不同儀器分析技術(shù)在藥品檢測中的應(yīng)用

邱海龍+李進(jìn)+楊靜靜

摘 要 藥品安全問題一直備受人們關(guān)注，本文主要介紹了幾種不同儀器分析技術(shù)在藥品檢測中的應(yīng)用。

關(guān)鍵詞 儀器分析技術(shù) 藥品 檢測

中圖分類號：O657 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A DOI：10.16400/j.cnki.kjdkx.2017.10.028

藥品安全問題一直是當(dāng)下備受關(guān)注的民生問題之一。在日常的藥品監(jiān)督管理中，需要嚴(yán)格把控藥品質(zhì)量檢測環(huán)節(jié)，保證藥品檢測過程的規(guī)范性和檢測結(jié)果的可靠性，才能有效規(guī)避不合格藥品流入市場影響人們生命健康。不同藥品在檢測過程中常用到不同的檢測技術(shù)，本文主要對藥品不同檢測技術(shù)作簡單介紹。

1 光譜檢測技術(shù)

1.1 UV-VIS

UV-VIS，即紫外-可見分光光度法，其是利用某些物質(zhì)的分子在10～800nm光譜區(qū)的輻射吸收來對物質(zhì)進(jìn)行分析測定。該測定法相對其他檢測技術(shù)較為簡便，既可以測定某物質(zhì)的最大吸收波長，也可以通過比色法測定物質(zhì)的含量。日常檢測過程中，紫外光譜可以被用于檢驗一些具有大的共軛體系或發(fā)色官能團的化合物，推導(dǎo)化合物分子骨架是否含有共軛體系，如C=C-C=O、苯環(huán)等。由于很多化合物在紫外沒有吸收或僅有微弱吸收，且紫外光譜一般比較簡單，特征性不強。因此，只根據(jù)紫外光譜并不能完全鑒別出物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)，可能須與IR、MS、NMR或其他方法共同配合才能得出具體的結(jié)論。[1]

在日常的檢驗環(huán)節(jié)，UV-VIS常被用于一些藥品的含量測定，如黃連中小檗堿的含量測定，以及藥材的糖分測定等。

1.2 AAS

AAS，即原子吸收光譜法，它的原理是根據(jù)一定波長的光輻射被氣態(tài)原子吸收后可以使原子外層的電子發(fā)生躍遷，從而產(chǎn)生吸收光譜。AAS亦可以根據(jù)郎伯-比爾定律來確定樣品中化合物的含量。AAS現(xiàn)主要適用于樣品中微量及痕量組分分析。

AAS具有準(zhǔn)確度高、檢出限低、選擇性好等優(yōu)點，但也存在局限性，如：樣品前處理麻煩；不能多元素同時分析；儀器設(shè)備價格昂貴；標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的線性范圍窄；對于一些易于形成穩(wěn)定化合物的元素，檢出能力較差等。AAS在日常檢測中常用于對西洋參、金銀花等藥材的重金屬含量測定。

1.3 IR

IR，即紅外光譜法，為分子吸收光譜的一種。其原理是當(dāng)紅外光區(qū)輻射后，物質(zhì)對其產(chǎn)生選擇性吸收，從而判斷分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)。在紅外線照射下，當(dāng)輻射能量與分子振動、轉(zhuǎn)動頻率相一致時，被測物質(zhì)分子會產(chǎn)生其特定的紅外光譜，據(jù)此可鑒定出化合物中各種原子團。IR具有測定快速、特征性強、試樣用量少、操作簡便等優(yōu)點。但是，紅外光譜一般只提供物質(zhì)分子中官能團的相關(guān)信息，而對于一些復(fù)雜化合物，特別是新化合物，單靠IR檢測技術(shù)并不能解決問題，需要與其他分析手段互相配合，才能確定分子結(jié)構(gòu)。目前，IR在藥品定量分析研究中應(yīng)用不是很多，有時用于農(nóng)藥組份及土壤表面水份含量的測定。

