甘草次酸衍生物18GAGly介導(dǎo)肝主動靶向脂質(zhì)體的制備及體內(nèi)相關(guān)研究

金粟　王秀麗　李耿

[摘要]基于國內(nèi)外對甘草次酸配體介導(dǎo)主動肝靶向脂質(zhì)體的研究情況，該文主要對以甘草次酸為母核的肝靶向配體18GAGly修飾的脂質(zhì)體的肝靶向效果進(jìn)行研究。采用薄膜分散高壓乳勻法制備18GAGly配體介導(dǎo)的丹參酚酸B丹參酮ⅡA脂質(zhì)體及未修飾配體的脂質(zhì)體，考察2種脂質(zhì)體的制劑學(xué)性質(zhì)，考察粒徑、電位、包封率和配體結(jié)合率；尾靜脈給藥后不同時間點(diǎn)獲取血漿樣本以及小鼠心、肝、脾、肺、腎組織樣本，UPLC測定各樣本中丹參酚酸B（Sal B）和丹參酮IIA（TSN）含量，評價18GAGly配體的肝靶向效果。結(jié)果顯示脂質(zhì)體GlyTSLip和TSLip的粒徑、電位、包封率、配體結(jié)合率基本符合要求；體內(nèi)靶向性考察結(jié)果顯示GlyTSLip組脂質(zhì)體與TSLip組脂質(zhì)體血漿數(shù)據(jù)無顯著性差別；甘草次酸衍生物配體18GAGly介導(dǎo)脂質(zhì)體可以增加Sal B和TSN 在肝組織的峰濃度，但并未顯示明顯的肝靶向效果。

[關(guān)鍵詞]甘草次酸衍生物； 脂質(zhì)體； 主動肝靶向； 靶向系數(shù)； 丹酚酸B； 丹參酮ⅡA

[Abstract]Based on the research of active liver targeting liposomes mediated by glycyrrhetinic acid ligand at home and abroad， this paper focuses on the liver targeting effect of liposomes mediated with 18GAGly， a kind of glycyrrhetinic acid ligand salvianolic acid B（Sal B）tanshinone ⅡA （TSN）liposomes mediated by 18GAGly as well as the liposomes with unmodified ligands were prepared by film dispersionhigh pressure homogenization method， and then the particle size， potential， encapsulation efficiency and ligand binding rate were detected Plasma samples of the heart， liver， spleen， lung and kidney tissues were taken at different time points after tail vein injections The contents of Sal B and TSN in each sample were determined with UPLC methods and the liver targeting effect of 18GAGly ligands was evaluated The results showed that the particle size， potential， encapsulation efficiency and ligand binding rate met the basic requirements； in vivo targeting investigation results showed no difference between GLYTSLip group and TSLip group The liposomes mediated by glycyrrhetinic acid derivative ligand 18GAGly can increase the peak concentration of Sal B and TSN in liver， but showed no significant liver targeting effect.

[Key words]glycyrrhetinic acid derivatives； liposomes； active liver targeting； targeting coefficient； salvianolic acid B； tanshinone ⅡA

脂質(zhì)體是一種以磷脂為膜材的具有良好生物相容性的脂質(zhì)載體，屬于納米制劑的一種，在靜脈注射入體內(nèi)后會因被動靶向作用向網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)豐富的組織分布[1]。通過在脂質(zhì)體表面進(jìn)行一定修飾，可以實(shí)現(xiàn)特定組織部位的聚集。研究表明甘草次酸衍生物是良好的肝靶向配體，特別是對甘草次酸3位和30位進(jìn)行一定的修飾得到的衍生物表現(xiàn)出良好的肝細(xì)胞靶向性[24]，有研究利用熒光成像結(jié)果表明，合成的甘草次酸衍生物修飾的脂質(zhì)體在小鼠體內(nèi)可以靶向分部到肝臟[5]，利用這一特性，將甘草次酸衍生物配體標(biāo)記載藥脂質(zhì)體給藥，對實(shí)現(xiàn)主動靶向給藥，降低藥物的毒副作用具有重要意義。課題組前期對甘草次酸為母核合成肝靶向配體的肝靶向效果進(jìn)行研究[6]，結(jié)果顯示配體18GAsuc可以修飾在脂質(zhì)體表面顯示出一定得肝靶向效果，本文以新型甘草次酸衍生物甘氨酸丁二酸甘草次酸十八烷酯（18GAGly）作為配體修飾脂質(zhì)體，并考察脂質(zhì)體包載模型藥物丹酚酸B和丹參酮ⅡA在小鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)以及組織分布情況，以評價18GAGly作為配體對脂質(zhì)體的肝靶向效果。

