蝙蝠葛堿在人乳腺癌MCF-7細(xì)胞對(duì)5氟尿嘧啶敏感性的研究

李紅陽(yáng) 孫 亮 姜 醒 苑光軍 劉 艷

·基礎(chǔ)研究·

蝙蝠葛堿在人乳腺癌MCF-7細(xì)胞對(duì)5氟尿嘧啶敏感性的研究

李紅陽(yáng)1孫 亮2姜 醒3苑光軍3劉 艷1

目的探討人乳腺癌MCF-7細(xì)胞受蝙蝠葛堿(Dauricine，Dau)作用后，對(duì)5氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的影響。方法分別以終濃度為2.5 μg/mL的蝙蝠葛堿、50 μg/mL的5-FU、2.5 μg/mL的蝙蝠葛堿和50 μg/mL的5-FU作用于人乳腺癌細(xì)胞MCF-7，運(yùn)用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性，Transwell實(shí)驗(yàn)分析細(xì)胞的遷移，DAPI染色檢測(cè)細(xì)胞的凋亡，Western blot法檢測(cè)cyclinD1和Bcl-2蛋白的表達(dá)。結(jié)果MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示聯(lián)合使用閾下濃度的蝙蝠葛堿增強(qiáng)了5-FU對(duì)細(xì)胞增殖的抑制；Transwell實(shí)驗(yàn)表明聯(lián)合應(yīng)用閾下濃度的蝙蝠葛堿進(jìn)一步加劇了5-FU對(duì)細(xì)胞遷移的抑制；DAPI染色說(shuō)明聯(lián)合應(yīng)用閾下劑量的蝙蝠葛堿加強(qiáng)了5-FU對(duì)細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)，Western blot實(shí)驗(yàn)表明聯(lián)合應(yīng)用閾下濃度的蝙蝠葛堿進(jìn)一步抑制了cyclinD1和Bcl-2蛋白的表達(dá)。結(jié)論蝙蝠葛堿可有效增強(qiáng)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞對(duì)5-FU的敏感性。

蝙蝠葛堿；5氟尿嘧啶；乳腺癌；MCF-7細(xì)胞

乳腺癌是中國(guó)女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，占女性新發(fā)癌癥總數(shù)的25%[1-2]。因此，乳腺癌的防治具有重要的價(jià)值與意義?；瘜W(xué)療法是治療乳腺癌的一種重要手段，5氟尿嘧啶(5-FU)是一種常見(jiàn)的治療乳腺癌化療藥物，但是通過(guò)臨床觀察表明，乳腺癌對(duì)5-FU的耐藥性越來(lái)越突出[3]。輔助藥物的開(kāi)發(fā)和利用為解決化療藥物的耐藥性提供了途徑。

蝙蝠葛堿是從北豆根的根莖中提取的生物堿[4]。蝙蝠葛堿有抗心律失常、抗腦缺血、抗腫瘤以及逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥性等作用[5-6]，有研究結(jié)果顯示蝙蝠葛堿對(duì)人肺癌細(xì)胞QG-56、人膀胱癌細(xì)胞T24等有良好的抑制增殖作用，而且量效關(guān)系良好[7-8]，其抗腫瘤的功能與抑制NF-κB通路有關(guān)[9]，但是關(guān)于蝙蝠葛堿對(duì)于5-FU在乳腺癌中的增敏作用鮮有報(bào)道。本研究擬將閾下濃度的蝙蝠葛堿與5-FU聯(lián)用，探究能否增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞對(duì)5-FU的化學(xué)敏感性，為解決5-FU臨床耐藥性找出可能的方法，以此提高化療的敏感性，減少相關(guān)化療藥物的毒副反應(yīng)，為進(jìn)一步探討其可能的作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

