肉雞新城疫母源抗體衰減規(guī)律和免疫程序試驗(yàn)

盧運(yùn)戰(zhàn) ， 程幫照 ， 楊金兵 ， 諸亞平 ， 李 楊 ， 王 穎 ， 劉鵬義 ， 趙宏波

(1．安徽省宣州區(qū)畜牧獸醫(yī)管理局 , 安徽 宣城 242000 ； 2.安徽省宣城市畜牧獸醫(yī)局 , 安徽 宣城 242000 ；3.安徽華衛(wèi)集團(tuán)禽業(yè)有限公司 , 安徽 宣城 242000)

肉雞新城疫母源抗體衰減規(guī)律和免疫程序試驗(yàn)

盧運(yùn)戰(zhàn)1， 程幫照2， 楊金兵1， 諸亞平1， 李 楊1， 王 穎3， 劉鵬義3， 趙宏波3

(1．安徽省宣州區(qū)畜牧獸醫(yī)管理局 , 安徽 宣城 242000 ； 2.安徽省宣城市畜牧獸醫(yī)局 , 安徽 宣城 242000 ；3.安徽華衛(wèi)集團(tuán)禽業(yè)有限公司 , 安徽 宣城 242000)

雞新城疫(ND)是由雞新城疫病毒引起雞的一種急性、高度接觸性、高致死性傳染病，嚴(yán)重危害養(yǎng)雞生產(chǎn)，疫苗免疫是預(yù)防和控制ND的主要手段，有的養(yǎng)殖場免疫途徑選擇不合理，有的免疫次數(shù)過多，有的免疫時機(jī)不佳，免疫失敗情況也時有發(fā)生，研究雞新城疫母源抗體的消退規(guī)律，建立科學(xué)合理的免疫程序?qū)π鲁且叻揽赜袑?shí)際意義。

當(dāng)前多數(shù)肉雞養(yǎng)殖場在1日齡采用噴霧、點(diǎn)眼或滴鼻等方式進(jìn)行免疫，本試驗(yàn)中，對1日齡雛雞用ND活苗分別進(jìn)行噴霧、點(diǎn)眼和滴鼻3種免疫途徑接種，設(shè)定對照組，通過檢測抗體水平，可確定1日齡的免疫途徑，也為第二次免疫時間提供科學(xué)依據(jù)；第二次加強(qiáng)免疫中，選擇注射和飲水兩種方法，比較免疫效果，從而建立肉雞新城疫免疫程序。

1 材料與方法

1.1 疫苗 雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗(HB1株+H120株)，購自北京信得威特科技有限公司，生產(chǎn)批號：201603001；用于噴霧、滴鼻、點(diǎn)眼和飲水免疫，免疫劑量均按說明書要求操作。雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感(H9亞型)三聯(lián)滅活疫苗(LaSota株+M41株+WD株)(派力優(yōu))，購自四川省華派生物制藥有限公司，生產(chǎn)批號：2016004；用于注射免疫，免疫劑量按說明書要求操作。

1.2 檢測試劑 雞新城疫血凝抑制試驗(yàn)抗原，購自哈爾濱動物生物制品國家工程研究中心有限公司(批號：20151103)；雞新城疫血凝抑制試驗(yàn)陽性血清和陰性血清，購自哈爾濱動物生物制品國家工程研究中心有限公司(批號：20151101)。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 1日齡健康皖江黃雛雞2 400羽，由安徽華衛(wèi)集團(tuán)禽業(yè)有限公司提供，分成5組，共2個批次，第一組來源同一批次，共300羽，第二、三、四、五組來源同一批次，其中第三組900羽，其他每組300羽。第一、二組作為對照，不進(jìn)行任何免疫；第三組1日齡雛雞進(jìn)行ND噴霧免疫，第四組1日齡雛雞進(jìn)行ND點(diǎn)眼免疫，第五組1日齡雛雞進(jìn)行ND滴鼻免疫。試驗(yàn)雞由安徽華衛(wèi)集團(tuán)禽業(yè)有限公司在隔離場所按常規(guī)方法進(jìn)行飼養(yǎng)管理[1]，分別于1、4、7、10、13、16、19、22日齡采集血樣，每組每次采樣30羽，18日齡前用心臟采血，18日齡后翅靜脈采血，采樣后雞只廢棄，血樣放于室溫待自然淅出血清后，取血清于離心管中，放置于-20 ℃冰箱冷凍保存待檢。13日齡時，選取第三組噴霧免疫組雞600羽，平均分成A、B兩小組，A組進(jìn)行注射免疫，B組進(jìn)行飲水免疫，每隔4天分別進(jìn)行翅靜脈采血30羽，血樣放于室溫待自然淅出血清后，取血清于離心管中，放置于-20 ℃冰箱冷凍保存待檢。

1.4 抗體檢測方法 按照國標(biāo)《新城疫診斷技術(shù)》(GB/T 16550-2008) 中血凝和血凝抑制試驗(yàn)(HA-HI)方法進(jìn)行抗體檢測。每組按采樣日齡分別計(jì)算平均值。

2 結(jié)果

2.1 不同批次皖江黃肉雞新城疫母源抗體衰減規(guī)律 對兩組不同批次的試驗(yàn)雞群，采集其不同日齡血樣進(jìn)行ND抗體的HI效價測定。由表1可知，兩組1日齡皖江黃雛雞的ND母源抗體HI效價平均值分別是7.8 log2、和7.5 log2， 10 日齡分別降至5.95 log2和4.60 log2，22 日齡降至2.65 log2和2.35 log2。依據(jù)母源抗體滴度衰減規(guī)律，10～13日齡進(jìn)行1次加強(qiáng)免疫為宜。