1材料

11試劑

丹酚酸B對照品（Sal B，中國食品藥品檢定研究院，批號10113081107）；丹參酮 ⅡA對照品（TSN，中國食品藥品檢定研究院，批號110766200417）；配體18GAGly（自合成）；TSN（寶雞國康生物科技有限公司，批號 120428，純度>98%）；Sal B（寶雞國康生物科技有限公司，批號 MUST12020104，純度>98%）；大豆磷脂（德國Lipoid 公司，批號01/2015，純度> 94%）；膽固醇（美國Amresco公司，批號0433，超純級）；無水乙醇（分析純）；色譜甲醇（賽默飛世爾科技公司，批號101437）；乙腈（色譜純，F(xiàn)isher Scientific）；甘氨酸（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號20111215）；氯霉素（源葉生物有限公司）；甲酸（西隴化工股份有限公司，批號110704）；Thermo超純水機(jī)制備超純水（25 ℃電阻率>182 Ω·cm），娃哈哈純凈水（杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司）。endprint

12儀器

BSl10S 型1/1萬電子分析天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；Waters UPLC：二元溶劑管理系統(tǒng)、在線脫氣機(jī)、自動進(jìn)樣器、PDA檢測器（美國 Waters 公司）；RW2000A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；SCIENTZⅡD型超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)（浙江新芝）；Zetasize Nano ZS納米粒度儀（英國Malvern公司）；JEM1230型透射電鏡（日本JEOL）；G16型醫(yī)用高速離心機(jī)（白洋離心機(jī)廠）；Ultracel YM100 超濾管（Millipore）。Thermo 高級超純水系統(tǒng)（美國Thermo Fisher）；KQ5200DE 超聲波儀（江蘇昆山市超聲儀器有限公司）；Qilinbeier VORTEX5 渦旋混合儀（北京東南儀誠實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司）；TTLDC 型多功能氮吹儀（北京同泰聯(lián)科技發(fā)展有限公司）；S10 型高速勻漿機(jī)（浙江新芝有限公司）。

13動物

SPF級KM種小鼠，雄性，5周齡，體質(zhì)量20～25 g（合格證號SCXK 京 20160002，購于北京斯倍福實(shí)驗(yàn)動物科技有限公司）。

2方法

21溶液的配置

211對照品溶液的配置精密稱取Sal B對照品130 mg，TSN對照品140 mg，18GAGly 115 mg，分別加入到25 mL量瓶中，加入甲醇超聲溶解，放置室溫后定容，即得到Sal B，TSN，18GAGly對照品儲備液，質(zhì)量濃度分別為0052 0，0056 0，0046 0 g·L-1。

212甘氨酸鹽酸緩沖溶液的配置精密稱取甘氨酸適量，配置質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的甘氨酸溶液，后用02 mol·L-1的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH 332，備用。

22檢測方法的建立

221色譜條件的確定對Sal B，TSN及18GAGly進(jìn)樣考察色譜條件，最終確定色譜條件為Waters UPLC，ACQUITY BEH C18色譜柱（21 mm×50 mm，17 μm），流動相05%甲酸水溶液（A）甲醇（B），梯度洗脫（0～3 min，20%～100%B，3～6 min，100%B），流速04 mL·min-1，進(jìn)樣量2 μL，樣品室溫度-4 ℃，柱溫45 ℃，檢測波長Sal B 284 nm，TSN 265 nm，18GAGly 254 nm。

222專屬性考察分別量取211項(xiàng)下對照品溶液，以純甲醇配置不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別取空白脂質(zhì)體甲醇破乳液、空白脂質(zhì)體破乳液混合Sal B，TSN，18GAGly混合溶液，采用221項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，檢測圖譜見圖1，各成分分離度均良好，可以達(dá)到含量測定要求。

223線性關(guān)系考察精密吸取Sal B，TSN和18GAGly對照品溶液 10，20，40，60，80 μL，分別進(jìn)樣，測定峰面積。分別以色譜峰面積（Y）對質(zhì)量（X）進(jìn)行線性回歸。Sal B標(biāo)準(zhǔn)曲線為

