黃石地區(qū)2 648例就診者的HPV檢測(cè)結(jié)果分析

張 偉,汪宏良,朱杰穩(wěn),蔡小鳳

(1黃石市中心醫(yī)院,湖北 黃石 435000;2腎臟疾病發(fā)生與干預(yù)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 黃石 435000)

*通訊作者：蔡小鳳，主治醫(yī)師,碩士。

黃石地區(qū)2 648例就診者的HPV檢測(cè)結(jié)果分析

張 偉1,2,汪宏良1,2,朱杰穩(wěn)1,2,蔡小鳳1*

(1黃石市中心醫(yī)院,湖北 黃石 435000;2腎臟疾病發(fā)生與干預(yù)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 黃石 435000)

為研究湖北省黃石地區(qū)女性人乳頭瘤病毒(HPV)感染狀況及其亞型分布,回顧性分析應(yīng)用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)檢測(cè)從 2016年9月至2017年7月2 648例女性宮頸拭子HPV基因分型的結(jié)果，比較不同基因型的流行病學(xué)特點(diǎn)， 并采用SPSS 17.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果為：在2 648例檢測(cè)標(biāo)本中，檢測(cè)出HPV陽(yáng)性感染率為43.92%(1 163/2 648)。感染年齡分布以>60歲年齡段感染率最高，為63.46%；其次是≤20歲年齡段(47.56%);而后是21～30歲年齡段(47.39%)，51～60歲年齡段(44.69%)，41～50歲年齡段(42.87%)，31～40歲年齡段(40.76%),各年齡組感染率之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。20種HPV基因亞型中，居前5位的分別是HPV52(20.64%)、HPV16(14.70%)、HPV58(10.83%)、HPV6(6.45%)、HPV33(5.85%)。在不同宮頸病變的HPV感染狀況中：宮頸炎組(24.38%)、CIN I組(48.70%)、CIN II組(77.89%)、CIN III組(89.64%)、宮頸癌組(93.23%)，兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。單一型別占總感染例數(shù)的75.49%(878/1 163)；多重感染率為24.51%(285/1 163)，其中雙重感染率為17.45%(203/1 163)，三重以上混合感染率為7.05%(82/1 163)。湖北省黃石地區(qū)女性HPV感染率較高，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)HPV的篩檢力度，為HPV相關(guān)疾病的防治提供重要參考。

人乳頭狀瘤病毒；基因型；宮頸癌；宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變

隨著醫(yī)療技術(shù)和實(shí)驗(yàn)方法的不斷進(jìn)步，已在多種疾病(例如：尖銳濕疣、肛管癌、鼻腔內(nèi)癌等)中檢測(cè)出人乳頭瘤病毒(Human papiliomavirus,Hpv)的亞型。尤其在婦科疾病中，宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)、宮頸癌(cervical cancer,CC)等疾病與該病毒的感染密切相關(guān)[1]。

學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)[2]，HPV易浸染受損的宮頸上皮，并與宿主基因組整合，整合后的宮頸上皮不利修復(fù)，從而導(dǎo)致宮頸上皮內(nèi)瘤變。若此時(shí)沒有及時(shí)干預(yù)治療，而任其持續(xù)感染，就會(huì)進(jìn)一步促進(jìn)疾病的惡變[3]。同時(shí)，有文獻(xiàn)報(bào)道[4]HPV亞型的分布因地區(qū)不同而有所區(qū)別，感染與致病力因亞型的不同而有所差異。為探究黃石地區(qū)女性宮頸病變患者HPV感染狀況和亞型遍布特征，以及與宮頸病變的相關(guān)性，本研究對(duì)2 648例宮頸病變患者的HPV的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析總結(jié)。

1 資料與方法

1.1一般資料

研究對(duì)象來(lái)源于黃石市中心醫(yī)院2016年9月至2017年7月門診及住院的2 648例宮頸病變(宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤變、宮頸癌)患者，年齡15～78歲，平均年齡37.99±12.3歲。

1.2主要儀器與試劑

基因擴(kuò)增檢測(cè)系統(tǒng)(ABI7500型)：美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司；分子雜交儀(LF-III)：上海比朗儀器制造有限公司；HPV基因分型試劑盒：廣東凱普生物科技股份有限公司。

1.3檢測(cè)方法

采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和基因芯片檢測(cè)技術(shù)，由婦科醫(yī)生采用HPV專用采樣刷采取標(biāo)本后置于有標(biāo)記的專用細(xì)胞保存液中，扭緊瓶蓋。標(biāo)本采集后，立即送檢，若未能及時(shí)檢測(cè)，保存于4 ℃冰箱，一周內(nèi)完成檢測(cè)。對(duì)宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行HPV基因分型檢測(cè)：DNA的提取→擴(kuò)增→雜交→孵育→顯色嚴(yán)格按照SOP文件執(zhí)行。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。對(duì)感染狀況、感染亞型等指標(biāo)采取描述性分析，不同組別HPV感染率的差異性采用X2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1各年齡段HPV感染狀況