表1 兩批次皖江黃雞ND母源抗體的動態(tài)變化 (log2)

2.2 同一批次1日齡雛雞不同免疫接種方法新城疫抗體測定 對同一批次的第2、3、4、5組雞群在不同日齡采樣后檢測新城疫抗體，檢測結(jié)果如表2所示，經(jīng)噴霧、點(diǎn)眼、滴鼻免疫后，免疫組抗體滴度比空白對照組略高，但抗體均勻度有所提升，3種免疫途徑間的免疫效果差異不顯著。

表2 同一批次1日齡雛雞不同免疫方法ND抗體的動態(tài)變化 (log2)

2.3 1日齡噴霧免疫，13日齡注射免疫和飲水免疫效果監(jiān)測 13日齡時，采用注射免疫和飲水免疫兩種方法分別進(jìn)行ND第二次免疫，抗體監(jiān)測結(jié)果如表3所示，由此可知，1日齡進(jìn)行噴霧免疫，13日齡進(jìn)行注射免疫可獲得良好的ND免疫效果；1日齡進(jìn)行噴霧免疫，13日齡進(jìn)行飲水免疫ND免疫效果不明顯。

表3 1日齡噴霧免疫，13日齡注射免疫和飲水免疫效果監(jiān)測 (log2)

3 討論

測定ND母源抗體的衰減規(guī)律對于制定科學(xué)合理的ND免疫程序是十分重要的基礎(chǔ)性工作，本試驗(yàn)選取了兩組不同批次的皖江黃雞為試驗(yàn)對象，研究母源抗體衰減規(guī)律。試驗(yàn)中，兩批次皖江黃雞ND母源抗體高低有所不同，這與父母代雞的ND抗體高低直接相關(guān)，隨著雞日齡的增長，血清中母源抗體水平逐漸降低，至22日齡時，兩批皖江黃雞的母源抗體退到2.5 log2左右。選擇其中一批試驗(yàn)雞，對1日齡雛雞分別進(jìn)行噴霧、點(diǎn)眼和滴鼻免疫后，測定其血清中ND抗體，通過數(shù)據(jù)分析可以得出，3種免疫接種方法，其血清中ND抗體差異不顯著，但與不免疫的空白對照組相比，抗體滴度下降較慢，抗體均勻度有所提高，考慮到操作簡易性，1日齡噴霧免疫是比較不錯的選擇。

在第二次免疫中，根據(jù)1日齡雛雞噴霧免疫后抗體的滴度下降規(guī)律，在10-13日齡時，抗體滴度降至5.0 log2左右，此時是加強(qiáng)免疫的最好時機(jī)，以弱毒苗飲水和死苗注射兩種免疫途徑進(jìn)行，每隔4 d監(jiān)測抗體1次，通過抗體滴度數(shù)據(jù)不難發(fā)現(xiàn)，注射免疫可獲得可靠的免疫抗體滴度，抗體峰值較高，最高可達(dá)9.68 log2，均勻度高；而飲水免疫后，效果不明顯，峰值最高只達(dá)到5.10 log2，離散度高，注射免疫效果明顯好于飲水免疫。

在傳染病的預(yù)防接種中，局部免疫作用有利于封鎖入侵門戶，是防制傳染病的較好措施。由于新城疫病毒，對黏膜有特殊的親嗜性，極易經(jīng)呼吸道感染而發(fā)病，雛雞早期抵抗ND病毒感染的機(jī)制主要依靠的是黏膜的局部免疫作用。通過疫苗在體內(nèi)的占位性免疫，先入為主，干擾野毒的入侵。弱毒活疫苗通過滴鼻、點(diǎn)眼和氣霧途徑免疫，均可產(chǎn)生局部黏膜抗體和免疫記憶細(xì)胞，且這種抗體的產(chǎn)生不受母源抗體的影響，因而1日齡進(jìn)行噴霧免疫，抗體滴度雖不能很大幅度提高，但對于早期新城疫的防控具有重要意義。周寶貴等[2]提倡1日齡進(jìn)行活苗免疫。

綜上所述，根據(jù)母源抗體衰減規(guī)律和黏膜的局部免疫作用原理，以及本試驗(yàn)的監(jiān)測結(jié)果，肉雞新城疫免疫程序推薦為1日齡用活苗進(jìn)行噴霧免疫，13日齡采用滅活苗進(jìn)行注射免疫，可取得良好效果。這種弱毒疫苗和滅活疫苗間隔免疫法與孟建斌等[3]報道的相符。

[1] 馮永志. 皖江黃雞飼養(yǎng)管理技術(shù)[J]. 農(nóng)技服務(wù),2011,28(7):1 017-1 055.

[2] 周寶貴,盧國強(qiáng),邢千旺，等. 雞群新城疫免疫應(yīng)堅(jiān)持的原則[J]. 中國家禽,2005,27(21):51.

[3] 孟建斌,溫志醫(yī),王興龍，等. 弱毒疫苗和滅活疫苗間隔免疫法提高雞群新城疫苗免疫效果的研究[J]. 畜牧獸醫(yī)科技信息,2014,05:13-14.

S855.3

B

0529-6005(2017)09-0051-02

2017-01-16

盧運(yùn)戰(zhàn)(1980-)，男，獸醫(yī)師，碩士，主要從事動物疫病防控工作，E-mail: lyz0563@163.com