• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    生物材料的3D打印研究進(jìn)展

    2017-11-13 08:28:02鈺方
    關(guān)鍵詞:支架生物結(jié)構(gòu)

    , , , 鈺方

    (上海理工大學(xué) 材料科學(xué)與工程學(xué)院,上海 200093)

    生物材料的3D打印研究進(jìn)展

    朱敏,黃婷,杜曉宇,朱鈺方

    (上海理工大學(xué) 材料科學(xué)與工程學(xué)院,上海200093)

    在生物醫(yī)藥領(lǐng)域,通過(guò)對(duì)生物材料或活細(xì)胞進(jìn)行3D打印,可構(gòu)建復(fù)雜生物三維結(jié)構(gòu)如個(gè)性化植入體、可再生人工骨、體外細(xì)胞三維結(jié)構(gòu)體、人工器官等,因而基于生物3D打印在個(gè)性化定制及復(fù)雜結(jié)構(gòu)調(diào)控制造上的獨(dú)特優(yōu)勢(shì),綜述了生物3D打印技術(shù)的基本工藝、應(yīng)用領(lǐng)域與研究進(jìn)展.重點(diǎn)針對(duì)3D打印生物材料這一研究熱點(diǎn),全面討論了噴墨打印和注射擠出打印兩種路徑,分析總結(jié)了3D打印相關(guān)生物材料并應(yīng)用于體外模型、醫(yī)療器械和植入體的制造以及可降解組織支架、細(xì)胞三維結(jié)構(gòu)體的構(gòu)建,最后對(duì)該技術(shù)未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)和研究重點(diǎn)提出展望.

    生物材料;3D打印; 生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用; 研究進(jìn)展

    1 生物3D打印技術(shù)概述

    3D打印技術(shù)(three-dimensional printing,3DP),又名快速成型、實(shí)體自由成型、增材制造等,是基于離散-堆積原理,在計(jì)算機(jī)輔助下通過(guò)層層堆積形成三維實(shí)體的有別于傳統(tǒng)減材制造的先進(jìn)制造方法[1-2].因高精度、個(gè)性化制造及復(fù)雜形狀構(gòu)建上的獨(dú)特顯著優(yōu)勢(shì),3D打印滲入了各行各業(yè)并引領(lǐng)創(chuàng)新,引發(fā)全球制造業(yè)產(chǎn)生革命性變革[3-6].

    在生物醫(yī)藥領(lǐng)域,3D打印技術(shù)通過(guò)對(duì)生物材料或活細(xì)胞進(jìn)行3D打印,可構(gòu)建復(fù)雜生物三維結(jié)構(gòu)如個(gè)性化植入體、可再生人工骨、體外細(xì)胞三維結(jié)構(gòu)體、人工器官等[7-9].以3D打印技術(shù)為基礎(chǔ)的組織工程支架和器官打印技術(shù)的發(fā)展[6]是目前3D打印技術(shù)研究的最前沿領(lǐng)域,也是3D打印技術(shù)中最具活力和發(fā)展前景的方向之一.當(dāng)前以組織器官修復(fù)與重建為目的,國(guó)際上開發(fā)了各種生物3D打印技術(shù),包括用于組織工程支架構(gòu)建的熔融擠出技術(shù)、基于噴墨技術(shù)的細(xì)胞打印、細(xì)胞和細(xì)菌的激光直寫以及T細(xì)胞和細(xì)菌的微接觸印刷等[6-10].

    生物3D打印涵蓋的內(nèi)容十分廣泛[11],根據(jù)打印材料的不同可將其劃分為4個(gè)層次的應(yīng)用:

    a. 個(gè)性化體外模型制造.材料為無(wú)需生物相容性和降解性的工程材料,主要為手術(shù)規(guī)劃、假肢設(shè)計(jì)、測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)等制造體外的模型[12-13].

    b. 個(gè)性化植入體制造材料.為具有良好生物相容性且不易降解的生物材料,如鈦合金[14]、聚氨酯類聚合物[15-16]等,用于制造人工假肢植入物、組織缺損部位支撐和替代,以及整形外科.

    c. 可降解組織工程支架制造.針對(duì)組織工程應(yīng)用,要求材料既具有良好的生物相容性又有匹配的降解性能,避免自體或異體組織移植中的問(wèn)題.以支架模擬細(xì)胞外基質(zhì),相應(yīng)細(xì)胞在支架上經(jīng)體外培養(yǎng)后植入體內(nèi),誘導(dǎo)組織再生與修復(fù)[17-18].

    d. 細(xì)胞三維結(jié)構(gòu)體的人工構(gòu)建.材料為活細(xì)胞及其外基質(zhì)材料,如肝細(xì)胞-明膠、干細(xì)胞-膠原等,用于構(gòu)建三維細(xì)胞結(jié)構(gòu)體、體外三維細(xì)胞模型及組織或器官胚體等[19-22].

    這4個(gè)層次的生物3D打印對(duì)生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究、藥物篩選和臨床應(yīng)用都具有重要的促進(jìn)作用.

    通常,生物3D打印的實(shí)施包含3個(gè)步驟:(影像)數(shù)據(jù)獲取與三維模型設(shè)計(jì)、打印墨水(材料和細(xì)胞)選擇和組織構(gòu)架的3D打印工藝.

    1.1(影像)數(shù)據(jù)獲取與三維模型設(shè)計(jì)

    為實(shí)現(xiàn)打印組織或器官最終的功能性及復(fù)雜結(jié)構(gòu)的精確復(fù)制,在打印之前采用醫(yī)學(xué)影像檢查方法收集組織結(jié)構(gòu)和組成信息以構(gòu)建打印模型是至關(guān)重要的.最常見的兩種影像學(xué)手段是CT(計(jì)算機(jī)X射線斷層成像)和MRI(磁共振成像).牙科領(lǐng)域?yàn)楂@得圖像數(shù)據(jù)還會(huì)使用錐形束計(jì)算機(jī)斷層掃描(CBCT).這3種技術(shù)均可獲得二維截面的解剖信息,通過(guò)專業(yè)軟件對(duì)系列截面的三維重構(gòu)建模即可得3D打印機(jī)接受的STL格式圖形文件,繼而最終制造出生物產(chǎn)品三維實(shí)體[23].

    近十多年來(lái),歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家科研機(jī)構(gòu)對(duì)于醫(yī)學(xué)圖像三維重建技術(shù)的研究相當(dāng)活躍,其技術(shù)水平正從后處理向?qū)崟r(shí)跟蹤和交互處理發(fā)展,并且已經(jīng)將超級(jí)計(jì)算機(jī)、光纖高速網(wǎng)、高性能工作站和虛擬現(xiàn)實(shí)結(jié)合起來(lái),代表著這一技術(shù)領(lǐng)域未來(lái)的發(fā)展方向.在市場(chǎng)應(yīng)用領(lǐng)域,如表1所示,目前已有多個(gè)較為成熟的商品化三維醫(yī)學(xué)影像處理系統(tǒng).

    表1 常見商品化三維醫(yī)學(xué)影像處理與分析系統(tǒng)[24]Tab.1 Common 3D medical image analysis and processing systems

    1.2生物材料打印墨水的選擇

    基于生物應(yīng)用指向的3D打印技術(shù),其打印材料組成與其他領(lǐng)域3D打印材料相比具有更多特殊要求.例如,高溫?zé)Y(jié)、有機(jī)溶劑、紫外輻照和交聯(lián)劑等條件在生物3D打印過(guò)程中往往須盡量避免[25].具體來(lái)說(shuō),根據(jù)應(yīng)用目的須考慮以下要求:

    a. 可打印性.材料的黏度、流變和凝膠化等性能直接影響到3D打印的可操作性,決定打印制品的空間和時(shí)間分辨率[26].

    b. 生物相容性.包含生物安全性和生物功能性.材料不僅要求很低的毒性及不引起機(jī)體的任何不良反應(yīng),而且也要求材料在特定的應(yīng)用中激發(fā)機(jī)體的相應(yīng)功能[27].

    c. 降解性.包括材料的降解速度可控性、與組織再生速度的匹配性、降解產(chǎn)物安全性、材料的溶脹和收縮特性等[28].

    d. 結(jié)構(gòu)與機(jī)械性能.3D打印的材料往往具有支撐細(xì)胞和組織三維結(jié)構(gòu)的作用.針對(duì)特定的組織類型,從皮膚、肌肉、軟骨到硬骨,材料打印后須具有不同的力學(xué)強(qiáng)度和微結(jié)構(gòu),尤其是材料的孔隙[29].

    e. 仿生學(xué)特性.材料仿生學(xué)特性有利于刺激細(xì)胞響應(yīng).在生物材料中摻入生物活性組分可對(duì)內(nèi)源或外源細(xì)胞的粘附、遷移、增殖及功能表達(dá)產(chǎn)生積極作用[30-31].另外,材料表面性質(zhì)如化學(xué)基團(tuán)的修飾、粗糙度、親疏水性、微納米結(jié)構(gòu)等直接影響到細(xì)胞的鋪展形狀、分化過(guò)程、運(yùn)動(dòng)、取向、細(xì)胞骨架的組裝,甚至是細(xì)胞內(nèi)部的相關(guān)信號(hào)通路[32].

    1.3生物材料3D打印工藝

    用于生物材料,包括材料/細(xì)胞復(fù)合體材料的3D打印技術(shù)手段主要有兩種類型:噴墨生物打印和注射式生物打印.兩者在打印產(chǎn)品的表面分辨率、細(xì)胞存活率以及生物活性材料選用等方面具有不同特點(diǎn)[7],其工作原理和技術(shù)方法如圖1所示.

