn)生的IGFBP-1能夠抑制IGF-1的促顆粒細(xì)胞DNA合成作用,也可抑制FSH與IGF-1的促顆粒細(xì)胞孕激素合成分泌作用。IGFBP-1通過(guò)自分泌和旁分泌作用抑制IGF-1對(duì)顆粒-黃體細(xì)胞的增殖作用[8]。本研究發(fā)現(xiàn),在低反應(yīng)患者的卵泡液中,IGFBP-1的水平明顯下降,是正常反應(yīng)組的76%。IGFBP-1是由大卵泡的顆粒細(xì)胞合成的,我們推測(cè),IGFBP-1水平的降低與低反應(yīng)患者大卵泡數(shù)量減少有關(guān)。在3種反應(yīng)類型中,卵泡液IGFBP-1水平,隨卵巢反應(yīng)性增高而增高,低反應(yīng)組低于正常反應(yīng)組和高反應(yīng)組,差異有顯著性(P<0.05)。這一結(jié)果說(shuō)明,卵泡中IGF-1的生物學(xué)活性是通過(guò)卵泡液中IGFBP-1水平變化來(lái)調(diào)控的。低反應(yīng)組卵泡液中IGFBP-1水平較低,從而保證有更高水平的游離IGF-1輔助調(diào)節(jié)卵泡發(fā)育;反之,高反應(yīng)組卵泡液中IGFBP-1水平較高,使游離IGF-1減少[9]。IGFBP-1間接影響卵泡發(fā)育。

    3.2 IGF-1、IGFBP-1與IVF結(jié)局:目前有關(guān)IGF-1對(duì)胚胎質(zhì)量影響的觀點(diǎn)不一,Lamb JD等[10]報(bào)道取卵日卵泡液內(nèi)低水平的IGF-1,提示該卵母細(xì)胞受精后的胚胎發(fā)育較好;但亦有報(bào)道顯示卵泡液中IGF-1的濃度與卵母細(xì)胞的質(zhì)量呈正相關(guān)[11]。本研究顯示,隨著IGF-1水平增加, E2水平增加,卵泡數(shù)與獲卵數(shù)增加,預(yù)示著良好的卵巢反應(yīng)性和較多的成熟卵泡數(shù)。同時(shí)本研究顯示,3種反應(yīng)類型受精率、卵裂率、優(yōu)胚率比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)。卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平在妊娠組和非妊娠組無(wú)明顯變化(P>0.05),這一結(jié)果說(shuō)明,隨著IGF-1、E2水平增加,卵子的質(zhì)量并不受影響。有研究顯示卵子質(zhì)量、受精率和卵裂率在不同E2水平組均相似[12],與本研究結(jié)果一致。該結(jié)果進(jìn)一步提示E2、IGF-1水平是卵巢反應(yīng)性和發(fā)育卵泡數(shù)量的反映。卵泡液IGF-1、IGFBP-1水平與 IVF 結(jié)局及妊娠結(jié)局沒(méi)有相關(guān)性。各項(xiàng)研究觀點(diǎn)不一,可能與研究病例數(shù)較少有關(guān),今后應(yīng)增加樣本量,進(jìn)行進(jìn)一步研究。

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    TherelationshipbetweentheexpressionofIGF-1andIGFBP-1andtheIVFoutcomesindifferentovarianresponse

    YAOHairong,LIUYongjie,LIXuli,DUJian,HAOMiaomiao.

    TheAssistedReproductiveCenter,YinchuanMaternalandChildrenHealthHospital,Yinchuan750001,China

    ObjectiveTo explore the expression of IGF-1,IGFBP-1 in different ovarian responsibility women,and to explore the relationship with the IVF outcomes.Methods109 cases of women undergoing IVF treatment were chosen for oviducal infertility in our reproductive center between May 2013 to Jan. 2015. All patients accepted the standard long protocol,FSH injected intramuscularly at the third day of menstrual cycle. Accorded the number of obtaining ova,all the patients were divided into three groups: normal responsibility group,poor responsibility group,high responsibility group. The level of IGF-1,IGFBP-1 were analyzed. Meanwhile,the data of the number of obtained ova,embryo,good embryo and serum HCG level and B-ultrasound were collected.ResultsGeneral data was not different in groups (P>0.05);Compared with high responsibility group,the level of follicular fluid IGF-1,IGFBP-1 were obviously decreased in poor responsibility group (P<0.05);Compared with normal responsibility group,the numbers of follicle and ova were decreased in poor responsibility group,and increased in high responsibility group (P<0.05);There were positive correlation between the level of follicular fluid IGF-1 with the level of serum E2in obtained ova day,and the number of follicle and ova (P<0.05). There were positive correlations between the level of follicular fluid IGFBP-1 with the number of follicle and ova (P<0.05).ConclusionIGF-1 and IGFBP could be the indicators for ovarian responsibility in controlled ovarian stimulation.

    Ovarianresponsibility;IGF-1;IGFBP-1

    R246

    A

    10.13621/j.1001-5949.2017.11.0961

    寧夏自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(NZ14250)

    寧夏銀川市婦幼保健院生殖醫(yī)學(xué)中心,寧夏 銀川 750001

    姚海蓉(1974-),女,副主任醫(yī)師,主要從事婦科及生殖輔助生育技術(shù)研究。

    http://kns.cnki.net/kcms/detail/64.1008.R.20171109.1543.024.html

    2017-05-14責(zé)任編輯王凱榮

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