“鳳香洗液”對(duì)高危HPV感染者和CINⅠ患者宮頸局部體液免疫的影響

李小寧 劉 霞 桂曉鳳

(陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院婦科，咸陽(yáng)，712000)

“鳳香洗液”對(duì)高危HPV感染者和CINⅠ患者宮頸局部體液免疫的影響

李小寧 劉 霞 桂曉鳳

(陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院婦科，咸陽(yáng)，712000)

目的：觀察高危人乳頭瘤病毒(Human Papillomavirus，HPV)感染及伴宮頸上皮內(nèi)瘤變(Cervical Intraepithelial Neoplasia，CIN I)的患者宮頸局部體液免疫因子的變化及中藥“鳳香洗液”對(duì)其干預(yù)作用。方法：選取單純高危HPV感染者50例(HPV組)、高危HPV感染伴CINⅠ者50例(CINⅠ組)，同期健康婦女50例作對(duì)照組。HPV組及CINⅠ組給予中藥“鳳香洗液”治療，留取各組患者治療前后陰道灌洗液，ELISA法測(cè)定SIgA、IgG、IgE濃度。結(jié)果：用藥前HPV組和CINⅠ組SIgA濃度顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，CINⅠ組變化更顯著(P<0.01)，HPV組IgG、IgE濃度顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，而CINⅠ組IgG、IgE濃度顯著低于對(duì)照組(P<0.01)；HPV組用藥后SIgA濃度顯著升高(P<0.01)，IgG、IgE濃度顯著下降(P<0.01)；CINⅠ組用藥后SIgA、IgG、IgE濃度均顯著升高(P<0.01)；HPV組、CINⅠ組用藥后SIgA、IgG、IgE水平與正常組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論：?jiǎn)渭兏呶PV感染及伴CINⅠ的患者宮頸局部體液免疫因子發(fā)生異常改變，中藥“鳳香洗液”能有效改善宮頸局部體液免疫狀態(tài)。

HPV；CIN；“鳳香洗液”；體液免疫

CIN是宮頸癌前病變，高危HPV持續(xù)感染是導(dǎo)致其發(fā)病的主要原因[1]，在接近90%的CIN和99%以上的宮頸癌組織中發(fā)現(xiàn)有高危HPV感染，但并非所有感染高危HPV的女性都發(fā)生CIN和宮頸癌變，CIN的發(fā)生除與HPV致病力和病毒載量有關(guān)外，還與機(jī)體免疫防御能力有關(guān)。在體液免疫、細(xì)胞免疫及各種細(xì)胞因子的共同作用下機(jī)體才能完成對(duì)細(xì)菌、病毒的有效預(yù)防，宿主的免疫功能低下時(shí)HPV感染無(wú)法正常清除，是其持續(xù)存在的原因。我們?cè)谇捌赱2]對(duì)宮頸局部的細(xì)胞免疫進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)在CIN患者的陰道灌洗液中，存在著Th1、Th2細(xì)胞因子的表達(dá)失衡，而使用中藥“鳳香洗液”治療后Th1因子IL-2、IL-12的表達(dá)增強(qiáng)，Th2因子IL-4、IL-10表達(dá)下降，Th1/Th2比值恢復(fù)平衡，陰道局部細(xì)胞免疫狀態(tài)得到了改善，理論上為高危HPV病毒的清除和宮頸病變向正常組織轉(zhuǎn)化提供了有利的條件。本研究通過(guò)對(duì)高危HPV感染者及伴CINⅠ的患者進(jìn)行中藥“鳳香洗液”治療，進(jìn)一步了解高危HPV感染后宮頸及陰道體液免疫因子的變化及中藥對(duì)其的干預(yù)作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 所收集的病例均來(lái)源于2014年8月至2015年8月來(lái)西電集團(tuán)醫(yī)院門診的就診者，初次就診時(shí)即進(jìn)行婦科檢查、HPV篩查聯(lián)合TCT檢查。共選取正常人群組50例，作為對(duì)照組；經(jīng)病理檢查確診為伴有高危型HPV感染的CIN I患者50例，作為CINⅠ組；宮頸篩查無(wú)異常僅為單純高危型HPV感染者50例，作為HPV組，CIN I組和HPV組為用藥組。入組前告知研究流程，簽署患者知情同意書。本課題研究已通過(guò)陜西中醫(yī)藥大學(xué)倫理委員會(huì)審核。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 所有入組的150例研究對(duì)象行婦科檢查、HPV篩查聯(lián)合TCT檢查，并留取陰道灌洗液，若TCT檢查異常則參照謝幸[1]主編的第八版《婦產(chǎn)科學(xué)》制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，行宮頸活組織病理學(xué)檢查確診。CIN I級(jí)為上皮下1/3層細(xì)胞異型性；HR-HPV感染的診斷：無(wú)菌刷順時(shí)針在宮頸表面旋轉(zhuǎn)刷5圈，留取樣本，HC-2法檢測(cè)高危HPV DNA含量，單位為RLU/CO，以RLU/CO比值≥1.0 pg/mL為陽(yáng)性。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) 入組患者均為年齡21～65歲有性生活史的女性，就診前2周內(nèi)無(wú)陰道治療，未參加其他臨床研究(未服用甾體類激素藥物)，無(wú)藥物過(guò)敏史，知情同意，依從性好。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) 急、慢性生殖系統(tǒng)感染性疾病(真菌、滴蟲、支原體、衣原體感染等，盆腔炎，子宮宮體炎)；免疫功能低下(患有各種免疫性疾病、艾滋病、惡性腫瘤或使用免疫抑制劑等)；合并其他臟器(心、腦、腎)嚴(yán)重慢性病及精神病者；妊娠期或哺乳期婦女。

