水飛薊賓對裸鼠皮膚質(zhì)量影響的實驗研究

王雪　付巍　楊柳　李建民　徐艷明

[摘要]目的 研究水飛薊賓乳霜對中波紫外線（UVB）誘導(dǎo)的裸鼠皮膚損傷模型的影響，包括對皮膚水分、pH值、黑色素和血紅素的影響。方法 將40只裸鼠分成空白組、模型組、陽性對照組和水飛薊賓組4組，每組10只?？瞻捉M每天給與撫摸，模型組每天給與撫摸后進(jìn)行UVB照射，陽性對照組和水飛薊賓組在接受UVB照射前分別將資生堂悠萊甄彈柔采和水飛薊賓乳霜均勻地涂抹在裸鼠的背部皮膚上，然后對模型組、陽性對照組和水飛薊賓進(jìn)行UVB照射，每次照射20 min，連續(xù)照射15 d，使裸鼠的背部皮膚受損，照射結(jié)束后采用德國CK公司生產(chǎn)的皮膚測試儀對裸鼠的背部皮膚進(jìn)行檢測。結(jié)果 模型組與空白組相比，水分含量明顯減少，pH值增高，黑色素與血紅素的含量明顯增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；陽性組和水飛薊賓組與空白組和模型組相比，水分含量增加，pH值下降，黑色素和血紅素含量明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 中藥化妝品水飛薊賓可以提高皮膚的含水量，減少色素沉著，降低外界刺激對皮膚的傷害，對已受損的皮膚具有良好的修復(fù)和改善作用。

[關(guān)鍵詞]裸鼠；水分；pH值；黑色素；血紅素

[中圖分類號] R-332 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）10（c）-0117-03

Experimental study on the effect of Silybin on skin quality of nude mice

WANG Xue1 FU Wei2 YANG Liu1 LI Jian-min1▲ XU Yan-ming1▲

1.Experimental Center，Jiamusi College of Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine，Jiamusi 150047，China；2.Department of Medicine，Cancer Hospital of Jiamusi City in Heilongjiang Province，Jiamusi 154007，China

[Abstract]Objective To study the influence of Silybin cream on skin damage of nude mice model induced by UVB，including skin moisture，pH value，melanin and heme.Methods 40 nude mice were divided into 4 group，they were the blank group，the model group，the positive control group and the Silybin group.The blank group was given a touch every day，and the model group was given UVB exposure every day after touching.Nude mice′s back in the positive control group and the Silybin group was smeared by Shiseido yurao zhenlai and Silybin cream before irradiated by UVB，nude mice in the model group，the positive control group and the silybin group were irradiated by UVB for 15 days continually，each time 20 min，the back of nude mice was damaged，the back was tested by the skin tester produced by German CK company after irradiating.Results The moisture content in the model group decreased distinctively compared with the blank group，pH value increased，melanin and heme content increased，with significant difference （P<0.05）.The moisture content in the positive control group and the Silybin group increased compared with the blank group and the model group，pH value decreased，melanin and heme content decreased，with significant difference （P<0.05）.Conclusion Silybin can increase skin moisture，decrease hyper pigmentation，reduce skin damaged by outside stimulus，and repair damaged skin effectively.

[Key words]Nude mice；Moisture；pH value；Melanin；Hemoglobin

隨著人們生活水平的提高和現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，化妝品的種類越來越多，目前大多數(shù)人熱衷于中藥化妝品的研發(fā)和使用。中藥化妝品是由純中藥制成或在中藥或中藥有效成分中添加化學(xué)成分的一種用于改善皮膚質(zhì)量的物質(zhì)。該化妝品與現(xiàn)代化妝品相比具有歷史悠久、功能多樣、純天然性和整體辨治的特點?，F(xiàn)代研究顯示，中藥水飛薊賓具有保肝、抗腫瘤、改善人體的認(rèn)知功能及抗氧化作用[1]，但中藥水飛薊賓對皮膚質(zhì)量的研究還未見報道。本文采用德國CK公司生產(chǎn)的皮膚測試儀對裸鼠的背部皮膚進(jìn)行檢測，觀察水飛薊賓對皮膚水分、pH值、黑色素和血紅素的影響，現(xiàn)報道如下。endprint