    圖1 “生物墨水”的3D打印技術(shù)方法 [7]Fig.1 Two strategies of 3D-printing “Bioinks”

    噴墨式3D打印機(jī)是目前生物3D打印領(lǐng)域最常見的打印機(jī)類型,可實(shí)現(xiàn)連續(xù)和按需噴射.實(shí)際上,3D噴墨打印機(jī)是從傳統(tǒng)的2D打印機(jī)發(fā)展而來(lái),其原理差別不大,只是利用生物材料替代打印墨水,利用一個(gè)可升降的平臺(tái)替代紙張,是低成本和經(jīng)濟(jì)性的3D打印機(jī).目前,多個(gè)研究團(tuán)隊(duì)正致力于研究開發(fā)能夠?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高精確度的含細(xì)胞液滴的3D打印,打印液滴體積可控制在1~300 pl,每秒噴射速度可在1~10 000滴范圍內(nèi)調(diào)節(jié),可以準(zhǔn)確地打印成寬約50 μm的圖案[33-35].

    目前,噴墨式3D打印機(jī)擠出墨水的方式有熱驅(qū)動(dòng)和聲驅(qū)動(dòng)兩種.熱驅(qū)動(dòng)式打印噴頭通過(guò)局部電阻加熱產(chǎn)生氣泡,擠壓噴頭內(nèi)液體獲得液滴[36].這種熱泡擠壓打印噴頭盡管使用范圍較廣,打印速度較快,但是其在液滴方向、均勻性和尺寸控制上表現(xiàn)得不盡如人意,且噴射過(guò)程中產(chǎn)生的熱應(yīng)力、噴頭堵塞、細(xì)胞裸露等問(wèn)題往往對(duì)打印產(chǎn)生不利影響.為克服以上問(wèn)題,可通過(guò)壓電器件的逆壓電效應(yīng)造成材料變形,使噴頭內(nèi)液體體積和壓力發(fā)生變化而擠出液體.聲驅(qū)動(dòng)打印噴頭以聲波配合超聲場(chǎng)來(lái)噴射液滴,擠壓出的液滴大小和擠壓速度可由超聲強(qiáng)度、時(shí)間、脈沖等參數(shù)實(shí)現(xiàn)控制[37].噴墨式3D打印在擠出墨水時(shí)產(chǎn)生的剪切力容易對(duì)細(xì)胞造成損傷,而且要求擠出的材料必須是液態(tài)的形式,極大地限制其應(yīng)用[38].因此,提高噴墨式3D打印細(xì)胞存活率及優(yōu)化打印工藝仍然面臨挑戰(zhàn).

    與噴墨式生物3D打印相比,注射式生物3D打印直接采用壓縮空氣或通過(guò)壓縮空氣直線電動(dòng)機(jī)推動(dòng)的活塞將注射筒中的材料連續(xù)擠出,對(duì)于黏度較大的“生物墨水”的打印優(yōu)勢(shì)更為明顯[33].目前已有文獻(xiàn)報(bào)道的注射式3D打印材料種類相當(dāng)豐富,黏度范圍30~6×107mP·s,可同時(shí)涵蓋打印所需的高強(qiáng)度支撐材料和低黏度含活細(xì)胞材料[39-43].注射式的噴頭設(shè)計(jì)可處理高濃度的細(xì)胞懸浮液,具有構(gòu)建高細(xì)胞濃度的組織和器官的潛能[44].含多種細(xì)胞的細(xì)胞團(tuán)在被擠出沉積后得到的細(xì)胞團(tuán)聚體,在一定程度上具有了類似細(xì)胞外基質(zhì)材料的力學(xué)性能和功能,因而可作為自組裝的單元在粘彈性能驅(qū)動(dòng)下發(fā)生融合和自組裝,形成3D結(jié)構(gòu)[45].這種細(xì)胞團(tuán)自組裝打印技術(shù)對(duì)器官打印時(shí)內(nèi)部血管網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建具有獨(dú)到之處[46].

    2 生物3D打印的應(yīng)用領(lǐng)域

    2.1診斷與手術(shù)規(guī)劃

    近年來(lái),醫(yī)學(xué)方面的3D打印技術(shù)發(fā)展主要在于繼續(xù)發(fā)展醫(yī)療成像技術(shù)、開發(fā)虛擬外科手術(shù)規(guī)劃工具、生產(chǎn)針對(duì)特殊患者的器械以及可以直接植入人體的金屬植入物等. 3D打印的模型提供直觀的、可觸摸的信息,有效地提高診斷和手術(shù)水平,便于醫(yī)生與患者之間的溝通,避免了可能的醫(yī)患矛盾.國(guó)內(nèi)外臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域已有多例借助3D打印技術(shù)進(jìn)行術(shù)前規(guī)劃和模擬的事例.例如2015年,美國(guó)心血管外科醫(yī)生通過(guò)3D打印精細(xì)還原一例“完全型肺靜脈畸形引流”的心臟模型,成功實(shí)施一個(gè)細(xì)節(jié)清晰、過(guò)程復(fù)雜的矯正手術(shù).

    3D打印還可制作精準(zhǔn)貼合的術(shù)中導(dǎo)航模板,主要應(yīng)用在顱頸交界、上頸椎、上胸椎、脊柱側(cè)彎、腫瘤等手術(shù)上[12].臨床上因?yàn)檫@些區(qū)域較復(fù)雜,手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)、難度大,通過(guò)3D打印導(dǎo)航模板來(lái)指導(dǎo)手術(shù)會(huì)大大增加其安全性[47-48].例如華山醫(yī)院利用3D打印手部手術(shù)導(dǎo)板實(shí)現(xiàn)輔助舟狀骨骨折精確經(jīng)皮內(nèi)固定手術(shù).

    2.2個(gè)性化體外模型制造

    牙冠、內(nèi)冠固定橋金屬修復(fù)體以及可摘局部義齒的金屬支架等,其形狀精細(xì)、復(fù)雜,要求精度誤差要控制在微米級(jí).傳統(tǒng)的金屬修復(fù)體制作工序復(fù)雜,需要數(shù)次模型的澆筑、復(fù)制,尤其是蠟型的制作只能依賴于技工手工完成,效率和精度低[49].為解決上述問(wèn)題,近年來(lái)出現(xiàn)了口腔金屬修復(fù)體蠟型直接3D打印成形的方法.目前,加拿大Cynovad公司用于義齒修復(fù)體數(shù)據(jù)采集和蠟型制作的Pro50數(shù)字制造系統(tǒng)、美國(guó)Solidscape公司preXacto系列以及3D Systems公司ProJet系列三維蠟型打印機(jī)就是其中的佼佼者.用陶瓷材料替代金屬進(jìn)行3D打印制作口腔修復(fù)體是該領(lǐng)域的主流趨勢(shì),也是21世紀(jì)牙科修復(fù)的發(fā)展方向[50].3D打印陶瓷修復(fù)體所采用的陶瓷材料除目前臨床常用的IPS Empress鑄造陶瓷和氧化鋁陶瓷外,氧化鋯結(jié)構(gòu)陶瓷材料因強(qiáng)度高、韌性好而被廣泛研究.例如Ebert等[51]利用噴射噴頭進(jìn)行了氧化鋯牙冠的直接噴墨打印成形,打印的成品陶瓷件的咬合面細(xì)節(jié)清晰,壁厚可小至100 μm,強(qiáng)度可高達(dá)1 200 MPa.當(dāng)采用多噴頭打印,還可以成形具有空腔結(jié)構(gòu)的整個(gè)牙冠和支架.

    基于3D打印技術(shù)的假肢制造也為截肢者和醫(yī)生帶來(lái)了全新的高度定制化.例如,Bespoke公司采用3D打印技術(shù)設(shè)計(jì)制造假肢,通過(guò)對(duì)患者“健康”的腿和他們目前假肢的掃描,并進(jìn)行掃描數(shù)據(jù)建模以確定肢體能夠保持身體對(duì)稱,從而打印出與患者的身體和生活方式充分吻合并迎合審美的假肢[52].

    2.3個(gè)性化植入體制造

    目前,國(guó)內(nèi)外已有報(bào)道開始臨床使用的3D打印植入體仍多應(yīng)用于硬組織和關(guān)節(jié)替代或修復(fù).通常骨內(nèi)植入物剛度過(guò)高會(huì)產(chǎn)生應(yīng)力遮擋,自體骨與原松質(zhì)骨得不到合適的力學(xué)刺激,從而引起植入物的松動(dòng);而剛度過(guò)低又會(huì)使植入物斷裂,欠缺力學(xué)強(qiáng)度.利用3D打印技術(shù)能通過(guò)不同人的骨模量來(lái)制造個(gè)體化植入物,各種生物力學(xué)均與人體相近,因而具有廣闊的應(yīng)用前景和傳統(tǒng)技術(shù)不可比擬的優(yōu)勢(shì)[48].更具體地來(lái)說(shuō),3D打印的人工骨在組成、形狀、結(jié)構(gòu)等方面可控,與病灶或缺損能夠準(zhǔn)確匹配,產(chǎn)生與人體組織相似的生物學(xué)特性,有效避免了并發(fā)癥的出現(xiàn),如植入物的沉降、塌陷甚至臨近組織的退變[53].3D打印的人工骨可以制作豐富多變的孔隙結(jié)構(gòu),使得打印骨與自體骨通過(guò)孔隙牢固結(jié)合,大大縮短康復(fù)時(shí)間.北京三院的劉忠軍等率先嘗試了在頸椎、脊柱原發(fā)惡性腫瘤患者體內(nèi)直接植入3D打印的人工椎體和人工骨骼,取得了不錯(cuò)的效果[54].該團(tuán)隊(duì)在2016年成功為一名骨科脊索瘤患者切除五節(jié)段脊椎腫瘤,并利用世界首個(gè)3D打印多節(jié)段胸腰椎植入物完成長(zhǎng)達(dá)19 cm大跨度椎體重建手術(shù).

