微生物分析儀法和紙片擴(kuò)散法在細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值探討

侯新月 孟存仁

微生物分析儀法和紙片擴(kuò)散法在細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值探討

侯新月 孟存仁

目的分析比較紙片擴(kuò)散（K-B）法與微生物分析儀（Vitek）法在細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中的應(yīng)用效果。方法選取肺炎克雷伯桿菌、大腸埃希菌及金黃色葡萄球菌各80株，分別應(yīng)用K-B法與Vitek法進(jìn)行細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)。比較兩種方法的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果兩種方法的超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（extended-spectrum β-lactamase,ESBLs）和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（meticillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）檢出陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），K-B法的紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)陽(yáng)性率低于Vitek法檢測(cè)陽(yáng)性率（P＜0.05）。結(jié)論微生物分析儀法能夠較快速地判斷細(xì)菌的耐藥表型，具有較高準(zhǔn)確率和靈敏度。

紙片擴(kuò)散法；微生物分析儀法；檢測(cè)效果

作者單位：830011 烏魯木齊，新疆維吾爾自治區(qū)第二濟(jì)困醫(yī)院檢驗(yàn)科（侯新月）；8300542 烏魯木齊，新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心（孟存仁）

細(xì)菌感染是影響人們身體健康的重要因素，隨著各種抗生素藥物的應(yīng)用，細(xì)菌的耐藥性問(wèn)題也更加凸顯，快速、準(zhǔn)確地提供抗生素藥敏結(jié)果，是保障臨床合理應(yīng)用抗生素藥物的重要前提[1]。紙片擴(kuò)散（K-B）法與微生物分析儀（Vitek）法是臨床常用的細(xì)菌藥物敏感性檢測(cè)方法[2]，為了解這兩種檢測(cè)方法在細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中的應(yīng)用效果，本文對(duì)其進(jìn)行了如下探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 于2015年3月-2017年3月我院細(xì)菌室分離保存的大腸桿菌、肺炎克雷伯桿菌以及金黃色葡萄球菌中各選取80株，并以將金黃色葡萄球菌ATCC29213與大腸桿菌ATCC25922作為質(zhì)控菌。Vitek法：應(yīng)用法國(guó)梅里埃公司所生產(chǎn)的VITEK 2 Compact微生物分析儀及配套檢測(cè)板。常規(guī)K-B法：血培養(yǎng)基、M-H培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、藥敏紙片。

1.2 方法 本研究所選菌株均分別應(yīng)用K-B法和Vitek法對(duì)其細(xì)菌耐藥表型進(jìn)行檢測(cè)。常規(guī)K-B法檢測(cè)：（1）超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（extended-spectrum β-lactamase,ESBLs）驗(yàn)證試驗(yàn)；（2）耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（meticillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）檢測(cè)；（3）紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)的具體方法均參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第三版）[3]，其陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)參照相關(guān)文獻(xiàn)[4-6]。

Vitek法：選取大腸桿菌和肺炎克雷伯桿菌，分別配置0.5 MCF的懸濁液，然后應(yīng)用梅里埃Vitek-GN13檢測(cè)板對(duì)大腸桿菌和肺炎克雷伯桿菌進(jìn)行檢測(cè)。金黃色葡萄球菌檢測(cè)，配置同等濃度的金黃色葡萄球菌懸濁液后，應(yīng)用梅里埃Vitek-GP67檢測(cè)板進(jìn)行藥敏檢測(cè)[7]。

1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)兩種檢測(cè)方法的藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行記錄，并比較這兩種方法的ESBLs、MRSA以及克林霉素誘導(dǎo)陽(yáng)性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 18.0進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同檢測(cè)方法的ESBLs陽(yáng)性率對(duì)比 Vitek法檢測(cè)陽(yáng)性率略高于K-B法，但組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

2.2 不同檢測(cè)方法的MRSA陽(yáng)性率比較 K-B法對(duì)金黃色葡萄球菌進(jìn)行耐MRSA檢測(cè)，陽(yáng)性51株，檢出率為63.75%；Vitek法檢測(cè)陽(yáng)性53株，檢出率為67.50%。兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 不同檢測(cè)方法的克林霉素誘導(dǎo)陽(yáng)性率比較 在克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中，K-B法的紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)陽(yáng)性37株，檢出率為46.25%。Vitek法檢測(cè)陽(yáng)性45株，檢出率為56.25%。組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 不同檢測(cè)方法的ESBLs陽(yáng)性率對(duì)比