2 色譜檢測技術(shù)

2.1 TLC

TLC，即薄層層析色譜法，指將合適的固定相均勻地涂布在玻璃板或鋁基片上，經(jīng)過活化，制成可供樣品測定的薄層板，選擇合適的展開劑對點樣進(jìn)行展開后，對比供試品與對照品在同等條件下的比移值（Rf），用以實現(xiàn)對藥品快速鑒別的方法。TLC在檢測藥品時相對于其他色譜檢測技術(shù)操作較簡單，同時還可以借助顯色判定物質(zhì)種類。而且該法展開速率較快，一般每次薄層板進(jìn)行層析時只需15～20分鐘，對于一些常見藥品的快速鑒定具有很好的幫助。其缺點是對極性類似的化合物分離效果不甚理想，且對于無紫外吸收或無顯色特征的物質(zhì)檢測不理想。TLC法在對香連丸、甘草等快速鑒別中有所應(yīng)用。

2.2 TLCS

TLCS，即薄層色譜掃描法，該法在前期操作時與TLC基本一致，但該法常須對物質(zhì)的吸收進(jìn)行定量，因此在技術(shù)上要求更為嚴(yán)苛。一般而言，制備的薄層板厚度要足夠均勻，為了避免自制薄層板的缺點，實驗人員往往統(tǒng)一購置同等規(guī)格的機器制板，同時點樣操作較TLC法更為精細(xì)。TLCS一般用于物質(zhì)的含量測定，如對丹桂香顆粒的含量測定，規(guī)定每袋含黃連以鹽酸小檗堿計不少于12mg[2]。

2.3 GC

GC，即氣相色譜法，系用氣體作為移動相的色譜分析方法，一般分為氣固色譜法和氣液色譜法。待測物質(zhì)中的成分在固定相與流動相之間不斷進(jìn)行溶解、揮發(fā)（氣液色譜），或吸附、解吸過程（氣固色譜）而相互分離，再進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測分析。

一般而言，GC可以用于易揮發(fā)且熱穩(wěn)定較好的物質(zhì)，或?qū)﹄y以氣化的物質(zhì)通過化學(xué)衍生化后的測定分析。其優(yōu)點為：樣品用量少；檢測靈敏度高；分離效率高；分析速度快；應(yīng)用范圍廣等。但是，氣相色譜法在對物質(zhì)成分進(jìn)行定性分析時，必須用已知標(biāo)準(zhǔn)物或已知數(shù)據(jù)與待測物質(zhì)相應(yīng)時間的色譜峰進(jìn)行對比，才能獲得較為肯定的結(jié)果，且其不適用于許多非揮發(fā)性物質(zhì)的測定分析。該法目前常被用作中藥材中有機氯殘留、有機磷農(nóng)藥、中成藥中揮發(fā)性成分等測定，如西瓜霜潤喉片、關(guān)節(jié)止痛膏在藥品檢測過程中常用到GC技術(shù)。

2.4 HPLC

HPLC，即高效液相色譜法，其以液體為流動相，將流動相經(jīng)過高壓載液系統(tǒng)泵入到裝有固定相的色譜柱，借助機器自動取樣，將待測物質(zhì)成分進(jìn)行不斷分離、出柱，再經(jīng)過檢測器檢測，從而實現(xiàn)對待測物質(zhì)的定性或定量分析。HPLC法分為正相色譜法和反向色譜法，前者采用極性固定相，一般像酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等中等極性和極性較強的化合物可以用此法進(jìn)行分離檢測。后者一般采用非極性固定相，流動相常為水或緩沖液，一般非極性和極性較弱的化合物用此法進(jìn)行分離檢測。后者在藥品日常檢測中更為常用。安爾寧顆粒、復(fù)方黃連素片等中成藥在藥品檢測環(huán)節(jié)常用到HPLC法。