在2 648例患者標(biāo)本中，檢測(cè)出HPV感染的有1 163例，占檢測(cè)標(biāo)本的43.92%。對(duì)感染年齡分布進(jìn)行分析得出：60歲以上患者感染率高達(dá)63.46%；其次是≤20歲年齡段，為47.56%；而后是21～30歲年齡段，為47.39%；51～60年齡段為44.69%；41～50歲年齡段為42.87%；31～40歲年齡段，為40.76%。各年齡段間HPV陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),各年齡段HPV感染狀況如圖1所示。

圖1 各年齡段HPV感染狀況

2.2 HPV-DNA分型檢測(cè)結(jié)果

宮頸病變中HPV基因感染構(gòu)成比如圖2所示。居前5位的是HPV52(20.64%)、HPV16(14.70%)、HPV58(10.83%)、HPV6(6.45%)、HPV33(5.85%)。HPV感染在宮頸病變中的檢出率有顯著差異(X2=83.269，P=0.000)。

圖2 宮頸病變中HPV感染構(gòu)成比

不同型別感染的宮頸病變分布如圖3所示。HPV52、HPV16、HPV58 3種亞型在不同宮頸病變中的檢出率具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=32.312,19.816,15.692；P=0.000,0.002,0.003)，其余亞型檢出率無(wú)差異性(P>0.05)。用Logistic回歸分析HPV52、HPV16、HPV58與病變的相關(guān)程度，回歸系數(shù)分別為：2.582,1.255,0.962;P值分別為0.001,0.062,0.529;OR分別為16.555,6.583,1.867;95%CI分別為3.958～72.172,0.950～26.223,0.686～6.355。HPV52、HPV16、HPV58均為CIN II/CIN III致病的危險(xiǎn)因素，其中HPV52的致病風(fēng)險(xiǎn)最高(P<0.05)。

圖3 不同型別HPV感染的宮頸病變分布

2.3不同級(jí)別宮頸病變HPV感染狀況

在不同宮頸病變的HPV感染狀況中：宮頸炎組(25.26%)、CIN I組(48.70%)、CIN II組(77.89%)、CIN III組(89.64%)、宮頸癌組(93.23%)，兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。不同宮頸病變中HPV感染狀況見表1。

表1不同宮頸病變中HPV感染狀況例(%)

HPV感染狀況宮頸炎組宮頸上皮內(nèi)瘤病變組CINI組CINII組CINIII組宮頸癌組陽(yáng)性(1163例)412①(25.26)169(48.70)155(77.89)303(89.64)124(93.23)陰性(1485例)1219178②44②35②9

注：①與CINI組、CINII組、CINIII組比較，P<0.01；②與宮頸癌組比較，P<0.01

2.4宮頸病變中HPV亞型的感染狀況

在1 163例感染的患者中，只有1種基因型別為陽(yáng)性的有878例，占陽(yáng)性患者的75.49%；多種基因型共同感染的陽(yáng)性率為24.51%;2種基因型別共同感染為陽(yáng)性的有203例，占陽(yáng)性患者的17.45%;3種以上基因型別混合感染為陽(yáng)性的有82例，占陽(yáng)性患者的7.05%。宮頸病變中HPV亞型的單一感染與多重感染比較結(jié)果見表2。

表2宮頸病變中HPV亞型的單一感染與多重感染比較例(%)

組別n宮頸炎CINICINIICINIII宮頸癌X2P1、單一感染878285(69.14%)132(77.86%)109(70.63%)266(87.71%)86(69.35%)56.328③0.000③2、雙重感染20386(20.86%)26(15.27%)28(18.13%)36(11.96%)27(21.77%)8.256④0.032④3、三重以上8241(10%)11(6.87%)18(11.25%)1(0.33%)11(8.87%)6.862⑤0.022⑤

注：“③”表示A與B比較；“④”表示B與C比較；“⑤”表示A與C比較

3 討論

在臨床工作中，常見的宮頸病變有宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤變、 宮頸癌等。其中宮頸癌在全球女性中發(fā)病率比較高，是居第2位的惡性腫瘤[5]。宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)是一組與宮頸浸潤(rùn)癌密切相關(guān)的癌前病變的統(tǒng)稱，包括宮頸不典型增生和宮頸原位癌，反映了宮頸癌發(fā)生中連續(xù)發(fā)展的過(guò)程，即由宮頸不典型增生(輕→中→重)→原位癌→早期浸潤(rùn)癌→浸潤(rùn)癌的一系列病理變化[6]。人乳頭瘤病毒是一組嗜上皮組織的小雙鏈DNA病毒，其感染具有明顯的組織特異性。HPV的分子流行病學(xué)研究證實(shí)，HPV感染是宮頸癌發(fā)生的重要啟動(dòng)因子[7]。

