不同劑量比例的玉屏風(fēng)散對小鼠上呼吸道微生態(tài)的影響

劉青 李慶生 袁嘉麗 李杰 康良 李仲銳

·中藥研究·

不同劑量比例的玉屏風(fēng)散對小鼠上呼吸道微生態(tài)的影響

劉青1李慶生2袁嘉麗2李杰3康良2李仲銳2

目的探討分析應(yīng)用不同劑量比例玉屏風(fēng)散對小鼠上呼吸道微生態(tài)產(chǎn)生的影響。方法選取由青霉素造成的上呼吸道菌群失調(diào)動物小鼠模型作為本次研究對象，分配將其劃分成3組，即對照組、模擬組與治療組（玉屏風(fēng)散治療），對不同組別的研究對象微生態(tài)指標(biāo)進(jìn)行檢驗(yàn)對比。結(jié)果大劑量比例應(yīng)用黃芪、白術(shù)的治療組對小鼠上呼吸道微生態(tài)作用明顯，同模擬組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論不同劑量比例的玉屏風(fēng)散對上呼吸道微生態(tài)作用明顯，大劑量使用黃芪與白術(shù)能夠有效改善甲型鏈球菌數(shù)量，促進(jìn)其繁殖生長，維持上呼吸道菌群平衡。

玉屏風(fēng)散；小鼠試驗(yàn)；上呼吸道；微生態(tài)

玉屏風(fēng)散的功效是益氣解表，固衛(wèi)斂汗，是臨床治療中常用的預(yù)防感染方劑，對于呼吸道疾病以及相關(guān)感染疾病的治療效果顯著[1]。上呼吸道固有的免疫平衡狀態(tài)和微生物種群定性、定量上的穩(wěn)定性，在宿主呼吸道正常防御機(jī)制中起著重要的作用。當(dāng)這種平衡被打破后，外源性病原微生物侵入或內(nèi)源性某種細(xì)菌大量繁殖，致呼吸道菌群密集度增高、菌群多樣性降低、優(yōu)勢細(xì)菌發(fā)生改變，致病菌增加，引起上呼吸道感染[2-3]。本次研究主要對不同劑量比例的玉屏分散對小鼠上呼吸道微生態(tài)作用效果進(jìn)行探討，為玉屏風(fēng)散防治上呼吸道感染提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，中醫(yī)扶正解表法防治上呼吸道感染提供有效的數(shù)據(jù)指導(dǎo)。

1 實(shí)驗(yàn)資料

1.1 實(shí)驗(yàn)對象

昆明種小白鼠（SPF級），雌雄各半，體質(zhì)量18～22 g，飼養(yǎng)于昆明醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心層流架。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥劑

玉屏風(fēng)散，由我院中藥鑒定教研室鑒定，均為正品，質(zhì)量合格。采用高低兩種不同的濃度，低濃度為古載劑量，根據(jù)小鼠與人體表面積比等效劑量換算法換算成小鼠的給藥劑量，高濃度為低濃度的1倍。由學(xué)院中藥制劑實(shí)驗(yàn)室制作成浸膏，再根據(jù)所需濃度換算成小鼠給藥量。

1.3 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備

（1）SPX-250B-Z型生化培養(yǎng)箱；（2）XS—18型生物顯微鏡；（3）醫(yī)用超凈工作臺；（4）YXQ-LS-75SII型立式壓力蒸汽滅菌器；（5）定量接種環(huán)；（6）滴瓶式革蘭式染液；（7）液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基，營養(yǎng)瓊脂，生化鑒定管。

1.4 方法

（1）空白對照組：取小鼠8只，雌雄各半，按20g小鼠每天灌胃蒸餾水0.4 ml。（2）模擬組：在青霉素制備的上呼吸道菌群失調(diào)的模型組中取小鼠8只，雌雄各半。每只小鼠每天灌胃蒸餾水0.4 ml。（3）其余所有組別：均按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)對方中藥劑比例進(jìn)行增減稀釋，并給予小鼠喂養(yǎng)。

以上10組均7天后檢測小鼠口咽部菌群密集度，甲型鏈球菌，菌群多樣性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

研究所得數(shù)據(jù)均采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，采用t檢驗(yàn)，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)過7 d喂養(yǎng)后，10組小鼠上呼吸道菌群密集度差異較大，高、低濃度劑量的黃芪、白術(shù)玉屏風(fēng)散組，其菌群密集度升高明顯，重用白術(shù)高濃度玉屏風(fēng)散組小鼠菌群密集度最高，而重用防風(fēng)低濃度組小鼠菌群密集度最低，組間各數(shù)據(jù)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