    從材料上來(lái)說(shuō),金屬鈦、生物陶瓷及其復(fù)合材料,尤其是功能性梯度材料都可以3D打印制作骨植入物.3D打印通過(guò)對(duì)多種材料的組合,對(duì)構(gòu)成的局域要素(如組分的組成和分布、微結(jié)構(gòu)、孔隙率、物性參數(shù))的控制,乃至在多個(gè)特定方向上材料功能及特性的(準(zhǔn))連續(xù)性變化,可充分滿足工件各部位不同的特性要求[25].例如,常見牙種植體要求由生物金屬(Ti或不銹鋼)和生物陶瓷(HA)組成,體部即下端100%金屬,臺(tái)部即上端100%陶瓷,而兩者之間沿種植體垂直方向具有連續(xù)的梯度成分變化[55].3D打印個(gè)體化的鋼板、鋼釘?shù)葍?nèi)固定物一直被設(shè)想,但由于工藝和技術(shù)上極大的困難目前仍未見報(bào)道.

    除骨內(nèi)或關(guān)節(jié)植入體外,美國(guó)密歇根大學(xué)于2013年運(yùn)用3D打印技術(shù)制造了用于治療氣管支氣管軟化癥的夾板,成功挽救3名嬰幼兒的生命.該夾板采用可隨時(shí)間變形的PCL材料,能夠被人體吸收并再生出相關(guān)組織和細(xì)胞[56].如圖2所示,圖(a)是病患在夾板植入前的氣管最小密度投影成像;圖(b)表示計(jì)算機(jī)復(fù)制設(shè)計(jì)為病患量身定制的夾板模型(紅色);圖(c)和圖(d)則是三維打印的氣管夾板;圖(e)和圖(f)是在病患左主支氣管軟化段處手術(shù)植入打印的氣管夾板;圖(g)顯示了夾板植入手術(shù)后1年的氣管擴(kuò)張情況.

    圖2 三維打印氣道夾板 [56]Fig.2 3D printing of airway clamp

    2.4再生醫(yī)學(xué)

    傳統(tǒng)組織再生和損傷修復(fù)的方法包括了自體移植、異體移植與人工合成產(chǎn)品的替代3條途徑[57].然而,來(lái)源有限、免疫排斥、生物相容性差等問(wèn)題極大地限制了這些方法的應(yīng)用,難以真正達(dá)到修復(fù)或長(zhǎng)期替代的效果.組織工程技術(shù)適時(shí)出現(xiàn),給組織再生與修復(fù)帶來(lái)新的生機(jī).常見基于生物材料支架的組織工程方法原理是,在體外要首先制作模仿組織器官形狀結(jié)構(gòu)的多孔支架,然后再結(jié)合種子細(xì)胞形成復(fù)合物植入體內(nèi)進(jìn)一步增殖、分化[58].其中,多孔組織工程支架的制作是至關(guān)重要的一步.

    組織工程用支架是一種多孔隙三維結(jié)構(gòu)體,它要求有合適的孔隙尺寸和高連通的孔道結(jié)構(gòu),以提供細(xì)胞足夠和連續(xù)的生長(zhǎng)通道,同時(shí)也保證了水分、無(wú)機(jī)鹽、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和排泄廢物的流通.很多已經(jīng)發(fā)展的支架制備方法有溶液澆注/顆粒濾取法、氣體發(fā)泡法、纖維編織法等,但這些方法的共同問(wèn)題是難以對(duì)支架孔隙的形狀、大小、連接形態(tài)、空間分布等進(jìn)行有效的精確控制,不能滿足組織工程對(duì)支架的復(fù)雜結(jié)構(gòu)要求,不能使不同細(xì)胞在支架的空間結(jié)構(gòu)中準(zhǔn)確定位等[59-60].3D打印技術(shù)的高度靈活性和可定制性恰好能夠解決上述問(wèn)題,并且在材料打印同時(shí)可將各種生長(zhǎng)因子、蛋白質(zhì)乃至細(xì)胞混合至支架結(jié)構(gòu)中.因此,3D打印在組織工程技術(shù)尤其是組織工程用支架構(gòu)建上體現(xiàn)出無(wú)可比擬的優(yōu)勢(shì)[61].

    目前,3D打印技術(shù)應(yīng)用于組織工程再生/修復(fù)的組織包含骨、軟骨、神經(jīng)、肌肉、血管等,并且已經(jīng)取得了較為理想的研究成果,對(duì)臨床應(yīng)用展現(xiàn)出極大的潛力.

    2.4.1骨修復(fù)

    骨組織修復(fù)支架的3D打印是目前研究深入、發(fā)表成果最多的生物3D打印應(yīng)用,不同結(jié)構(gòu)與組成的骨修復(fù)支架被打印出來(lái).例如,Castilho等[62]通過(guò)擠出式3D打印制備了孔徑在100~1 000 μm范圍內(nèi)可精確調(diào)控的TCP/HA復(fù)合陶瓷支架,準(zhǔn)確度可達(dá)96.5%.Serra等[63]采用PLA/磷酸鈣的有機(jī)無(wú)機(jī)復(fù)合材料,以擠出3D打印方式制備了四方和雙層交錯(cuò)結(jié)構(gòu)的多孔支架,研究結(jié)果表明結(jié)構(gòu)上細(xì)微的差異就能導(dǎo)致迥異的生物力學(xué)性能.Almeida等[64]按照同樣的打印參數(shù)分別3D打印了PLA和殼聚糖支架,在植入家兔體內(nèi)后考察了兩者的免疫應(yīng)答與炎癥反應(yīng)情況,結(jié)果與支架的組成和結(jié)構(gòu)均息息相關(guān).Jakus等[65]采用擠出式3D打印制備含有90%HA和10%PCL或PLGA的彈性人工骨,彈性應(yīng)變達(dá)32%~67%,彈性模量4~11 MPa可調(diào);植入老鼠體內(nèi)35天后的生物相容性良好,8周內(nèi)新骨生成,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)沒(méi)有顯示負(fù)面的免疫反應(yīng),血管生成并與周圍組織很好地結(jié)合.Tumbleston等[66]在Science發(fā)表封面文章,介紹了一種革命性的3D打印技術(shù)——連續(xù)液面生產(chǎn)技術(shù),這項(xiàng)技術(shù)成千倍地提高了傳統(tǒng)3D打印的速度和精度,因而對(duì)復(fù)雜且細(xì)節(jié)豐富的組織修復(fù)支架的打印具有巨大的優(yōu)勢(shì).

    2.4.2軟骨修復(fù)

    軟骨組織的自我再生和愈合能力有限,結(jié)合支架材料、干細(xì)胞和相關(guān)因子的組織工程技術(shù)是目前最具潛力的軟骨缺損修復(fù)手段[67].Lee等[68]通過(guò)混合打印技術(shù),以PEG作為支撐材料,能夠打印具有復(fù)雜外形的軟骨修復(fù)支架特殊結(jié)構(gòu),如碗狀、倒金字塔狀等,因而可直接用于耳朵、鼻子等軟骨組成器官的修復(fù).另外,軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞同時(shí)與材料進(jìn)行打印后,體外培養(yǎng)顯示出良好的存活率以及成軟骨和成脂肪性能.

    用于打印軟骨修復(fù)支架的生物材料目前常為海藻酸鹽、殼聚糖、透明質(zhì)酸等生物相容的水凝膠[69-70],但是水凝膠材料缺乏較高的機(jī)械強(qiáng)度,真正實(shí)現(xiàn)應(yīng)用具有一定的困難.Hutmacher等[59]結(jié)合熔體靜電紡絲和3D打印技術(shù),制備出了超細(xì)纖維網(wǎng)絡(luò)增強(qiáng)的蛋白聚糖水凝膠,具有與人類膝關(guān)節(jié)軟骨類似的強(qiáng)度和韌性.這種增強(qiáng)水凝膠可以很好地支持人類軟骨細(xì)胞的生長(zhǎng)和軟骨三維組織的形成,因而有望用于乳房組織和心臟瓣膜組織的重建.Hung等[72]合成了水溶性PU彈性納米粒子并與透明質(zhì)酸混合打印多孔支架,而且還可在支架打印過(guò)程中添加生物活性分子或替代小分子藥物.該支架可實(shí)現(xiàn)活性分子的持續(xù)可控釋放,誘導(dǎo)MSCs細(xì)胞向成軟骨方向分化并抑制新生軟骨過(guò)度生長(zhǎng),能有效地修復(fù)兔子關(guān)節(jié)軟骨缺損.

    2.4.3神經(jīng)修復(fù)

    運(yùn)用組織工程手段進(jìn)行神經(jīng)再生的過(guò)程中,仿生支架的結(jié)構(gòu)和組成可構(gòu)建出具有不同動(dòng)態(tài)功能的細(xì)胞微環(huán)境,從而影響到體內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)的命運(yùn)[73].通過(guò)3D打印技術(shù)靈活打印不同結(jié)構(gòu)支架,可模擬細(xì)胞外基質(zhì)并滿足神經(jīng)再生和修復(fù)的支架結(jié)構(gòu)要求[73].Wüst等[74]通過(guò)不同3D打印路徑在長(zhǎng)方體支架中分別構(gòu)造出了L,T,S,U和X形通道,系統(tǒng)研究了各種通道曲線上的材料聚集情況、神經(jīng)干細(xì)胞在不同形狀的凹槽和通道內(nèi)具有的遷移、增殖和分化特性,為闡明神經(jīng)修復(fù)機(jī)制提供技術(shù)基礎(chǔ).Wong等[75]研究了支架內(nèi)部結(jié)構(gòu)對(duì)大腦皮質(zhì)損傷修復(fù)的影響,如圖3所示.以聚己內(nèi)酯為材料,3D打印了內(nèi)部含有縱向微溝單向通道及水平與垂直方向正交叉通道的圓柱體支架(圖3(a)~(i)).結(jié)果表明,兩種支架分別植入大鼠的大腦皮質(zhì)缺損部位,如圖3(j)中4周后組織再生情況和圖3(k)中蘇木精-伊紅染色照片顯示,正交叉形支架中向內(nèi)生長(zhǎng)的組織總量與星形細(xì)胞的滲透率均明顯增高.

