血清sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白檢測對乙肝肝硬化預(yù)后評估的意義

王 烈 胡義忠 徐秀亮 王志強 王細宏 徐元宏

(安徽醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院，合肥 230032)

血清sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白檢測對乙肝肝硬化預(yù)后評估的意義

王 烈 胡義忠①徐秀亮②王志強③王細宏①徐元宏

(安徽醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院，合肥 230032)

目的旨在探討血清sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白檢測對乙肝肝硬化預(yù)后評估的意義。方法選取池州市人民醫(yī)院于2014年1月～2016年12月收治的162例乙肝肝硬化患者作為研究對象，分別測定患者血清可溶性P-選擇素(sP-selectin)、可溶性細胞間黏附分子-1(sICAM-1)、免疫球蛋白和相關(guān)血清指標(biāo)。比較不同肝硬化患者和肝癌患者血清指標(biāo)差異性，Pearson分析血清可溶性P-選擇素(sP-selectin)、可溶性細胞間黏附分子-1(sICAM-1)、免疫球蛋白和相關(guān)血清指標(biāo)相關(guān)性，logistic多因素回歸分析肝硬化轉(zhuǎn)肝癌危險因素，受試者工作特征(ROC)曲線評價OR>1參數(shù)對肝硬化轉(zhuǎn)肝癌預(yù)測價值。結(jié)果原發(fā)性肝癌患者sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgG、IgA顯著高于代償期肝硬化和失代償期肝硬化患者(P<0.05)。失代償期肝硬化患者sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgG、IgA顯著高于代償期肝硬化患者(P<0.05)。不同Child-Pugh分級肝硬化患者中，C級患者sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgG、IgA顯著高于B級和A級患者(P<0.05)。B級患者sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgG、IgA顯著高于A級患者(P<0.05)。多發(fā)癌灶患者和單發(fā)癌灶原發(fā)性肝癌患者sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。Ⅱ期原發(fā)性肝癌患者sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白顯著高于Ⅰ期患者(P<0.05)。肝硬化患者sP-selectin、sICAM-1、免疫球蛋白之間均互為正相關(guān)性(P<0.05)。以肝硬化是否轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌為因變量進行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，ALT、AST、sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgG、IgA均是肝硬化轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌的危險因素。ROC曲線分析可得，sICAM-1和sP-selectin診斷肝硬化轉(zhuǎn)肝癌敏感性和特異性均高于其他因素。結(jié)論血清sP-selectin、sICAM-1對乙肝肝硬化預(yù)后評估具有較高臨床診斷精度，對肝硬化轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌的診斷特異度、敏感度高于單純免疫球蛋白檢測，故其聯(lián)合檢測診斷肝硬化預(yù)后值得臨床推廣。

血清sP-selectin；sICAM-1；免疫球蛋白；乙肝肝硬化；預(yù)后

肝硬化是慢性肝病最終結(jié)局，其極易轉(zhuǎn)變?yōu)樵l(fā)性肝癌[1]。常規(guī)肝硬化病情評估和其轉(zhuǎn)肝癌診斷主要為血清指標(biāo)檢測、病理組織學(xué)檢測和影像學(xué)診斷，但由于血清指標(biāo)檢測費用低、操作簡便和對設(shè)備要求不高，故臨床應(yīng)用較廣[2]。血清免疫球蛋白檢測作為常規(guī)檢查肝臟炎癥、肝損傷和肝硬化的血清檢測指標(biāo)之一，技術(shù)成熟、推廣程度較高[3]，但其作為免疫反應(yīng)蛋白，易受到非肝器官或組織炎癥或損傷影響，故對肝硬化和肝癌診斷特異度不高。P-選擇素(P-selectin)作為一種黏附分子選擇素，可促進多種細胞進入炎癥反應(yīng)部位。細胞間黏附分子-1(ICAM-1)是一種黏附分子免疫球蛋白[4,5]，與其受體淋巴細胞功能相關(guān)抗原-1(LFA-1)結(jié)合后影響細胞炎癥反應(yīng)。既往研究已通過研究分析P-selectin和ICAM-1參與慢性肝炎轉(zhuǎn)肝硬化病理機制，但關(guān)于其與免疫球蛋白在肝硬化發(fā)展及其轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌評估診斷作用尚無有報道。本文選取池州市人民醫(yī)院于2014年1月～2016年12月收治的162例乙肝肝硬化患者作為研究對象，旨在探討血清sP-selectin、sICAM-1和血清免疫球蛋白檢測對乙肝肝硬化預(yù)后評估的意義，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1材料

