豬圓環(huán)病毒2型疫苗注射方法對比試驗

王鼎民+銀少華+翁梅悅+歐盛繪+莫榮艷+黎益圖+覃磊+黃艷+黎宏嘉+黃國杰

摘 要：為了獲得較高的豬圓環(huán)病毒2型抗體水平，課題組在來賓市鼎晟種豬場開展豬圓環(huán)病毒疫苗注射方法對比試驗，選擇出生日期接近同批8窩品種為杜洛克×長大三元雜哺乳仔豬80頭，試驗為期77d，隨機分成4組，每組20頭，第Ⅰ組采取15日齡試驗豬第1次免疫豬圓環(huán)病毒2型基因工程亞單位疫苗，每頭注射2ml；第Ⅱ組采取15日齡試驗豬第1次免疫豬圓環(huán)病毒2型基因工程亞單位疫苗，每頭注射2ml，間隔2周后第2次免疫同種疫苗2ml，第Ⅲ組采取15日齡試驗豬第1次免疫豬圓環(huán)病毒2型基因工程亞單位疫苗，每頭注射2ml，間隔3周后第2次免疫同種疫苗2ml，第Ⅳ組采取15日齡試驗豬第1次免疫豬圓環(huán)病毒2型基因工程亞單位疫苗，每頭注射2ml，間隔4周后第2次免疫同種疫苗2ml。每組試驗豬都在最后一次注射疫苗后4周抽血，ELASA方法檢測豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體，試驗結(jié)果表明，注苗方法與豬圓環(huán)病毒2型抗體陽性率的關聯(lián)非常顯著，間隔2周后免疫2次豬圓環(huán)病毒2型疫苗抗體陽性率為最高，抗體水平最佳。

關鍵詞：豬圓環(huán)病毒疫苗；注射方法；對比試驗；抗體水平

一、材料與方法

1.疫苗名稱及批號

青島易邦生物工程有限公司生產(chǎn)，豬圓環(huán)病毒2型基因工程亞單位疫苗，商品名為“易圓凈”，批準文號獸藥生字（2014）150131096，規(guī)格為20ml×10，生產(chǎn)批號為160922501。

2.用量及用法

15日齡以上仔豬（含15日齡）肌肉注射，每頭注射2ml。

3.試驗動物

在來賓市鼎晟種豬場選擇出生日期接近同批8窩，品種為杜洛克×長大三元雜哺乳仔豬80頭。

4.試驗分組

試驗豬群經(jīng)過編號、飼料適應性飼喂7天后，隨機分成4組，每組20頭（每窩10頭），并用抽簽的辦法分為試驗Ⅰ組，試驗Ⅱ組，試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組，分組情況如下表所示。

各組豬的體重差異在組內(nèi)不超過±10%，組間不超過±5%。

5.試驗設計

試驗驗為期77天，從2016年5月1日至2016年7月16日。

試驗前預試期為7天，第Ⅰ組采取15日齡試驗豬第1次免疫豬圓環(huán)病毒2型基因工程亞單位疫苗，每頭注射1頭份2ml，；第Ⅱ組采取15日齡試驗豬第1次免疫豬圓環(huán)病毒2型基因工程亞單位疫苗，每頭注射2ml，間隔2周后第2次免疫同種疫苗2ml，第Ⅲ組采取15日齡試驗豬第1次免疫豬圓環(huán)病毒2型基因工程亞單位疫苗，每頭注射2ml，間隔3周后第2次免疫同種疫苗2ml，第Ⅳ組采取15日齡試驗豬第1次免疫豬圓環(huán)病毒2型基因工程亞單位疫苗，每頭注射2ml，間隔4周后第2次免疫同種疫苗2ml。試驗期間各試驗組的哺乳母豬、哺乳仔豬及斷奶后保育豬實行相同的飼養(yǎng)管理，同一日齡斷尾去勢，保證飼料、環(huán)境溫度一致的情況下，飼料添加相同藥物保健。每組試驗豬都在最后一次注射疫苗后28d抽血，采用武漢科前試劑盒，ELISA方法檢測豬圓環(huán)病毒2型抗體。