    圖3 3D打印含內(nèi)部通道支架用于大腦皮質(zhì)損傷修復(fù)[75]Fig.3 Scaffolds with channels and microgrooves manufactured by 3D printing technique for brain cortex regeneration

    另外,3D打印定制硅膠導(dǎo)板可應(yīng)用于幫助受損的復(fù)雜神經(jīng)再生其感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)功能.通過(guò)3D打印設(shè)計(jì)定制導(dǎo)板,賦予導(dǎo)板物理和化學(xué)誘導(dǎo)因素(包括溝槽設(shè)計(jì)和生物化學(xué)組份的添加),已成功應(yīng)用于老鼠的坐骨神經(jīng)結(jié)構(gòu)缺損修復(fù),促進(jìn)了其運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)神經(jīng)的再生[76].

    2.4.4心血管修復(fù)

    3D打印技術(shù)在心血管研究和應(yīng)用方面具有重要價(jià)值.目前在組織工程心肌、組織工程心臟瓣膜、組織工程大血管及血管網(wǎng)的構(gòu)建上都已有突破性進(jìn)展,3D打印方案也逐漸完善,其應(yīng)用已從實(shí)驗(yàn)室研究走向臨床應(yīng)用.

    心肌組織:Petrochenko等[77]采用激光燒結(jié)3D打印技術(shù),使用生物可降解脲烷和丙酸鹽基材料打印出心肌組織材料,材料表現(xiàn)出良好的可塑性、彈性及生物活性,有利于骨髓干細(xì)胞生長(zhǎng).Pati等[78]采用液滴材料,3D打印出質(zhì)地與大腦脂肪類似的網(wǎng)狀細(xì)胞外基質(zhì),打印的液滴大小約與5個(gè)心肌細(xì)胞相當(dāng),因此打印出的組織結(jié)構(gòu)整體性和精細(xì)度大大提高.

    血管:構(gòu)建大血管與毛細(xì)血管也是組織工程中的重要方面[79].大血管可提供管腔結(jié)構(gòu),血液通過(guò)官腔結(jié)構(gòu)運(yùn)輸至靶器官[80].毛細(xì)血管的構(gòu)建能改善血液微循環(huán),更好地實(shí)現(xiàn)血細(xì)胞的功能[81].Lee等[80]以水凝膠、膠原和臍帶靜脈血內(nèi)皮細(xì)胞為材料,3D打印出直徑為1 mm、長(zhǎng)5 mm、具有血管動(dòng)力學(xué)特性和功能的微血管床模型.研究結(jié)果表明臍帶靜脈血內(nèi)皮細(xì)胞可自然生長(zhǎng)和增殖,并形成血管分支結(jié)構(gòu),實(shí)現(xiàn)小血管微循環(huán)、靶器官的血液供應(yīng)等功能.Miller等[82]利用可去除的糖玻璃為原料進(jìn)行3D打印纖維網(wǎng)絡(luò)支架,可用于進(jìn)行血管內(nèi)皮細(xì)胞的灌注以形成血管網(wǎng)絡(luò),如圖4所示.由圖4(a)和(b)可見,3D打印的糖玻璃纖維支架具有可控的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),各打印纖維相交處易融合形成連通交聯(lián).圖4(c)和(d)顯示了活細(xì)胞灌注至纖維支架中之后的發(fā)展情況,紅色表示沿空管腔分布的血管內(nèi)細(xì)胞,綠色表示支架網(wǎng)格之間灌注的成纖維細(xì)胞.Zhao等[83]以3D打印技術(shù)構(gòu)建具有內(nèi)連接通道的生物降解聚合物骨架結(jié)構(gòu),再將脂肪干細(xì)胞引入骨架結(jié)構(gòu),誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞分化成為內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞,從而形成血管.

    圖4 3D打印的糖玻璃支架用于血管內(nèi)皮細(xì)胞灌注成型三維組織[82]Fig.4 3D printed vascular networks for endothelialization and perfusable engineered extravascular tissues

    多樣化心臟瓣膜:Lueders等[84]以心臟半月瓣為模型研究了其在3D打印中的熱力學(xué)、材料學(xué)特性及移植細(xì)胞的功能,發(fā)現(xiàn)3D打印構(gòu)建心臟瓣膜的主要影響因素取決于瓣膜骨架材料和種子細(xì)胞種類.其中,瓣膜骨架材料的韌性、耐久度等達(dá)到長(zhǎng)期的心臟瓣膜活動(dòng)時(shí)具備的功能結(jié)構(gòu).因此,與3D打印血管結(jié)構(gòu)相比,心臟瓣膜的3D打印在材料和打印方式上均有較高要求.

    2.5個(gè)性化藥物緩釋裝置

    為克服傳統(tǒng)藥劑效率低下、副作用大、作用時(shí)間短等缺陷,緩釋型給藥系統(tǒng)近年來(lái)受到廣泛關(guān)注.緩釋藥物系統(tǒng)指的是通過(guò)一定方法控制藥物釋放的時(shí)間、速度和位置,改善藥物在體內(nèi)的釋放、吸收和分布代謝的過(guò)程,從而達(dá)到延長(zhǎng)藥物作用、減少藥物不良反應(yīng)的一類藥劑[85].美國(guó)麻省理工學(xué)院基于3D打印技術(shù),提出了一種層層鋪粉、噴墨粘結(jié)的3D打印藥片制劑的方法獲得可控緩釋藥物的系統(tǒng)[86].由于3D打印成形的高度靈活性,噴墨過(guò)程及參數(shù)可以隨意控制,不同組成和類型的材料可以通過(guò)不同噴頭打印,因此可以很容易地控制局部材料組成、微觀結(jié)構(gòu)和表面特性,從而精確控制藥物釋放行為.目前常見的3D打印緩釋藥片有多層片、多腔室、核殼結(jié)構(gòu)、包裹結(jié)構(gòu)等類型[87-88],藥劑偏差量小于1%[89].

    植入式的藥物緩釋系統(tǒng)進(jìn)一步改善單純口服緩釋片劑不能靶向給藥的缺點(diǎn),能做到通過(guò)手術(shù)植入或注射等手段直接導(dǎo)入病灶部位,從而實(shí)現(xiàn)定位給藥,植入局部藥物濃度高,而進(jìn)入血液的藥物濃度低,減少用藥次數(shù)和用藥量.目前,3D打印可降解材料制作植入式藥物制劑是主要方向.Huang等[90]采用聚乳酸3D打印了慶大霉素的植入式藥劑,聚乳酸的不斷降解使包藏的藥物得以逐步完全釋放.與傳統(tǒng)的溶劑澆注壓制法相比,3D打印制劑的初始爆發(fā)釋放量低,緩釋過(guò)程中維持釋放濃度更平穩(wěn).Wu等[91]3D打印了具有多層結(jié)構(gòu)的載藥聚乳酸植入式支架,植入家兔體內(nèi)的藥物釋放研究表明,各層結(jié)構(gòu)中的藥物可以分階段控制釋放,極大地避免了全身用藥導(dǎo)致的毒性.朱鈺方研究團(tuán)隊(duì)[23,92-94]通過(guò)材料表面化學(xué)改性,利用3D打印有機(jī)無(wú)機(jī)復(fù)合支架,在實(shí)現(xiàn)骨修復(fù)支架構(gòu)建的同時(shí),獲得了抗生素、DNA、地塞米松、DMOG、阿霉素等多類型多尺寸藥物分子的局部緩釋和控制釋放.

    2.6腫瘤治療

    3D打印技術(shù)目前對(duì)腫瘤診斷和治療的意義主要在于體外腫瘤三維模型的構(gòu)建.早在2003年,Cho等報(bào)道,乳腺癌細(xì)胞在3D環(huán)境中通過(guò)合適的誘導(dǎo)因子添加可恢復(fù)到良性細(xì)胞的狀態(tài),而這是在2D平面培養(yǎng)中無(wú)法實(shí)現(xiàn)的[95].因此,構(gòu)建3D體外腫瘤模型對(duì)于腫瘤診療的研究具有重要的意義.Zhao等[96]運(yùn)用自主開發(fā)的細(xì)胞3D打印技術(shù),在世界上首次構(gòu)建出由明膠、藻酸鹽和纖維素組成的Hela細(xì)胞的體外三維腫瘤模型.與2D培養(yǎng)相比,3D模型具有與腫瘤生理環(huán)境更相似的特征,腫瘤細(xì)胞在其中表現(xiàn)出較高的擴(kuò)散效率,更高的蛋白表達(dá)和對(duì)抗腫瘤藥物更好的抗性,從而便于研究腫瘤的發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移和治療.Huang等[97]采用3D打印技術(shù)制備了仿生支架,深入研究了良性細(xì)胞和不同腫瘤細(xì)胞在支架中的遷移情況,并通過(guò)打印不同粗細(xì)的血管網(wǎng)絡(luò)研究腫瘤細(xì)胞在抗癌轉(zhuǎn)移藥物作用下的運(yùn)動(dòng)行為和分布.

    另外,眾多研究人員開始采用3D打印技術(shù)精確設(shè)計(jì)仿生組織藥物病理作用模型,可以使人們?cè)诙虝r(shí)間內(nèi)大規(guī)模高通量篩選新型高效藥物[24],更重要的是,3D打印的病理模型具有極高的可重復(fù)性,對(duì)新型藥物或者藥物輸送系統(tǒng)的篩選測(cè)試也就具有了可靠性.近來(lái),Gou等通過(guò)3D打印設(shè)計(jì)了一款肝組織結(jié)構(gòu)藥物解毒模型,受到全世界關(guān)注[98].