MCF-7細(xì)胞由中科院上海生物細(xì)胞所引進(jìn)，蝙蝠葛堿購(gòu)自美國(guó)Sigma公司，用二甲基亞砜(DMSO)配成5mg/mL貯存液，-20℃冰箱保存，實(shí)驗(yàn)時(shí)用DMEM高糖培養(yǎng)基稀釋?zhuān)籇MEM高糖培養(yǎng)基、胎牛血清(FBS)、青、鏈霉素均購(gòu)自美國(guó)Gibco公司；四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)和二甲基亞砜(DMSO)均購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；5氟尿嘧啶(5-FU)購(gòu)自美國(guó)Sigma公司。

1.2 MCF-7的培養(yǎng)與分組

體外細(xì)胞培養(yǎng)于含10%小牛血清以及100 U/mL青霉素和100 U/mL鏈霉素的DMEM高糖培養(yǎng)液中，37℃、5% CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，細(xì)胞長(zhǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期用于實(shí)驗(yàn)。

第一步篩選實(shí)驗(yàn)每組依次加入蝙蝠葛堿至終濃度為0.6 μg/mL、1.2 μg/mL、2.5 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL，空白對(duì)照組不加藥。第二步細(xì)胞分為四組，空白對(duì)照組不加藥(Blank組)，其余三組分別加入終濃度為2.5 μg/mL的蝙蝠葛堿(Dau組)、50 μg/mL的5-FU(5-FU組)、2.5 μg/mL的蝙蝠葛堿和50 μg/mL的5-FU(Dau+5-FU組)。

1.3 MTT檢測(cè)

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF-7細(xì)胞，配制成2×104/mL單細(xì)胞懸液，接種于96孔培養(yǎng)板，每孔200 μL于培養(yǎng)箱中孵育過(guò)夜后加藥。第一步篩選實(shí)驗(yàn)分為六組，每組5個(gè)復(fù)孔，調(diào)零孔只加入PBS；空白對(duì)照組不加藥物，實(shí)驗(yàn)組分別加入藥物培養(yǎng)，第二步實(shí)驗(yàn)一共分為四組，每組5個(gè)復(fù)孔，調(diào)零孔只加入PBS；空白對(duì)照組不加藥物；實(shí)驗(yàn)組分別加入不同濃度藥物。于培養(yǎng)箱中孵育24 h后每孔加入10 μL MTT溶液(5 mg/mL)，繼續(xù)培養(yǎng)4 h后終止培養(yǎng)。吸掉孔內(nèi)培養(yǎng)液于每孔加入100 μL二甲基亞砜，置搖床上低速振蕩10 min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀490 nm處測(cè)量各孔的吸光度值。計(jì)算藥物對(duì)細(xì)胞的抑制率。抑制率(%)=(1-實(shí)驗(yàn)組OD值/對(duì)照組OD值)×100%。上述實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.4 Transwell實(shí)驗(yàn)

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF-7細(xì)胞，配制成1×105/mL單細(xì)胞懸液，取200 μL加入24孔板上室中，24孔板下室培養(yǎng)加入500 μL含各種藥物的培養(yǎng)液，培養(yǎng)24 h后，甲醛固定，結(jié)晶紫染色后拍照觀察。計(jì)數(shù)5個(gè)區(qū)域取平均值。

1.5 DAPI染色

調(diào)節(jié)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF-7細(xì)胞，配制成2×105/mL單細(xì)胞懸液，六孔板中每孔2 mL，待細(xì)胞貼壁時(shí)依次加入含有藥物的培養(yǎng)基，對(duì)照組不加藥。繼續(xù)培養(yǎng)24 h后，多聚甲醛固定20 min，Tritonx-100打孔5 min，在避光條件下加入DAPI染色5 min，用400倍熒光顯微鏡進(jìn)行凋亡形態(tài)學(xué)觀察。計(jì)數(shù)有效細(xì)胞，五個(gè)區(qū)域取平均值。凋亡率(%)=(1-實(shí)驗(yàn)組有效細(xì)胞數(shù)/對(duì)照組有效細(xì)胞數(shù))×100%。