A. 284 nm； B. 265 nm； C. 254 nm； D. 空白脂質(zhì)體破乳后溶液；1. Sal B； 2. TSN；3. 18GAGly。

圖1UPLC的專屬性

Fig1Results of UPLC conditions

Y=1 931 414X-54 675，R2=0999 4，且Sal B在0052～0416 μg線性關(guān)系良好； TSN標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=12 425X-3 8796，R2=0999 8，且TSN在0056～0448 μg線性關(guān)系良好； 18GAGly標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=1 130 479X-37 466，R2=0999 4，且18GAGly在0046～0368 μg線性關(guān)系良好。

224精密度考察取Sal B，TSN和18GAGly對照品溶液適量，過022 μm濾膜，UPLC連續(xù)進(jìn)樣6次，測定3個成分峰面積，Sal B，TSN和18GAGly RSD分別為091%，086%，030%。表明儀器精密度良好。

225穩(wěn)定性考察取供試品溶液，按221項(xiàng)下色譜條件在0，2，4，8，16，24 h分別進(jìn)樣，Sal B，TSN和18GAGly 的RSD分別為12%，13%，12%，說明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定，可用于含量測定。

226重復(fù)性考察按照供試品制備方法平行制備6份供試品溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣，Sal B，TSN和18GAGly的RSD分別為14%，10%，19%，說明該方法重復(fù)性合格。

227加樣回收率考察精密吸取空白脂質(zhì)體05 mL置5 mL量瓶中，分別精密加入500 mg·L-1 Sal B，500 mg·L-1 TSN，500 mg·L-118GAGly對照品儲備液各05 mL，制得脂質(zhì)體混懸液，平行操作6份，分別以022 μm微孔濾膜濾過，分別測定Sal B，TSN，18GAGly含量?；厥章蕦?shí)驗(yàn)結(jié)果表明Sal B，TSN，18GAGly平均回收率分別為9646%，9766%，9573%，RSD均小于20%，方法回收率合格。

23脂質(zhì)體的制備及表征

231脂質(zhì)體制備方法稱量TSN，配體18GAGly（TSLip不加入配體），磷脂（SPC），膽固醇（CH）（SPCCH質(zhì)量比6∶1，SPCTSN物質(zhì)的量之比30∶1），超聲共融于無水乙醇，水浴減壓旋蒸除去無水乙醇，圓底燒瓶內(nèi)壁形成均勻薄膜，加入適量純水水合，使形成的脂質(zhì)體從瓶壁分離下來。經(jīng)水合得到的脂質(zhì)體混懸液在水浴條件下，經(jīng)380 W探頭超聲進(jìn)行勻化處理，后用高壓乳勻機(jī)進(jìn)行均質(zhì)處理，然后逐滴加入Sal B的甘氨酸鹽酸緩沖溶液（pH 332），搖勻后30 ℃水浴孵化30 min得到肝靶向脂質(zhì)體及普通脂質(zhì)體（TSLip）。

232脂質(zhì)體的形態(tài)觀察采用磷鎢酸負(fù)染透射電鏡觀察。取適量樣品（稀釋25倍）滴于300目銅網(wǎng)表面，15 min 后用濾紙吸去多余液體，再在銅網(wǎng)表面滴入1滴2%磷鎢酸溶液染色3 min，濾紙吸去多余液體，自然晾干后測定。endprint

233脂質(zhì)體的粒徑分布及電位測定吸取待測定脂質(zhì)體混懸液08 mL于塑料離心管中，加入純水稀釋100倍，用馬爾文粒徑檢測儀分別測定粒徑、多分散系數(shù)（PDI）及電位結(jié)果。

234包封率及載藥量測定[8] 取1 mL待測定脂質(zhì)體混懸液于15 mL離心管中2 000 r·min-1離心5 min，取上清加甲醇稀釋，超聲制備液相樣品，UPLC測定脂溶性藥物TSN/配體含量為W1；剩余脂質(zhì)體混懸液繼續(xù)15 000 r·min-1離心30 min，取上層液體清液置超濾管中6 000 r·min-1離心30 min，精密移取下層濾過液01 mL加入01 mL甲醇超聲溶解，UPLC測定Sal B含量為W2；另精密移取未離心脂質(zhì)體混懸液加入甲醇超聲，UPLC測定藥物含量為W總。配體結(jié)合率計(jì)算公式為EE=W1/W總×100%，Sal B包封率計(jì)算公式為EE=1-（W2×2）/（W總×10）×100%，TSN包封率計(jì)算公式EE=W1/W總×100%。