3.1本地區(qū)HPV感染年齡分布特點(diǎn)

本研究分析發(fā)現(xiàn)HPV感染年齡分布狀況為： 60歲以上女性患者HPV的感染率比較高，達(dá)63.46%，而后是20歲及以下的女性患者，HPV的感染率為47.56%。其主要原因可能為：從生理學(xué)來(lái)講，60歲以上女性已經(jīng)進(jìn)入絕經(jīng)期階段，此階段的生理和免疫調(diào)節(jié)異常是HPV 持續(xù)感染的一個(gè)重要因素，同時(shí)，潛伏期感染病毒也被喚醒，得以復(fù)活[8]；30歲以下女性的平均感染率為47.48%，此年齡段感染率較高，可能與此階段女性性生活較為頻繁，長(zhǎng)期的刺激會(huì)導(dǎo)致局部免疫力低下，HPV的獲得易感性增加[9]；20歲以下女性患者的HPV陽(yáng)性率也比較高，表明本地區(qū)的HPV感染已趨于年輕化，需要擴(kuò)大其篩查的年齡范圍。在研究分析中發(fā)現(xiàn)較高年齡階段患者HPV的陽(yáng)性率間的差異并不明顯，可能與來(lái)我院診治患者的人群和標(biāo)本收集的數(shù)量有關(guān)，在后繼研究中，應(yīng)加大年齡范圍的普查和標(biāo)本數(shù)量的采集。此外，還應(yīng)增強(qiáng)性知識(shí)的健康教育，減少HPV的感染途徑，從而達(dá)到降低宮頸疾病發(fā)病率的目的。

3.2本地區(qū)HPV感染型別分布特點(diǎn)

在已經(jīng)證實(shí)的200多種亞型HPV中，約有30～40種以上為嗜肛生殖器粘膜型，生殖器HPV感染是一種最常見的性傳播疾病，僅次于衣原體和滴蟲病而居第3位。流行病學(xué)調(diào)查報(bào)告[10]顯示，日前感染女性的HPV的亞型主要為16，18，31，52 和 58，感染的亞型因地域的不同而有所區(qū)別。在歐美等國(guó)家，與宮頸病變尤其是宮頸癌有密切關(guān)聯(lián)的亞型是HPV16、HPV18這2個(gè)亞型，而在亞洲的一些國(guó)家區(qū)域里，與宮頸癌有密切關(guān)聯(lián)的亞型是HPV52、HPV58[11]，即提示在這些地區(qū)HPV疫苗應(yīng)包括這2個(gè)型別。在本次分析研究中發(fā)現(xiàn)，在本地區(qū)域內(nèi)，與宮頸癌有密切關(guān)聯(lián)的亞型是HPV52、HPV16、HPV58，其中CIN II、CIN III以上患者排在前5位的分別是HPV52、HPV16、HPV58、HPV6、HPV33、HPV18。HPV52是本地區(qū)域感染率最高的HPV亞型，也是宮頸疾病的最大威脅。這些HPV亞型的分布凸顯出黃石地區(qū)感染的型別有自身特點(diǎn)，期望這種因地域而異的亞型感染可以為當(dāng)?shù)蒯t(yī)療衛(wèi)生部門進(jìn)行監(jiān)測(cè)和精準(zhǔn)防治提供幫助。

3.3 HPV感染與宮頸疾患的關(guān)系

數(shù)據(jù)分析顯示，從宮頸炎到宮頸上皮內(nèi)瘤變?cè)俚綄m頸癌這一系列病變的逐漸加重變化中，HPV的感染率也是隨之增高的，這表明宮頸病變的發(fā)生、發(fā)展與HPV的連續(xù)感染有關(guān)。有文獻(xiàn)報(bào)道，2種以上HPV亞型的感染會(huì)增加宮頸病變發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)；1種HPV亞型連續(xù)感染時(shí)，患者宮頸病變?yōu)閻盒圆∽兊母怕蕿?9.9%;當(dāng)2種及以上亞型同時(shí)感染時(shí)，這種患病惡性風(fēng)險(xiǎn)的概率提升31.8倍[12]。本研究中單一感染在CIN I、CIN II、CIN III中分別占77.86%，70.63%，87.71%，高于宮頸癌中HPV的感染率69.35%；然而，宮頸癌患者2種及以上HPV亞型的感染率要高于CIN患者，這在很大程度上說(shuō)明2種及以上HPV亞型的感染較1種亞型的感染更有促進(jìn)宮頸病變癌變的可能。

綜上研究表明，HPV的感染與宮頸病變的發(fā)展進(jìn)程密切相關(guān)，在日常醫(yī)療健康防護(hù)工作中要重視HPV的篩檢工作，這對(duì)宮頸病變的防治具有重要意義。

[1] Yang L,He Z,Huang XY,et al.Prevalence of human papillomavirus and the correlation of HPV infection with cervical disease in Weihai,China[J].European Journal of Gynaecological Oncology,2015,36(1):73-74.