1.1.1一般資料 選取池州市人民醫(yī)院于2014年1月～2016年12月收治的162例乙肝肝硬化患者作為研究對象。年齡30～55歲，平均年齡(44.15±7.6)歲，男84例、女性78例，根據(jù)肝硬化程度分為代償期肝硬化64例、失代償期肝硬化67例、原發(fā)性肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)31例，Child-Pugh分級：A級64例、B級37例、C級30例，癌灶類型：單發(fā)癌灶18例、多發(fā)癌灶13例，TNM分期：Ⅰ期20例、Ⅱ期11例。全部患者均告知本研究目的，自愿簽訂知情同意書，本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核通過。

1.1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn)[6]納入標(biāo)準(zhǔn)：①全部患者均經(jīng)2010版《慢性乙型肝炎防治指南》標(biāo)準(zhǔn)確診為乙肝，行CT或(和)MRI檢查，影像特征確診為肝硬化；②HCC診斷根據(jù)《第四屆全國肝癌學(xué)術(shù)會議概況及關(guān)于原發(fā)性肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)》確診；③肝癌病灶的診斷均經(jīng)病理檢查證實，根據(jù)Child-Pugh分級標(biāo)準(zhǔn)分為代償期肝硬化(A級)和失代償期肝硬化(B、C級)；④HCC基于2010年美國國立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)(National Comprehensive Cancer Network，NCCN)指南中的TNM分期為Ⅰ～Ⅱ期；⑤均未行肝臟介入或手術(shù)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有手術(shù)病史者；②肝癌病灶未得到病理學(xué)明確診斷者；③非乙肝病毒因素引起的肝硬化；④合并高球蛋白血癥相關(guān)代謝疾??；⑤近2周內(nèi)有服用影響血清HBsAg和免疫球蛋白表達的藥物者。

1.1.3實驗材料和儀器 sP-selectin雙抗體夾心ABC-ELISA試劑盒(上海西唐生物科技有限公司)，sICAM-1雙抗體夾心ELISA試劑盒(上海賢綿生物科技有限公司)，免疫球蛋白IgA、IgM、IgG試劑盒(奧地利DIALAB公司)，AU5400全自動生化分析儀(美國貝克曼庫爾特公司)，XT4000i血細胞分析儀(日本希森美康公司)，HR801酶標(biāo)分析儀(深圳市華科瑞科技有限公司)。

1.2實驗方法

1.2.1血清樣本制作 患者入院后7 d，抽取清晨8:00空腹抽取外周靜脈血10 ml，3 200 r/min(離心半徑12 cm)離心10 min，取上清液滴入干燥試管，于-20℃冷存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.1血清sP-selectin測定 取冷存血清標(biāo)本約2.0 ml，室溫下解凍，取sP-selectin凍干粉240 ng/ml根據(jù)1∶20溶解獲取標(biāo)準(zhǔn)品，選用雙抗體夾心ABC-ELISA法測定sP-selectin表達，實驗步驟按照試劑盒說明書操作，在492 nm的酶標(biāo)儀上測OD值，以標(biāo)準(zhǔn)品120、60、30、15、7.5、3.75、1.875、0 ng/ml的OD值在坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品OD值查出sP-selectin表達，敏感度0.1 ng/ml。