1.5 脫落與剔除標(biāo)準(zhǔn) 篩選合格并進(jìn)入臨床試驗(yàn)但因不良事件、患者失訪或患者主動(dòng)要求終止試驗(yàn)而中途退出觀察的病例為脫落病例。本研究整個(gè)隨訪過(guò)程中無(wú)病例脫落。

1.6 治療方法

1.6.1 采集方法 篩選入組的150例研究對(duì)象在初次就診確診后，排空膀胱，以膀胱截石位臥于檢查床上，用陰道窺器充分暴露宮頸，用生理鹽水15 mL充分沖洗陰道壁上1/3及宮頸陰道部，于陰道后穹窿吸取灌洗液10 mL，室溫2 000 r/min離心5～10 min，取上清液進(jìn)行分裝并做標(biāo)記后，置于-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。CIN I組和HPV組于用藥治療第3個(gè)療程結(jié)束后用同樣的方法收集標(biāo)本標(biāo)記分裝，對(duì)照組在初診后3周也用同樣的方法收集標(biāo)本標(biāo)記分裝，操作過(guò)程中標(biāo)本不能混有血液及反復(fù)凍融。

1.6.2 藥物制備 鳳香洗液(由地龍、丁香、苦參、蛇床子、黃柏等七味藥物組成)，由陜西中醫(yī)藥大學(xué)制藥廠提供，實(shí)驗(yàn)用藥按要求定容，高壓滅菌備用。鳳香洗液(由地龍、丁香、苦參、蛇床子、黃柏等七味藥物組成)，由陜西中醫(yī)藥大學(xué)制藥廠提供，實(shí)驗(yàn)用藥按要求定容，高壓滅菌備用。

1.6.3 用藥方法 CIN I組和HPV組于月經(jīng)干凈后3 d開始陰道用藥。取膀胱截石位，充分暴露宮頸，用生理鹽水將陰道、宮頸沖洗干凈，用20 mL注射器抽取與無(wú)菌蒸餾水按1∶5比例稀釋后的“鳳香洗液”20 mL充分沖洗陰道宮頸局部后，用稀釋好的“鳳香洗液”浸透一塊10 cm×10 cm的紗布置于陰道穹窿部，使之充分接觸宮頸6 h后取出，紗布尾端系一無(wú)菌棉線置于患者陰道口外，以便用藥結(jié)束后患者能夠自行取出。每天用藥1次，連續(xù)用藥7 d為1個(gè)療程，共用藥3個(gè)療程，每個(gè)療程都對(duì)150例研究對(duì)象定期隨訪。

