高效液相色譜（HPLC）法在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

丁峰

（山東省沂水縣檢驗(yàn)檢測(cè)中心，山東 臨沂 276400）

高效液相色譜（HPLC）法在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

丁峰

（山東省沂水縣檢驗(yàn)檢測(cè)中心，山東 臨沂 276400）

色譜法作為一種分離以及分析的方法，其廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)以及食品檢測(cè)等領(lǐng)域，又稱為“色譜分析法”“層析法”等。簡(jiǎn)述了高效液相色譜檢測(cè)方法，其作為一種新型分離分析技術(shù)在食品檢驗(yàn)過程中得到了廣泛應(yīng)用，并針對(duì)該種方法在食品添加劑檢測(cè)、食品分析以及農(nóng)藥殘留等各個(gè)方面的應(yīng)用進(jìn)行了闡述。

高效液相色譜；食品檢測(cè)；添加劑檢測(cè)；溶質(zhì)

1 高效色譜儀（HPLC）

高效液相色譜法是在高壓條件下溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間進(jìn)行的一種連續(xù)多次交換的過程，它借溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同引起排阻作用的差別，使不同溶質(zhì)得以分離。

因?yàn)樯V柱填充劑顆粒直徑很小，并且為了使得淋洗液以均勻的速度流過色譜柱，在高效液相色譜中需要采用高壓泵。高壓泵要求具有穩(wěn)定的壓力以及流量，通常壓力選取范圍為510～710 kPa之間。在色譜分析中，應(yīng)用較多的為梯度淋洗（梯度洗脫），其為以一定比例混合的不同極性的溶劑，通過極性變化改變被分離組分的分離因素，以提高分離效果。高效色譜儀（HPLC）常采用的色譜柱為內(nèi)壁極為光滑的不銹鋼管，但當(dāng)壓力較低時(shí)，色譜柱也可以采用玻璃或石英材質(zhì)，通常色譜柱為直圓柱形，以達(dá)到便于液體填充的目的。

在高效色譜儀（HPLC）中采用的檢測(cè)器的作用為檢測(cè)對(duì)象經(jīng)過色譜柱后各個(gè)成分的濃度變化，其輸出的結(jié)果為定性或者定量分析的圖形。為了使得結(jié)果較為精準(zhǔn)，就要求檢測(cè)器具有足夠高的靈敏度以及滿足使用范圍的要求等，還應(yīng)該具有對(duì)溫度等周圍環(huán)境的變化不敏感等特點(diǎn)。

2 液相色譜法在食品分析中的應(yīng)用

20世紀(jì)80年代，有學(xué)者在食品分析中已經(jīng)采用高效液相色譜法。隨著技術(shù)的發(fā)展，該種方法在食品分析中得到了廣泛應(yīng)用。

2.1 在乳品分析中的應(yīng)用

乳制品主要成分為葡萄糖、脂肪、蛋白質(zhì)以及維生素等，利用HPLC液相色譜法可以精確地檢測(cè)出奶制品中各個(gè)組成營(yíng)養(yǎng)成分的類型及比例。此外，還可以利用糖類分析專用柱或氨基鍵合柱來檢測(cè)低分子糖類。

2.2 在肉制品分析中的應(yīng)用

HPLC液相色譜法可用于肉制品分析中，比如在臘肉制品中，加工商往往采用硝酸鹽或者亞硝酸鹽作為發(fā)色劑，但如果上述成分添加量過多，則在存放過程中可能轉(zhuǎn)變生成N-亞硝胺，該種成分具有毒性，會(huì)導(dǎo)致食用者患肝癌、結(jié)腸癌等疾病的概率提升。在該類食品銷售前都需要抽樣檢測(cè)，利用HPLC液相色譜法分析硝酸鹽或亞硝酸鹽所占的比例，如果大于國標(biāo)要求值，則會(huì)禁止該種食品進(jìn)入市場(chǎng)。

2.3 在其他食品分析中的應(yīng)用

在果蔬以及其他熟食制品銷售前，往往也需要對(duì)其的營(yíng)養(yǎng)成分、比例、食品添加劑以及有毒物質(zhì)是否超標(biāo)等方面進(jìn)行檢測(cè)，保證安全，讓消費(fèi)者購買、食用時(shí)放心。

3 在食品微生物及代謝物檢測(cè)中的應(yīng)用

在食品中通常有著大量的微生物，其中，有些對(duì)人類有益，有些本身或其代謝物具有毒性，從而需要對(duì)食品中微生物的含量進(jìn)行分析。

HPLC方法也被應(yīng)用于食品微生物及微生物代謝物的檢測(cè)，該種方法可以通過分析不同微生物的組成以及不同微生物的代謝產(chǎn)物，可以得出樣品中各類細(xì)菌的類型及比例，最終確定病原微生物的組成成分，以判斷被檢驗(yàn)的食品所包含微生物的比例是否存在超標(biāo)的現(xiàn)象，以及是否包含對(duì)人類健康有損害的成分。