1實驗材料與方法

1.1實驗材料

SPF級雌性健康裸鼠40只，體重10～12g[由長春市億斯試驗動物技術(shù)責(zé)任有限公司提供，合格證號SCXK-（吉）2014-0002]，資生堂悠萊甄彈柔采（上海卓多姿中國化妝品有限公司，批號20161215），水飛薊賓乳霜（自制，批號20150601），德國CK公司生產(chǎn)的皮膚測試儀，紫外光療儀（Sigma公司），紫外線輻照計（北京師范大學(xué)光電儀器廠）。

1.2方法

1.2.1水飛薊賓化妝品的制備 將16醇和十六烷基糖苷、單硬脂酸甘油酯、橄欖油、角鯊?fù)?、十?十八醇混合后升溫至80℃溶解制得油相；將甘油加入去離子水中，升溫至80℃，加入對羥基苯甲酸甲酯，攪拌至全部溶解，制得水相；然后，將水相加入油相中，均質(zhì)8 min，攪拌降溫至40℃，加入用丙二醇分散的水飛薊賓，攪拌至分散均勻，制成含1.0%杜仲提取物的乳霜。

1.2.2儀器使用方法 ①水分的測量：測量時將水分測試探頭垂直地壓在裸鼠背部的皮膚表面，探頭頂部被壓回一段距離，1秒鐘內(nèi)聽到提示聲音并在主機(jī)上顯示結(jié)果。每1個部位測量3次，取平均值。②pH值的測定：測量前先用pH=7.0和pH=4.0的標(biāo)準(zhǔn)溶液對儀器進(jìn)行校正。測量前將測試探頭浸泡于氯化鉀緩沖液中，測試時把探頭放在蒸餾水中清洗一下，輕輕甩掉多余蒸餾水后將探頭垂直放在裸鼠背部的皮膚表面，按一下測試探頭上的綠色開關(guān)，1秒鐘后聽到提示聲音并讀取結(jié)果。每1個部位測量3次，取平均值。③皮膚黑色素的測定：Mexameter MX18具有2個測量參數(shù)，其中M為黑色素數(shù)值，該值越大，說明皮膚中黑色素的含量越高。將儀器的探頭垂直地貼在裸鼠背部的皮膚表面，探頭內(nèi)有一彈簧保證每次測試時探頭的壓力恒定。1秒鐘測試完畢，儀器發(fā)出提示聲音并讀取顯示在屏目上的數(shù)據(jù)。④皮膚血紅素的測定：Mexameter MX18具有2個測量參數(shù)，其中E為血紅素數(shù)值，該值越大，說明皮膚中血紅素的含量越高。將儀器的探頭垂直地貼在裸鼠背部的皮膚表面，探頭內(nèi)有1個彈簧保證每次測試時探頭的壓力恒定。1秒鐘測試完畢，儀器發(fā)出提示聲音并讀取顯示屏數(shù)據(jù)。

1.2.3模型的制備 使用SS-04B型紫外線光療儀，將裸鼠置于紫外光療儀燈具下照射，照射距離40 cm，每天照射20 min，出現(xiàn)水皰、紅腫等，光照暫停至癥狀緩解，照射15 d，達(dá)到累計照射劑量UVB為0.15 mJ/cm2。紫外線的照射劑量按公式以下計算，照射強(qiáng)度通過紫外線輻照計來測定。照射劑量（J/cm2）=照射強(qiáng)度（W/cm2）×照射時間（s）。