1.2.2血清sICAM-1測定 取冷存血清標(biāo)本約2.0 ml，室溫下解凍，1∶140稀釋，雙抗體夾心ELISA法測定血清sICAM-1表達，實驗步驟按照試劑盒說明書操作，選取試劑盒附帶標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本稀釋液 0.5 ml溶解，分別制備8 000、4 000、2 000、1 000、500、250、125、0 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品，于450 nm酶標(biāo)儀上測定OD值，根據(jù)標(biāo)本OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出值乘以140既得所測標(biāo)本sICAM-1表達，敏感度60 pg/ml。

1.2.3血清免疫球蛋白及肝腎功能指標(biāo)測定 清晨空腹抽取患者2.0 ml外周靜脈血，3 200 r/min(離心半徑12 cm)離心10 min，靜置30 min，取上清液滴入試管，采用全自動生化儀測定血清IgM、IgG、IgA及血肌酐(Cr)、血清尿素(Urea)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、血清總膽紅素(TBil)、血清白蛋白(ALB)。

1.2.4血紅蛋白測定 清晨空腹抽取患者2.0 ml外周靜脈血于EDTA-2K抗凝管充分混勻，2 h內(nèi)血細胞分析儀上機測定。

1.2.5檢測質(zhì)控措施

1.2.5.1標(biāo)本制備質(zhì)控 患者采取血樣時，要保持空腹，醫(yī)護人員告知采樣目的，平撫其情緒，血液采樣力求順暢，使用一次性玻璃試管或真空采血管，采血后凝固、離心充分，標(biāo)本容器送檢時要貼上含患者姓名、性別、年齡、科室、病房、門診、住院號、床號、檢驗?zāi)康?、臨床診斷或疑似診斷、送檢日期、醫(yī)師簽字的信息，血清標(biāo)本制備后要立刻冷存。

1.2.5.2實驗設(shè)備質(zhì)控 實驗操作時，吸管吸頭清潔，復(fù)孔加樣、勻速，不產(chǎn)生氣泡和濺出污染其他孔，加樣后封板，反應(yīng)板底部置于水中，保證溫育受熱均勻、時間準(zhǔn)確，洗板機洗板前要保證洗液充足，洗板針通暢，拍板時用清潔濾紙，預(yù)防“84”消毒液污染。各檢測儀器實驗前均進行矯正歸零。

1.2.5.3檢測操作質(zhì)控[7,8]血清標(biāo)本實驗前要滴入弱陽性室內(nèi)質(zhì)控血清，繪制質(zhì)控圖觀察指標(biāo)檢測，自制弱陽性室內(nèi)質(zhì)控品。血清sP-selectin和sICAM-1均根據(jù)試劑盒說明書規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)制備標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為X軸，OD值為Y標(biāo)，用平滑線連接各標(biāo)準(zhǔn)品坐標(biāo)點，基于曲線圖查出實際含量，根據(jù)直線回歸方程 ，Y代表OD值，x代表濃度(ng/ml)，若標(biāo)本OD值>標(biāo)準(zhǔn)曲線上限，則稀釋樣品稀釋重測。IgM、IgG、IgA依次參照等研究標(biāo)準(zhǔn)，選取質(zhì)控品，根據(jù)公式：不精密度σ值=允許總誤差(Tea)/變異系數(shù)(CV)，σ臨界范圍2～3，若σ確定>3，樣本重新測定。

2 結(jié)果

2.1本研究納入患者的基本特征 代償期肝硬化、失代償期肝硬化和原發(fā)性肝癌患者各項指標(biāo)組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。原發(fā)性肝癌患者sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgG、IgA顯著高于代償期肝硬化和失代償期肝硬化患者(P<0.05)。失代償期肝硬化患者sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgG、IgA顯著高于代償期肝硬化患者(P<0.05)，見表1。

2.2不同Child-Pugh分級患者HBeAg、sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白表達 不同Child-Pugh分級肝硬化患者中，C級患者sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgG、IgA顯著高于B級和A級患者(P<0.05)。B級患者sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgG、IgA顯著高于A級患者(P<0.05)，見表2。

2.3各類原發(fā)性肝癌患者sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白表達 多發(fā)癌灶患者和單發(fā)癌灶原發(fā)性肝癌患者sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。Ⅱ期原發(fā)性肝癌患者sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白顯著高于Ⅰ期患者(P<0.05)，見表3。