3 討論

根據(jù)中醫(yī)學(xué)邪正發(fā)病學(xué)說，正氣不足是疾病發(fā)生的內(nèi)在因素；邪氣是發(fā)病的重要條件；邪正斗爭的勝負(fù)決定是否發(fā)病[4]。正氣在疾病發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸的過程中起著極其重要的作用[5]。通過實(shí)驗(yàn)研究表明，重用黃芪、白術(shù)的玉屏風(fēng)散具有促進(jìn)菌群失調(diào)的小鼠上呼吸道菌群密集度升高，甲型鏈球菌數(shù)量增加的作用。玉屏風(fēng)散方中黃芪，白術(shù)，防風(fēng)的比例是1∶2∶1，3∶2∶1時具有促進(jìn)上呼吸道微生態(tài)恢復(fù)平衡的作用。其中，重用白術(shù)高濃度的玉屏風(fēng)散作用最為明顯，說明白術(shù)高劑量組的比例關(guān)系在促進(jìn)上呼吸道微生態(tài)平衡方面具有良好的療效。從上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析可以看出重用黃芪，白術(shù)玉屏風(fēng)散組促進(jìn)上呼吸道微生態(tài)恢復(fù)平衡作用要優(yōu)于重用防風(fēng)組，可見扶助正氣在防治上呼吸道感染的過程中起著重要的作用[6]。這與《內(nèi)經(jīng)》“正氣在內(nèi)邪不可干，邪之所湊其氣必虛”理論相吻合[7]。

表1 各組之間菌群密集度比較（±s）

表1 各組之間菌群密集度比較（±s）

注：與模擬組比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；與空白對照組比較，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01；與玉屏風(fēng)散口服液組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01；與白葡奈氏菌片組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；與重用黃芪高濃度組比較，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01；與重用黃芪低濃度組比較，★P＜0.05，★★P＜0.01；與重用白術(shù)高濃度組比較，◇P＜0.05，◇◇P＜0.01；與重用白術(shù)低濃度組比較，◆P＜0.05，◆◆P＜0.01

綜上所述，重用黃芪高、低濃度的玉屏風(fēng)散，重用白術(shù)高、低濃度的玉屏風(fēng)散通過加大黃芪，白術(shù)的劑量比例，能夠有效調(diào)控上呼吸道微生態(tài)平衡[8]。玉屏風(fēng)防治呼吸道感染的作用機(jī)制是否與HBD-2有關(guān)，本課題擬在前期玉屏風(fēng)散對上呼吸道微生態(tài)調(diào)節(jié)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步選用玉屏風(fēng)散，以不同劑量比例玉屏風(fēng)散對HBD-2表達(dá)影響為切入點(diǎn)，研究其對HBD-2的調(diào)節(jié)作用，為臨床中醫(yī)藥防治呼吸道感染提供新的理論指導(dǎo)。

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E ff ects of Di ff erent Doses of Yuping Feng Powder on Microecology of Upper Respiratory Tract in Mice

LIU Qing1LI Qingsheng2YUAN Jiali2LI Jie3KANG Liang2LI Zhongrui21 Department of Pulmonary Diseases, Kunming Hospital of Traditional Chinese Medicine, Kunming Yunnan 650012, China; 2 School of Basic Medical Sciences, Yunnan University of TCM, Kunming Yunnan 650500,China; 3 Department of Cardiology, Shanxi Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine, Taiyuan Shanxi 030012, China

ObjectiveTo analyze the effect of different doses of yuping feng powder on the upper respiratory tract microecology in mice.MethodsSelected by penicillin caused by upper respiratory tract dysbacteriosis in animal model of mice as the research object, the distribution can be divided into 3 groups: control group, model group and treatment group(yuping fengsan treatment), to study di ff erent groups of micro ecological indicators were tested and compared.Resultsthe large dose of astragalus and baizhu treatment group had obvious effect on the upper respiratory tract microecology, compared with the simulation group, the di ff erence was statistically signi fi cant (P＜ 0.05).ConclusionDi ff erent dosage of yuping feng powder was micro ecological e ff ects on the upper respiratory tract, the use of large dose of huangqi and baizhu can e ff ectively improve the number of Streptococcus, promote reproductive growth, maintain the balance of fl ora in the respiratory tract.

yuping fengsan; mice test; upper respiratory tract;microecology

R285

A

1674-9308（2017）24-0192-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.24.104

1 昆明市中醫(yī)醫(yī)院肺病科，云南 昆明 650012；2 云南省中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，云南 昆明 650500；3 山西省中醫(yī)院心內(nèi)科，山西太原 030012

劉青