1.6 Western blot檢測(cè)

處于對(duì)數(shù)取生長(zhǎng)期的MCF-7細(xì)胞，配制成1×105/mL單細(xì)胞懸液，實(shí)驗(yàn)組分別加入2.5 μg/mL的蝙蝠葛堿(Dau-1組)、50 μg/mL的5-FU(5-FU組)、5 μg/mL的蝙蝠葛堿(Dau-2組)、2.5 μg/mL的蝙蝠葛堿和50 μg/mL的5-FU(Dau-1+5-FU組)，對(duì)照組不加任何藥物。按照提取蛋白-測(cè)定蛋白濃度-蛋白上樣-電泳-轉(zhuǎn)膜-封閉-一抗孵育-二抗孵育-蛋白檢測(cè)。得到圖像并分析。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，其中MTT篩選實(shí)驗(yàn)采用單因素方差分析，其余組采用雙因素方差分析，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 蝙蝠葛堿聯(lián)合5-FU對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖的抑制效應(yīng)

MTT篩選實(shí)驗(yàn)顯示，2.5 μg/mL的蝙蝠葛堿與空白對(duì)照組比較無(wú)明顯差異，作為蝙蝠葛堿的閾下濃度(圖1A)。Dau組對(duì)MCF-7細(xì)胞的抑制率為(5.12±1.23)%，與空白對(duì)照組比較對(duì)細(xì)胞增殖無(wú)明顯抑制(P>0.05)；5-FU組對(duì)癌細(xì)胞的抑制率為(30.25±2.23)%，與空白對(duì)照組比較，對(duì)細(xì)胞的增殖有一定的抑制效應(yīng)(P<0.05)；Dau+5-FU組對(duì)癌細(xì)胞的增殖抑制率升高為(60.25±2.25)%，與空白對(duì)照組、Dau組、5-FU組相比較，對(duì)癌細(xì)胞的增殖都有一定的抑制作用，說(shuō)明閾下濃度的蝙蝠葛堿可以增強(qiáng)對(duì)癌細(xì)胞增殖的抑制(圖1B)。

圖1 MTT檢測(cè)蝙蝠葛堿、5氟尿嘧啶作用于MCF-7細(xì)胞24 h后細(xì)胞增殖抑制率Figure 1 The inhibitory rates of proliferation were calculatod in MCF-7 cells treated with dauricine or 5-FU for 24 hNote：A.The inhibitory rate of dauricine in MCF-7 cells；B.The inhibitory rate of dauricine or 5-FU in MCF-7 cells.*P<0.05，compared to the control or 5-FU groups.

2.2 蝙蝠葛堿聯(lián)合5-FU對(duì)MCF-7細(xì)胞遷移的影響

Dau組與空白對(duì)照組比較，對(duì)細(xì)胞遷移幾乎沒(méi)有影響；5-FU組與空白對(duì)照組比較，5-FU組對(duì)細(xì)胞的遷移有一定的抑制作用(P<0.05)；Dau+5-FU組與5-FU組相對(duì)比，兩者合用比單用5-FU對(duì)細(xì)胞的遷移抑制作用大大增強(qiáng)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明閾下濃度的蝙蝠葛堿可以增強(qiáng)對(duì)癌細(xì)胞遷移的抑制(圖2)。

圖2 Transwell小室檢測(cè)蝙蝠葛堿、5氟尿嘧啶對(duì)MCF-7細(xì)胞24 h后遷移的影響Figure 2 The cell migration of dauricine or 5-FU in MCF-7 cellsNote：A.Crystal violet staining；B.The statistical results of migration.*P<0.05，compared to the control or 5-FU groups.