    3 結(jié)束語(yǔ)

    生物材料3D打印具有個(gè)性化、精準(zhǔn)化生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用,越來(lái)越受到重視.目前,生物材料3D打印研究已經(jīng)在醫(yī)療與手術(shù)設(shè)計(jì)模型、手術(shù)導(dǎo)板、體外醫(yī)療器械,及非降解永久植入物等方面取得重要進(jìn)展,并已經(jīng)開展臨床應(yīng)用.但是,生物材料3D打印更為優(yōu)勢(shì)的應(yīng)用,應(yīng)該向可降解組織工程支架、3D打印體外仿生三維生物結(jié)構(gòu)體、器官及器官再生等領(lǐng)域發(fā)展.個(gè)性化可降解的組織工程支架將為包括骨/軟骨組織、皮膚組織等修復(fù)提供新的途徑;生物3D打印體外仿生生物結(jié)構(gòu)體的研發(fā)對(duì)短時(shí)間大規(guī)模高通量的新藥篩選具有重大價(jià)值;生物3D打印器官再生如能實(shí)現(xiàn),對(duì)器官移植具有深遠(yuǎn)意義.另外,由于3D打印機(jī)的局限,目前合適的3D打印生物材料有限,質(zhì)量也有待于進(jìn)一步提高.因此,3D打印生物材料問(wèn)題的解決才能助力生物材料3D打印技術(shù)的臨床應(yīng)用,從而造福人類.

    [1] PELTOLA S M,MELCHELS F P W,GRIJPMA D W,et al.A review of rapid prototyping techniques for tissue engineering purposes[J].Annals of Medicine,2008,40(4):268-280.

    [2] JANG J,YI H G,CHO D W.3D printed tissue models:present and future[J].ACS Biomaterials Science & Engineering,2016,2(10):1722-1731.

    [3] 潘周嫻,陳適,劉巍,等.醫(yī)學(xué)三維打印材料分類及應(yīng)用介紹[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床,2015,35(5):702-706.

    [4] 王雪瑩.3D打印技術(shù)與產(chǎn)業(yè)的發(fā)展及前景分析[J].中國(guó)高新技術(shù)企業(yè),2012(9):3-5.

    [5] 黃健,姜山.3D打印技術(shù)將掀起“第三次工業(yè)革命”[J].新材料產(chǎn)業(yè),2013(1):62-67.

    [6] 周長(zhǎng)春,王科峰,謝鵬飛,等.生物三維打印技術(shù)的研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)[J].科技與企業(yè),2014(13):381-382.

    [7] MURPHY S V,ATALA A.3D bioprinting of tissues and organs[J].Nature Biotechnology,2014,32(8):773-785.

    [8] CALVERT P.Printing cells[J].Science,2007,318(5848):208-209.

    [9] DERBY B.Printing and prototyping of tissues and scaffolds[J].Science,2012,338(6109):921-926.

    [10] SEARS N A,SESHADRI D R,DHAVALIKAR P S,et al.A review of three-dimensional printing in tissue engineering[J].Tissue Engineering Part B:Reviews,2016,22(4):298-310.

    [11] 顧奇,郝捷,陸陽(yáng)杰,等.生物三維打印的研究進(jìn)展[J].中國(guó)科學(xué):生命科學(xué),2015,45(5):439-449.

    [12] KAWAGUCHI Y,NAKANO M,YASUDA T,et al.Development of a new technique for pedicle screw and Magerl screw insertion using a 3-dimensional image guide[J].Spine,2012,37(23):1983-1988.

    [13] 黃軒,李鳳寧,張帆,等.三維打印個(gè)體化導(dǎo)航模板在枕骨髁螺釘固定技術(shù)中的應(yīng)用研究[J].中國(guó)脊柱脊髓雜志,2014,24(5):440-446.

    [14] XIONG Y Y,QIAN C,SUN J.Fabrication of porous titanium implants by three-dimensional printing and sintering at different temperatures[J].Dental Materials Journal,2012,31(5):815-820.

    [15] CHEN Q Y,MANGADLAO J D,WALLAT J,et al.3D printing biocompatible polyurethane/poly(lactic acid)/graphene oxide nanocomposites:anisotropic properties[J].ACS Applied Materials & Interfaces,2017,9(4):4015-4023.

    [17] INZANA J A,OLVERA D,FULLER S M,et al.3D printing of composite calcium phosphate and collagen scaffolds for bone regeneration[J].Biomaterials,2014,35(13):4026-4034.

    [18] PEI P,QI X,DU X Y,et al.Three-dimensional printing of tricalcium silicate/mesoporous bioactive glass cement scaffolds for bone regeneration[J].Journal of Materials Chemistry B,2016,4(46):7452-7463.

    [19] KIM Y B,LEE H,KIM G H.Strategy to achieve highly porous/biocompatible macroscale cell blocks,using a collagen/genipin-bioink and an optimal 3D printing process[J].ACS Applied Materials & Interfaces,2016,8(47):32230-32240.

    [20] GAETANI R,FEYEN D A M,VERHAGE V,et al.Epicardial application of cardiac progenitor cells in a 3D-printed gelatin/hyaluronic acid patch preserves cardiac function after myocardial infarction[J].Biomaterials,2015,61:339-348.

    [21] CHOI Y,PATI F,DAS S,et al.Development of novel silk fibroin-gelatin bioink for 3d cell printing technology[J].Tissue Engineering Part A,2014,20:S116.

    [22] BILLIET T,GEVAERT E,DE SCHRYVER T,et al.The 3D printing of gelatin methacrylamide cell-laden tissue-engineered constructs with high cell viability[J].Biomaterials,2014,35(1):49-62.

    [23] ZHANG J H,ZHAO S C,ZHU Y F,et al.Three-dimensional printing of strontium-containing mesoporous bioactive glass scaffolds for bone regeneration[J].Acta Biomaterialia,2014,10(5):2269-2281.

    [24] 周長(zhǎng)春,王科峰,肖占文,等.3D打印技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)工程中的研究及應(yīng)用[J].科技創(chuàng)新與應(yīng)用,2014(21):41-42.

    [25] GUVENDIREN M,MOLDE J,SOARES R M D,et al.Designing biomaterials for 3D printing[J].ACS Biomaterials Science & Engineering,2016,2(10):1679-1693.

    [26] JOSE R R,BROWN J E,POLIDO K E,et al.Polyol-silk bioink formulations as two-part room-temperature curable materials for 3D printing[J].ACS Biomaterials Science & Engineering,2015,1(9):780-788.

    [27] NI S Y,LI X H,YANG P A,et al.Enhanced apatite-forming ability and antibacterial activity of porous anodic alumina embedded with CaO-SiO2-Ag2O bioactive materials[J].Materials Science and Engineering C,2016,58:700-708.

    [28] SHAO H F,HE Y,FU J Z,et al.3D printing magnesium-doped wollastonite/β-TCP bioceramics scaffolds with high strength and adjustable degradation[J].Journal of the European Ceramic Society,2016,36(6):1495-1503.

    [29] PEI P,WEI D X,ZHU M,et al.The effect of calcium sulfate incorporation on physiochemical and biological properties of 3D-printed mesoporous calcium silicate cement scaffolds[J].Microporous and Mesoporous Materials,2017,241:11-20.

    [30] ZHU W,XU C,MA B P,et al.Three-dimensional printed scaffolds with gelatin and platelets enhanceinvitropreosteoblast growth behavior and the sustained-release effect of growth factors[J].Chinese Medical Journal,2016,129(21):2576-2581.

    [31] STERNER E,MASUKO S,LI G Y,et al.Fibroblast growth factor-based signaling through synthetic heparan sulfate blocks copolymers studied using high cell density three-dimensional cell printing[J].Journal of Biological Chemistry,2014,289(14):9754-9765.

    [32] PAGE H,FLOOD P,REYNAUD E G.Three-dimensional tissue cultures:current trends and beyond[J].Cell and Tissue Research,2013,352(1):123-131.

    [33] DERBY B.Inkjet printing of functional and structural materials:fluid property requirements,feature stability,and resolution[J].Annual Review of Materials Research,2010,40(1):395-414.

    [34] DEMIRCI U,MONTESANO G.Single cell epitaxy by acoustic picolitre droplets[J].Lab on a Chip,2007,7(9):1139-1145.

    [35] NAKAMURA M,KOBAYASHI A,TAKAGI F,et al.Biocompatible inkjet printing technique for designed seeding of individual living cells[J].Tissue Engineering,2005,11(11/12):1658-1666.

    [36] KADOR K E,GROGAN S P,DORTHé E W,et al.Control of retinal ganglion cell positioning and neurite growth:combining 3D printing with radial electrospun scaffolds[J].Tissue Engineering Part A,2016,22(3/4):286-294.

    [37] FANG Y,FRAMPTON J P,RAGHAVAN S,et al.Rapid generation of multiplexed cell cocultures using acoustic droplet ejection followed by aqueous two-phase exclusion patterning[J].Tissue Engineering Part C:Methods,2012,18(9):647-657.

    [38] CHENG E,YU H R,AHMADI A,et al.Investigation of the hydrodynamic response of cells in drop on demand piezoelectric inkjet nozzles[J].Biofabrication,2016,8(1):015008.

    [39] FERRIS C J,GILMORE K J,BEIRNE S,et al.Bio-ink for on-demand printing of living cells[J].Biomaterials Science,2013,1(2):224-230.

    [40] HEO E Y,KO N R,BAE M S,et al.Novel 3D printed alginate-BFP1 hybrid scaffolds for enhanced bone regeneration[J].Journal of Industrial and Engineering Chemistry,2017,45:61-67.