HPLC法具有“四高一廣”的特點，即流動相載壓高、載液流速高、分離效能高、檢測靈敏度高、應(yīng)用范圍廣。但其相比于TLC法操作更為復(fù)雜，對樣品的前處理要求較高，在分析過程中對于未知樣品洗脫條件的設(shè)置較復(fù)雜，整體分析耗時較長，且靈敏度不及氣相色譜。幾種常用色譜檢測技術(shù)的特點見表1。endprint

3 其他

3.1 顯微鑒定技術(shù)

顯微鏡技術(shù)在藥品檢測管理中主要是針對中藥的傳統(tǒng)鑒定，尤其是中藥材的快速定性鑒別。在日常檢測中，顯微鑒別技術(shù)同樣發(fā)揮著重要的作用，如對番瀉葉藥材進(jìn)行快速鑒定時，可以借助其草酸鈣結(jié)晶形態(tài)及氣孔類型這些微觀特征進(jìn)行初步鑒別。對于花類藥材花粉粒的觀察，可以通過電子顯微鏡觀察到更為立體的微觀結(jié)構(gòu)。然而很多時候，同一科的不同藥材或不同科的藥材在微觀視野下會出現(xiàn)相同的特征，如草酸鈣方晶不僅僅存在于大多數(shù)豆科藥材中，也存在于部分其他科屬藥材中，此時可能需要借助于以上所提到的光譜法或色譜法進(jìn)行綜合評價鑒定。因此，顯微鑒定技術(shù)作為傳統(tǒng)快速鑒別技術(shù)，其常用于部分藥材或中成藥的快速定性分析，其常作為現(xiàn)代儀器分析技術(shù)的一種輔助檢測手段。

3.2 MS

色譜法的優(yōu)勢在于分離，但其難以得到物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息。而質(zhì)譜法（MS）能夠提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，用樣量亦很少。GC-MS，即氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，是在GC基礎(chǔ)之上聯(lián)用MS技術(shù)，從而實現(xiàn)對有機揮發(fā)物結(jié)構(gòu)的測定，進(jìn)一步優(yōu)化定性檢測結(jié)果，如對人參、西洋參等藥材農(nóng)藥殘留檢測會用到GC-MS技術(shù)。LC-MS，即液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，它將液相色譜與質(zhì)譜技術(shù)聯(lián)合起來，即實現(xiàn)了藥物的分離，又可以對物質(zhì)進(jìn)行質(zhì)譜檢測，從而進(jìn)一步確定化合物相關(guān)結(jié)構(gòu)信息。此外，LC-MS可以分析GC-MS所不能分析的強極性、熱不穩(wěn)定性、難揮發(fā)性的化合物，目前在藥物分析和檢測中得到了大量的應(yīng)用。

3.3 NMR

NMR技術(shù)即核磁共振技術(shù)，是利用外磁場的電磁波對藥物進(jìn)行照射檢測，得到物質(zhì)的光譜圖如C譜和H譜圖等，再通過波譜解析技術(shù)分析其原子排布規(guī)律，從而鑒定出藥物的結(jié)構(gòu)。NMR常與MS結(jié)合使用，一般常用作化學(xué)藥物尤其是新化合物的結(jié)構(gòu)鑒定。近年來，LC-NMR技術(shù)也越來越多地被用作藥物研發(fā)過程中的未知物檢測與鑒定。

4 討論

藥品檢測環(huán)節(jié)對于藥品質(zhì)量控制和管理具有重要的意義，因此，選擇合理的儀器分析檢測技術(shù)對于藥品的質(zhì)量保證至關(guān)重要，且新型儀器檢測技術(shù)的開發(fā)任重道遠(yuǎn)。藥學(xué)檢驗人員在對藥品進(jìn)行檢測時，需要根據(jù)不同的藥品采用合適的儀器分析方法，或者將幾種儀器分析方法聯(lián)合使用，從而保證實驗結(jié)果的科學(xué)性和可靠性。

參考文獻(xiàn)

[1] 譚承學(xué).現(xiàn)代分析儀器在藥品檢測中的應(yīng)用觀察[J].健康前沿，2016.23（2）：166.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.endprint