張改平/中國(guó)工程院
中國(guó)豬瘟防控思考與研究
張改平/中國(guó)工程院
豬瘟是一種流行廣泛,感染豬的一種高傳染性疾病,一但暴發(fā)會(huì)造成嚴(yán)重的損失,雖然我國(guó)目前已經(jīng)有了一系列的防控措施,但風(fēng)險(xiǎn)仍然存在。目前我國(guó)研究豬瘟的團(tuán)隊(duì)眾多,研究課題也比較全面,我國(guó)豬瘟疫苗的發(fā)展處于國(guó)際領(lǐng)先狀態(tài)。
1.疫苗。當(dāng)前疫苗生產(chǎn)廠家過(guò)多,政府采購(gòu)價(jià)格和市場(chǎng)價(jià)不均一,生產(chǎn)疫苗的母源抗體不夠優(yōu)良。
2.檢測(cè)。目前所應(yīng)用的檢測(cè)技術(shù)有:疫苗有效性檢測(cè)技術(shù)、抗體評(píng)價(jià)技術(shù)和病原檢測(cè),在檢測(cè)技術(shù)上還應(yīng)該多加完善。
3.綜合防控。有些豬場(chǎng)對(duì)綜合防控的理解不到位,在防控的技術(shù)操作上有偏差。
1.生物安全防范是動(dòng)物疫病防控的最高境界。
2.建議疫苗廠商整合,平衡市場(chǎng)價(jià)格。
3.加強(qiáng)疫苗質(zhì)量評(píng)價(jià)監(jiān)控,保障疫苗質(zhì)量。
4.用優(yōu)質(zhì)的疫苗免疫,還要把疫苗用好,不盲目免疫。
5.加強(qiáng)疫苗評(píng)價(jià)技術(shù)研究。
6.加強(qiáng)抗體評(píng)價(jià)技術(shù)研究。研發(fā)出了新的CSFV抗體檢測(cè)試紙,其檢測(cè)線使用的抗體為抗豬IgG抗體;對(duì)照線使用的為抗rEms-E2單抗。
C系豬瘟兔化弱毒疫苗雖然是目前最好的疫苗,但是它需要冷鏈運(yùn)輸保存,同時(shí)還會(huì)受母源抗體影響,因此在接下來(lái)的工作中要開發(fā)新經(jīng)典的新型疫苗。理想的豬瘟疫苗,應(yīng)無(wú)短期或長(zhǎng)期副反應(yīng),對(duì)靶動(dòng)物和非靶動(dòng)物遺傳穩(wěn)定,常規(guī)條件下生產(chǎn)工藝穩(wěn)定簡(jiǎn)單,成本低,產(chǎn)生免疫迅速,終生免疫,能夠抵御不同毒株,不形成帶毒者,具有敏感特異的診斷方法。
經(jīng)典的新型疫苗是以新技術(shù)命名的基因工程疫苗、基因疫苗、病毒空殼疫苗等。新型疫苗的研究應(yīng)該以“安全、高效、不浪費(fèi)免疫能力”為原則。新型疫苗的概念要以實(shí)際需求設(shè)計(jì),安全高效,不浪費(fèi)免疫能力,做到精確、純化、微量。
1.結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)上應(yīng)該最大限度誘導(dǎo)保護(hù)性免疫反應(yīng),最大限度降低無(wú)關(guān)反應(yīng)。
2.注意表達(dá)體系的篩選,選擇能夠最大限度滿足結(jié)構(gòu)性表達(dá)的表達(dá)體系。
3.組裝時(shí)要保證結(jié)構(gòu)的正確性。
4.選擇純化方案的原則:從疫苗設(shè)計(jì)開始時(shí)就考慮簡(jiǎn)便、高效的純化方案。
轉(zhuǎn)基因植物疫苗是通過(guò)構(gòu)建植物載體、遺傳轉(zhuǎn)化、植株再生、轉(zhuǎn)基因水稻、E2蛋白純化和動(dòng)物試驗(yàn)這一流程生產(chǎn)出來(lái)的。
1.小鼠試驗(yàn)。使用該疫苗做小鼠免疫試驗(yàn)并觀察體內(nèi)阻斷值的變化,小鼠在免疫后14~56 d內(nèi),E2-9-5和E2-5的阻斷值呈增高態(tài)勢(shì),豬瘟弱毒疫苗和PBS的阻斷值基本維持在20%以下,在免疫28~35 d時(shí)有緩慢下降,在35~49 d內(nèi)又逐漸上升到原來(lái)的水平。
2.豬免疫保護(hù)試驗(yàn)。E2-9-5和E2-5的阻斷值呈增高態(tài)勢(shì)且幅度基本相同;豬瘟弱毒疫苗在免疫14 d以前呈降低趨勢(shì),在14~21 d是趨于平緩,在21 d以后開始逐漸升高;PBS抗體阻斷值基本處于下降的趨勢(shì)。
3.中和試驗(yàn)結(jié)果。E2-9-5和E2-5的抗體含量約在12~13log10TCID50/ml;豬瘟弱毒疫苗抗體含量在6~8log10TCID50/ml;PBS抗體為0。
4.不同劑量、免疫持續(xù)期檢測(cè)。由檢測(cè)數(shù)據(jù)來(lái)看,在相同的免疫持續(xù)期內(nèi),劑量越大阻斷值越高,在免疫周期內(nèi)阻斷值變化越趨于平緩;由PBS在不同免疫周期內(nèi)的阻斷值變化數(shù)據(jù)來(lái)看,其阻斷值會(huì)隨著免疫周期的延長(zhǎng)而逐漸降低。