24小鼠體內(nèi)分布考察方法

241色譜條件[9] ACQUITY BEH C18色譜柱（21 mm×50 mm，17 μm），流動相乙腈（A）05%甲酸溶液（B），梯度洗脫（0～15 min，20%～25%A；15～3 min，25%～64%A；3～51 min，64%A；51～58 min，64%～90%A；58～60 min，90%～20%A），流速10 mL·min-1，進(jìn)樣量1 μL，樣品室溫度-4 ℃，檢測波長Sal B 289 nm，TSN 265 nm。

242血漿處理方法[8] 精密吸取小鼠血漿150 μL置15 mL EP管中，加入內(nèi)標(biāo)氯霉素（IS）10 μL（02 g·L-1），甲酸水溶液（1∶3）50 μL，繼續(xù)加入乙酸乙酯 1 mL，渦旋振蕩 3 min，15 000 r·min-1離心10 min以分離蛋白，將上清液全部轉(zhuǎn)移置另一EP管中，剩余沉淀繼續(xù)加入乙酸乙酯溶液1 mL 同法第二次萃取后合并上清液，37 ℃水浴條件下于氮吹儀上揮干，殘?jiān)?100 μL甲醇復(fù)溶，渦旋振蕩1 min后于15 000 r·min-1離心10 min，取上清液1 μL進(jìn)樣UPLC 分析。

243血漿含量檢測方法[8] 血漿內(nèi)檢測藥物為Sal B，TSN，241項(xiàng)下色譜條件藥物與內(nèi)標(biāo)物分離良好，可以準(zhǔn)確的檢測處理后的血漿樣品中Sal B和TSN的含量。以待測成分與內(nèi)標(biāo)峰面積的計(jì)算比值帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算血漿內(nèi)藥物含量。標(biāo)準(zhǔn)曲線為YSal B=18412 3X-0363 6，r=0995 9，在0010 0～0600 0 g·L-1線性良好；YTSN =82369 0X+0071 1，r=0999 4，在0000 25～0100 0 g·L-1線性良好。

244組織處理方法各臟器處理前自然解凍，剪碎后稱重，加入15倍生理鹽水制備組織勻漿。小鼠心、脾、肺組織全量，肝、腎組織移液槍移取勻漿液500 μL至EP管中，分別加入甲酸水（1∶3）混合溶液，（肝、腎 70 μL；心、脾、肺50 μL），精密加入標(biāo)準(zhǔn)對照IS 10 μL，繼續(xù)加入乙酸乙酯1 mL，渦旋振蕩3 min，15 000 r·min-1離心10 min以分離蛋白，將上清液全部轉(zhuǎn)移至另一EP管中，剩余沉淀繼續(xù)加入乙酸乙酯溶液1 mL按前述方法渦旋震蕩進(jìn)行萃取，合并2次萃取清液，37 ℃水浴條件氮?dú)獯蹈桑瑲堅(jiān)?00 μL甲醇復(fù)溶，渦旋振蕩1 min后于15 000 r·min-1離心10 min，取上清液1 μL進(jìn)樣UPLC分析。

245各組織含量計(jì)算方法[8] 各臟器內(nèi)檢測藥物為Sal B，TSN，以待測成分與內(nèi)標(biāo)峰面積的計(jì)算比值帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算藥物含量。標(biāo)準(zhǔn)曲線見表1，2，該方法精密度、穩(wěn)定性、回收率均良好。

246動物分組和血漿、組織采集KM小鼠100只，雄性，20～25 g，隨機(jī)分為2組，分別為GlyTSLip組和STLip組，給藥前24 h禁食不禁水。各組小鼠分為10個時間點(diǎn)，每個時間點(diǎn)5只，分別尾靜脈注射GlyTSLip和TSLip脂質(zhì)體，每只小鼠025 mL/只，給藥劑量折合小鼠劑量含藥質(zhì)量濃度為Sal B 4825 mg·kg-1，TSN 488 mg·kg-1。3組小鼠分別采用尾靜脈注射給藥方式分別注射2種脂質(zhì)體，并于給藥后0083，0167，033，05，075，1，15，2，4，6 h摘眼球取血，獲得心、肝、脾、肺、腎組織用生理鹽水沖洗凈表面血液，濾紙吸去多余水分，稱重后于-20 ℃保存，檢測前自然解凍。

