一例蛋雞禽網(wǎng)狀內皮組織增殖病和禽白血病混合感染的診治

張棟 ，楊凱 ，劉波 ，劉娜 ，孔令靜

（1.山東省動物疫病預防與控制中心，山東 濟南 250022；2.濟南市農業(yè)局，山東 濟南 250022；3.山東匯眾獸醫(yī)技術服務有限公司，山東 濟南 250022）

一例蛋雞禽網(wǎng)狀內皮組織增殖病和禽白血病混合感染的診治

張棟1，楊凱2，劉波3，劉娜3，孔令靜3

（1.山東省動物疫病預防與控制中心，山東 濟南 250022；2.濟南市農業(yè)局，山東 濟南 250022；3.山東匯眾獸醫(yī)技術服務有限公司，山東 濟南 250022）

某蛋雞場80日齡蛋雞出現(xiàn)漸進性消瘦和生長發(fā)育不良，剖檢可見腺胃腫大，乳頭擠壓出現(xiàn)膿性分泌物。無菌取病死雞的腺胃進行熒光定量RT-PCR/PCR檢測，結果顯示該樣品禽網(wǎng)狀內皮組織增殖病病毒、禽白血病病毒均為陽性。結合臨床癥狀、剖檢病變和實驗室檢測結果，該蛋雞場發(fā)病的原因是由禽網(wǎng)狀內皮組織增殖病病毒和禽白血病病毒混合感染而引起的。

禽網(wǎng)狀內皮組織增殖病病毒；禽白血病病毒；RT-PCR/PCR

禽網(wǎng)狀內皮組織增殖?。≧E）和禽白血病(AL)是繼馬立克病（MD）后發(fā)現(xiàn)的兩種腫瘤性免疫抑制性疾病，其中RE是由禽網(wǎng)狀內皮組織增殖病病毒（REV）引起的，單REV感染禽多不表現(xiàn)出典型的臨床癥狀，主要以病雞的生長發(fā)育不良、漸進性消瘦和因免疫抑制而繼發(fā)感染其他病原引起的病死率上升為特征[1]；AL是由禽白血病病毒（ALV）引起，發(fā)病雞主要表現(xiàn)為精神沉郁、生長遲緩、雞群發(fā)育不均，感染雞群出現(xiàn)腫瘤疾病及其所導致的慢性消耗性死亡、生產性能下降和免疫抑制等。這兩種疾病均能造成禽類的免疫系統(tǒng)損傷，導致生產性能降低和死亡。近年來，ALV和REV感染有增多趨勢，這嚴重危害了養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展并造成了巨大的經(jīng)濟損失[2]。

1 雞群臨床癥狀

2016年8月，德州某蛋雞養(yǎng)殖場養(yǎng)殖蛋雞20000只，80日齡，病雞食欲下降(采食量一直不達標)，精神沉郁，羽毛蓬亂，雞冠蒼白，貧血，排飼料糞便，消瘦，生長發(fā)育不良，發(fā)病率約為30%，零星傷亡。

2 剖檢變化

病死雞腺胃腫大（圖1、圖2），如乒乓球狀，腺胃壁顯著增厚、變硬，乳頭內可擠出乳白色膿樣分泌物，個別腺胃粘膜出血脫落（圖3）、潰瘍；胸腺、脾臟萎縮。個別病雞盲腸扁桃體腫大、出血。其他器官無明顯病變。

圖1 外觀：腺胃腫大

圖2 剖解：腺胃腫大

圖3 腺胃粘膜脫落

3 實驗室檢測

3.1 材料與方法

3.1.1 試劑 禽網(wǎng)狀內皮組織增殖病病毒單重熒光PCR檢測試劑盒購自北京億森寶生物科技有限公司，禽白血病病毒實時熒光PCR檢測試劑盒購自世紀元亨有限公司，病毒RNA/DNA柱式提取試劑盒購自北京森康生物技術開發(fā)有限公司。

3.1.2 方法 無菌采集病死雞的腺胃，將其剪碎后，研磨并勻漿，反復凍融4次，4℃ 8000r/min離心5min，取上清液分別用病毒RNA/DNA柱式提取試劑盒提取核酸，置于-20℃保存?zhèn)溆?。REV的反轉錄、擴增，ALV的擴增均按試劑盒說明進行操作。

3.2 檢測結果

3.2.1 REV的RT-PCR檢測結果 REV陽性對照Ct值為12.909，呈 S型特異性曲線，陰性對照 Ct值為 0， 樣品 （B、C、D）Ct值分別為 15.772、15.455、16.208，樣品均呈擴增曲線，如圖4所示，表明樣品感染了REV。

圖4 REV PCR圖

3.2.2 ALV的PCR檢測結果 ALV陽性對照Ct值為15.74，呈S型特異性曲線，陰性對照Ct值為0，樣品（B、C、D）Ct值分別為 17.33、18.70、19.51，樣品均呈擴增曲線，如圖5所示，表明樣品感染了ALV。

圖5 ALV PCR圖

4 診斷結果

結合臨床癥狀、剖檢變化以及實驗室病毒RT-PCR/PCR檢測結果，可以明確該蛋雞場的發(fā)病原因是由REV和ALV混合感染所引起的。

5 討論

5.1 REV和ALV具有垂直傳播的特性，因此建議養(yǎng)殖戶從正規(guī)孵化場引進健康雞苗，避免從疫區(qū)引進種蛋和雛雞。對引進的種雞要嚴格執(zhí)行先隔離觀察，之后再轉入生產群的制度。疫苗中兩者的污染和傳播是引起其感染和流行的重要原因[3]，此外所用疫苗也應從正規(guī)廠家引進，避免免疫造成二次污染。

5.2 REV和ALV是引起雞腺胃炎的重要因素。臨床上腺胃炎病雞的腺胃組織中這兩種病原檢出率顯著升高，可能是由于這兩種病原的混合或繼發(fā)感染所致，因此對兩者的有效防控，除凈化雞群外，應防止繼發(fā)感染或混合感染。

5.3 加強飼養(yǎng)管理，改善雞舍的飼養(yǎng)環(huán)境，保證舍內溫度、濕度和合理通風，為其健康創(chuàng)造有利條件。加強生物安全措施，發(fā)現(xiàn)病雞，及早隔離，避免接觸傳播。定期消毒，尤其是各種生產用具和運輸車輛及種蛋的消毒。做好雞場的衛(wèi)生管理，墊料的消毒及處理、病死雞的無害化處理等工作。

[1] 任玉鵬,張煥容,王小楠,等.四川部分雞場禽網(wǎng)狀內皮組織增生癥病毒感染情況調查 [J].動物醫(yī)學進展.2015，36（6）:162-166.

[2] 沈清霞,任冬梅,丁紅雷,等.重慶市禽白血病及禽網(wǎng)狀內皮組織增生癥的血清流行病學調查[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2014,11,54-55.

[3] 莊金秋,畢妍麗,梅建國,等.應用PCR法檢測禽源生物制品中禽網(wǎng)狀內皮組織增生癥病毒[J].中國畜牧獸醫(yī),2012,39（7）：36-39.

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