2.3 蝙蝠葛堿聯(lián)合5-FU對(duì)MCF-7細(xì)胞凋亡率的影響

應(yīng)用DAPI染色觀察各組藥物對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。當(dāng)培養(yǎng)24 h后，Dau組與空白對(duì)照組比較時(shí)，對(duì)細(xì)胞凋亡沒(méi)有明顯影響；當(dāng)5-FU組與空白對(duì)照組比較時(shí)，5-FU組對(duì)促進(jìn)細(xì)胞凋亡有一定的效果(P<0.05)；將蝙蝠葛堿與5-FU聯(lián)用組與單用5-FU組比較時(shí)，對(duì)細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡的能力大大增強(qiáng)(P<0.05)，說(shuō)明閾下濃度的蝙蝠葛堿可增強(qiáng)對(duì)癌細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用(圖3)。

圖3 應(yīng)用DAPI染色檢測(cè)蝙蝠葛堿、5氟尿嘧啶對(duì)MCF-7細(xì)胞24 h后凋亡的影響Figure 3 Effects of dauricine or 5-FU on apoptosis of MCF-7 cells after 24 hours treatment by DAPI stainingNote：A.MCF-7 cell DAPI staining；B.The DAPI staining MCF-7 cell apoptosis rate statistics，*P<0.05.

2.4 蝙蝠葛堿對(duì)MCF-7細(xì)胞cyclinD1和Bcl-2表達(dá)的影響

Dau-1組對(duì)cyclinD1和Bcl-2的表達(dá)與對(duì)照組相對(duì)比沒(méi)有明顯變化，Dau-2組對(duì)基因的表達(dá)產(chǎn)生了較為明顯的影響。共用閾下濃度的蝙蝠葛堿(Dau-1)和5-FU組使cyclinD1和Bcl-2基因表達(dá)明顯下降，而單用5-FU組對(duì)其相關(guān)基因表達(dá)影響較小，共用組比單用5-FU組和Dau-2組對(duì)基因表達(dá)的抑制明顯。說(shuō)明2.5 μg/mL的蝙蝠葛堿增強(qiáng)了5-FU對(duì)乳腺癌細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)，使增殖相關(guān)的cyclinD1基因和抗凋亡基因Bcl-2的表達(dá)進(jìn)一步下降，即通過(guò)抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)凋亡來(lái)實(shí)現(xiàn)抗腫瘤的作用(圖4)。

圖4 應(yīng)用Western blot分析蝙蝠葛堿、5氟尿嘧啶對(duì)MCF-7細(xì)胞作用24 h后cyclinD1和Bcl-2相關(guān)蛋白的表達(dá)Figure 4 The expression of Bcl-2 and cyclin D1 in MCF-7 cells.MCF-7 cells treated with dauricine or 5-FU for 24 h.The expression of cyclin D1 and Bcl-2 protein was determined by Western blot.

3 討論

乳腺癌是女性發(fā)病率較常見(jiàn)的腫瘤，其中雌激素受體(ER)陽(yáng)性乳腺癌占臨床所有乳腺癌的60%～65%[10]。本研究選取的MCF-7細(xì)胞是研究乳腺癌的一種經(jīng)典的細(xì)胞系，其雌激素受體為陽(yáng)性。而且5-FU作用于MCF-7細(xì)胞是常規(guī)的乳腺癌藥物治療模型，常用作乳腺癌抗腫瘤藥物開(kāi)發(fā)相關(guān)研究的一線臨床藥物對(duì)照，其臨床毒性作用和耐藥性具有典型性[11]。因此，選擇MCF-7細(xì)胞系與5-FU研究乳腺癌是具有代表性和現(xiàn)實(shí)意義的。

乳腺癌的發(fā)生發(fā)展與腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，本研究選擇MTT實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)來(lái)模擬腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。細(xì)胞凋亡與腫瘤發(fā)生呈負(fù)相關(guān)，對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)率已經(jīng)成為評(píng)價(jià)抗腫瘤藥物療效的可靠指標(biāo)[12]，本研究運(yùn)用DAPI染色來(lái)評(píng)價(jià)藥物對(duì)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)率的影響。