1.7 觀察指標(biāo) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)陰道灌洗液中SIgA、IgG、IgE水平。人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、免疫球蛋白E(IgE)、免疫G(IgG)ELISA試劑盒購(gòu)自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。分別取保存的上清液樣本100 μL，嚴(yán)格按照試劑盒的說(shuō)明書要求操作，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，每份標(biāo)本設(shè)置空白及標(biāo)準(zhǔn)品孔，按照說(shuō)明分別添加標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，保證每孔50 μL，剩余孔先加樣品稀釋液40 μL后加樣本10 μL，晃動(dòng)，混勻，溫育，洗滌，加酶，每孔按要求加入A、B顯色劑各50 μL，終止液50 μL，將空白孔調(diào)零，用450 nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。根據(jù)試劑盒提供的樣本制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)本中SIgA、IgG、IgE濃度。

1.8 療效判定標(biāo)準(zhǔn) 本研究?jī)H僅是對(duì)HPV感染患者及CIN1組患者宮頸局部體液免疫因子狀態(tài)的觀察，即使用了鳳香洗液也只是觀察藥物對(duì)局部體液免疫因子的影響，無(wú)所謂療效，所以沒(méi)有療效判定標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 用藥前各組陰道灌洗液中SIgA、IgG、IgE濃度的比較 陰道灌洗液中SIgA、IgG、IgE濃度的表達(dá)見(jiàn)表1。HPV組和CINⅠ組SIgA濃度顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，且CINⅠ組變化較HPV組更顯著(P<0.01)，HPV組IgG、IgE濃度顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，而CINⅠ組IgG、IgE濃度均顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。

表1 各組患者初次就診SIgA、IgG、IgE濃度

注:與對(duì)照組比較，**P<0.01；與HPV組比較，△△P<0.01

2.2 HPV組用藥前后SIgA、IgG、IgE濃度的比較 HPV組用藥前后陰道灌洗液中SIgA、IgG、IgE的定量變化見(jiàn)表2，用藥后SIgA含量較用藥前顯著升高(t=18.225 5，P<0.01)；IgG、IgE含量均顯著下降(t=35.916 9、24.646 9，P<0.01)。

表2 HPV組用藥前后SIgA、IgG、IgE濃度

注:與用藥前比較，**P<0.01

2.3 CINⅠ組用藥前后SIgA、IgG、IgE濃度的比較 CINⅠ組用藥前后陰道灌洗液中SIgA、IgG、IgE的含量變化見(jiàn)表3，用藥后SIgA、IgG、IgE含量較用藥前均顯著升高(t=15.264 2、47.926 3、20.715 4，P<0.01)。

表3 CINⅠ組用藥前后SIgA、IgG、IgE濃度

注:與用藥前比較，**P<0.01

2.4 各組研究末SIgA、IgG、IgE濃度的比較 各組研究對(duì)象末次就診陰道灌洗液中SIgA、IgG、IgE的濃度見(jiàn)表4，顯示各組患者SIgA、IgG、IgE濃度差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表4 各組患者末次就診SIgA、IgG、IgE濃度