247數(shù)據(jù)處理與分析檢測不同脂質(zhì)體組小鼠血漿及臟器勻漿中的藥物含量，為排除模型干擾，采用DAS 32軟件按非房室模型對血漿數(shù)據(jù)及小鼠組織中藥物含量進(jìn)行處理，繪制血藥濃度時間曲線，采用SAS 81對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。兩兩比較采用T檢驗(yàn)，多組之間的兩兩比較分析采用OneWay ANOVA方差分析法。繪制各組組織藥物濃度時間柱形圖，可視化的比較配體后脂質(zhì)體在小鼠體內(nèi)的靶向效果。并用處理后的藥代動力學(xué)參數(shù)計(jì)算相對攝取率（RE），最大峰濃度之比（CE）和靶向效率（TE），評價靶向性的指標(biāo)[9]。RE=AUC配體修飾脂質(zhì)體/AUC未加配體脂質(zhì)體，CE=Cmax配體修飾脂質(zhì)體/Cmax未加配體脂質(zhì)體，TE=AUC肝/AUC其他臟器。

3結(jié)果

31脂質(zhì)體制劑學(xué)性質(zhì)考察

GlyTSLip粒徑為（2056 ± 1951）nm，多分散系數(shù)PDI（0460 ± 004），電位為（-247 ± 015）mV。Sal B，TSN的包封率和18GAGly結(jié)合率分別為（8309 ± 175）%，（7549 ± 223）%，（9795 ± 185）%。電鏡結(jié)果顯示脂質(zhì)體粒徑分散均勻，粒徑大小位于200 nm左右，數(shù)據(jù)表及粒徑、電位見圖2。endprint

A粒徑分布； B電位分布（圖3同）。

TSLip粒徑為（1786 ± 734）nm，多分散系數(shù)PDI（0405 ± 003），電位為（-277 ± 095）mV。Sal B，TSN的包封率分別為（8245 ± 164）%，（7965 ± 1049）%。電鏡結(jié)果顯示脂質(zhì)體粒徑分散均勻，粒徑大小位于 150～200 nm，粒徑、電位見圖3。

由上述結(jié)果可以看出，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)高壓乳勻法制備的2種脂質(zhì)體GlyTSLip，TSLip粒徑及電位數(shù)據(jù)良好，包封率符合要求。

32小鼠血漿及組織藥物含量

321血藥濃度時間曲線及藥代動力學(xué)參數(shù)以取血時間為橫坐標(biāo)，以Sal B，TSN 2種藥物濃度為縱坐標(biāo)，繪制脂質(zhì)體GlyTSLip和TSLip尾靜脈注射后的血藥濃度時間曲線，結(jié)果見圖4。2組小鼠血漿數(shù)據(jù)經(jīng)DAS 32處理后的藥動學(xué)參數(shù)結(jié)果見表3。

對GlyTSLip與TSLip的血漿數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，

ASal B；BTSN。

圖4尾靜脈注射給藥GlyTSLip組和TSLip組小鼠平均藥時曲線（±s，n=5）

Fig4Mouse plasma concentration of Sal B and TSN in GlyTSLip group and TSLip group by iv administration（±s，n=5）

2組脂質(zhì)體經(jīng)尾靜脈注射給藥后的Sal B和TSN的藥動學(xué)行為有一定的差別。給藥075 h后GlyTSLip組和TSLip組中Sal B均快速降解，但隨時間延長，GlyTSLip組Sal B分解減慢，推測修飾配體后的GlyTSLip一定程度上提升了Sal B的穩(wěn)定性；將2組藥動學(xué)參數(shù)進(jìn)行比較，GlyTSLip組Sal B的半衰期小于TSLip組，但不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；GlyTS

Lip組與TSLip組AUC差異不明顯，Sal B和TSN在GlyTSLip組略大于TSLip組，分別為117，127倍。

322小鼠體內(nèi)分布結(jié)果根據(jù)GlyTSLip及TSLip 2組脂質(zhì)體尾靜脈注射后不同時間點(diǎn)各組織中藥物含量繪制組織分布柱狀圖。