1.2.4分組及給藥 將40只雌性裸鼠分成4組，分別是空白組、模型組、陽性對照組和水飛薊賓組。將資生堂悠萊甄彈柔采和水飛薊賓乳霜每天均涂抹在陽性對照組和水飛薊賓組裸鼠的背部皮膚上，每次涂抹至裸鼠的背部皮膚均被相應(yīng)的化妝品覆蓋且厚度適中，涂抹好的裸鼠至于UVB下進(jìn)行照射；模型組每天予以撫摸并在UVB下進(jìn)行照射；空白組每天予以撫摸，不進(jìn)行UVB照射。15 d后采用皮膚測試儀對裸鼠的背部皮膚進(jìn)行檢測，觀察水飛薊賓對裸鼠背部皮膚的影響。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 2結(jié)果

2.1觀察結(jié)果分析

從裸鼠背部的皮膚可以看出給予化妝品的各組與模型組相比皮膚表面光滑有彈性，色素沉著明顯減少。

2.2儀器分析結(jié)果分析

2.2.1對皮膚水分和pH值的影響 陽性組和水飛薊賓組與空白組和模型組相比，水分含量明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而陽性組與水飛薊賓組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），但水飛薊賓組與陽性組相比水分略有增加。陽性組和水飛薊賓組與空白組和模型組相比pH值降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而陽性組和水飛薊賓組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

2.2.2對皮膚黑色素和血紅素的影響 陽性組和水飛薊賓組與空白組和模型組相比黑色素含量明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而陽性組與水飛薊賓組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），但陽性組黑素含量與水飛薊賓組相比略有減少。陽性組和水飛薊賓組與空白組相比血紅素含量有所增加，但無顯著性差異，而陽性組和水飛薊賓組與模型組相比血紅素含量明顯降低，模型組與空白組相比血紅素含量明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

3討論

水是保持皮膚清潔、滋潤、細(xì)嫩的特效而廉價的美容劑。人體皮膚表層水分在12%～15%時，皮膚光滑而有彈性。一旦缺少水分引起的干燥則嚴(yán)重影響肌膚的健康。研究顯示，臉部處于干燥狀態(tài)3 d，皮膚會起皮、長皺紋、皮膚色素沉積加快；干燥時間>7 d，會產(chǎn)生色斑，堆積毒素，需要3個月恢復(fù)；全身干燥狀態(tài)>30 d，會生成各種頑固性色斑、皺紋，皮膚老化速度加快3年[2-5]。中藥通過益氣養(yǎng)血、健運(yùn)脾胃、滋養(yǎng)肺腎等途徑補(bǔ)充了水分的來源，促進(jìn)了水運(yùn)的調(diào)暢，保證了水分在體表的持久作用[6]。

皮膚表面的pH值是機(jī)體生物學(xué)活動在表皮的表達(dá)，還可影響角質(zhì)形成、細(xì)胞甚至真皮的生物學(xué)功能。在不同的生長發(fā)育時期，皮膚表面的pH值會發(fā)生變化，但偏酸性仍然是正常動物pH值的表現(xiàn)。pH值偏高容易引起皮膚干燥和瘙癢，嚴(yán)重者則容易產(chǎn)生接觸性皮炎。研究顯示，長期處在較高pH值的環(huán)境下，會使皮膚產(chǎn)生念珠菌[7]。對皮膚表面pH值的測量是了解皮膚生物狀態(tài)、維持皮膚功能、延緩皮膚衰老、防止和加速某些皮膚病愈合的有效途徑[8-13]。

皮膚顏色能夠反映皮膚屏障的完整性和敏感性，有助于判斷美白祛斑化妝品的功效和色素性皮膚病的診斷和治療，因此對皮膚顏色進(jìn)行客觀的評價在皮膚科學(xué)及美容醫(yī)學(xué)中具有重要的作用[14-16]。endprint

本研究首次采用德國CK公司生產(chǎn)的皮膚測試儀對中波紫外線造成的裸鼠皮膚損傷進(jìn)行測試，結(jié)果顯示水飛薊賓可以改善皮膚的水分和pH值，減少皮膚的色素沉著，從而減輕紫外照射對皮膚的損傷，對提高皮膚質(zhì)量和延緩皮膚衰老有重要的作用。

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（收稿日期：2017-09-11 本文編輯：祁海文）endprint