雞血藤種源試驗(yàn)和優(yōu)良種源初步選擇研究

席飛飛　何鋼　劉賢桂

摘要：在廣東省從化市進(jìn)行雞血藤地理種源試驗(yàn)，通過(guò)對(duì)四年生不同雞血藤種的地徑粗、主藤條長(zhǎng)、總灰分含量、乙醇浸出物含量、總黃酮含量等評(píng)價(jià)性狀的測(cè)量分析，研究不同種源的地理差異。結(jié)果表明，不同地理種源雞血藤各性狀指標(biāo)的排序差異明顯。利用多目標(biāo)決策方法進(jìn)行地理種源評(píng)價(jià)，初步選擇出廣西賀州1、廣西賀州2、廣東梅州3個(gè)密花豆的優(yōu)良地理種源，云南大理、云南楚雄2個(gè)崖豆藤的優(yōu)良地理種源，湖南長(zhǎng)沙1的常春油麻藤優(yōu)良地理種源，為進(jìn)一步推進(jìn)雞血藤良種選育奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：雞血藤；多目標(biāo)決策；地理種源；最佳種源

中圖分類號(hào)：R282.71 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2017）19-3672-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.19.019

Abstract： The experiment was established in Conghua city of Guangdong province by assessing the differences in stem diameter，the main cane length，total ash，ethanol extract，total flavonoids for 4-year-old Spatholobi caulis. The results indicated that there were obvious differences among the stem diameter，the main cane length，total ash，ethanol extract，and total flavonoids. Multiple objective decision analysis showed diverse results. For Spatholobus suberectus Dunn，three superior geographical provenances were selected with the method of multiple objective decision，one from Hezhou1 of Guangxi and the other two from Hezhou 2 of Guangxi and Meizhou of Guangdong；For Millettia tsui，two superior geographical provenances were selected，one from Dali of Yunnan and the other from Chuxiong of Yunan；Mucuna sempervirens was the superior geographical provenances from Changsha 1 of Hunan，which laid the foundation for further promoting the quality cultivation of S. caulis.

Key words： Spatholobi caulis； multiple objective decision； geographical provenances； optimal provenance

雞血藤作為中國(guó)重要的藥材，自然分布在廣東、云南、四川、廣西等山地林間。其種質(zhì)資源豐富，有6科12屬多種之分[1]，前人對(duì)其生物學(xué)特性、繁殖與栽培[2-4]、藥用價(jià)值[5-11]等方面進(jìn)行了大量研究。近年來(lái)，由于雞血藤野生資源的匱乏，且人工栽培單位面積產(chǎn)量低，產(chǎn)品質(zhì)量良莠不齊，因此，對(duì)雞血藤種質(zhì)資源進(jìn)行評(píng)價(jià)和選優(yōu)，發(fā)掘、利用現(xiàn)有的優(yōu)良資源，加快雞血藤良種選育工作是一項(xiàng)亟待解決的重要課題。為此，在廣東省從化市對(duì)12個(gè)地理種源雞血藤進(jìn)行了試驗(yàn)，對(duì)影響其品質(zhì)的相關(guān)性狀進(jìn)行調(diào)查分析，并采用多目標(biāo)決策方法進(jìn)行優(yōu)良地理種源選擇，以期為優(yōu)良雞血藤培育提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地設(shè)在廣東省從化市鰲頭鎮(zhèn)，位于從化市西部東經(jīng)113°56′，北緯23°34′，年平均氣溫21.2 ℃，年降水量2 176.3 mm，境內(nèi)地勢(shì)平坦，土層深厚、肥沃，土質(zhì)較疏松。鰲頭鎮(zhèn)橫嶺村種植基地是砂巖和變質(zhì)巖為主的紅壤丘陵地，土壤偏酸性，pH 4～6。

1.2 供試材料及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)材料為廣東梅州等12個(gè)種源的雞血藤苗木。其中，密花豆主要分布在廣東梅州、廣東深圳、廣東廣州、廣西賀州等地；崖豆藤主要分布在云南騰沖、云南大理、云南楚雄、四川宜賓等地；常春油麻藤主要分布在湖南長(zhǎng)沙。在每一個(gè)采種點(diǎn)上，選擇天然起源，生長(zhǎng)正常的優(yōu)勢(shì)單株采種，每隔10～20 m取一株（10枝/株）。種源地的地理位置、采集株數(shù)及鑒定種類見(jiàn)表1。