[2] Jung YS,Kato I,Kim HR.A novel function of HPV16-E6/E7 in epithelial-mesenchymal transition[J].Biochemical & Biophysical Research Communications,2013,435(3):339-344.

[3] 邱笑飛,林敏,姚招男,等.宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌I期患者高危型人乳頭瘤病毒的變化情況[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2017,27(7):1597-1600.

[4] 朱慧慧.調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與HPV感染性疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J].腫瘤預(yù)防與治療,2015,28(4):232-235.

[5] 王軼英,王悅,喬友林,等.中國(guó)宮頸癌篩查未來(lái)之路——細(xì)胞學(xué)初篩的棄或守[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2017(3):324-326.

[6] 沈依帆,徐曼,王欣,等.人子宮頸癌腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)與T細(xì)胞亞型及臨床病理特征的相關(guān)性分析[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué),2016,35(12):3235-3240.

[7] Goodman A.HPV testing as a screen for cervical cancer[J].Bmj,2015,350(1):23-27.

[8] 韋明秀,朱允菊,沈雪敏,等.人乳頭狀病瘤病毒感染與宮頸癌及癌前病變關(guān)系的臨床研究[J].中華腫瘤防治雜志,2016,23(s1):198-199.

[9] Tang L,LI Hai-Ying,LY Liu,et al.Changes of cervical local and peripheral blood T cell subsets and interleukins in patients with HPV infection[J].Hainan Medical Journal,2016,32(5):532-535.

[10] DM Schütze,O Krijgsman,PJ Snijders,et al.Immortalization capacity of HPV types is inversely related to chromosomal instability[J].Oncotarget,2016,7(25):37608-37621.

[11] 范成嬌,李靜,魯愛枝.HPV52/58感染與女性宮內(nèi)病變發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性研究[J].中國(guó)婦幼保健,2015,30(6):841-843.

[12] Lu D,Sundstr?m K,Sparén P,et al.Bereavement is associated with an increased risk of HPV infection and cervical cancer:an epidemiological study in Sweden[J].Cancer Research,2016,76(3):643-644.

Analysis of Epidemic Epidemiological Characteristics of Female HPV Infection Status of 2,648 Cases in Huangshi

ZhangWei1,2,WangHongliang1,2,ZhuJiewen1,2,CaiXiaofeng1*

(1Huangshi Central Hospital,Huangshi Hubei 435000;2Hubei Key Laboratory of Kidney Disease Pathogenesis and Intervention,Huangshi Hubei 435000)

Objective:To investigate infection status and distribution of cervical human papillomavirus(HPV)in huangshi,hubei province.Methods:All 2,648 cases were studied.Cervical cell specimens and 20 hpv genotypes were analyzed by PCR and reverse dot blot gene chip technology.Results:Total of 1 163 specimens were found with positive HPV among 2 648 cases,the positive rate was 43.92%(1 163/2 648).The infection rate in>60 years old was the highest(63.46%),next was≤20 years old(47.56%),21～30 years old(47.39%)，51～60 years old(44.69%)，41～50 years old(42.87%)，31～40 years old(40.76%).However,there was no satistical difference among age groups(P>0.05).20 kinds of HPV gene subtype,the top five was respectively HPV52(20.64%),HPV16 (14.70%),HPV58(10.83%),HPV6 (6.45%),HPV33 (5.85%).Different cervical lesions of HPV infection status were cervicitis group (24.38%),CIN I(48.70%),CIN II group(77.89%),CIN III group(89.64%),cervical cancer(93.23%),multiple comparison among these was statistically significant(P<0.01).The infection rate of single subybe was 75.49%(878/1 163),Multiple infection rate was 24.51%(285/1 163).With dual infection in 17.45%(203/1 163),more than triple mixed infection rate was 7.05%(82/1 163).Conclusion:HPV infection rate is higher in Huangshi city,the HPV screening should be done and strengthened,which can provide a valuable reference for the prevention and treatment of HPV related disease.

human papillomavirus (HPV);genotype;cervicalcancer;cervical intraepithelial neoplasia lesions(CIN)

2017-08-21

黃石市醫(yī)藥衛(wèi)生科研立項(xiàng)項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)[2016]269號(hào)-35)。

張偉，主管技師，碩士。

10.3969/j.issn.2095-4565.2017.05.012

R711.74

A

2095-4565(2017)05-0055-04

(責(zé)任編輯吳鴻霞)