3 討論

3.1 宮頸局部體液免疫與高危HPV感染及CIN的關(guān)系 過(guò)去大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，在抗HPV感染中細(xì)胞免疫比體液免疫更為重要，但最近有觀點(diǎn)表示黏膜組織的局部免疫中體液免疫的作用更為突出[3]，SIgA、IgG、IgE作為體液免疫的的重要成員，在黏膜組織局部免疫中發(fā)揮著重要作用。研究表明[4]，在細(xì)菌病毒感染初期，首先通過(guò)體液免疫阻止病毒在機(jī)體內(nèi)傳播，只有病毒侵染到寄主細(xì)胞中，才會(huì)啟動(dòng)細(xì)胞免疫，由此可見(jiàn)體液免疫在局部黏膜感染疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起到關(guān)鍵的作用。HPV是一種雙鏈DNA病毒，具有嗜皮膚和黏膜上皮細(xì)胞性[3]，最早感染的是宮頸外口轉(zhuǎn)化區(qū)上皮組織中的基底層細(xì)胞，Wang HK[5]等研究發(fā)現(xiàn)，觀察組中HPV-IgG陽(yáng)性表達(dá)主要分布于宮頸基質(zhì)細(xì)胞，對(duì)照組則無(wú)HPV-IgG表達(dá)。宮頸低度上皮病變時(shí)，HPV IgG最先出現(xiàn)于宮頸基質(zhì)，隨后累及宮頸復(fù)層鱗狀上皮下的1/3，當(dāng)病變擴(kuò)展為CINⅡ或Ⅲ時(shí)Ig G則累及上皮下2/3或全層。這說(shuō)明：宮頸轉(zhuǎn)化區(qū)和其他黏膜相關(guān)淋巴組織一樣是免疫效應(yīng)部位，宮頸基質(zhì)層尤其是宮頸鱗狀上皮下2/3浸潤(rùn)的HPV Ig G陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量明顯增多，表明宮頸轉(zhuǎn)化區(qū)內(nèi)發(fā)生了B細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫反應(yīng)。

宮頸處HPV感染的靶細(xì)胞是基底層的柱狀上皮細(xì)胞，HPV病毒感染通常不會(huì)引起細(xì)胞裂解[5]，很少引起炎性反應(yīng)，此外在病毒感染過(guò)程中不引起病毒血癥，只有少量病毒蛋白顆粒呈遞給免疫細(xì)胞，免疫反應(yīng)微弱，因此感染HPV后很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)都能有效地免疫逃逸[6]。即使如此，大多數(shù)HPV感染的女性會(huì)在一年內(nèi)清除體內(nèi)的病毒，使其HPV DNA檢測(cè)結(jié)果轉(zhuǎn)為陰性，只有5%～10%的感染者會(huì)發(fā)展為持續(xù)感染，進(jìn)而發(fā)展為宮頸上皮異常增生。由于HPV特殊的感染方式[7]，低滴度的病毒感染和病毒DNA保留在低水平使得病毒的生命周期得以完成，而當(dāng)免疫耗竭后，持續(xù)在低水平表達(dá)的病毒基因可被再次激活，這是HPV不容易得以徹底根治的原因之一。由于免疫反應(yīng)弱[8]，在HPV一過(guò)性感染中很少能在患者血清中檢測(cè)到抗體，即使是HPV16持續(xù)感染的人群，也只有40%～60%可以檢測(cè)到抗體，而且抗體水平遠(yuǎn)低于疫苗免疫的水平。目前應(yīng)用的HPV疫苗都是基于HPV晚期蛋白L1五聚體組裝而成的病毒樣顆粒[7]，可以誘導(dǎo)產(chǎn)生高水平的中和抗體，有效預(yù)防持續(xù)感染。疫苗誘導(dǎo)的抗體通過(guò)以下途徑產(chǎn)生保護(hù)作用：第一，血清中的抗體滲至陰道分泌液中，宮頸處濃度尤高。第二，基底細(xì)胞上皮破損，血清抗體由破損部位直接滲出。由此可見(jiàn)HPV抗體效應(yīng)的部位在宮頸局部的基底細(xì)胞，HPV病毒最早侵犯的也是宮頸基底細(xì)胞，所以，HPV感染早期主要是基底細(xì)胞處的體液免疫發(fā)揮作用。

