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    2017年蘇州市規(guī)模豬場(chǎng)豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查

    2017-11-17 06:27:01顧津僮盛水興何文峰徐嘉萍
    獸醫(yī)導(dǎo)刊 2017年14期
    關(guān)鍵詞:野毒狂犬狂犬病

    顧津僮 盛水興 何文峰 徐嘉萍

    (江蘇省蘇州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,江蘇蘇州 215125)

    2017年蘇州市規(guī)模豬場(chǎng)豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查

    顧津僮 盛水興 何文峰 徐嘉萍

    (江蘇省蘇州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,江蘇蘇州 215125)

    為了解我蘇州地區(qū)豬偽狂犬病的野毒感染情況,對(duì)蘇州市3個(gè)市(區(qū))的15家自繁自養(yǎng)規(guī)模豬場(chǎng)共971份豬血清樣品進(jìn)行了豬偽狂犬病gB抗體和gE抗體的監(jiān)測(cè)與分析,結(jié)果顯示:971份樣品中,偽狂犬gE抗體陽(yáng)性497份,gE抗體陽(yáng)性率為51.15%,其中生產(chǎn)母豬樣品394份,偽狂犬gE抗體陽(yáng)性率為63.2%;公豬樣品130份,偽狂犬gE抗體陽(yáng)性率為46.92%。結(jié)果顯示,蘇州地區(qū)中存在豬偽狂犬病痛毒感染,且某些豬場(chǎng)豬偽狂犬病病毒的感染率較高。

    豬偽狂犬病;血清學(xué)調(diào)查;凈化

    豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的豬的急性傳染病。該病在豬呈爆發(fā)性流行。引起妊娠母豬流產(chǎn)、死胎,公豬不育,新生仔豬的大量死亡,育肥豬呼吸困難、生長(zhǎng)停滯等,是危害全球養(yǎng)豬業(yè)的重大傳染病之一[1]。偽狂犬病毒在全世界廣泛分布,偽狂犬病自然發(fā)生于豬、牛、綿羊、犬和貓,另外,多種野生動(dòng)物、肉食動(dòng)物也易感。我國(guó)將其列為二類動(dòng)物疫病。2006~2007年度,豬偽狂犬病在全國(guó)大范圍的傳播流行,使豬病的感染流行復(fù)雜化;2011年以來(lái),豬偽狂犬變異株在全國(guó)多地區(qū)流行,造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

    疫苗接種是預(yù)防和控制偽狂犬病的根本措施。目前我國(guó)普遍使用的是偽狂犬病病毒gE基因缺失疫苗,且使用偽狂犬病毒gE抗體ELISA檢測(cè)試劑盒能夠檢測(cè)豬群中的偽狂犬野毒感染豬[2]。為了解我市豬偽狂犬的免疫和野毒感染情況,2017年2月至6月,對(duì)我市部分地區(qū)的18個(gè)自繁自養(yǎng)規(guī)模豬場(chǎng)進(jìn)行偽狂犬病抗體監(jiān)測(cè),希望能為我市偽狂犬病的防控和凈化提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 樣品來(lái)源

    2017年2月-2017年6月,采自蘇州市常熟市、太倉(cāng)市、吳江區(qū)共18家自繁自養(yǎng)規(guī)模豬場(chǎng)的971份豬血清樣品。其中有15家豬場(chǎng)均免疫豬偽狂犬gE基因缺失疫苗,有3家豬場(chǎng)未免疫豬偽狂犬疫苗。

    1.2 檢測(cè)試劑

    美國(guó)IDEXX公司生產(chǎn)的偽狂犬gB抗體檢測(cè)試劑盒,批號(hào):HM634、LM951、CN405;美國(guó)IDEXX公司生產(chǎn)的偽狂犬gE抗體檢測(cè)試劑盒,批號(hào):KM818、AN178、CN428。

    1.3 試驗(yàn)儀器

    微量移液器、微量振蕩儀、洗板機(jī)、酶標(biāo)儀等。

    1.4 方法步驟

    采取ELISA方法檢測(cè):1取出抗原包被板,在每孔中加入50μl樣品稀釋液,在相應(yīng)的孔中加入50μl陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照和待檢樣品,充分混勻,陰、陽(yáng)性對(duì)照各兩孔,在室溫下孵育60in;2用300ul洗滌液洗板5次,在吸水材料上拍干后,每孔加入100μl酶標(biāo)抗體,在室溫下孵育20min;3再用300μl洗滌液洗板5次,在吸水材料上拍干后,每孔加入100μlTMD底物溶液,在室溫下避光孵育15min;4每孔加入50μl終止液終止反應(yīng);5酶標(biāo)儀調(diào)至650nm波長(zhǎng),讀取對(duì)照及樣品的OD值。