    [41] WANG Q,XIA Q Q,WU Y,et al.3D-printed atsttrin-incorporated alginate/hydroxyapatite scaffold promotes bone defect regeneration with TNF/TNFR signaling involvement[J].Advanced Healthcare Materials,2015,4(11):1701-1708.

    [42] JEON H,KANG K,PARK S A,et al.Generation of multilayered 3D structures of HepG2 cells using a bio-printing technique[J].Gut and Liver,2017,11(1):121-128.

    [43] JANG J,PARK H J,KIM S W,et al.3D printed complex tissue construct using stem cell-laden decellularized extracellular matrix bioinks for cardiac repair[J].Biomaterials,2017,112:264-274.

    [44] XU T,KINCAID H,ATALA A,et al.High-throughput production of single-cell microparticles using an inkjet printing technology[J].Journal of Manufacturing Science and Engineering,2008,130(2):021017.

    [45] LI S J,XIONG Z,WANG X H,et al.Direct fabrication of a hybrid cell/hydrogel construct by a double-nozzle assembling technology[J].Journal of Bioactive and Compatible Polymers,2009,24(3):249-265.

    [46] ZHAO Y,LI Y,MAO S S,et al.The influence of printing parameters on cell survival rate and printability in microextrusion-based 3D cell printing technology[J].Biofabrication,2015,7(4):045002.

    [47] AHMED R,MENEZES A H.Management of operative complications related to occipitocervical instrumentation[J].Neurosurgery,2013,72(2S):ons214.

    [48] 禤天航,曹正霖,王剛.三維打印技術(shù)在脊柱外科的研究與應(yīng)用[J].海南醫(yī)學(xué),2015,26(12):1807-1809.

    [49] 石靜,鐘玉敏.組織工程中3D生物打印技術(shù)的應(yīng)用[J].中國(guó)組織工程研究,2014,18(2):271-276.

    [50] SUN J,ZHANG F Q.The application of rapid prototyping in prosthodontics[J].Journal of Prosthodontics:Implant,Esthetic,and Reconstructive Dentistry,2012,21(8):641-644.

    [51] EBERT J,?ZKOL E,ZEICHNER A,et al.Direct inkjet printing of dental prostheses made of zirconia[J].Journal of Dental Research,2009,88(7):673-676.

    [52] Emma,INDEX.3D打印定制假肢[J].設(shè)計(jì),2013,(12):24.

    [53] ZHU M,ZHAO S C,XIN C,et al.3D-printed dimethyloxallyl glycine delivery scaffolds to improve angiogenesis and osteogenesis[J].Biomaterials Science,2015,3(8):1236-1244.

    [54] 朱建平.3D打印骨骼進(jìn)入臨床觀察階段[J].健康博覽,2013(8):9.

    [55] CARRADA,PERRIN-SCHMITT F,LE Q V,et al.Nanoporous hydroxyapatite/sodium titanate bilayer on titanium implants for improved osteointegration[J].Dental Materials,2017,33(3):321-332.

    [56] MORRISON R J,HOLLISTER S J,NIEDNER M F,et al.Mitigation of tracheobronchomalacia with 3D-printed personalized medical devices in pediatric patients[J].Science Translational Medicine,2015,7(285):285ra64.

    [57] WEI G B,MA P X.Structure and properties of nano-hydroxyapatite/polymer composite scaffolds for bone tissue engineering[J].Biomaterials,2004,25(19):4749-4757.

    [58] LANGER R,VACANTI J P.Tissue engineering[J].Science,1993,260(5110):920-926.

    [59] HUTMACHER D W.Scaffolds in tissue engineering bone and cartilage[J].Biomaterials,2000,21(24):2529-2543.

    [60] 趙瑾,袁曉燕,姚康德.組織工程多孔支架制備技術(shù)進(jìn)展[J].化工進(jìn)展,2002,21(9):644-648.

    [61] RICHARDS D J,TAN Y,JIA J,et al.3D printing for tissue engineering[J].Israel Journal of Chemistry,2013,53(9/10):805-814.

    [62] CASTILHO M,MOSEKE C,EWALD A,et al.Direct 3D powder printing of biphasic calcium phosphate scaffolds for substitution of complex bone defects[J].Biofabrication,2014,6(1):015006.

    [63] SERRA T,MATEOS-TIMONEDA M A,PLANELL J A,et al.3D printed PLA-based scaffolds:a versatile tool in regenerative medicine[J].Organogenesis,2013,9(4):239-244.

    [64] ALMEIDA C R,SERRA T,OLIVEIRA M I,et al.Impact of 3-D printed PLA and chitosan-based scaffolds on human monocyte/macrophage responses:unraveling the effect of 3-D structures on inflammation[J].Acta Biomaterialia,2014,10(2):613-622.

    [65] JAKUS A E,RUTZ A L,JORDAN S W,et al.Hyperelastic “bone”:a highly versatile,growth factor-free,osteoregenerative,scalable,and surgically friendly biomaterial[J].Science Translational Medicine,2016,8(358):358ral127.

    [66] TUMBLESTON J R,SHIRVANYANTS D,ERMOSHKIN N,et al.Continuous liquid interface production of 3D objects[J].Science,2015,347(6228):1349-1352.

    [67] VISSCHER D O,BOS E J,PEETERS M,et al.Cartilage tissue engineering:preventing tissue scaffold contraction using a 3D-printed polymeric cage[J].Tissue Engineering Part C:Methods,2016,22(6):573-584.

    [68] LEE J S,HONG J M,JUNG J W,et al.3D printing of composite tissue with complex shape applied to ear regeneration[J].Biofabrication,2014,6(2):024103.

    [69] YOU F,WU X,CHEN X B.3D printing of porous alginate/gelatin hydrogel scaffolds and their mechanical property characterization[J].International Journal of Polymeric Materials and Polymeric Biomaterials,2017,66(6):299-306.

    [70] KIRCHMAJER D M,GORKIN III R,PANHUIS M I H.An overview of the suitability of hydrogel-forming polymers for extrusion-based 3D-printing[J].Journal of Materials Chemistry B,2015,3(20):4105-4117.

    [71] VISSER J,MELCHELS F P W,JEON J E,et al.Reinforcement of hydrogels using three-dimensionally printed microfibres[J].Nature Communications,2015,6:6933.

    [72] HUNG K C,TSENG C S,DAI L G,et al.Water-based polyurethane 3D printed scaffolds with controlled release function for customized cartilage tissue engineering[J].Biomaterials,2016,83:156-168.

    [73] 符鋒,李曉紅,張賽.三維打印技術(shù)在神經(jīng)修復(fù)中的應(yīng)用[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2016,11(1):138-141.

    [74] WüST S,MüLLER R,HOFMANN S.3D Bioprinting of complex channels-Effects of material,orientation,geometry,and cell embedding[J].Journal of Biomedical Materials Research Part A,2015,103(8):2558-2570.

    [75] WONG D Y,KREBSBACH P H,HOLLISTER S J.Brain cortex regeneration affected by scaffold architectures[J].Journal of Neurosurgery,2008,109(4):715-722.

    [76] CHANG C C,BOLAND E D,WILLIAMS S K,et al.Direct-write bioprinting three-dimensional biohybrid systems for future regenerative therapies[J].Journal of Biomedical Materials Research Part B:Applied Biomaterials,2011,98B(1):160-170.

    [77] PETROCHENKO P E,TORGERSEN J,GRUBER P,et al.Laser 3D printing with sub-microscale resolution of porous elastomeric scaffolds for supporting human bone stem cells[J].Advanced Healthcare Materials,2015,4(5):739-747.

    [78] PATI F,JANG J,HA D H,et al.Printing three-dimensional tissue analogues with decellularized extracellular matrix bioink[J].Nature Communications,2014,5:3935.

    [79] 王璐,胡為杰,聶昊,等.3D打印與組織工程心肌、心臟瓣膜、大血管及血管網(wǎng)的構(gòu)建[J].中國(guó)組織工程研究,2015,19(43):7029-7034.

    [80] LEE V K,KIM D Y,NGO H,et al.Creating perfused functional vascular channels using 3D bio-printing technology[J].Biomaterials,2014,35(28):8092-8102.

    [81] CHRISTENSEN K,XU C X,CHAI W X,et al.Freeform inkjet printing of cellular structures with bifurcations[J].Biotechnology and Bioengineering,2015,112(5):1047-1055.

    [82] MILLER J S,STEVENS K R,YANG M T,et al.Rapid casting of patterned vascular networks for perfusable engineered three-dimensional tissues[J].Nature Materials,2012,11(9):768-774.

    [83] ZHAO X R,LIU L B,WANG J Y,et al.Invitrovascularization of a combined system based on a 3D printing technique[J].Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine,2016,10(10):833-842.

    [84] LUEDERS C,JASTRAM B,HETZER R,et al.Rapid manufacturing techniques for the tissue engineering of human heart valves[J].European Journal of Cardio-Thoracic Surgery,2014,46(4):593-601.

    [85] ZHU M,ZHANG J H,TAO C L,et al.Design of mesoporous bioactive glass/hydroxyapatite composites for controllable co-delivery of chemotherapeutic drugs and proteins[J].Materials Letters,2014,115:194-197.

    [86] GOOLE J,AMIGHI K.3D printing in pharmaceutics:a new tool for designing customized drug delivery systems[J].International Journal of Pharmaceutics,2016,499(1/2):376-394.

    [87] KHALED S A,BURLEY J C,ALEXANDER M R,et al.3D printing of tablets containing multiple drugs with defined release profiles[J].International Journal of Pharmaceutics,2015,494(2):643-650.

    [88] KHALED S A,BURLEY J C,ALEXANDER M R,et al.3D printing of five-in-one dose combination polypill with defined immediate and sustained release profiles[J].Journal of Controlled Release,2015,217:308-314.