2.4肝硬化患者HBeAg、sP-selectin、sICAM-1、免疫球蛋白與其他檢測指標(biāo)相關(guān)性分析 肝硬化患者sP-selectin、sICAM-1、免疫球蛋白之間均互為正相關(guān)性(P<0.05)，與其他檢測指標(biāo)也均呈現(xiàn)正相關(guān)性(P<0.05)，見表4。

2.5肝硬化轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌危險因素單因素Logistic回歸分析 以肝硬化是否轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌為因變量進行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，ALT、AST、sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgG、IgA均是肝硬化轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌的危險因素(P<0.05)，見表5。

2.6肝硬化患者轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌危險因素的診斷效能分析 選擇多因素Logistic回歸模型分析中OR值>1的因素做ROC曲線分析，敏感性呈現(xiàn)sICAM-1>sP-selectin>IgM>IgG>IgA>ALT>AST，特異性呈現(xiàn)sICAM-1>sP-selectin>IgM>IgG>IgA>AST>ALT，如表6。

表1不同肝硬化患者基本特征

Tab.1Basiccharacteristicsofpatientswithdifferentlivercirrhosis

IndexCompensatedcirrhosis(n=64)Decompensatedlivercirrhosis(n=67) Primaryliver cancer(n=31)χ2/F,PSex(male/female) 32/32 34/44 18/131)3)7.76,0.0230Age(year) 38.36±3.12 42.85±4.15 49.84±5.311)8.32,0.0120sP-selectin(ng/ml) 10.01±4.52 13.43±4.741) 22.43±4.822)4)7.15,0.0085sICAM-1(ng/ml)187.89±65.60249.11±69.631)382.24±72.412)4)8.06,0.0060ALT(U/L) 53.41±13.61 85.42±15.721)124.53±22.962)3)8.17,0.0057AST(U/L) 68.62±18.72 89.43±20.151)119.52±23.642)3)7.64,0.0074Cr(mmol/L) 77.21±18.74 92.36±22.631)124.49±27.822)3)7.28,0.0088BUN(mmol/L) 6.05±3.22 7.41±3.691) 12.36±4.252)3)5.48,0.0260Hb(g/L)101.25±20.31123.31±24.621)134.42±24.721)3)6.12,0.0160ALB(g/L) 29.86±5.62 22.74±5.011) 17.41±4.312)4)5.72,0.0220TBil(μmol/L) 66.42±21.71 84.36±24.521)101.48±30.312)4)5.35,0.0290IgM(mg/dl)244.18±42.34298.15±64.711)379.53±85.172)4)6.43,0.0120IgG(mg/dl)1674.37±374.641925.49±449.741)2147.37±157.262)4)8.16,0.0057IgA(mg/dl)421.35±67.24587.19±74.351)705.25±74.182)4)5.61,0.0230

Note：Compared with compensated cirrhosis，1)P<0.05，2)P<0.01；compared with decompensated liver cirrhosis，3)P<0.05，4)P<0.01.

IndexAgrade(n=64)Bgrade(n=37)Cgrade(n=30)χ2/F,PsP-selectin(ng/ml)10.01±4.5211.17±5.0714.23±5.641)2)6.22,0.0150sICAM-1(ng/ml)187.89±65.60199.41±74.351)249.35±80.251)2)6.28,0.0130IgM(mg/dl)244.18±42.34267.29±52.361)312.21±72.351)2)6.34,0.0110IgG(mg/dl)1674.37±374.641774.57±421.511)2219.51±512.461)2)7.15,0.0074IgA(mg/dl)421.35±67.24541.24±70.361)593.17±72.321)2)7.46,0.0072

Note：Compared with A grade ,1)P<0.05,compared with B grade,2)P<0.01.