    1.5 結(jié)果判定

    S/N=樣品OD值/陰性對(duì)照OD值。S/N值小于等于0.6判定為抗體陽(yáng)性,S/N值大于0.7判定為抗體陰性,S/N值大于0.6同時(shí)小于等于0.7的判定為可疑。

    2 結(jié)果

    (1)對(duì)18個(gè)自繁自養(yǎng)的規(guī)模豬場(chǎng)偽狂犬疫苗免疫情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì),15個(gè)場(chǎng)使用了偽狂犬疫苗,占采樣場(chǎng)數(shù)的83.33%。疫苗免疫場(chǎng)共采集樣品864份,其中PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)686份,陽(yáng)性率79.40%,PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)446份,陽(yáng)性率51.62%。3個(gè)未免疫場(chǎng)共采集樣品107份,PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)65份,陽(yáng)性率60.75%;PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)51份,陽(yáng)性率47.66%。(見表1、表2)

    (2)本次調(diào)查的18個(gè)豬場(chǎng)偽狂犬野毒感染場(chǎng)達(dá)100%,其中PRV gE抗體陽(yáng)性率大于10%的場(chǎng)(高風(fēng)險(xiǎn)場(chǎng))有17個(gè),占94.44%;PRV gE抗體陽(yáng)性率達(dá)到100%的場(chǎng)有3個(gè),占16.66%。

    表1 免疫豬場(chǎng)偽狂犬病gB抗體和gE抗體檢測(cè)結(jié)果

    (3)本次調(diào)查按照生產(chǎn)母豬、公豬、后備母豬、育肥豬分別進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)(見表3):生產(chǎn)母豬樣品共394份,PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)364份,陽(yáng)性率92.39%;PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)249份,陽(yáng)性率63.2%。公豬樣品共130份,PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)110份,陽(yáng)性率84.62%;PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)61份,陽(yáng)性率46.92%。后備母豬樣品共195份,PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)146份,陽(yáng)性率74.87%;PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)95份,陽(yáng)性率48.72%。育肥豬樣品共252份,PRV gB抗體陽(yáng)性數(shù)135份,陽(yáng)性率77.34%;PRV gE抗體陽(yáng)性數(shù)92份,陽(yáng)性率36.51%。

    (4)據(jù)統(tǒng)計(jì),公豬樣品采自17個(gè)豬場(chǎng),16個(gè)場(chǎng)被檢出PRV gE抗體,公豬野毒感染場(chǎng)占94.12%;生產(chǎn)母豬樣品采自17個(gè)豬場(chǎng),17個(gè)場(chǎng)均檢出PRV gE抗體,生產(chǎn)母豬野毒感染場(chǎng)達(dá)100%;后備母豬樣品采自13個(gè)豬場(chǎng),8個(gè)場(chǎng)檢出PRV gE抗體,后備母豬野毒感染場(chǎng)占61.54%;育肥豬樣品采自15個(gè)豬場(chǎng),8個(gè)場(chǎng)檢出PRVgE抗體,育肥豬野毒感染場(chǎng)占53.33%。

    表2 未免疫豬場(chǎng)偽狂犬病gB抗體和gE抗體檢測(cè)結(jié)果

    表3 不同豬群偽狂犬gB抗體和gE抗體檢測(cè)結(jié)果

    3 分析與討論

    (1)本次調(diào)查顯示,蘇州市部分地區(qū)豬偽狂犬野毒感染很嚴(yán)重,感染率達(dá)51.18%,調(diào)查的18個(gè)豬場(chǎng)均有不同程度的野毒感染,且這18個(gè)豬場(chǎng)分布于3個(gè)市(區(qū)),說明偽狂犬病毒的感染在我市分布較為廣泛。根據(jù)調(diào)查,這18個(gè)豬場(chǎng)中有2個(gè)豬場(chǎng)表示曾確診過豬偽狂犬病,其他豬場(chǎng)均未曾確診相關(guān)病例;但據(jù)統(tǒng)計(jì)這些場(chǎng)的平均死胎流產(chǎn)等繁殖障礙率為2.69%,平均仔豬早期死亡率為7.69%,說明大多數(shù)豬場(chǎng)呈隱形感染狀態(tài)。綜上調(diào)查,筆者認(rèn)為本地區(qū)開展偽狂犬防控和凈化措施已迫在眉睫。