2組小鼠均在脾、肺組織中檢測到大量Sal B，這應(yīng)該與脂質(zhì)體的被動靶向作用有關(guān)，同時前期藥劑學(xué)性質(zhì)檢驗(yàn)結(jié)果顯示脂質(zhì)體理化性質(zhì)欠佳，也會對脂質(zhì)體分布結(jié)果產(chǎn)生一定影響。2組脂質(zhì)體給藥劑量一致，GlyTSLip組在肝組織中累積的Sal B含量略高于未修飾配體的TSLip組，說明18GAGly配體修飾脂質(zhì)體對水溶性藥物Sal B有一定的肝靶向效果，但結(jié)果無顯著性差異，見圖5。

2組脂質(zhì)體在肺組織中均積累較多，一方面可能是由于脂質(zhì)體的被動靶向作用，另一方面，文獻(xiàn)[2]發(fā)現(xiàn)TSN原藥在小鼠體內(nèi)有明顯的肺靶向現(xiàn)

AGlyTSLip；BTSLip（圖6同）。

圖5尾靜脈注射GlyTSLip和TSLip后各組小鼠Sal B組織分布情況（±s，n=5）

Fig5Distribution of Sal B in mice organs at different time points after intravenous administration of GlyTSLip and TSlip（±s，n=5）

象。比較2組小鼠在肝組織積累的TSN含量可以看出，GlyTSLip組相較TSLip組TSN含量檢測更高、檢測到時間更長，顯示18GAGly配體對脂溶性TSN有一定的肝組織靶向作用，見圖6。

323靶向性考察結(jié)果比較2組小鼠肝組織對Sal B和TSN的相對攝取率（Re）結(jié)果，GlySLip組脂質(zhì)體的水溶性Sal B相較TSLip組在肝組織內(nèi)含量沒有顯出相對攝取率提高的效果，統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果無顯著性差異，見表4，5。GlyTSLip組的TSN為TSLip組的506倍，說明18GAGly配體修飾后可以實(shí)現(xiàn)TSN在肝組織的聚集，實(shí)現(xiàn)肝組織的靶向效果。推測Sal B和TSN靶向效果差異的原因，可能是脂溶性的TSN相比水溶性Sal B可以牢牢鏈接于磷脂雙分子膜上，實(shí)現(xiàn)肝組織靶向。比較Ce結(jié)果可以看出，GlyTSLip組在肝組織的Sal B和TSN的Ce大于TSLip組，說明18GAAla配體修飾脂質(zhì)體可以增大Sal B和TSN在肝組織的峰濃度。GlyTSLip在肝與其他臟器中靶向效率比較，見表6。

4討論

通過尾靜脈方式給藥考察血藥濃度時間曲線及組織分布情況，結(jié)果顯示18GAGly配體修飾脂質(zhì)體可以提升Sal B和TSN在肝組織積累的峰濃度，但是肝靶向效果并不十分明顯，GlyTSLip組Sal B在肝組織之中的AUC分別是脾、肺、腎組織的

005，052，135倍，TSN在脾、肺腎的AUC分別是TSLip組對應(yīng)組織的066，006，203倍。推測脂質(zhì)體被動靶向作用明顯，導(dǎo)致在肝組織積累的藥物含量低于脾、肺組織，影響到肝靶向性考察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

本文選用的肝靶向配體18GAGly，與作者之前文獻(xiàn)[8，10]報道肝靶向配體3琥珀酸30硬脂醇甘草次酸酯（18GAsuc）和甘氨酸丁二酸甘草次酸十八烷酯（18GAGly）結(jié)構(gòu)相似。其中18GAsuc是以甘草次酸為母核，同時連接了親水基團(tuán)和親脂基團(tuán)，使其具備兩親性而便于鑲嵌于脂質(zhì)體磷脂雙分子層。但總體而言其親脂性仍然比較強(qiáng)。18GAGly和18GAAla則是在18GAsuc上進(jìn)一步分別鏈接了親水基團(tuán)甘氨酸和丙氨酸。作者的目的是希望通過改變親水性以實(shí)現(xiàn)改變肝靶向配體的肝靶向性，以便找出更強(qiáng)肝靶向性的肝靶向配體。但文獻(xiàn)[8，10]顯示18GAsuc和18GAAla肝靶向性較為明顯，結(jié)合本文結(jié)果推斷，推測肝靶向性與配體的親水性無直接關(guān)系，與配體所連接的基團(tuán)結(jié)構(gòu)有關(guān)。

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[責(zé)任編輯孔晶晶]endprint