3.2 SIgA、IgG、IgE在高危HPV感染和CIN中的變化 有研究顯示，機(jī)體約有80%的感染發(fā)生在黏膜上，而黏膜免疫的一個(gè)重要特征就是產(chǎn)生分泌型抗體。SIgA即分泌型IgA，是人體合成分泌最多的免疫球蛋白，每天的分泌量多達(dá)66 mg，是機(jī)體黏膜免疫系統(tǒng)最重要的效應(yīng)分子，SIgA在陰道局部免疫中作用巨大。研究顯示宮頸HPV感染患者SIgA明顯降低，且HPV16感染的患者SIgA更低[9]。Nguyen等[10]用重組HPV16 E7蛋白檢測(cè)HPV16特異性抗體，發(fā)現(xiàn)在宮頸癌和宮頸病變患者的陰道沖洗液中IgA抗體滴度低于對(duì)照組，提示宮頸癌患者的宮頸局部出現(xiàn)了IgA抗體的選擇性下調(diào)。劉靜[11]經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，HPV清除組中SIgA濃度高于持續(xù)感染組和正常人組，持續(xù)感染組濃度最低，說(shuō)明免疫功能正常的人，能夠分泌足夠的SIgA發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，中和HPV病毒，當(dāng)免疫缺陷SIgA分泌減少時(shí)，則出現(xiàn)HPV的感染持續(xù)。本研究發(fā)現(xiàn)，高危型HPV感染者和伴高危型HPV感染的CINⅠ患者宮頸分泌物中SIgA的的定量明顯低于正常女性，而隨著CIN的出現(xiàn)SIgA的定量明顯降低，與前述研究結(jié)果吻合，表明當(dāng)陰道局部SIgA下降，局部黏膜免疫缺陷，無(wú)法正常清除高危HPV感染，促進(jìn)了病毒感染持續(xù)。IgG在總的免疫球蛋白中占70%～75%，是人體血清最主要的免疫抗體，主要是通過(guò)被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入黏膜表面發(fā)揮其免疫排斥功能，IgG在HPV雙重感染及多重感染中發(fā)揮著重要作用[12]。目前關(guān)于HPV IgG的研究結(jié)果說(shuō)法不一。聶建輝[13]、Bierl C[14]研究發(fā)現(xiàn)，在HPV病毒的易感人群中，宮頸局部抗HPV16-Ig G抗體與宮頸病變程度和HPV16感染呈負(fù)相關(guān)，而Matsumoto認(rèn)為[15]，持續(xù)HPV感染會(huì)誘發(fā)宮頸局部強(qiáng)烈而持久的IgG抗體反應(yīng)。韓玲[16]進(jìn)一步研究證實(shí)了Matsumoto的觀點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)觀察組中宮頸HPV-Ig G1抗體表達(dá)率明顯高于對(duì)照組，而且CIN級(jí)別越高，HPV-Ig G1的陽(yáng)性率和強(qiáng)陽(yáng)性率表達(dá)越強(qiáng)。在本研究中，HPV感染組IgG抗體明顯高于正常對(duì)照組，可能是由于HPV感染在宮頸局部激發(fā)出強(qiáng)的體液免疫應(yīng)答，產(chǎn)生大量IgG抗體，而在CINⅠ組IgG抗體定量明顯下降，甚至低于正常組，這可能是由于當(dāng)病變進(jìn)展到CIN階段時(shí)，病毒基因已經(jīng)整合到宿主基因組中，宮頸病變局部缺少病毒復(fù)制，因而機(jī)體需較長(zhǎng)時(shí)間才能誘導(dǎo)出HPV-IgG抗體反應(yīng)，或從另一方面也證實(shí)，部分患者宮頸局部可能存在免疫功能缺陷，無(wú)法分泌出足夠的IgG抗體去中和病毒，才導(dǎo)致宮頸上皮發(fā)生異常增生。IgE在過(guò)敏反應(yīng)中起主導(dǎo)作用，與感染的持續(xù)和慢性化有關(guān)。關(guān)于IgE和HPV感染的關(guān)系，胡繼先[17]等研究發(fā)現(xiàn)，有HPV感染灶的慢性蕁麻疹患者經(jīng)久不愈，但經(jīng)過(guò)去除HPV感染灶和抗病毒治療之后，再治療慢性蕁麻疹，比單純作慢性蕁麻疹常規(guī)治療的對(duì)照組療效更優(yōu)，原因在于IgE主要由Th1細(xì)胞介導(dǎo)體液免疫所產(chǎn)生，通過(guò)激活嗜酸性粒細(xì)胞誘導(dǎo)抗炎細(xì)胞因子產(chǎn)生，發(fā)揮其抗感染作用。Th1/Th2比值在正常情況下處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，而HPV感染破壞了Th1、Th2的平衡，使正常情況下由Th1細(xì)胞介導(dǎo)的預(yù)防性反應(yīng)轉(zhuǎn)變成了過(guò)度反應(yīng)，引起IgE生成明顯增多，增強(qiáng)了Ⅰ型超敏反應(yīng)，導(dǎo)致蕁麻疹遷延難愈。浦紅等[18]用HPV E6、E7抗原多肽刺激樹突狀細(xì)胞后可引起大量Th1類細(xì)胞因子的分泌。由此可見(jiàn)，病毒感染早期主要是Th1反應(yīng)為主，但在炎性反應(yīng)后期，為抑制Th1介導(dǎo)的免疫損傷，Th2反應(yīng)出現(xiàn)并逐漸增強(qiáng)，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。在本研究中我們也觀察到，單純HPV感染組IgE水平較正常對(duì)照人群明顯升高，而在CINⅠ組中又明顯低于正常對(duì)照組，說(shuō)明在HPV感染的早期以Th1反應(yīng)為主，相應(yīng)的由Th1細(xì)胞介導(dǎo)產(chǎn)生的IgE也明顯升高，而當(dāng)HPV感染持續(xù)難愈繼發(fā)了CIN改變時(shí)，發(fā)生了Th1向Th2的漂移，Th2反應(yīng)出現(xiàn)并逐漸增強(qiáng)，抑制了Th1介導(dǎo)的免疫損傷，同時(shí)由Th1介導(dǎo)產(chǎn)生的IgE也相應(yīng)下降。