    (2)調(diào)查顯示我市偽狂犬病免疫效果層次不齊,未免疫場(chǎng)占本次調(diào)查的16.67%,免疫場(chǎng)中多數(shù)場(chǎng)存在免疫程序不規(guī)范、疫苗接種形式單一、疫苗選擇不科學(xué)等問題。因此,加強(qiáng)偽狂犬病疫苗免疫是防控偽狂犬病的首要任務(wù):選擇質(zhì)量穩(wěn)定的疫苗,滅活苗和弱毒苗科學(xué)使用;根據(jù)當(dāng)?shù)亓餍袪顩r和疫苗廠家的推薦,指定符合各豬場(chǎng)切實(shí)有效的免疫程序,不要盲目、片面的免疫;加強(qiáng)仔豬和育肥豬的免疫,采用滴鼻+肌注的形式免疫接種。

    (3)本次調(diào)查的18個(gè)豬場(chǎng)的野毒感染率非常高,很大程度上是因?yàn)楣i和生產(chǎn)母豬野毒感染非常嚴(yán)重引起的,公豬和生產(chǎn)母豬的PRV gE抗體陽(yáng)性率分別達(dá)到46.92%和63.2%。由于規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)一般都是采取“自繁自養(yǎng)”方式,若種豬感染偽狂犬病則該病將在養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)持續(xù)存在[3],做好種豬PRV野毒抗體檢測(cè),及時(shí)清除帶毒豬,加快培育健康優(yōu)質(zhì)的后備豬群,并結(jié)合進(jìn)行免疫抗體的監(jiān)測(cè)和評(píng)估,對(duì)偽狂犬病的控制和凈化至關(guān)重要[4]。

    (4)本次試驗(yàn)同時(shí)對(duì)偽狂犬gB抗體和gE抗體進(jìn)行了檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果顯示gB抗體陽(yáng)性率為77.34%,但由于gE野毒抗體的陽(yáng)性率也較高,因此本次偽狂犬gB抗體的檢測(cè)結(jié)果并不能準(zhǔn)確反映疫苗免疫效果的好壞,只能作為部分參考用。但筆者建議常規(guī)監(jiān)測(cè)中仍應(yīng)同步檢測(cè)gB抗體與gE抗體,在凈化工作中掌握好仔豬的母源抗體水平、野毒陰性豬的免疫抗體保護(hù)水平非常重要,免疫程序的制定也需要清楚免疫抗體的消長(zhǎng)規(guī)律。

    (5)偽狂犬病毒感染與豬場(chǎng)生物安全管理、區(qū)域病毒變異及豬群自身免疫水平相關(guān)[5]。良好的飼養(yǎng)管理水平,完善的生物安全措施,是凈化偽狂犬病的必要條件。如豬場(chǎng)禁養(yǎng)犬貓,定期滅鼠、殺蟲,定期對(duì)豬舍、場(chǎng)地、用具消毒,飼喂優(yōu)質(zhì)、新鮮飼料,對(duì)病死豬嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)害化處理等措施。

    (6)《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃(2012-2020)》中已明確豬偽狂犬病的根除計(jì)劃,我省也出臺(tái)了多種政策來(lái)促進(jìn)豬偽狂犬病的凈化工作,各大科研機(jī)構(gòu)對(duì)豬偽狂犬病的研究不斷深入,再加上各豬場(chǎng)對(duì)豬偽狂犬病的凈化意識(shí)逐漸提高。筆者相信偽狂犬病的形勢(shì)會(huì)不斷好轉(zhuǎn),很快達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)。

    [1]陸承平.獸醫(yī)微生物學(xué)[M]. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2001:411-483.

    [2]楊文萍,顧真慶,孫海鳳,等.偽狂犬病毒流行毒株的抗原性和血清中和特性分析[J].畜牧與獸醫(yī),2014,46(10):11-14.

    [3]王瓊秋,李阿黑,蘇寶昆,等.綠春縣2003-2008年豬偽狂犬病血清流行病學(xué)調(diào)查[J].中國(guó)畜禽種業(yè),2009,(3):35-36.

    [4]畢峻龍,楊培昌,肖俊,等.2009年-2003年云南省楚雄地區(qū)豬偽狂犬病血清流行病學(xué)調(diào)查和防控措施研究[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2015,36(4):117-120.

    [5]焦顯芹,杜紅喜,賀紀(jì)云,等.我國(guó)規(guī)?;i場(chǎng)偽狂犬病野毒感染規(guī)律的調(diào)查[J].畜牧與獸醫(yī),2014,46(11):92-96.

    江蘇省農(nóng)業(yè)三新工程項(xiàng)目“生豬偽狂犬病綜合凈化技術(shù)”合同編號(hào):SXGC[2016]084

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