6.飼喂方法

各組試驗豬不限料，哺乳母豬、哺乳仔豬及斷奶仔豬以吃飽不剩料為原則， 每日4餐，喂?jié)窳?，料水比例?：1～2，以手抓成團而松手后又散開為宜，吃完料后，再放水到料槽，自由飲水。

7.飼養(yǎng)管理

各組試驗豬均在同一棟豬舍，飼喂同一種飼料，豬舍溫度一致，條件一致，產(chǎn)房和保育舍每天進行1次清糞處理，試驗期間注意觀察各組豬的精神和健康狀況。

8.抗體陽性判定標準

圓環(huán)抗體≥0.16判為陽性，<0.16判為陰性。

9.測定指標

血清中豬圓環(huán)病毒2型抗體陽性率計算公式：

抗體陽性率（%）=∑抗體呈陽性頭數(shù)÷∑送檢血清頭數(shù)×100%

10.統(tǒng)計方法

根據(jù)送檢血清檢測報告對數(shù)據(jù)進行整理，抗體陽性率采用X2檢驗。

二、結(jié)果與分析

1.試驗結(jié)果

各組試驗豬的抗體陽性率見表1。

2.X2檢驗

假設免疫方法處理與豬圓環(huán)病毒2型抗體陽性率的關聯(lián)不顯著。

計算理論頻數(shù)，按4組合計的平均抗體陽性率57.89%，則理論上第Ⅰ組陽性頻數(shù)為18×57.89%=10.42頭，第Ⅰ組陰性頻數(shù)18×（1-57.89%）=7.58頭，以此類推，計算第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組陽性和陰性理論頻數(shù)。

計算X2=14.402

df=（4-1）（2-1）=3

查X2值表，X20.01，3=11.34，求得的X2值>X20.01，3，即P<0.01。表明免疫方法處理與豬圓環(huán)病毒2型抗體陽性率的關聯(lián)非常顯著。

3.不同免疫方法對豬圓環(huán)病毒2型抗體陽性率的影響

從表1可知：在免疫方法方面，第Ⅱ組間隔2周2次注苗的免疫方法，豬圓環(huán)病毒2型抗體陽性率為最高，其次是第Ⅰ組1次注苗的免疫方法，再次是第Ⅳ組間隔4周2次注苗的免疫方法，最差是第Ⅲ組間隔3周2次注苗的方法。

4.討論

豬病毒性疫苗注射屬于特異性免疫，健康的機體注射疫苗后產(chǎn)生免疫應答反應，隨之產(chǎn)生免疫記憶性，并產(chǎn)生記憶細胞，間隔合適的時間再次注射同種疫苗，能有效刺激記憶細胞，激發(fā)強大和持久的抗體。從本次試驗可知，間隔2周注射相同的豬圓環(huán)病毒2型疫苗能獲得最佳抗體，從而有效預防豬圓環(huán)病毒2型病毒。

從本次試驗可知，間隔2周注射相同的豬圓環(huán)病毒2型疫苗獲得最佳抗體，本次試驗僅對豬圓環(huán)病毒2型疫苗這一種豬病毒性疫苗進行試驗，其他種類的豬病毒性疫苗是否遵循這一規(guī)律，還有待進一步試驗研究。

三、結(jié)語

試驗結(jié)果表明，免疫方法與豬圓環(huán)病毒2型抗體陽性率關聯(lián)非常顯著，特別是間隔2周后免疫2次豬圓環(huán)病毒2型疫苗抗體陽性率為最高，抗體水平最佳。

參考文獻：

[1] 張崢. 豬圓環(huán)病毒2型疫苗效果對比試驗[J].當?shù)匦竽粒?013，（9）：78-79.