蔬菜中氨基甲酸酯農(nóng)藥的檢測(cè)方法

摘要：液相色譜儀廣泛應(yīng)用在生物化學(xué)、食品、醫(yī)藥、環(huán)境分析等各種領(lǐng)域。適用于蒸發(fā)溫度低、易揮發(fā)的氨基甲酸酯。農(nóng)藥升溫測(cè)定如吡蟲(chóng)啉、除蟲(chóng)脲、滅幼脲等，檢測(cè)效果較好。

關(guān)鍵詞：蔬菜；農(nóng)藥；檢測(cè)方法

中圖分類(lèi)號(hào)：S132 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A DOI編號(hào)： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.21.047

1液相色譜儀的原理

基本原理使通過(guò)目標(biāo)物分子的有機(jī)相和水相混合溶液中表現(xiàn)的極性不同從而使不同的農(nóng)藥組份分開(kāi)。

2液相色譜儀在蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用（氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的檢測(cè)）

2.1檢測(cè)的范圍

檢測(cè)水果蔬菜中氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥包括吡蟲(chóng)啉、多菌靈、除蟲(chóng)脲、滅幼脲、阿維菌素、涕滅威亞砜、涕滅威砜、涕滅威、三羥基克百威、克百威、甲萘威；12種氨基甲酸酯農(nóng)藥方法檢出限為0.01～0.03毫克/公斤。

2.2實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)儀器華光P600液相色譜儀、脫氣機(jī)，荷蘭進(jìn)口自動(dòng)進(jìn)樣器，配有安捷倫C-18柱子，日本島津的紫外（型號(hào)Essentia SOD-16）和島津熒光（型號(hào)RF-20A）檢測(cè)器。

2.3液相華光P600型設(shè)備原理

樣品經(jīng)前處理后通過(guò)自動(dòng)進(jìn)樣樣品，注入20毫克試樣，通過(guò)C-18的色譜柱時(shí)，吸附在柱的填料中；通過(guò)高壓輸液泵調(diào)節(jié)有機(jī)相和水相的比例。使C-18柱中的目標(biāo)混合物，將先后順序進(jìn)入檢測(cè)器，行程圖譜。

2.4耗材

實(shí)驗(yàn)用的一級(jí)純凈水、乙腈、二氯甲烷、甲醇、農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。

2.5農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

2.5.1單一藥的標(biāo)準(zhǔn)溶液 取某種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物，用甲醇溶劑制成1000毫克/升的農(nóng)藥儲(chǔ)備液置于冰箱冷凍室內(nèi)，使用時(shí)放置于室內(nèi)達(dá)到常溫后，吸收用甲醇稀釋制成標(biāo)準(zhǔn)上機(jī)單一的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.5.2混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 取多種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物分別準(zhǔn)確稱(chēng)量一定量，用甲醇溶解制成1000毫克/升的農(nóng)藥儲(chǔ)備液置于冰箱冷凍室內(nèi)，使用時(shí)放置于室內(nèi)達(dá)到?；旌希傧♂尯笾瞥缮蠙C(jī)用的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液。

2.6使用的儀器

液相色譜儀帶有紫外檢測(cè)器和熒光檢測(cè)器，C-18液相色譜柱；分析試驗(yàn)室常用儀器設(shè)備；食品料理機(jī)；氮吹儀；漩渦混合器；勻漿機(jī)。

2.7實(shí)驗(yàn)步驟

2.7.1實(shí)驗(yàn)樣品制備 按GB/T789的方法抽樣，采用對(duì)角線(xiàn)縮分法把使用部分3公斤濃縮到500克左右，打漿裝入樣品盒中，置于-20℃冰箱冷凍室內(nèi)保存。

2.7.2農(nóng)藥提取 將樣品解凍置于室溫稱(chēng)量25.0克樣品，加入50.0毫升乙腈后勻漿3分鐘，再用濾紙過(guò)濾收集到1000毫升具塞量筒中，加入5～7克Nacl蓋上塞子震蕩1分鐘，靜止45分鐘，使之分層備用。吸取10毫升上清液放入50毫升的燒杯中然后放入70℃水浴鍋中蒸至凈干，向燒杯中加入2毫升的99∶1（二氯甲烷加甲醇）備用，向氨基柱中加入4.0毫升（二氯甲烷加甲醇）溶液，待溶液面到達(dá)吸附層表面時(shí)立即加入待凈化溶液，用10毫升刻度離心管接收洗脫液，然后向燒杯中分3次加入共6毫升的混合液，涮洗后注入氨基柱中回收8毫升洗脫液，將刻度離心管放入40℃水浴鍋中氮吹至近干后用2.5毫升的甲醇溶液定溶轉(zhuǎn)移到上機(jī)小瓶中待測(cè)。

2.7.3農(nóng)藥殘留測(cè)定 使用碳十八液相色譜柱，使色譜柱保持在38℃；用紫外檢測(cè)器檢測(cè)吡蟲(chóng)啉、多菌靈、滅幼脲、阿維菌素、除蟲(chóng)脲等農(nóng)藥；起始的流動(dòng)相比例為水相55%有機(jī)相45%，經(jīng)過(guò)6分鐘水相變?yōu)?5%有機(jī)相45%，運(yùn)行到30分鐘時(shí)水相變?yōu)?0%有機(jī)相為80%，到40分鐘時(shí)水相變?yōu)?0%有機(jī)相變?yōu)?0%，到50分鐘時(shí)水相變?yōu)?5%有機(jī)相變?yōu)?5%。

使用熒光檢測(cè)器檢測(cè)涕滅威、滅多威、甲萘威、克百威等農(nóng)藥，時(shí)間梯度為起始的流動(dòng)相比例為：水相70%，有機(jī)相30%，經(jīng)過(guò)6分鐘水相變?yōu)?0%，有機(jī)相30%。運(yùn)行到19分鐘時(shí)水相變?yōu)?0%，有機(jī)相為70%。到24分鐘時(shí)水相變?yōu)?5%，有機(jī)相變?yōu)?5%。到35分鐘時(shí)水相變?yōu)?0%，有機(jī)相變?yōu)?0%。

2.8液相色譜分析

由自動(dòng)進(jìn)樣器吸取20微升待測(cè)溶液注入系統(tǒng)中，通過(guò)碳十八柱子分離出待測(cè)組分，經(jīng)過(guò)檢測(cè)器形成色譜圖，以各組分的出峰時(shí)間定性；以出峰面積定量。

2.9分析定性

2.9.1結(jié)果分析 采用色譜圖各農(nóng)藥出峰時(shí)間給農(nóng)藥定性；用外標(biāo)法根據(jù)峰面積給農(nóng)藥定量。

2.9.2定量結(jié)果計(jì)算 式樣中被測(cè)農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計(jì)，單位以毫克每公斤（毫克/公斤）表示，按公式：

ω=ρ×V3÷V2×V1÷m

ρ——標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥的質(zhì)量濃度，單位為毫升每升。

V1——提取以毫升為單位的溶劑體積。

V2——吸取以毫升為單位用于檢測(cè)溶液體積。

V3——以毫升為單位定容樣品溶液體積。

m——以克為單位的式樣質(zhì)量。

計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字，當(dāng)結(jié)果大于1毫克/公斤時(shí)保留三位有效數(shù)字。

2.10精密度

實(shí)驗(yàn)精密度按照GB/T6379.2規(guī)定，獲得重復(fù)性和再現(xiàn)性的值以95%的可信度來(lái)計(jì)算。

作者簡(jiǎn)介：孔德志，大專(zhuān)學(xué)歷，中級(jí)農(nóng)藝師，研究方向：蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)。endprint