IndexTypesofcancerfociPrimaryhepatocellular(n=18)Multiplefoci(n=13)t,PCancerstagingStageⅠ(n=20)StageⅡ(n=11)t,PsP-selectin(ng/ml)20.32±6.1222.43±6.820.16,0.2118.31±6.3124.77±6.944.16,0.047sICAM-1(ng/ml)317.67±122.62326.14±112.320.36,0.45305.18±126.37452.12±102.244.36,0.035IgM(mg/dl)301.41±76.35322.13±91.240.18,0.21329.72±85.19476.41±102.314.78,0.031IgG(mg/dl)1841.31±141.272040.31±175.220.12,0.181647.37±133.123241.74±272.194.72,0.031IgA(mg/dl)642.25±64.21681.14±78.220.082,0.092615.84±68.22774.62±86.374.82,0.027

表4肝硬化患者HBeAg、sP-selectin、sICAM-1、免疫球蛋白與其他檢測指標(biāo)相關(guān)性

Tab.4CorrelationbetweenHBeAg,sP-selectin,sICAM-1andimmunoglobulinotherindicatorsinpatientswithlivercirrhosis

rsP-selectinsICAM-1IgMIgGIgAALT0.4141)0.4211)0.4331)0.4251)0.4271)AST0.4251)0.4221)0.4241)0.4191)0.4181)Cr0.4321)0.4161)0.4211)0.4211)0.4231)BUN0.4371)0.4191)0.4221)0.4181)0.4271)Hb0.4121)0.4121)0.4291)0.4201)0.4341)ALB0.4421)0.4361)0.4411)0.4241)0.4351)TBil0.4271)0.4471)0.4321)0.4211)0.4251)sP-selectin-0.4241)0.4241)0.4241)0.4241)sICAM-1--0.4211)0.4341)0.4271)IgM---0.6062)0.6122)IgG----0.6132)IgA-----

Note：1)P<0.05，2)P<0.01.

表5肝硬化轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌危險因素單因素Logistic回歸分析結(jié)果

Tab.5UnivariateLogisticregressionanalysisofriskfactorsforprimarylivercancerwithcirrhosis

IndexPartialregressioncoefficientstd.errorWalddfPOROR95%CIInferiorlimitSuperiorlimitALT1.5440.39216.97610.0003.6851.90615.199AST0.7020.23812.70610.0032.0181.26619.216Cr0.0180.0180.95710.3280.9820.9486.018BUN0.0560.0291.37710.3490.5451.2004.418Hb0.1440.0214.32310.0930.8661.2316.902ALB0.2630.0453.20310.1290.5361.5552.519TBil1.2260.3094.85210.0680.6921.8879.701sP-selectin1.4290.01112.42310.0023.4261.87216.727sICAM-11.3400.10912.79410.0023.7261.94616.892IgM1.2460.1566.42310.0321.4281.6429.753IgG1.2720.1256.12810.0351.3421.3819.185IgA1.2240.1366.26210.0311.4131.4259.253

表6肝硬化患者轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌危險因素的診斷效能分析

Tab.6Diagnosticefficacyofriskfactorsforprimarylivercancerinpatientswithlivercirrhosis

VariableAUCSensibilitySpecificityInterceptpointvalueAUC95%CIInferiorlimitSuperiorlimitALTs0.78178.7%79.3%98.680.7270.835AST0.73479.4%79.2%105.570.9090.959sICAM-10.64588.4%82.7%21.620.7780.869P-selectin0.63389.7%85.5%317.950.7870.879IgM0.56477.2%72.7%283.940.4970.630IgG0.58176.2%73.5%1413.230.3180.446IgA0.53277.2%72.9%642.340.3090.427

Note：AUC was the area under the receiver operating characteristic curve.