本研究發(fā)現(xiàn)2.5 μg/mL的蝙蝠葛堿對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移、凋亡沒(méi)有影響，可以排除抗腫瘤效果。可以作為蝙蝠葛堿的閾下濃度。綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合應(yīng)用閾下濃度(2.5 μg/mL)的蝙蝠葛堿增強(qiáng)了5-FU的抗腫瘤效果，這與蝙蝠葛堿增強(qiáng)了乳腺癌對(duì)5-FU的化療敏感性有關(guān)。

但是蝙蝠葛堿抗乳腺癌的藥理及分子靶向機(jī)制研究甚少。本研究旨在探索蝙蝠葛堿體外的抗腫瘤可能的機(jī)制，我們發(fā)現(xiàn)蝙蝠葛堿抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移，誘導(dǎo)其凋亡，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)蝙蝠葛堿的抗腫瘤作用是通過(guò)抑制NF-κB相關(guān)基因的表達(dá)完成的，具體表現(xiàn)為使增殖相關(guān)的cyclinD1基因和抗凋亡基因Bcl-2的表達(dá)下降。NF-κB是炎癥和惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展的一個(gè)至關(guān)重要的控制因子[13]。有實(shí)驗(yàn)顯示NF-κB有著抑制細(xì)胞增殖、遷移和新生血管的生成，介導(dǎo)細(xì)胞死亡等多種生理效用[14]。蝙蝠葛堿使其下游靶基因cyclinD1和Bcl-2基因表達(dá)減少，從而發(fā)揮抗腫瘤作用。

本研究結(jié)果表明開(kāi)發(fā)蝙蝠葛堿作為乳腺癌的輔助治療藥物是可能的。蝙蝠葛堿作為一種已經(jīng)應(yīng)用于臨床的抗心律失常藥，其藥物安全性已得到充分的證實(shí)，其作為乳腺癌的輔助治療藥物具備基本的安全條件[15-16]。但是關(guān)于蝙蝠葛堿與5-FU的交互作用鮮有報(bào)道，而且蝙蝠葛堿是一種生物堿類(lèi)成分，有較好的脂溶性，具有體內(nèi)攝取快、發(fā)揮療效快等優(yōu)點(diǎn)[16]，這為開(kāi)發(fā)乳腺癌的輔助治療藥物提供了理論依據(jù)。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)閾下濃度的蝙蝠葛堿可增強(qiáng)化療藥物的敏感性，為開(kāi)發(fā)化療藥物的輔助用藥提供了理論基礎(chǔ)，但是開(kāi)發(fā)可適用于臨床的新藥需要進(jìn)一步的研究。

1 Gradishar WJ，Anderson BO，Balassanian R，et al.NCCN guidelines insights breast cancer，version 1.2016[J].J Natl Compr Canc Netw，2015，13(12)：1475-1485.

2 劉麗媛.女性乳腺癌危險(xiǎn)因素及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型的流行病學(xué)研究[D].濟(jì)南：山東大學(xué)，2015：1-45.

3 Gao J，Yan Q，Liu S，et al.Knockdown of EpCAM enhances the chemosensitivity of breast cancer cells to 5-fluorouracil by downregulating the antiapoptotic factor Bcl-2[J].PLoS One，2014，9(7)：e102590.

4 Liu X，Liu Q，Wang D，et al.Validated liquid chromatography-tandem mass spectrometry method for quantitative determination of dauricine in human plasma and its application to pharmacokinetic study[J].J Chromatogr B，2010，878(15/16)：1199-1203.

5 仲麗麗，張英博，白云，等.蝙蝠葛堿藥理作用及其臨床應(yīng)用[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，12(2)：91-93.

6 張英博，周忠光，仲麗麗，等.蝙蝠葛堿抗腫瘤研究新進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備，2014，15(S2)：370-371.

7 石玉生，張艷，王加志，等.蝙蝠葛堿抑制肺癌細(xì)胞QG-56增殖的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)藥信息，2010，27(3)：115-116.

8 李銘，梁文杰，曾亞平，等.蝙蝠葛堿對(duì)人膀胱癌T-24細(xì)胞株生長(zhǎng)增殖的抑制作用[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，28(18)：1860-1863.