3.3 中藥“鳳香洗液”對(duì)高危HPV感染和CINⅠ患者的的治療作用 CIN是發(fā)生在宮頸局部組織有可能發(fā)展為宮頸癌的病變，具有雙向性，既可以不予治療的情況下自愈，也可以進(jìn)展為宮頸癌。一般從CIN到宮頸癌大約需要5～10年甚至更長(zhǎng)時(shí)間，所以這個(gè)時(shí)期需要高度關(guān)注、定期監(jiān)測(cè)隨訪，換言之，從高危型HPV感染直至機(jī)體自然清除病毒，患者需要經(jīng)歷漫長(zhǎng)的等待和不厭其煩的復(fù)診，這在一定程度上給患者帶來(lái)相當(dāng)大的精神心理負(fù)擔(dān)。CIN病情進(jìn)展與高危HPV感染的持續(xù)時(shí)間和病毒載量成正比，因此積極采取合理的治療措施，有助于促進(jìn)HPV病毒的清除[19]。目前，臨床上對(duì)于CINⅡ和Ⅲ多采用物理治療和手術(shù)治療，而對(duì)CINⅠ多選用藥物治療，常用的藥物有愛(ài)寶療、干擾素、保婦康栓等。中醫(yī)古代文獻(xiàn)中沒(méi)有“宮頸上皮內(nèi)瘤變、宮頸HPV感染”的專門論述，但根據(jù)宮頸病變所引起的“分泌物增多、性交出血、明確的贅生物”等臨床癥狀，中醫(yī)婦科將其歸為“陰癢、帶下病”的范疇，主要病因是濕邪，臨床治療帶下病常選用清熱解毒、散結(jié)除濕的藥物，適當(dāng)輔以益氣扶正。臨床治療常用藥物有：苦參、白鮮皮、蛇床子、黃柏、土茯苓、花椒、魚腥草、鴉膽子等。中藥復(fù)方“鳳香洗液”是陜西中醫(yī)藥大學(xué)賀豐杰教授經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期臨床摸索和實(shí)驗(yàn)觀察研制的中藥制劑，主要由地龍、丁香、苦參、蛇床子等7味藥物組成，以地龍、丁香為君藥，現(xiàn)代藥理研究表明[20]，地龍、丁香能促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，蛇床子、苦參具有抗腫瘤、抗病毒、抗菌、殺蟲等功效，能增加網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞的吞噬功能，具有增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能的作用。地龍[20]是傳統(tǒng)藥材，俗稱蚯蚓，既往用來(lái)治療炎性反應(yīng)、病毒感染、免疫疾病和腫瘤等，有良好的抗炎作用與活化巨噬細(xì)胞的功能，活化Fc受體，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬活性，促進(jìn)吞噬細(xì)胞分泌細(xì)胞因子TNF-α，E花環(huán)試驗(yàn)證實(shí)地龍可促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖，地龍還被證實(shí)有良好的抗腫瘤作用。我們的前期研究已經(jīng)對(duì)中藥“鳳香洗液”對(duì)宮頸局部細(xì)胞免疫狀態(tài)的影響作了深入研究，在本研究中，我們又進(jìn)一步探討了其對(duì)體液免疫的影響，發(fā)現(xiàn)HPV組和CINⅠ組的患者經(jīng)過(guò)“鳳香洗液”治療后，2組患者陰道灌洗液中的SIgA、IgG和IgE水平均恢復(fù)至正常對(duì)照組水平，再一次通過(guò)臨床試驗(yàn)證實(shí)中藥“鳳香洗液”使陰道免疫環(huán)境恢復(fù)至正常狀態(tài)，提高了陰道局部體液免疫功能，為機(jī)體抵抗并最終清除高危HPV病毒準(zhǔn)備了良好的條件。