圖1 診斷肝硬化患者轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌ROC曲線Fig.1 ROC curve of primary liver cancer in patients with liver cirrhosis

3 討論

免疫球蛋白是一組具有抗體活性和結(jié)構(gòu)的球蛋白，由漿細胞合成和釋放，主要分布于血液、組織液和各類外分泌液內(nèi)，結(jié)構(gòu)為一條蛋白輕鏈和兩條結(jié)構(gòu)相同的蛋白重鏈，具有抗體活性和特異性識別及結(jié)合抗原功能[9]。研究顯示[10]，當(dāng)乙型肝炎病毒感染肝臟后，病毒抗原在肝臟細胞內(nèi)持續(xù)存在，刺激致敏 B 細胞產(chǎn)生多種血漿免疫球蛋白，如IgG、IgE、IgM、IgA 等，這些免疫球蛋白可結(jié)合病毒的相應(yīng)抗原，為機體的一種較為常見的免疫機制，造成血清免疫球蛋白表達顯著異常，故臨床中常通過檢測肝炎患者免疫球蛋白表達以診斷肝硬化。但免疫球蛋白表達在機體其他部分出現(xiàn)炎癥時也出現(xiàn)顯著改變，對肝硬化診斷特異性不高，因此需要結(jié)合其他血清指標(biāo)診斷提升肝硬化診斷精度。

P-selectin作為主要分布于血小板α顆粒和內(nèi)皮細胞的Weibel-Palade小體內(nèi)的一種顆粒膜蛋白，分子量為140 kD，由789個氨基酸殘基構(gòu)成，內(nèi)含5個功能區(qū)域，分別為Ca2+依賴性凝集素樣區(qū)、表皮生長因子樣區(qū)、蛋白調(diào)節(jié)重復(fù)單位、跨膜區(qū)和胞漿短尾[11]。研究顯示，P-selectin在正常機體內(nèi)皮細胞或血小板表面無表達或少量表達，炎性介質(zhì)、脂多糖(LPS)、過氧化物、補體系統(tǒng)等因子侵害內(nèi)皮細胞或血小板時，其細胞表面釋放和分布大量P-selectin進入血液內(nèi)后脫落部分酶解形成sP-selectin[12]。有文獻稱，乙肝病毒損傷肝細胞，引起肝細胞硬化壞死，造成肝細胞表面分泌大量P-selectin進入外周血，導(dǎo)致乙肝肝硬化患者血清內(nèi)sP-selectin表達上升，且表達水平與肝細胞損傷程度呈現(xiàn)正相關(guān)性[13]。通過測定慢性乙肝患者血清P-selectin表達，顯示乙肝肝硬化患者血清sP-selectin顯著高于非肝硬化患者。ICAM-1是一種免疫球蛋白和單鏈跨膜糖蛋白，存在于19號染色體上，相對分子量為70～120 kD，由N-末端的胞外區(qū)、跨膜區(qū)和C-末端的胞質(zhì)區(qū)構(gòu)成[14]。其作為一種黏附分子參與機體免疫答應(yīng)，可促進T細胞受體介導(dǎo)抗原呈遞細胞結(jié)合淋巴細胞，對細胞免疫起協(xié)同激活作用。研究顯示，ICAM-1在內(nèi)皮細胞、上皮細胞、成纖維細胞和白細胞等細胞表面廣泛表達，其表達受肝組織炎癥程度顯著影響。劉展等[15]采取腫瘤壞死因子(TNF)和白介素(IL)等炎癥因子及內(nèi)毒素對正常肝細胞誘導(dǎo)培養(yǎng)，促使其釋放大量可溶性ICAM-1即sICAM-1。而鄧桂軍等[16]研究表明，慢性肝炎患者血清內(nèi)sICAM-1表達顯著高于健康人，其表達與肝細胞炎癥及損傷程度和肝組織纖維化程度呈現(xiàn)密切關(guān)系。國外研究者也通過實驗肯定sICAM-1與LFA-1結(jié)合后形成的免疫反應(yīng)參與乙肝肝硬化的發(fā)生和發(fā)展[17]。