于2011年3月分別選擇生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害、長(zhǎng)勢(shì)均衡的12個(gè)地理種源雞血藤苗木的枝條，在試驗(yàn)基地進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)袋扦插噴霧育苗，待苗高40 cm以上時(shí)，按行距2 m、株距1.0～1.5 m挖穴栽植。種源試驗(yàn)采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，設(shè)3個(gè)區(qū)組，每個(gè)區(qū)組均包含12個(gè)地理種源。試驗(yàn)小區(qū)間的田間管理、撫育、水肥管理等措施相同。

1.3 試驗(yàn)檢測(cè)及方法

栽植4年后，對(duì)試驗(yàn)點(diǎn)的各種源雞血藤進(jìn)行檢測(cè)分析，觀測(cè)性狀包括地徑粗（V1）、主藤條長(zhǎng)（V2）、總灰分含量（V3）、乙醇浸出物含量（V4）、總黃酮含量（V5）。

地徑粗的測(cè)定：分別隨機(jī)取3株長(zhǎng)勢(shì)優(yōu)良、生長(zhǎng)一致的雞血藤調(diào)查，3次重復(fù)，用游標(biāo)卡尺測(cè)量莖粗（地徑為離地5 cm的直徑），各種源的雞血藤地徑粗取3個(gè)重復(fù)的平均值。

主藤條長(zhǎng)的測(cè)定：分別隨機(jī)取3株長(zhǎng)勢(shì)優(yōu)良、生長(zhǎng)一致的雞血藤調(diào)查，3次重復(fù)，用卷尺測(cè)量主藤條長(zhǎng)，各種源的雞血藤主藤條長(zhǎng)取3個(gè)重復(fù)的平均值。

總灰分含量的測(cè)定：將測(cè)定用雞血藤藤莖粉碎，使能夠通過(guò)2號(hào)篩，混合均勻后，取供試品2～3 g，置熾灼至恒重的坩堝中，稱定質(zhì)量（準(zhǔn)確至0.01 g），緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時(shí)，逐漸升高溫度至500～600 ℃，使完全灰化并至恒重，重復(fù)3次。灼燒殘留的無(wú)機(jī)氧化物質(zhì)量即為總灰分，根據(jù)殘?jiān)|(zhì)量計(jì)算供試品中總灰分的含量。

乙醇浸出物含量的測(cè)定：依照2010年版中國(guó)藥典一部版附錄XA方法[12]測(cè)定雞血藤中醇溶性浸出物的含量，重復(fù)3次。

總黃酮含量的測(cè)定：吸取雞血藤醇溶性提取物于容量瓶中，參照《中國(guó)藥典》版鋁鹽在堿性條件下同黃酮生成紅色絡(luò)合物的比色法測(cè)定總黃酮的含量[12]，重復(fù)3次。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)采用Excel和SPSS 21.0軟件進(jìn)行處理分析。

1.5 雞血藤優(yōu)良地理種源評(píng)價(jià)及選擇方法

采用多目標(biāo)決策中的一維比較法進(jìn)行優(yōu)良地理種源的評(píng)價(jià)和選擇[13，14]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同地理種源雞血藤的性狀表現(xiàn)及分析

不同地理種源雞血藤在地徑粗等5個(gè)性狀指標(biāo)上的排序情況不同（表2）。對(duì)于密花豆，地徑粗排名第一的是廣西賀州2種源，主藤條長(zhǎng)最長(zhǎng)的是廣西賀州1種源，且和其他地理種源間存在顯著差異；總灰分含量方面，排名第一的是廣東深圳種源；乙醇浸出物含量方面，排名第一的是廣西賀州2種源，但和廣西賀州1種源、廣東梅州種源等差異不顯著；總黃酮含量方面，排名第一的是廣西賀州1種源，排名第二的是廣東梅州種源。

對(duì)于崖豆藤，地徑粗、主藤條長(zhǎng)第一的是云南大理種源，且和其余種源間差異顯著；總灰分含量方面，四川宜賓1排名第一，且和其余種源間差異顯著；乙醇浸出物含量方面，云南楚雄種源排名第一，排名第二的是云南大理種源，兩者間差異不顯著，但和其余種源間差異顯著；總黃酮含量方面，排名第一的是云南大理種源，排名第二的是云南楚雄種源，兩者間差異不顯著，但和其余種源間存在顯著差異。