[1]謝幸,茍文麗.婦產(chǎn)科學(xué)[M].8版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:247.

[2]李小寧,王妮,賀豐杰.高危型人乳頭瘤病毒感染宮頸上皮內(nèi)瘤變患者陰道局部白介素-10、12水平及鳳香洗液的干預(yù)作用[J].廣西醫(yī)學(xué),2015,8(37):1114-1117.

[3]穆琳,宋靜慧.子宮頸上皮內(nèi)瘤變與女性生殖道局部免疫[J].中國(guó)婦產(chǎn)科臨床雜志,2014,15(6):561-562.

[4]李世蓉,張三元,劉冬青,等.IgG、INF及CD4、CD8T細(xì)胞對(duì)不同宮頸病變高危型HPV感染轉(zhuǎn)歸的影響[J].中國(guó)婦幼保健,2015,30(30):5125-5126.

[5]Wang HK,Wei Q,Moldoveanu Z,et al.Characterization of serum antibodies from women immunized with Gardasil：A study of HPV-18 infection of primary human keratinocytes[J].Vaccine，2016,34(27):3171-3177.

[6]張慧杰,張淑蘭.宮頸癌免疫逃逸的相關(guān)機(jī)制[J].國(guó)際婦產(chǎn)科雜志,2015,41(1):87-90.

[7]Schiller JT，Castellsague X，Garland SM，et al.A review of clinical trials of humanpapillomavirus prophylactic vaccines[J].Vaccine,2012,30Suppl 5:F123-138.

[8]徐斌.初發(fā)喉乳頭狀瘤患兒HPV感染與外周血免疫功能改變的相關(guān)性研究[D].杭州：浙江大學(xué),2015.

[9]Hu J,Brendle S,Balogh K,et al.Antibody detection in tear samples as a surrogate to monitor host immunity against papillomavirus infections in vaccinated and naturally infected hosts[J].J Gen Virol,2014，95(9):2030-2037.

[10]Nguyen HH,Broker TR,Chow LT,et al.Immune responses tohuman papillomavirus in genital tract of women with cervi-cal cancer[J].Gynecol Oncol,2005,96(2):452-461.

[11]劉靜.高危型HPV持續(xù)感染與陰道局部黏膜免疫中免疫球蛋白的關(guān)系[D].天津：天津醫(yī)科大學(xué),2015.

[12]Persson CG,Eefalt JS,Grelf fL,et al.Cobutionof Plasmaderived molecule stomucosal inununedefenee,disease and repair in the airways[J].Seandinavian Journal of Immunolo，1998,47(4):302-313.

[13]聶建輝.高通量人乳頭瘤病毒及人類免疫缺陷病毒假病毒檢測(cè)體系的建立及應(yīng)用[D].吉林：吉林大學(xué),2015.