4 添加劑檢測(cè)中的應(yīng)用

為了獲得更好的食品外觀或味道，食品制造商往往會(huì)采用增加添加劑的方法。另外，部分食品添加劑也具有防腐或者干燥等作用，部分食品添加劑的成分為天然的，該種添加劑往往對(duì)人們健康沒有損害。然而，也存在很多人工合成的添加劑，其往往對(duì)食品安全產(chǎn)生了很大的影響；很多不良商販為了獲取高額利益，添加了大量添加劑，造成大量群眾中毒或引發(fā)疾病。例如，在奶粉中添加大量的三聚氰胺后，會(huì)對(duì)嬰幼兒造成不可逆轉(zhuǎn)的傷害。因此，采用HPLC方法對(duì)食品添加劑進(jìn)行檢測(cè)極其重要。以下對(duì)各類常見添加劑的檢測(cè)進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹。

4.1 甜味添加劑的檢測(cè)

在食品添加劑中，甜味添加劑極為常見，其多用于糕點(diǎn)以及飲料制品中，添加部分甜味添加劑就可以使得食品獲得較高的甜度值。甜味添加劑中糖精最為常見，很多食品加工商對(duì)人們的身體健康置之不理，在食品中大量投放糖精，使得消費(fèi)者出現(xiàn)血小板減少的癥狀，更有甚者對(duì)消費(fèi)者的肝臟功能造成了損害。在糖精的檢測(cè)中，我國多家檢測(cè)機(jī)構(gòu)采用HPLC方法結(jié)合熒光以及紫外線檢測(cè)的方法，與傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比，該種方法具有檢測(cè)迅速、靈敏度高、準(zhǔn)確率高的特點(diǎn)，檢測(cè)初期可以很好地避免因?yàn)闄z測(cè)成分多而引起的樣品分離效果不理想。

4.2 色素添加劑的檢測(cè)

色素添加劑可以使食品具有更加吸引人的外觀，色素添加劑也分為天然和人工合成兩大類。其中，天然的色素添加劑為從自然的動(dòng)植物中提取，具有無害的特點(diǎn)；而人工合成的食品添加劑會(huì)對(duì)使用者的身體構(gòu)成損害，過量使用合成的色素添加劑，會(huì)使食用者產(chǎn)生中毒現(xiàn)象。具體檢測(cè)步驟如下：對(duì)肉類制品進(jìn)行脫脂處理，按照特定比例將乙醇和氨水進(jìn)行混合，利用超聲波過濾技術(shù)對(duì)上述樣品進(jìn)行提取處理，再用安捷倫1100系統(tǒng)按照20 kmmol/L乙酸銨與甲醇梯度進(jìn)行洗脫，最后利用二極管整列檢測(cè)，以得到最終檢測(cè)結(jié)果。

5 農(nóng)藥與獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

在農(nóng)作物耕種和牲畜飼養(yǎng)過程中，往往會(huì)或多或少地使用農(nóng)藥和獸藥。如果農(nóng)藥的殘留量過多，則會(huì)對(duì)消費(fèi)者的健康構(gòu)成損害。該現(xiàn)象已經(jīng)引起國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注，藥物殘留的檢測(cè)已成為食品安全的極為重要的課題。隨著HPLC方法的發(fā)展，結(jié)合液質(zhì)聯(lián)用的技術(shù)在農(nóng)藥以及毒素成分檢測(cè)的過程中廣泛應(yīng)用。

6 結(jié)論

綜上所述，高效液相色譜法作為一種現(xiàn)代的檢測(cè)分析方法，在食品的添加劑、農(nóng)藥殘留、微生物以及添加劑的檢測(cè)中發(fā)揮著極為重要的作用。隨著該種方法的發(fā)展，其檢測(cè)范圍更為廣泛，檢測(cè)精度也有了較大的提高，其對(duì)食品進(jìn)行了較為全面的分析，提高了食品的安全性，保障了人們的身體健康，該種方法值得推廣。

［1］費(fèi)賢明，張紅梅.應(yīng)用HPLC FLD法測(cè)定食品中的糖精鈉［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17（08）.

［2］黎其萬，劉宏程.高效液相色譜法測(cè)定油浸醬菜中的苯甲酸、山梨酸和糖精鈉［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2004，3（10）.

〔編輯：張思楠〕

R155.5

A

10.15913/j.cnki.kjycx.2017.24.148

2095-6835（2017）24-0148-02