    [89] LEE K J,KANG A,DELFINO J J,et al.Evaluation of critical formulation factors in the development of a rapidly dispersing captopril oral dosage form[J].Drug Development and Industrial Pharmacy,2003,29(9):967-979.

    [90] HUANG Y Y,CHUNG T W.Microencapsulation of gentamicin in biodegradable PLA and/or PLA/PEG copolymer[J].Journal of Microencapsulation,2001,18(4):457-465.

    [91] WU W G,ZHENG Q X,GUO X D,et al.The controlled-releasing drug implant based on the three dimensional printing technology:fabrication and properties of drug releasinginvivo[J].Journal of Wuhan University of Technology-Materials Science Edition,2009,24(6):977-981.

    [92] ZHU M,LI K,ZHU Y F,et al.3D-printed hierarchical scaffold for localized isoniazid/rifampin drug delivery and osteoarticular tuberculosis therapy[J].Acta Biomaterialia,2015,16:145-155.

    [93] ZHAO S C,ZHU M,ZHANG J H,et al.Three dimensionally printed mesoporous bioactive glass and poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate) composite scaffolds for bone regeneration[J].Journal of Materials Chemistry B,2014,2(36):6106-6118.

    [94] ZHANG J H,ZHAO S C,ZHU M,et al.3D-printed magnetic Fe3O4/MBG/PCL composite scaffolds with multifunctionality of bone regeneration,local anticancer drug delivery and hyperthermia[J].Journal of Materials Chemistry B,2014,2(43):7583-7595.

    [95] CHO H S,MASON K,RAMYAR K X,et al.Structure of the extracellular region of HER2 alone and in complex with the Herceptin Fab[J].Nature,2003,421(6924):756-760.

    [96] ZHAO Y,YAO R,OUYANG L L,et al.Three-dimensional printing of Hela cells for cervical tumor modelinvitro[J].Biofabrication,2014,6(3):035001.

    [97] HUANG T Q,QU X,LIU J,et al.3D printing of biomimetic microstructures for cancer cell migration[J].Biomedical Microdevices,2014,16(1):127-132.

    [98] GOU M L,QU X,ZHU W,et al.Bio-inspired detoxification using 3D-printed hydrogel nanocomposites[J].Nature Communications,2014,5:3774.

    Progressofthe3DPrintingTechnologyforBiomaterials

    ZHU Min,HUANGTing,DUXiaoyu,ZHUYufang

    (SchoolofMaterialsandEngineering,UniversityofShanghaiforScienceandTechnology,Shanghai200093,China)

    In biomedical fields,the 3D printing of either biomaterials or living cells is capable to construct complex 3D bio-structures,such as customized implants,engineered bone grafts,ex vivo 3D cellular aggregates and artificial organs,etc.Therefore,considering its remarkable superiorities over the individual fabrication and complex structure building,the paper affords a meaningful review of the basis technological process,application areas and developments of 3D bio-printing.The discussions based on the 3D printing of biomaterials were then presented according to current research hotspots,including the two strategies of inkjet printing and dispensing printing techniques.Its applications in manufacturing medical models,devices and implants with biomaterials were focused.In addition,tissue engineering scaffolds and three-dimensional cell aggregates fabricated via 3D bio-printing were summarized.The outlooks about the future 3D bio-printing technique were put forward.

    biomaterial; 3Dprinting;biomedicalapplications;progress

    1007-6735(2017)05-0473-11

    10.13255/j.cnki.jusst.2017.05.011

    2017-05-05

    上海理工大學(xué)科技發(fā)展基金資助項(xiàng)目(2016KJFZ011,2017KJFZ010)

    朱 敏(1985-),女,副研究員.研究方向:生物材料.E-mail:mzhu@usst.edu.cn

    朱鈺方(1976-),男,教授.研究方向:生物材料.E-mail:yfzhu@usst.edu.cn

    TP391.7;R318.1

    A

    (編輯:丁紅藝)