[14]Bierl C，Karem K，Poon AC，et al.Correlates of cervical mucosal antibodies to human papillomavirus 16：results from a case control study[J].Gynecol Oncol，2005,99(3):262-268.

[15]Matsumoto K，Yasugi T，Oki A，et al.IgG antibodies to HPV16，52，58 and 6 L1-capsids and spontaneous regression of cervical intraepithelial neoplasia[J].Cancer Lett，2006,231(2)：309-313.

[16]韓玲.HPV病毒顆粒IgG1_IgG2亞類抗體與宮頸上皮內(nèi)瘤變關(guān)系的研究[D].蘭州：蘭州大學(xué),2008.

[17]胡繼先,李德憲,羅芳廷,等.HPV感染與慢性蕁麻疹發(fā)病的臨床觀察[J].華夏醫(yī)學(xué),2015,28(5):31-33.

[18]浦紅,史央,陸英華,等.HPV多肽致敏的樹突狀細(xì)胞體外激發(fā)特異性CTL能力的研究[J].中華微生物學(xué)與免疫學(xué)雜志,2012,32(5):468-472.

[19]郭彥蓉,趙廣超,李文華,等.人乳頭狀瘤病毒感染對(duì)宮頸癌局部免疫功能的影響分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2014,24(13):3333-3337.

[20]楊美玲,陳瑞儀,張紫虹,等.地龍蛋白和?；撬岬目蛊谧饔煤兔庖哒{(diào)節(jié)功能的研究[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué),2015,15(5):552-554.

Effectsof“FengxiangLotion”onCervicalLocalHumoralImmunityinPatientswithHigh-RiskHPVInfectionandCINI

Li Xiaoning, Liu Xia, Gui Xiaofeng

(AffiliatedHospitalofShaanxiUniversityofChineseMedicine，Xianyang712000，China)

Objective:To observe the changes in the local humoral immune factors in the cervix and interventional effects of the “Fengxiang Lotion” on these factors in patients with high-risk HPV infection and CIN I.MethodsFifty patients with simple high-risk HPV infection (HPV group), 50 patients with high-risk HPV infection associated with CIN I (CIN I group) and 50 healthy women (control group) were selected. In the HPV group and CIN I group, patients were given the TCM “Fengxiang Lotion” as treatment; the vaginal lavage was retained before and after treatment; and the SIgA, IgG and IgE expression levels were detected using ELISA method.ResultsBefore treatment, the SIgA concentration was significantly lower in the HPV group and CIN I group than that in the control group (P<0.01); the changes were more remarkable in the CIN I group than that in the HPV group (P<0.01); the IgG and IgE concentrations were significantly higher in the HPV group than that in the control group (P<0.01), while the IgG and IgE concentrations were significantly lower in CIN I group than that in the control group (P<0.01); After treatment, there was a significant increase in SIgA concentration (P<0.01) and a significant decrease in IgG and IgE concentrations in the HPV group (P<0.01); After treatment, there were a significant increase in SIgA, IgG and IgE concentrations in the CIN I group (P<0.01); There were no statistically significant difference in post-treatment SIgA, IgG or IgE level between the control group and the HPV or CIN I group (P>0.05).ConclusionIn patients with high-risk HPV infection and CIN I, there are abnormal changes in the local humoral immune factors in cervix, such as SIgA, IgG and IgE, and “Fengxiang Lotion” effectively improves the local humoral immune state in cervix.

Human papillomavirus (HPV); Cervical intraepithelial neoplasia (CIN); Fengxiang Lotion; Humoral immunity

陜西省教育廳自然科學(xué)專項(xiàng)(2013JK0799)——中藥復(fù)方“鳳香洗液”對(duì)HR-HPV感染CIN患者病毒載量及陰道微環(huán)境的影響

李小寧(1971.10—)，女，碩士研究生，副主任醫(yī)師，研究方向：女性生殖道微生態(tài)相關(guān)疾病研究，E-mail：706366841@qq.com

劉霞(1980.08—)，女，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向：女性生殖道感染的中醫(yī)藥研究，E-mail：lily6lx@163.com

R271.1

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.10.008

(2016-07-24收稿 責(zé)任編輯：徐穎)