對(duì)于常春油麻藤，湖南長(zhǎng)沙1種源總體優(yōu)于湖南長(zhǎng)沙2種源。

2.2 雞血藤優(yōu)良地理種源選擇

不同地理種源的雞血藤評(píng)價(jià)性狀存在很大的差異，且同一地理種源不同性狀間的表現(xiàn)趨勢(shì)也不一致，因而，如果單純從一個(gè)指標(biāo)上進(jìn)行地理種源評(píng)價(jià)選擇，必然導(dǎo)致入選范圍過(guò)大或失真的現(xiàn)象。為此綜合其各性狀指標(biāo)情況，進(jìn)行科學(xué)評(píng)價(jià)選擇顯得尤其重要。

2.2.1 把不同的計(jì)量單位轉(zhuǎn)換為統(tǒng)一的效用單位 應(yīng)用常用的一維比較法，將四年生不同雞血藤種源地徑粗、主藤條長(zhǎng)、總灰分含量、乙醇浸出物含量、總黃酮含量等不同量綱的目標(biāo)項(xiàng)目換算成同一效用單位。效用值U采用下式轉(zhuǎn)換公式：U=1-0.9（Vmax-V）/（Vmax-Vmin），將其余V值換算成效用單位值，計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表3。

2.2.2 確定性狀指標(biāo)權(quán)重系數(shù) 應(yīng)用相對(duì)比較法，依據(jù)專業(yè)知識(shí)及選擇目的，對(duì)5個(gè)性狀目標(biāo)進(jìn)行兩兩比較，其作C=10次的比較結(jié)果見(jiàn)表4。

2.2.3 綜合評(píng)價(jià)值計(jì)算及優(yōu)良地理種源選擇 根據(jù)綜合評(píng)價(jià)值=性狀指標(biāo)效用值×對(duì)應(yīng)性狀指標(biāo)權(quán)重系數(shù)的累計(jì)，計(jì)算綜合評(píng)價(jià)值。各地理種源雞血藤綜合評(píng)價(jià)值計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表5。對(duì)于密花豆而言，綜合評(píng)價(jià)值排名第一的是廣西賀州1種源，廣西賀州2種源排名第二，廣東梅州種源排名第三；對(duì)于崖豆藤，綜合評(píng)價(jià)值最高的是云南大理種源，為0.848，云南楚雄種源緊隨其后；對(duì)于常春油麻藤，湖南長(zhǎng)沙1種源排名第一，其綜合評(píng)價(jià)值為0.767。

3 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，不同地理種源雞血藤在地徑粗等5個(gè)性狀指標(biāo)上的排序不同。

采用多目標(biāo)決策方法進(jìn)行雞血藤的地理種源試驗(yàn)，就密花豆而言，綜合評(píng)價(jià)排名是廣西賀州1種源>廣西賀州2種源>廣東梅州種源>廣東深圳種源>廣東廣州種源，綜合評(píng)價(jià)值分別是0.852、0.709、0.578、0.389、0.385；對(duì)于崖豆藤而言，綜合評(píng)價(jià)排名是云南大理種源>云南楚雄種源>四川宜賓1種源>四川宜賓2種源>云南騰沖種源，綜合評(píng)價(jià)值分別是0.848、0.663、0.498、0.411、0.203；對(duì)于常春油麻藤，綜合評(píng)價(jià)排名是湖南長(zhǎng)沙1種源>湖南長(zhǎng)沙2種源，綜合評(píng)價(jià)值分別是0.767、0.344。根據(jù)綜合評(píng)價(jià)結(jié)果可初步選擇出廣西賀州1、廣西賀州2、廣東梅州3個(gè)密花豆的優(yōu)良地理種源，云南大理、云南楚雄2個(gè)崖豆藤的優(yōu)良地理種源，湖南長(zhǎng)沙1的常春油麻藤優(yōu)良地理種源。

林木多性狀綜合選擇的方法有很多，但各有利弊。多目標(biāo)決策法將復(fù)雜問(wèn)題轉(zhuǎn)化為“權(quán)值”和“評(píng)價(jià)值”的形式，然后依據(jù)特定的數(shù)學(xué)方法來(lái)綜合評(píng)判方案的優(yōu)劣，避免了由于個(gè)人的主觀見(jiàn)解所帶來(lái)的主觀性和片面性，是動(dòng)植物選育中較為理想的多性狀綜合選擇方法[15]。根據(jù)雞血藤自身的生物學(xué)特性，試驗(yàn)對(duì)于雞血藤的評(píng)價(jià)主要圍繞生長(zhǎng)情況、品質(zhì)等因素進(jìn)行。迄今為止，從雞血藤中發(fā)現(xiàn)的化合物結(jié)構(gòu)類型來(lái)看，其中關(guān)于黃酮類化合物的研究最多[16-22]。因此，試驗(yàn)選取總黃酮含量、乙醇浸出物含量、總灰分含量作為檢測(cè)性狀指標(biāo)是有意義的。由于試驗(yàn)設(shè)計(jì)和時(shí)間等方面的原因，試驗(yàn)主要以四年生雞血藤為研究對(duì)象，未能對(duì)更長(zhǎng)生長(zhǎng)時(shí)間的雞血藤進(jìn)行研究，同時(shí)試驗(yàn)只在一個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)開(kāi)展，沒(méi)能獲得雞血藤種源與環(huán)境交互作用的結(jié)果，使得進(jìn)行選擇時(shí)存在漏選的可能，因此還有待下一步觀測(cè)和探討。