3 討論

隨著現(xiàn)代醫(yī)療水平的不斷進(jìn)步，抗生素藥物在臨床治療中的應(yīng)用也更加廣泛，抗生素藥物的應(yīng)用極大地提高了臨床治療效果，但同時(shí)也會(huì)增強(qiáng)細(xì)菌耐藥性，導(dǎo)致耐藥菌產(chǎn)生，使得抗生素藥物的應(yīng)用也面臨困境[8]。因此，細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)具有非常重要的臨床意義。

K-B法是臨床進(jìn)行細(xì)菌藥物敏感性檢測(cè)的常用方法，操作簡(jiǎn)單，費(fèi)用低，使用靈活，但是該檢測(cè)方法耗時(shí)長(zhǎng)，影響因素多，難以達(dá)到檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)[9]。隨著微生物檢測(cè)技術(shù)的不斷進(jìn)步，Vitek法在細(xì)菌藥物敏感性測(cè)定中的應(yīng)用受到較多關(guān)注，Vitek法能夠?qū)?xì)菌的MSRA、誘導(dǎo)克林霉素耐藥以及ESBLs等多種耐藥表型進(jìn)行檢測(cè)和推斷，與常規(guī)K-B法相比，Vitek法能夠在較短的時(shí)間內(nèi)獲得藥敏鑒定結(jié)果，檢測(cè)速度快，且具有較高準(zhǔn)確率和特異度，能夠及時(shí)為臨床提供藥敏檢測(cè)結(jié)果，具有較高應(yīng)用價(jià)值[10]。

本研究中，通過(guò)對(duì)肺炎克雷伯桿菌、大腸桿菌以及金黃色葡萄球菌分別應(yīng)用K-B法與Vitek法進(jìn)行ESBLs、MSRA等檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，兩種方法的檢測(cè)結(jié)果略有差異，可能與K-B法影響因素較多有關(guān)，從而對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響。比較紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，K-B法檢測(cè)陽(yáng)性率為46.25%，Vitek法陽(yáng)性率為56.25%，顯著高于K-B法，說(shuō)明Vitek法有助于提高克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性檢出率，且該方法檢測(cè)時(shí)間短，可加強(qiáng)應(yīng)用。

總而言之，與傳統(tǒng)K-B法相比，細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)應(yīng)用Vitek法更具有優(yōu)勢(shì)，能夠?yàn)榕R床提供更為準(zhǔn)確、可靠的藥敏檢驗(yàn)結(jié)果。

1 張麗紅.重癥監(jiān)護(hù)病房細(xì)菌感染及耐藥性現(xiàn)狀調(diào)查.中國(guó)消毒學(xué)雜志,2013,30(10): 944-946.

2 李莉.微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法在細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中的比較.氨基酸和生物資源,2014,36(2): 67-69.

3 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司．全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程．第3版．南京: 東南大學(xué)出版社,2006: 759-762．

4 張健.兩種檢測(cè)產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌方法的比較.泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2015,36(1): 30-32.

5 張麗麗.主動(dòng)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)對(duì)于控制院內(nèi)MRSA感染的效果.中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志,2014,26(6): 690-692.

6 王鳳玲.金黃色葡萄球菌紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥性分析.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(1): 100-101.

7 李玉棟.微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法在細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中的比較.臨床醫(yī)藥文獻(xiàn),2016,3(56): 15-17.

8 張文韜.災(zāi)難性的威脅: 抗生素耐藥性.世界科學(xué),2013(5):45-46.

9 花扣珍.藥敏試驗(yàn)-紙片擴(kuò)散法影響因素的探討.實(shí)用醫(yī)技雜志,2014(4): 400-4001.

10 婁立革.全自動(dòng)微生物鑒定藥敏分析儀的臨床應(yīng)用價(jià)值分析.中國(guó)醫(yī)療器械信息,2015(2Z): 90.

Application value of microbial analyzer and disk diffusion in detection of bacterial drug resistance phenotype

Xinyue HOU1,Cunren MENG2

1Department of Clinical Laboratory,Xinjiang Uygur Autonomous Region Second Hospital,Urumqi 830011,China;2Medical Examination Center of the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi 830054,China

ObjectiveTo compare and analyze the effect of K-B and Vitek in the detection of bacterial drug resistance phenotype.MethodsA total of 80 strains ofKlebsiella pneumoniae,Escherichia coliandStaphylococcus aureuswere selected.Bacterial resistance phenotype was detected by K-B and Vitek respectively.ResultsThe positive rates of extended-spectrum β-lactamase (ESBLs) and meticillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)in the two methods were not statistically different (P＞0.05).The positive rate of erythromycin resistant clindamycin induced by K-B was lower than that of Vitek (P＜0.05).ConclusionThe microbial analyzer can be used to determine the drug resistance phenotype of bacteria rapidly,and has higher accuracy and sensitivity.

K-B; Microbiological analyzer; Detection effect