基于文獻，筆者認(rèn)為免疫球蛋白表達能夠顯示可以直接反映早期乙肝向肝硬化轉(zhuǎn)變程度,其中IgG、IgM、IgA 可以作為判斷早期肝硬化情況的指標(biāo)，而血清sP-selectin、sICAM-1能夠介導(dǎo)內(nèi)皮細胞和腫瘤細胞之間的黏附，能夠影響肝癌腫瘤細胞遷移和侵潤其他組織器官的能力，能夠反映晚期肝硬化向肝癌轉(zhuǎn)變程度和風(fēng)險，既往文獻多討論乙肝向肝癌或肝硬化向肝癌預(yù)后診斷，并未對肝硬化細分領(lǐng)域進行有效評估。故選擇sP-selectin、sICAM-1結(jié)合免疫球蛋白檢測對肝硬化患者預(yù)后進行相對精確的評估。本研究中，筆者通過對比不同程度肝硬化患者間血清sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgA和IgG，顯示非代償期肝硬化患者血清sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgA和IgG表達顯著高于代償期肝硬化患者(P<0.05)，在Child-Pugh分級中，C級患者sICAM-1、IgM、IgA和IgG表達顯著高于B級和A級患者(P<0.05)。B級患者sP-selectin顯著高于A級患者(P<0.05)，這表明血清sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgA和IgG表達上升不僅可以預(yù)測乙肝向肝硬化轉(zhuǎn)化的可能性，也可預(yù)測肝硬化嚴(yán)重程度，與他人研究一致[18]。文獻稱，sP-selectin與PSGLI、CD162、糖蛋白GPⅡb、唾液化的Lewis X(SLex)抗原結(jié)合，淋巴細胞活化，加重肝組織炎性程度，促使肝細胞具備黏附、浸潤、跨內(nèi)皮移動等生物學(xué)活性而變異成腫瘤細胞。劉忠武等[19]研究也證明，sICAM-1與原發(fā)性肝癌發(fā)展具有密切關(guān)系。在本研究中，筆者進一步通過分析探討sP-selectin表達、sICAM-1與肝硬化進展成原發(fā)性肝癌的關(guān)系，結(jié)果顯示，Ⅱ期原發(fā)性肝癌患者sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白顯著高于Ⅰ期患者(P<0.05)，結(jié)果表明原發(fā)性肝癌患者癌癥分期越高，其sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白表達越高。但本研究卻發(fā)現(xiàn)多發(fā)癌灶患者和單發(fā)癌灶原發(fā)性肝癌患者sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，這可能因為本研究選擇對象多為肝癌中早期和小癌灶患者，造成多發(fā)癌灶血清sP-selectin、sICAM-1和免疫球蛋白表達略高于單發(fā)癌灶，表明在臨床診斷中，不能僅憑影像學(xué)診斷出癌灶點數(shù)量判斷肝硬化肝癌患者病情程度。

既往研究已證明肝硬化患者血清sP-selectin和sICAM-1存在正相關(guān)性，而本研究通過Pearson相關(guān)性分析可得，肝硬化患者sP-selectin、sICAM-1、免疫球蛋白之間均互為正相關(guān)性(P<0.05)，同時進一步得出三者也分別與ALT、AST、Cr、BUN、Hb、ALB均呈正相關(guān)性(P<0.05)，這表明肝硬化引起sP-selectin、sICAM-1、免疫球蛋白、ALT、AST、Cr、BUN、Hb、ALB表達改變機制可能相同。研究中，筆者以肝硬化是否轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌進行多因素Logistic回歸分析，得出ALT、AST、sP-selectin、sICAM-1、IgM、IgG、IgA均是肝硬化轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌的危險因素(P<0.05)，而在ROC曲線下原發(fā)性肝癌效能診斷比較中，sICAM-1和sP-selectin的診斷特異度、敏感度高于免疫球蛋白、ALT、AST，反映出sICAM-1和sP-selectin作為細胞在炎性條件下釋放進入外周血跨膜蛋白，其生成條件更苛刻，對肝細胞纖維化和癌變敏感度更高。

綜上所述，血清sP-selectin、sICAM-1對乙肝肝硬化預(yù)后評估具有較高臨床診斷精度，對肝硬化轉(zhuǎn)原發(fā)性肝癌的診斷特異度、敏感度高于單純免疫球蛋白檢測，故其聯(lián)合檢測值得臨床推廣。

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[收稿2017-04-18 修回2017-07-08]

(編輯 張曉舟)

PrognosticsignificanceofserumsP-selectin,sICAM-1andimmunoglobulininpatientswithhepatitisBcirrhosis

WANGLie，HUYi-Zhong，XUXiu-Liang，WANGZhi-Qiang,WANGXi-Hong,XUYuan-Hong.