參考文獻(xiàn)：

[1] 中國(guó)科學(xué)院植物研究所.中國(guó)高等植物圖鑒[M].第二冊(cè).北京：科學(xué)出版社，1972.393.

[2] 榮廣天，何 鋼，倪尚格，等.雞血藤的扦插育苗試驗(yàn)[J].北方園藝，2016（5）：171-174.

[3] 呂惠珍，吳慶華，黃寶優(yōu)，等.雞血藤規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2012，26（2）：8-10.

[4] 榮廣天，何 鋼，朱麗芳，等.雞血藤的生理生化研究進(jìn)展[J].北方園藝，2015（6）：183-186.

[5] 秦建鮮，黃鎖義.雞血藤藥理作用的研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2014（1）：180-183.

[6] CHEN M，JIA Z W，CHEN D F. Heteroclitin H，a new lignan from Kadsura Heteroclita[J].Journal of Asian Natural Products Research，2006，8（7）：643-648.

[7] 南 楠，張甘霖，王笑民.雞血藤抗腫瘤作用研究現(xiàn)狀[J].中華中醫(yī)藥雜志，2014（8）：2563-2566.

[8] SHIM S H. 20S proteasome inhibitory activity of flavonoids isolated from Spatholobus suberectus[J].Phytotherapy Research，2011， 25（4）：615-618.

[9] 余彎彎，雙鵬程，張 凌.雞血藤化學(xué)成分及藥理作用研究概況[J].江西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，26（4）：89-92.

[10] 張夏輝.雞血藤中黃酮類化合物提取及抗氧化性的研究[D].廣西柳州：廣西科技大學(xué)，2013.

[11] WANG D X，LIU P，CHEN Y H，et al. Stimulating effect of catechin，an active component of Spatholobus suberectus Dunn， on bioactivity of hematopoietic growth factor[J].Chinese Medical Journal，2008，121（8）：752-755.

[12] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（2010年版一部）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

[13] 洪 偉，林思祖.計(jì)量林學(xué)研究[M].成都：電子科技大學(xué)出版社，1993.291-296.

[14] 歐建德.觀賞型南方紅豆杉地理種源試驗(yàn)及優(yōu)良地理種源的選擇初步研究[J].西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，27（4）：134-140.

[15] 張賢良.多目標(biāo)決策法在生態(tài)公益林資源優(yōu)化配置中的應(yīng)用研究[J].林業(yè)資源管理，2002（6）：31-34.

[16] 鄭 巖，劉 樺，白焱晶，等.雞血藤黃酮類化合物的研究[J].中國(guó)中藥雜志，2008，33（2）：152-154.

[17] 崔艷君，劉 屏，陳若蕓.雞血藤有效成分研究[J].中國(guó)中藥雜志，2005，30（2）：121-123.

[18] YOON J S，SUNG S H，PARK J H，et al. Flavonoids from Spatholobus suberectus[J].Archives of Pharmacal Research，2004， 27（6）：589-592.

[19] LEE M H，LIN Y P，HSU F L，et al. Bioactive constituents of Spatholobus suberectus in regulating tyrosinase-related proteins and mRNA in HEMn cells[J].Phytochemistry，2006，67（12）：1262-1270.

[20] ZHANG S，XUAN L. New phenolic constituents from the stems of Spatholobus suberectus[J].Helvetica Chimica Acta，2006， 89（6）：1241-1245.

[21] 成 軍，梁 鴻，王 媛，等.中藥雞血藤化學(xué)成分的研究[J].中國(guó)中藥雜志，2003，28（12）：1153-1155.

[22] 黃燦輝.HPLC法測(cè)定不同產(chǎn)地雞血藤中原兒茶酸的含量[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009，15（3）：83-84.