9 Yang Z，Li C，Wang X，et al.Dauricine induces apoptosis，inhibits proliferation and invasion through inhibiting NF-kappaB signaling pathway in colon cancer cells[J].J Cell Physiol，2010，225(1)：266-275.

10 Finn，Richard S，John P，et al.The cyclin-dependent kinase 4/6 inhibitor palbociclib in combination with letrozole versus letrozole alone as first-line treatment of oestrogen receptor-positive，HER2-negative，advanced breast cancer(PALOMA-1/TRIO-18)：a randomised phase 2 study[J].Lancet Oncology，2015，16(1)：25-35.

11 Jahani M，Azadbakht M，Norooznezhad F，et al.l-arginine alters the effect of 5-fluorouracil on breast cancer cells in favor of apoptosis[J].Biomed Pharmacother，2017，88：114.

12 Mcdonnell TJ，Meyn RE，Robertson LE.Implications of apoptotic cell death regulation in cancer therapy[J].Semin Cancer Biol，1995，6(1)：53.

13 Fantini MC，Pallone F.Cytokines：From gut inflammation to colorectal cancer[J].Curr Drug Targets，2008，9(5)：375-380.

14 Karin M.Nuclear factor-kappaB in cancer development and progression[J].Nature，2006，441(7092)：431-436.

15 Qian JQ.Cardiovascular pharmacological effects of bisbenzylisoquinoline alkaloid derivatives1[J].Acta Pharmacol Sin，2003，23(12)：1086-1092.

16 Xia JS，Li Z，Dong JW，et al.Dauricine-induced changes in monophasic action potentials and effective refractory period of rabbit left ventricle in situ[J].Acta Pharmacol Sin，2002，23(4)：371-375.

Dauricineenhancesthesensitivityof5-fluorouracilinhumanbreastcancerMCF-7cells

LIHongyang1，SUNLiang2，JIANGXing3，YUANGuangjun3，LIUYan1

1.Department of Oncology，The Fourth Affiliated Hospital of Harbin Medical University，Harbin 150001，China；2.Department of Human Anatomy，Harbin Medical University；3.Jiamusi College of Heilongjiang University of Chinese Medicine

ObjectiveThe objective of this study was to investigate the effect of dauricine on the sensitivity of 5-fluorouracil(5-FU)in human breast cancer MCF-7 cells.MethodsMCF-7 cells were treated with 2.5 μg/mL of dauricine，50 μg/mL of 5-FU，or 2.5 μg/mL of dauricine with 50 μg/mL of 5-FU，the cell proliferation was measured by MTT assay.The cell migration was determined by Transwell assay；The cell apoptosis was detected by DAPI staining；The expression of cyclin D1 and Bcl-2 gene was examined by Western blot.ResultsThe results showed that the combination of subthreshold concentration of dauricine enhanced the inhibitory effect of 5-FU on proliferation in MCF-7 cells.The combined use of subcutaneous concentration of dauricine further aggravated the inhibitory effect of 5-FU on cell migration.The combination of subcapsular dauricine enhanced the induction of apoptosis by 5-FU.The combination of dauricine with 5-FU could inhibit the expression of cyclin D1 and Bcl-2 protein in MCF-7 cells.ConclusionDauricine can effectively enhance the sensitivity of 5-FU in human breast cancer MCF-7 cells.

Dauricine；5-Fluorouracil；Breast cancer；MCF-7 cells

黑龍江省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(H201464)；黑龍江省高校專(zhuān)項(xiàng)基金(003000166)

1.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院腫瘤內(nèi)科(哈爾濱 150001)；2.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)人體解剖學(xué)教研室；3.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院

李紅陽(yáng)，男，(1989-)，碩士研究生，從事腫瘤內(nèi)科的研究。

劉艷，E-mail：1953786691@qq.com

R737.9

A

10.11904/j.issn.1002-3070.2017.05.001

(收稿：2017-01-17)