TheFirstClinicalMedicalCollegeofAnhuiMedicalUniversity，Hefei230032,China

Objective:To investigate the significance of serum sP-selectin,sICAM-1 and immunoglobulin in the prognosis of hepatitis B cirrhosis.Methods162 cases of hepatitis B patients with cirrhosis were treated as the research object in clinical laboratory of Chizhou People′s Hospital from January 2014 to December 2016,and detected in the serum of soluble P-selectin(sP-selectin),soluble intercellular adhesion molecule-1(sICAM-1),immunoglobulin and serum related index.Comparison of liver cirrhosis and liver cancer patients mean difference,Pearson analysis of serum soluble P-selectin(sP-selectin),soluble intercellular adhesion molecule-1(sICAM-1),the correlation of immunoglobulin and serum indexes,logistic regression analysis of risk factors of liver cirrhosis to hepatocellular carcinoma,the receiver operating characteristic(ROC)OR>1 parametric curve evaluation of predictive value of hepatocellular carcinoma to liver cirrhosis.ResultsThe levels of sP-selectin,sICAM-1,IgM,IgG and IgA in patients with primary liver cancer were significantly higher than those in compensated cirrhosis and decompensated liver cirrhosis(P<0.05).The levels of sP-selectin,sICAM-1,IgM,IgG and IgA in patients with decompensated cirrhosis were significantly higher than those in decompensated liver cirrhosis(P<0.05).sP-selectin,sICAM-1,IgM,IgG,IgA were significantly higher in patients with grade C and grade B(P<0.05)in patients with different grades of cirrhosis.SP-selectin,sICAM-1,IgM,IgG,IgA were significantly higher in patients with grade B(P<0.05).There was no significant difference in the expressions of sP-selectin,sICAM-1 and immunoglobulin in patients with multiple foci of carcinoma and primary hepatocellular carcinoma(P>0.05).SP-selectin,sICAM-1 and immunoglobulin in patients with stage Ⅱ primary liver cancer were significantly higher than those in stage Ⅰ(P<0.05).There was a positive correlation between sP-selectin,sICAM-1 and immunoglobulin in patients with liver cirrhosis(P<0.05).In liver cirrhosis was the transfer of primary liver cancer as the dependent variable for Logistic regression analysis,the results showed that ALT,AST,sP-selectin,sICAM-1,IgM,IgG,IgA were risk factors of liver cirrhosis to hepatocellular carcinoma.ROC curve analysis showed that the sensitivity and specificity of sICAM-1 and sP-selectin in diagnosis of liver cirrhosis were higher than other factors.ConclusionSerum sP-selectin,sICAM-1 has a higher accuracy of clinical diagnosis of hepatitis B cirrhosis prognosis evaluation,diagnostic specificity and sensitivity of liver cirrhosis to hepatocellular carcinoma was higher than that of simple detection of immunoglobulin,the combined detection in the diagnosis of liver cirrhosis is worthy of clinical prognosis.

Serum sP-selectin;sICAM-1;Immunoglobulin;Hepatitis B cirrhosis;Prognosis

10.3969/j.issn.1000-484X.2017.11.021

①安徽省池州市人民醫(yī)院檢驗科，池州 247100。

②安徽省池州市人民醫(yī)院感染科，池州 247100。

③安徽省池州市人民醫(yī)院病理科，池州 247100。

R575.2

A

1000-484X(2017)11-1699-07

王 烈(1977年-)，男，副主任技師,主要從事臨床檢驗診斷學(xué)研究，同時供職于安徽省池州市人民醫(yī)院檢驗科。

及指導(dǎo)教師：徐元宏(1964年-)，男，博士，二級教授，碩士生導(dǎo)師，主任技師，主要從事臨床檢驗診斷學(xué)方面的研究，E-mail：xyhong1964@163.com。