    猜你喜歡
    支架生物結(jié)構(gòu)
    生物多樣性
    支架≠治愈,隨意停藥危害大
    生物多樣性
    上上生物
    給支架念個(gè)懸浮咒
    《形而上學(xué)》△卷的結(jié)構(gòu)和位置
    第12話 完美生物
    航空世界(2020年10期)2020-01-19 14:36:20
    論結(jié)構(gòu)
    前門外拉手支架注射模設(shè)計(jì)與制造
    模具制造(2019年3期)2019-06-06 02:10:54
    論《日出》的結(jié)構(gòu)
    久9热在线精品视频| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 男男h啪啪无遮挡| 国产1区2区3区精品| 国产成人av激情在线播放| 欧美中文日本在线观看视频| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲七黄色美女视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产亚洲av嫩草精品影院| 一夜夜www| а√天堂www在线а√下载| 性色av乱码一区二区三区2| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 久久久久久大精品| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 精品国产美女av久久久久小说| 一个人免费在线观看的高清视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| netflix在线观看网站| 亚洲精品在线美女| 自线自在国产av| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国产男靠女视频免费网站| 好男人电影高清在线观看| 丝袜在线中文字幕| av天堂在线播放| ponron亚洲| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 欧美乱色亚洲激情| 97人妻天天添夜夜摸| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 色婷婷久久久亚洲欧美| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 老司机靠b影院| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲色图av天堂| 天天一区二区日本电影三级 | 国产精品九九99| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲精品美女久久av网站| 国产三级黄色录像| 国产成人av教育| 人人澡人人妻人| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 亚洲中文av在线| 成年人黄色毛片网站| svipshipincom国产片| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲 国产 在线| 国产私拍福利视频在线观看| 日韩高清综合在线| 国产精品一区二区免费欧美| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 一本久久中文字幕| 免费在线观看日本一区| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲,欧美精品.| 最近最新免费中文字幕在线| 日本在线视频免费播放| 美女国产高潮福利片在线看| 一区二区日韩欧美中文字幕| 最近最新免费中文字幕在线| 黑人欧美特级aaaaaa片| av免费在线观看网站| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 黄色片一级片一级黄色片| 九色国产91popny在线| 国语自产精品视频在线第100页| 欧美av亚洲av综合av国产av| 高清黄色对白视频在线免费看| 久久久国产成人精品二区| 在线国产一区二区在线| 亚洲专区中文字幕在线| 久久久精品欧美日韩精品| 日韩有码中文字幕| 在线观看舔阴道视频| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 日韩欧美免费精品| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 中文字幕精品免费在线观看视频| 丁香欧美五月| 两个人视频免费观看高清| 亚洲一区高清亚洲精品| 曰老女人黄片| 亚洲第一青青草原| 亚洲人成电影免费在线| 日韩大尺度精品在线看网址 | 国产成人一区二区三区免费视频网站| 91九色精品人成在线观看| 此物有八面人人有两片| 国产精品av久久久久免费| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 91精品国产国语对白视频| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 久久久久久久午夜电影| av片东京热男人的天堂| 国产免费男女视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 18禁美女被吸乳视频| 国产97色在线日韩免费| 成人国产综合亚洲| 国产精品,欧美在线| 日韩大码丰满熟妇| 欧美最黄视频在线播放免费| 大陆偷拍与自拍| 黄片大片在线免费观看| 啦啦啦韩国在线观看视频| 欧美日韩黄片免| www.999成人在线观看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产av一区在线观看免费| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 免费高清视频大片| 日本一区二区免费在线视频| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲av电影不卡..在线观看| 女同久久另类99精品国产91| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 亚洲五月婷婷丁香| 中文字幕av电影在线播放| 久久人人97超碰香蕉20202| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产成人av教育| 亚洲午夜理论影院| 男人舔女人下体高潮全视频| 黄频高清免费视频| 桃色一区二区三区在线观看| 日日夜夜操网爽| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 丝袜美腿诱惑在线| 中文字幕av电影在线播放| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 看片在线看免费视频| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 国产精品久久久久久精品电影 | 欧美黑人欧美精品刺激| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 老汉色av国产亚洲站长工具| 亚洲五月婷婷丁香| 两个人看的免费小视频| 女同久久另类99精品国产91| 最好的美女福利视频网| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 黄色视频,在线免费观看| 午夜福利在线观看吧| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产精品 欧美亚洲| 久久国产乱子伦精品免费另类| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲精品在线美女| 久久人人精品亚洲av| 91麻豆精品激情在线观看国产| 黄频高清免费视频| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲第一电影网av| 精品国产国语对白av| 久久精品91蜜桃| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产一区二区三区综合在线观看| 最近最新免费中文字幕在线| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 亚洲精品国产色婷婷电影| 欧美乱码精品一区二区三区| 欧美亚洲日本最大视频资源| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 99国产综合亚洲精品| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲欧美精品综合久久99| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 欧美日本中文国产一区发布| 精品欧美国产一区二区三| 一级毛片女人18水好多| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 亚洲专区中文字幕在线| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 女警被强在线播放| 久久国产精品人妻蜜桃| 欧美乱色亚洲激情| 欧美成人午夜精品| 在线视频色国产色| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 99riav亚洲国产免费| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲一区二区三区不卡视频| 久久国产精品影院| 国产免费av片在线观看野外av| 免费看美女性在线毛片视频| 极品人妻少妇av视频| 在线国产一区二区在线| 亚洲精品av麻豆狂野| 在线观看www视频免费| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 久久狼人影院| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 多毛熟女@视频| 美国免费a级毛片| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产精品一区二区三区四区久久 | 国产乱人伦免费视频| 亚洲自拍偷在线| 日本精品一区二区三区蜜桃| 午夜福利在线观看吧| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲av成人一区二区三| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 91精品三级在线观看| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产成人免费无遮挡视频| 日本五十路高清| 日韩三级视频一区二区三区| 国产av又大| 精品一区二区三区av网在线观看| 又黄又爽又免费观看的视频| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 好男人在线观看高清免费视频 | 亚洲一区高清亚洲精品| 91在线观看av| 乱人伦中国视频| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲成国产人片在线观看| 色播在线永久视频| 男人舔女人的私密视频| 十八禁网站免费在线| 制服诱惑二区| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 国产亚洲av高清不卡| 一区二区日韩欧美中文字幕| 亚洲精华国产精华精| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 九色亚洲精品在线播放| 精品人妻在线不人妻| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 两个人看的免费小视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 90打野战视频偷拍视频| 久久久国产成人免费| 成熟少妇高潮喷水视频| 久久中文看片网| 久久久久久久久久久久大奶| 久9热在线精品视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 国产亚洲精品第一综合不卡| 欧美激情极品国产一区二区三区| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 黄色 视频免费看| av视频免费观看在线观看| 搡老妇女老女人老熟妇| 无人区码免费观看不卡| 精品无人区乱码1区二区| 日日夜夜操网爽| 国产99白浆流出| 啦啦啦 在线观看视频| 欧美色视频一区免费| 窝窝影院91人妻| 999精品在线视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 一级作爱视频免费观看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 亚洲国产看品久久| 两个人视频免费观看高清| 人妻久久中文字幕网| 天天一区二区日本电影三级 | 亚洲人成电影观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 制服人妻中文乱码| 中文亚洲av片在线观看爽| 免费少妇av软件| 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 亚洲最大成人中文| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 老司机午夜十八禁免费视频| 老司机在亚洲福利影院| av在线天堂中文字幕| 欧美久久黑人一区二区| 他把我摸到了高潮在线观看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲伊人色综图| 大香蕉久久成人网| 成人国产综合亚洲| 亚洲无线在线观看| 脱女人内裤的视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 免费搜索国产男女视频| 欧美精品啪啪一区二区三区| 男女床上黄色一级片免费看| 夜夜夜夜夜久久久久| 动漫黄色视频在线观看| 男女下面插进去视频免费观看| 在线国产一区二区在线| 久久久久久国产a免费观看| 久久午夜综合久久蜜桃| avwww免费| 桃色一区二区三区在线观看| 日韩精品中文字幕看吧| 成人免费观看视频高清| 国产高清videossex| 波多野结衣高清无吗| 视频在线观看一区二区三区| 不卡av一区二区三区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 日本在线视频免费播放| 亚洲国产精品sss在线观看| 18美女黄网站色大片免费观看| 亚洲av成人一区二区三| 亚洲,欧美精品.| 在线av久久热| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 最近最新免费中文字幕在线| 日韩中文字幕欧美一区二区| 一进一出抽搐gif免费好疼| videosex国产| 国产成人精品无人区| 国产精品亚洲av一区麻豆| 无限看片的www在线观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| 精品免费久久久久久久清纯| av片东京热男人的天堂| 波多野结衣巨乳人妻| 动漫黄色视频在线观看| 国产欧美日韩一区二区三| 电影成人av| 两个人看的免费小视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 一本久久中文字幕| 久久国产精品影院| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲午夜理论影院| 久久精品人人爽人人爽视色| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲男人天堂网一区| 午夜久久久在线观看| 在线视频色国产色| 日本vs欧美在线观看视频| 久久婷婷成人综合色麻豆| 久久精品成人免费网站| 日韩精品中文字幕看吧| 性色av乱码一区二区三区2| 在线观看舔阴道视频| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 九色国产91popny在线| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产精品 欧美亚洲| 丁香欧美五月| 久久久国产成人精品二区| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产成人av教育| 免费在线观看影片大全网站| www.www免费av| 日韩精品中文字幕看吧| 男女下面插进去视频免费观看| 中文字幕精品免费在线观看视频| 一个人免费在线观看的高清视频| 亚洲国产中文字幕在线视频| 嫩草影视91久久| 国产成人影院久久av| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 免费看美女性在线毛片视频| 咕卡用的链子| 免费av毛片视频| 免费在线观看黄色视频的| 国产成人欧美| 国产精品九九99| 精品无人区乱码1区二区| 国产激情欧美一区二区| 日本三级黄在线观看| 亚洲三区欧美一区| 叶爱在线成人免费视频播放| 久久久久久人人人人人| 国产一区二区激情短视频| 欧美国产日韩亚洲一区| 此物有八面人人有两片| 日韩高清综合在线| 国产激情欧美一区二区| 国产不卡一卡二| 后天国语完整版免费观看| 亚洲专区字幕在线| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| e午夜精品久久久久久久| 岛国在线观看网站| 亚洲中文av在线| 久久草成人影院| 国产精品综合久久久久久久免费 | 男女之事视频高清在线观看| 久久影院123| 91成人精品电影| 香蕉国产在线看| 不卡av一区二区三区| 亚洲第一青青草原| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 欧美国产精品va在线观看不卡| 少妇被粗大的猛进出69影院| 在线观看日韩欧美| 香蕉久久夜色| 亚洲成人国产一区在线观看| 可以在线观看的亚洲视频| 国产精品亚洲美女久久久| 男女下面进入的视频免费午夜 | 国产在线观看jvid| 日韩av在线大香蕉| 亚洲精品av麻豆狂野| 日韩欧美一区视频在线观看| 欧美成人性av电影在线观看| 国内精品久久久久精免费| 亚洲专区国产一区二区| 国产成人系列免费观看| 国产亚洲欧美在线一区二区| 在线观看免费午夜福利视频| 一本综合久久免费| 黄色女人牲交| 国产97色在线日韩免费| 国产一区二区三区视频了| 日本免费a在线| 最近最新中文字幕大全电影3 | 久久青草综合色| 人人妻人人澡欧美一区二区 | 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 久久中文看片网| www国产在线视频色| 亚洲 国产 在线| 免费人成视频x8x8入口观看| 中文字幕av电影在线播放| 1024香蕉在线观看| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲欧美日韩另类电影网站| www.www免费av| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲av熟女| 手机成人av网站| av超薄肉色丝袜交足视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 精品欧美国产一区二区三| 老熟妇仑乱视频hdxx| 99香蕉大伊视频| 久久久久亚洲av毛片大全| 男人的好看免费观看在线视频 | 午夜福利成人在线免费观看| 欧美不卡视频在线免费观看 | 91老司机精品| 亚洲男人天堂网一区| 老司机福利观看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 日日摸夜夜添夜夜添小说| 无遮挡黄片免费观看| 真人一进一出gif抽搐免费| 亚洲欧美激情在线| 亚洲av电影在线进入| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲免费av在线视频| 身体一侧抽搐| 久久精品成人免费网站| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 丝袜美腿诱惑在线| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| a在线观看视频网站| 欧美亚洲日本最大视频资源| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 国产激情久久老熟女| 亚洲激情在线av| 一级毛片女人18水好多| 黑丝袜美女国产一区| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 日韩av在线大香蕉| 亚洲欧美激情在线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 成人国产一区最新在线观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产精品一区二区精品视频观看| a在线观看视频网站| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产一卡二卡三卡精品| 国产成人免费无遮挡视频| 一个人免费在线观看的高清视频| 少妇熟女aⅴ在线视频| 老鸭窝网址在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 黄色片一级片一级黄色片| 久久国产乱子伦精品免费另类| 婷婷丁香在线五月| 欧美黑人欧美精品刺激| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 日日夜夜操网爽| 99国产综合亚洲精品| 美女国产高潮福利片在线看| 久久九九热精品免费| 97碰自拍视频| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 欧美乱码精品一区二区三区| 中国美女看黄片| 丝袜在线中文字幕| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 曰老女人黄片| 欧美色视频一区免费| 精品久久久久久,| 在线播放国产精品三级| 久久久国产精品麻豆| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产亚洲av嫩草精品影院| 波多野结衣高清无吗| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 亚洲av片天天在线观看| 大型av网站在线播放| 欧美日韩黄片免| 女人精品久久久久毛片| 国产精品久久久人人做人人爽| 精品国内亚洲2022精品成人| 性色av乱码一区二区三区2| 国产精品亚洲一级av第二区| 久99久视频精品免费| 亚洲第一av免费看| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 免费高清在线观看日韩| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产麻豆成人av免费视频| 在线观看免费视频网站a站| 国产精品电影一区二区三区| 欧美日韩乱码在线| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 热re99久久国产66热| 51午夜福利影视在线观看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 日本 av在线| 亚洲 欧美一区二区三区| av视频在线观看入口| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 一本大道久久a久久精品| av超薄肉色丝袜交足视频| ponron亚洲| 国产单亲对白刺激| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 伦理电影免费视频| 久久久久久国产a免费观看| 老司机在亚洲福利影院| 99精品久久久久人妻精品| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 欧美亚洲日本最大视频资源| 亚洲一区高清亚洲精品| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 91九色精品人成在线观看| 桃红色精品国产亚洲av| 乱人伦中国视频| 制服人妻中文乱码| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 桃色一区二区三区在线观看| 国产精品,欧美在线| 国产亚洲精品一区二区www| 18美女黄网站色大片免费观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 狂野欧美激情性xxxx| 久久狼人影院| 制服人妻中文乱码| 一二三四社区在线视频社区8| 免费高清在线观看日韩| 午夜日韩欧美国产| 精品国产一区二区三区四区第35| 桃色一区二区三区在线观看| 国产亚洲精品第一综合不卡| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲精品在线观看二区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 久久亚洲精品不卡| xxx96com| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 91老司机精品| 亚洲久久久国产精品| 热re99久久国产66热| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 欧美日本视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产成+人综合+亚洲专区| 18禁美女被吸乳视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲av五月六月丁香网| 又大又爽又粗| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 男人舔女人的私密视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 精品久久久久久成人av| 免费av毛片视频| 国内精品久久久久精免费|